优化人间充质干细胞的临床应用:文献综述

摘要

成人间充质干细胞（MSC）在干细胞治疗中的应用正在进一步研究中。然而，由于在成人组织中发现的MSC数量非常少，因此需要进一步扩大在体外需要产生临床应用所需的MSC数量。由于人口老龄化的增加，增加了肌肉骨骼疾病的发病率，因此对有效细胞治疗的需求正在增加。本综述调查了供者的年龄和性别以及种子密度等因素如何影响MSC扩增。年龄和年龄捐赠者的研究结果喜忧参半，而种子密度研究对许多MSC来源产生了一致的结果，有利于降低种子密度。需要进一步研究，以降低感染风险，减少细胞培养中细胞特征的丧失，并通过h无论患者因素如何，均能快速扩增骨髓间充质干细胞。

1.介绍

干细胞是未分化的群体，能够无休止的自我更新和分化，下一个或多个谱系以产生专门的细胞类型[1］．它们产生多种细胞类型的能力在体外是已经强调了在细胞疗法其使用的重要特征之一。人体最早的干细胞，受精卵，是全能的，具有分化成所有细胞类型的人体，以及组织支持胚胎的能力。作为受精卵发育成人类胚胎的细胞，分化能力下降谱系变得更有限[2］．

成人干细胞，也称为体细胞，位于人体的许多组织中，需要通过组织修复和再生来恢复正常功能体内例如，肌肉组织中的卫星细胞．它们处于静止状态，直到被损伤或疾病的介质激活。成体干细胞在组织中只占细胞的一小部分，被成熟细胞包围，这些成熟细胞已达到分化过程的终点，没有增殖或分化的能力[3.].由于胚胎干细胞的使用受到限制和伦理问题，成人干细胞在临床应用中的使用正在进一步研究中。成人间充质干细胞（MSCs）具有良好的粘附性、增殖和分化能力，适合临床应用在体外，并具有适合移植的特性：低免疫原性和高免疫抑制特性，因为其细胞表面上的HLA-2标记物较低或缺失[4，5］．它们目前已被证明具有增强心血管疾病治疗的潜力[6]，神经学[7]，以及肌肉骨骼疾病[8分别分化为心肌细胞和血管细胞、神经元和胶质样细胞以及软骨细胞。

Friedenstein等人的早期研究。据报道，从骨髓中分离的MSCs类似于成纤维细胞[4，9，10]这些细胞是克隆形成的，在培养基中粘附在塑料上，并广泛复制在体外. 已经证明，这些细胞是多能的，当移植回体内时，会分化成成成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞体内[11，12］．以及骨髓间充质干细胞的分离，其他来源包括脂肪[13]， 骨骼肌 [14]滑膜[15]及滑液脂肪垫[16]也有报道含有能够多系分化的间充质干细胞。

骨髓间充质干细胞在临床应用中表现出了强大的能力；然而，由于在成人组织中发现的骨髓间充质干细胞数量非常少，因此不能进行扩张在体外在临床应用之前，需要达到所需的数量。对于如何有效地优化MSC扩增，我们还没有明确的认识，因为许多论文报道了结果的差异，例如供体年龄、供体性别和接种密度如何影响细胞增殖率。影响骨髓间充质干细胞优化的因素可分为患者因素，如年龄和性别，以及细胞培养因素，如使用的种子密度。这篇综述文章将探讨年龄、性别和接种密度如何影响成人间充质干细胞的增殖。

2.供体年龄与间充质干细胞增殖

在现有文献中，关于供体年龄如何影响间充质干细胞膨胀率的研究结果不一。许多报告说，增殖率与年龄成反比关系;然而，也有报道称两者没有关系。在研究年龄的影响时，大多数文献使用骨髓间充质干细胞，一些论文使用髌下脂肪垫来源的干细胞。

Khan等人。研究了两组平均年龄为57和86岁患者的滑膜脂肪垫MSCs的增殖率，在五个时间点（第2,4,6,8,10天）中，两个组之间的细胞增殖没有显着差异（第2,4,6,8,10）[17]这一趋势也得到了许多使用骨髓间充质干细胞（BMSCs）研究年龄效应的论文的支持。Phinney等人在调查17名19-45岁健康患者的BMSCs生长特性时发现，患者之间的差异高达12倍；然而，这一差异与供体年龄无关()[18］．Suva等和Scharstuhl等在髋关节置换术时分别从股骨颈和股骨干提取BMSCs [19，20.］．Suva等人报道了到达第一次传代所需的时间、细胞指数增长、加倍时间和最大细胞扩增量的不同结果，但同样没有发现这些变化是由于捐献者的年龄相关差异造成的。同样，在98个样本量的情况下，Scharstuhl等人也报道了在增殖与年龄相关后，增殖能力与年龄保持一致。

另一方面，Baxter等报道59-75岁患者与0-18岁患者相比增殖能力严重下降，生长速度较慢[21］．这得到了其他研究的支持，这些研究发现，与年轻患者相比，老年患者翻倍的时间几乎要长2倍[22，23]Stolzing等人从髂后嵴提取的“年轻”（7-18岁）、“成人”（19-40岁）和“老年”（>40岁）患者中培养超过4个月的BMSCs。发现从培养第5周开始的增殖率之间存在差异，说明“老年人”的增殖率骨髓间充质干细胞开始减少，生长曲线开始趋于平稳[24]。另一方面，“成年”患者的骨髓基质细胞在培养的整个4个月内增殖率持续增加。“年轻”患者一组骨髓间充质干细胞只进行了10次人口倍增的调查，他们也显示了增殖率随时间增加的模式。这些发现也得到了Dexheimer等人的支持，他们发现老年患者的骨髓间充质干细胞增殖率明显低于年轻患者[25］．克隆的可扩展性也随着年龄的增加而降低，80岁患者的细胞产生的克隆数量是20岁患者骨髓间充质干细胞的一半。

有趣的是，在研究年龄对滑膜脂肪垫组织中MSC增殖的影响时，一项研究在八种不同的种子密度下探讨了这种关系：50、250、500、1000、2500、5000、750和10000 细胞/厘米²[26].结果差异极大，有五种播种密度（50、250、500、5000、7500） 细胞/厘米²) showing that there was an age-related decline in population doublings, whereas 10,000 cells/cm²showed an age-related increase in population doublings and two densities (2500 and 1000 cells/cm²），显示与年龄没有相关性。即使在不同播种密度的相同细胞组之间的变化结果也表明MSCs的性质及其改变的性质不正确理解。它还表明，扩散可能受到许多因素的影响，其中更多的研究需要了解有关MSCS如何受到一系列因素的影响。

目前尚不清楚间充质干细胞的老化是由细胞内因素还是周围组织中的因素引起的。已经发现，周围组织中蛋白多糖和糖胺聚糖的合成减少导致间充质干细胞的增殖和生存能力降低体内[27］．此外，通过激活细胞凋亡和活性氧生产的糖基化的先进终产物（AGEs）的MSC的抑制增殖（ROS）生产[28.］．相比之下，周等人。认为内在因素可能是负责在骨髓基质干细胞与年龄有关的变化[22]他发现与衰老相关的骨髓间充质干细胞数量增加了4倍β-半乳糖苷酶-β-gal）和p53及其通路基因（p21和BAX）的表达增加，这可能是导致增殖潜能降低的原因。也有人认为，p16INK4a的表达随着年龄的增长而增加，p16INK4a是促进增殖的CDK4和CDK6的抑制剂[29.］．来自老年患者的MSCs也被发现更容易凋亡，因为衰老对MSCs的生理影响导致衰老[22］．

老化对间充质干细胞特性的影响仍然存在争议，结果不一致，即使使用来自同一来源类型和患者的间充质干细胞也是如此。研究年龄如何影响间充质干细胞的增殖率，对于了解是否可以通过自体修复骨髓间充质干细胞来实现干细胞治疗非常重要老年痴呆症患者。随着人口老龄化，肌肉骨骼疾病的发病率正在增加，这一问题变得越来越重要。一些研究还表明，较高的增殖率与更强的成骨、成软骨和成脂肪分化潜能有关，这对于修复受损或受损的骨骼肌至关重要坐骨肌组织[25］．变量可能是由于研究结果有一个限制年龄范围由于病人群体,研究在不同年龄范围为“年轻”和“老”类别,或没有一个足够大的样本容量为年轻患者不少研究使用bmsc提取在髋关节置换,这在老年人中更常见。不同研究之间的不同结果要求在这一课题上进行更多的工作，以明确供体年龄如何影响MSC增殖率。特别是，应该研究不同来源的间充质干细胞，如果发现衰老影响间充质干细胞的扩张，那么可能有一种来源受到的影响较小，更适合针对老年人的细胞治疗。

3.性别和MSC增殖

关于性别对MSC增殖潜力影响的文献很少，因为大多数论文组是由男性和女性患者共同得出的。MSC培养技术，如胶原酶的持续时间和浓度，以及获得最大产量的最佳收获地点，在男性和女性之间各不相同[30.，31.］．Faustini等。使用脂肪衍生的干细胞（ADSCs）发现，当脂肪组织与0.2％胶原酶孵育1小时的脂肪蛋白酶孵育1小时时，ADSC接受最有效的消化，而过夜消化对来自女性的组织更有效[31.］．还报道了MSCs产量明显更高的雌性的雌性，平均平均为2.05±1.46个小细胞的雌性，而来自男性的1.44±1.62百万个电池。随之而言，随着干细胞具有雌激素和雄激素受体的其他知识，表明MSC增殖可能存在性别差异。女性女性和雄雌雌激素中的雌激素较高的雌激素被认为是对男性和女性MSC的差异负责[30.］．大多数研究表明，雄激素对干细胞的功能[抑制作用32.]，而雌激素具有兴奋作用控制的MSC细胞因子和生长因子的生产水平[33.］．还发现雌激素对胚胎干细胞（ERA和ERB）上的受体表达，增加了17b-雌二醇的产生，其激活MAPK和细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK），其是细胞周期中的中间体[34.］．

尽管一些研究提出了建议和发现，Dexheimer等人发现骨髓中MSC的频率和非克隆MSC群体的扩展没有性别差异[25].由于性别可能是达到所需细胞数量的影响因素，因此需要开展研究，调查性别对骨髓间充质干细胞特性的影响。这将有助于使所有接受细胞治疗的患者的骨髓间充质干细胞提取和扩增更有效，因为如果女性确实具有更高的产量，可以从男性中提取比女性更多的组织，如Faustini等人所报告。此外，还应开展更多的工作，研究男性和女性患者骨髓间充质干细胞的首选分离和培养技术，以确保尽可能从组织来源中提取最大产量的骨髓间充质干细胞。

4.播种密度与间充质干细胞增殖

虽然有限，但文献表明播种密度对细胞增殖率产生影响。两个等。发现在较低密度下播种的BMSC比更高的密度更快，MSC为100个细胞/厘米²达到2亿个细胞的目标，比以更高密度(5000个细胞/厘米)播种的细胞快4.1天²)[35.].播种密度进一步降低至100以下 细胞/厘米²，也显示出进一步增加的增殖率。Lode等在研究播种密度对三维支架的影响时也发现了类似的关系[36.］．他们发现最高的播种密度cell /厘米²结果表明，与最低播种密度相比，细胞数量增加幅度很小，而最低播种密度的细胞数量增加幅度较大。极低密度(0.5-12个细胞/厘米²)显示了代表细胞数量和增殖率的单细胞衍生菌落的大小，与种子密度成反比[37.]。另一项针对骨髓基质细胞四种不同接种密度的研究也得出了与先前研究结果一致的结果。培养10天后，骨髓基质细胞在2500、250、25和2.5℃下接种 细胞/厘米²平均结果为2.72±0.48,4.8±0.42,6.7±0.53和7.6±0.97种群倍增，表明较低密度下的细胞具有比更高密度更高的增殖率。人口倍增的显着收益在2500到250之间，以及250和25（）。另一方面，虽然较低密度发生更多的人口倍增，但在使用25和2.5细胞/厘米之间没有显着差异². 他们还表明，播种密度不影响细胞特征，因为所有细胞都具有相同的细胞表面标记特征[38.］．这一趋势不仅发生在骨髓，还发生在不同组织位置的间充质干细胞中，证实了播种量对增殖率有显著影响。Mochizuki等人进行了一项研究，探索骨髓-、滑膜-、骨膜-、脂肪-和骨骼肌来源的间充质干细胞的最佳播种密度。用结晶紫染色测量细胞生长和菌落形成，他们发现所有的MSCs在较低的播种密度下都有较大的菌落大小;例如，从滑膜组织中提取的MSCs在10天播种后，在14天后集落变小或细胞变得模糊⁵和10⁶细胞/ 60厘米²，播种密度为10^3.或10⁴细胞/ 60厘米²结果表明，所有来源的最佳播种密度均为10^3.或10⁴细胞/ 60厘米²或者 cells per cm²对于骨髓干细胞。In addition similar trends were seen when cells were seeded at 50 cells/cm²producing a higher cumulative number of cells than at 5,000 cells/cm²滑膜脂肪垫来源的骨髓间充质干细胞观察到的结果与骨髓间充质干细胞的结果一致[39.］．

在较高密度上种植的细胞的较低生长速率可能是由于接触抑制。通过在滞后阶段的滞后阶段存在小和耕地细胞，在滞后阶段，在滞后阶段，较低密度的增长速率较高，在滞后阶段，在指数增长的日志阶段产生大细胞[37.］．在低密度播种的细胞中，对数期持续时间更长，因此，由于较长的指数生长期，会出现更多的种群加倍[40.］．以较低的接种密度较高的增长潜力也可能是由于每个细胞营养素的更高的可用性。

寻找最佳的播种量以达到最大的扩展，这在实验室研究和潜在的临床应用中都是有用的，因为细胞培养过程可以减少时间，降低细胞培养污染、感染或丧失细胞培养特性的风险，除了使这一过程更具成本效益之外。这些研究表明，通过使用较低的播种量，可以实现快速扩增，达到临床应用所需的足够数量的细胞。正如许多论文发现的，在较低的播种密度下，各种来源的MSCs都有较快的增殖率/种群加倍，如果在供体年龄和增殖率或性别和增殖率之间找到一致的关系，那么也许可以利用播种量来补偿和加速间充质干细胞的扩展，以供临床应用。

这次审查看了一些因素，如供者的年龄和性别，以及接种密度如何影响MSC扩张的临床应用。虽然研究对间充质干老化的影响不以为然，更多的工作应该进行探索的年龄，希望一个一致的关系，可以发现众多MSC源的影响。关系将使细胞培养技术鉴定，以适应从患者特别是年龄组的MSCs的扩展，而无需通过最小化在文化所花费的时间在细胞培养中增加感染的危险。性别也应充分调查，由于暴露于不同浓度的激素可能会改变MSC的性能的一个因素。年龄和性别如何影响MSC增殖应确保做出除了因素被调查的患者都按性别，年龄，社会因素，病史，久病匹配，以确保所有的结果是不是由于潜在混杂因素的研究。相比之下，播种密度呈现出了大量的研究，以及对众多MSC来源一致的结果。由于播种密度和间充质干细胞增殖率之间的关系已经发现，一旦年龄和性别的关系也被调查，播种密度也许可以用来弥补患者因素的影响导致的MSC的快速扩张。

工具书类

1. M. Witkowska-Zimny和K.Valenko，“来自脂肪组织的干细胞”，细胞和分子生物学字母，第16卷，第236-257页，2011年。查看在：谷歌学术搜索
2. J.T. Triffitt，“干细胞和哲学家的石头”，细胞生物化学杂志，卷。38，第13-19，2002。查看在：谷歌学术搜索
3. E. A. Jones, S. E. Kinsey, A. English等人，“骨髓多潜能间充质祖细胞的分离和特性”，关节炎和风湿病第46卷，第46期12，页3349-3360,2002。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
4. A.J.Friedenstein、R.K.Chailakhjan和K.S.Lalykina，“豚鼠骨髓和脾细胞单层培养中成纤维细胞集落的发育，”细胞和组织动力学，卷。3，不。4，第393-403，1970。查看在：谷歌学术搜索
5. K.勒布朗和O. Ringden，“人类的免疫学间充质干细胞和将来在造血干细胞移植的使用，”血液和骨髓移植生物学，卷。11，不。5，pp。321-334,2005。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
6. A. Leri, J. Kajstura, P. Anversa，和W. H. Frishman，“心肌再生和干细胞修复”，当前心脏病学的问题，卷。33，不。3，pp。91-153,2008。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
7. J. R.桑切斯-拉莫斯，“来自成人骨髓和脐带血的神经细胞，”神经科学的研究，卷。69，没有。6，PP。880-893,2002。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
8. S. Wakitani, K. Imoto, T. Yamamoto, M. Saito, N. Murata, M. Yoneda，“自体培养扩大骨髓间充质细胞移植修复骨关节炎膝关节软骨缺损”，骨关节炎和软骨，第10卷，第3期，第199-206页，2002年。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
9. A. J. Friedenstein，K. V. Petrakova，A. I. Kurolesova，和G. P. Frolova，“前体细胞为成骨和造血组织的骨marrow.Analysis异位，”移植，第6卷，第2期，第230-247页，1968年。查看在：谷歌学术搜索
10. A.J.Friedenstein、U.F.Deriglasova和N.N.Kulagina，“体外集落分析法检测不同造血细胞群中成纤维细胞的前体，”实验血液学，卷。2，没有。2，第83-92，1974。查看在：谷歌学术搜索
11. A.J.Friedenstein，I.I.Piatetzky Shapiro和K.V.Petrakova，“骨髓细胞移植中的成骨作用，”胚胎学与实验形态学杂志，第16卷，第5期。3，pp。381-390,1966。查看在：谷歌学术搜索
12. A. J. Friedenstein，《骨髓基质机制:体外克隆和体内再移植》，Hamatologie und BlutTransfusion，第25卷，第19-29页，1980年。查看在：谷歌学术搜索
13. P. A. ZUK，M.诸，P. Ashjian等人，“人脂肪组织是多能干细胞的来源，”细胞的分子生物学，第13卷，第12期，第4279-42952002页。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
14. L. J. Nesti, W. M. Jackson, R. M. Shanti等，“来自战争创伤肌肉组织的多能祖细胞的分化潜能”，骨关节外科杂志，第90卷，第11期，第2390-2398页，2008年。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
15. C. de Bari, F. Dell'Accio, P. Tylzanowski，和F. P. Luyten，“来自成人滑膜的多能间充质干细胞”，关节炎和风湿病，卷。44，不。8，第1928至1942年，2001。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
16. M.Q.Wickham，G.R.Erickson，J.M.Gimble，T.P.Vail和F.Guilak，“来源于膝盖髌下脂肪垫的多能干基质细胞，”临床骨科及相关研究， 不。412，第196-212，2003。查看在：谷歌学术搜索
17. W.S.Khan、A.B.Adesida、S.R.Tew、J.G.Andrew和T.E.Hardingham，“人类脂肪垫衍生干细胞的表位特征和成骨分化潜能在晚年随着年龄的增长而保持。”损伤，第40卷，第5期。2, pp. 150-157, 2009。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
18. D.G.Phinney，G.Kopen，W.Righter，S.Webster，N.Tremain和D.J.Prockop，“人类骨髓基质细胞生长特性和成骨潜能的供体变异，”细胞生物化学杂志，第75卷，第5期3，第424-436页，1999。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
19. A. Scharstuhl, B. Schewe, K. Benz, C. Gaissmaier, H. J. Buhring，和R. Stoop，“成人间充质干细胞的软骨形成潜能与年龄或骨关节炎病因无关。”干细胞，第25卷，第2期12，页3244-3251,2007。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
20. D.苏瓦，G.加拉瓦利亚，J. Menetrey等人，“非造血人骨髓包含长效，多潜能间质干细胞，”细胞生理学杂志，第198卷，第1期，第110-118页，2004年。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
21. M. A.巴克斯特，R. F.韦恩，J.E幽灵，S. N. Jowitt，L. J.费尔贝恩和I. Bellantuono，“研究端粒长度的揭示体外扩增人以下骨髓基质细胞的迅速老化，”干细胞，卷。22，没有。5，pp。675-682，2004。查看在：谷歌学术搜索
22. 周S，J.S.Greenberger，M.W.Epperly等人，“人类骨髓间充质干细胞的年龄相关内在变化及其向成骨细胞的分化，”老化细胞，第7卷，第3期，第335-343页，2008年。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
23. K.Mareschi，I.Ferrero，D.Rustichelli等人，“从儿童和成人供者骨髓中分离的间充质干细胞的扩增，”细胞生物化学杂志第97卷第1期4，第744-754，2006年。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
24. A. Stolzing, E. Jones, D. McGonagle, and A. Scutt，《人类骨髓间充质干细胞的年龄相关变化:细胞疗法的后果》老龄化与发展的机制，第129卷，第3期，第163-173页，2008年。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
25. 五Dexheimer，S.穆勒，F Braatz和W.里希特，“从休眠激活减少，但保持血统的选择人类的间充质干与捐赠者的年龄细胞。”《公共科学图书馆•综合》，第6卷，第8期，文章编号e22980，2011年。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
26. E. Fossett, W. S. Khan, U. G. Longo和P. J. Smitham，“年龄和性别对滑膜脂肪垫来源的间充质干细胞的细胞增殖和细胞表面特征的影响”，骨科研究杂志．在出版社。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
27. Y.Bi，C.H.Stuelten，T.Kilts等人，“细胞外基质蛋白多糖控制骨髓基质细胞的命运，”生物化学杂志，第280卷，第34号，第30481-30489页，2005年。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
28. S.Kume，S.Kato，S.I.Yamagishi等人，“晚期糖基化终产物减弱人间充质干细胞并阻止同源分化为脂肪组织、软骨和骨，”骨矿物研究杂志，第20卷，第9期，第1647-1658页，2005年。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
29. F.Zindy，D.E.Quelle，M.F.Roussel和C.J.Sherr，“在小鼠发育和衰老过程中p16INK4a肿瘤抑制因子相对于其他INK4家族成员的表达，”癌基因，卷。15，不。2，pp。203-211，1997。查看在：谷歌学术搜索
30. R. Ray，N.M. Novotny，P. R.Crisostomo，T. Lahm，A. Abarbanell和D. R. Meldrum，“性类固醇和干细胞功能”，分子医学，第14卷，第7-8号，第493-501页，2008年。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
31. 。M. Faustini，M.颊，T. Chlapanidas等人，“非扩展间充质干再生医学细胞：在从脂肪组织的基质血管级分的产量，”组织工程，第16卷，第5期。6, pp. 1515-1521, 2010。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
32. C. Y. chang，Y.D.Hsuuw，F.J.Huang等，“小鼠胚胎干细胞中的雄激素受体和雄激素受体的表达”，生育与不育，第85卷，第1期，第1195-1203页，2006年。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
33. P. R. Crisostomo, Y. Wang, T. A. Markel, M. Wang, T. Lahm，和D. R. Meldrum，“TNF-刺激的人间充质干细胞α.，LPS，或由NF缺氧产生生长因子κ..B-但不是JNK依赖机制，”美国生理学杂志-细胞生理学，第294卷，第2期3, pp. C675-C682, 2008。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
34. H. J. Han，J. S. Heo和Y. J. Lee，“埃斯拉多二利斯 - 17β刺激小鼠胚胎干细胞增殖:涉及MAPKs和CDKs以及原癌基因。美国生理学杂志-细胞生理学第290期4, pp. C1067-C1075, 2006。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
35. S. K.两者，A. J.C.Van der Muijsenberg，C.A.Van Blitterswijk，J.De Blitterswijk，J. de Boer和J. D. de Bruijn，“一种快速而有效地扩增人间充质干细胞的方法”组织工程，卷。13，不。1，pp。3-9,2007。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
36. A.Lode、A.Bernhardt和M.Gelinsky，“在矿化胶原三维支架上培养人骨髓基质细胞：接种密度对定植、增殖和成骨分化的影响，”中国组织工程与再生医学杂志，第2卷，第7期，第400-407页，2008年。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
37. D. C. Colter, R. Class, C. M. DiGirolamo和D. J. Prockop，《从人类骨髓中提取的塑料粘附细胞培养中再生干细胞的快速扩张》，美国国家科学院的诉讼程序第97卷第1期7，页3213-3218,2000。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
38. C. Bartmann, E. Rohde, K. Schallmoser等，“临床应用功能性间充质基质细胞的两个步骤”，输血，卷。47，没有。8，pp。1426-1435,2007。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
39. T. Mochizuki, T. Muneta, Y. Sakaguchi等人，“与皮下脂肪源性细胞相比，纤维滑膜和脂肪滑膜源性细胞具有更高的成软骨潜能:人类间充质干细胞的区别特性”关节炎和风湿病第54卷第5期3，第843-853页，2006。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索
40. B. Neuhuber, S. A. Swanger, L. Howard, A. Mackay，和I. Fischer，“培养基密度和培养时间对骨髓基质细胞特性的影响”，实验血液学第36卷第2期9，页1176 - 1185,2008。查看在：出版商网站|谷歌学术搜索

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