羊水和羊膜干细胞:标记的发现

文摘

羊水(AF)和羊膜(AM)最近被认为是有前途的干细胞或祖细胞的来源。不仅都含有亚种群具有干细胞特征类似于成人干细胞,如间充质干细胞,但也表现出一些胚胎干细胞多能性的属性(i)等表达标记,(2)高膨胀体外,或(3)multilineage分化能力。最近的努力都集中在隔离和这些干细胞类型的详细描述。然而,在他们的表型变化,异质性所描述的不同群体,没有一个单一的标记表示只有在这些细胞可能防止纯均匀的隔离这些来源的干细胞数量和他们的潜在的治疗应用程序中使用这些细胞。在本文中,我们旨在总结最近的进步标志等胎儿源干细胞来源于发现房颤和点,使用新颖的方法基于转录组、蛋白质组学、检查参与组成分泌腺或分析。

1。介绍

羊水(AF)和羊膜(AM)代表丰富的干细胞来源,可用于临床治疗的未来应用。伦理问题的隔离干细胞从这些来源是最小化(1- - - - - -3),在与新兴的问题从人类胚胎干细胞(ESC)的研究(4- - - - - -6]。房颤是计划期间收集的羊膜穿刺术15至19周妊娠的产前诊断和多余的样品可用于细胞采购(2,4- - - - - -9),而我通常是术语的剖腹产怀孕期间收集的(10,11]。由于异质性的干细胞数量来自这些资源,特定细胞类型的隔离是很困难的,需要一个详细的表型和分子特性的细胞。研究,包括组学方法基本在更好地了解这些细胞和分子的表达的机制定义正确的隔离方法,之前他们在治疗方法的使用。

本文旨在介绍房颤的主要生物学和分子特征,发病干细胞并突出标记发现使用全局方法的最新进展,如转录组、蛋白质组学、检查参与组成分泌腺或分析。

1.1。羊水

房颤作为保护液对胚胎发育过程中,提供机械支持和所需的营养素在胚胎发生(1,3]。羊膜穿刺术已经用于许多几十年作为胎儿核型分析和产前诊断的常规程序,允许各种遗传疾病的检测1,3,12]。

房颤的主要成分是水;然而其整体成分变化在怀孕。初怀孕,胎儿的羊膜渗透性是相似的等离子体。胎儿皮肤角质化后羊膜渗透性相对减少产妇或胎儿的等离子体,主要是由于胎儿尿液的流入(1]。更有趣的是,房颤也代表着丰富的干细胞群源于胎儿或周围的羊膜(1,12]。额外的调查由几组最近专注于羊膜细胞衍生的细胞性质和潜在的使用在临床前模型(13- - - - - -18)在移植疗法(7,17,19- - - - - -24]。

1.1.1。羊水干细胞(AFSCs)

羊水细胞(afc)代表一个异构的人口来自三个胚芽层。这些细胞共享一个上皮起源和来自发展中胚胎或羊膜的内表面,具有为羊膜干细胞(12]。亚足联主要由三组的贴壁细胞,根据他们的形态分类、增长和生化特征(12]。类上皮细胞(e)是立方形的柱状细胞来源于胎儿皮肤和尿液,羊水(AF-type)细胞是来自胎儿膜,和成纤维细胞的细胞(f型)生成主要由纤维结缔组织。房颤和f型细胞具有成形态和主要的细胞类型似乎AF-type, coexpressing角蛋白和波形蛋白(1- - - - - -3,8,9,25- - - - - -27]。几项研究已经证明,人类羊水干细胞(AFSCs)可以很容易地获得少量的怀孕中期房颤,收集在常规羊膜穿刺术(2,4- - - - - -9),一个过程与自然流产率从0.06到0.5% (2,28,29日]。迄今为止,许多不同的培养协议已报告,导致丰富的干细胞数量。AFSC的隔离和各自的文化协议在最近的一次回顾总结了Klemmt et al。3),可以分类如下:(i)单步培养协议,主要文化是离开安静的7天或更多,直到第一个殖民地出现(2,3,30.- - - - - -32),(2)一个两步培养协议,amniocytes,不附加5天后在文化、收集和进一步扩大3,5,33),(3)细胞表面标记选择CD117 (c - kit受体)3,7,34,35)(iv)机械隔离最初的间叶细胞祖细胞殖民地形成最初的文化(9),(v)短期文化孤立成殖民地(36]。大多数AFSCs,隔离这些方法后,共享一个多功能间质表型和表现出更高的增殖潜力和更广泛的分化潜力相比,成人msc (2,4- - - - - -7,9,24,37]。

1.2。羊膜(AM)

羊膜、缺乏维管组织形式最内层的胎膜(12,38)和由3层:(i)上皮组成的单层上皮细胞,(2)非细胞中间地下室一层,和(3)外部间充质细胞层,丰富的间充质干细胞和放置在靠近绒毛膜[12,38]。我在诊所几十年来在烧伤伤口愈合,促进上皮细胞形成和防止感染(39,40]。最近,我一直在评估的使用作为手术的伤口敷料材料缺陷的口腔黏膜41),重建眼表面(40,42),角膜穿孔43,44),和膀胱扩张(45]。

1.2.1。羊膜干细胞(超导公司)

羊膜干细胞(超导公司)包括两种类型,羊膜上皮细胞(aec)和羊膜间充质干细胞(AM-MSCs)源自羊膜上皮和羊膜间充质层,分别为(12,46]。细胞类型都是起源于胚胎在pregastrulation阶段发展中,描述前的三个主要微生物层和上皮性质的大多是38,47]。各种协议建立了原子能委员会和AM-MSCs隔离,主要基于来自绒膜膜的机械分离和随后的酶消化47- - - - - -50]。AM-MSCs展出塑料依从性和成形态,而原子能委员会显示一个鹅卵石上皮表型。AM-MSCs共享类似的表型特征与来自成人的来源。AF-MSCs AM-MSCs更有趣的是,同样的,表现出更高的增殖率相比,msc源自成人来源(12,51)和一个multilineage分化潜能进入细胞来源于三个胚芽层(27]。

2。Immunophenotype

2.1。羊水干细胞

房颤最近成为另一个胎儿源干细胞起源的各种细胞(1,3]。在此,我们的目标是描述AFSCs总结的关键标志。到目前为止,msc代表AFSCs最好的族群特征。AF-MSCs表现出典型的间叶细胞标记表达式,如CD90、CD73, CD105, CD29, CD166 CD49e, CD58, CD44,由流式细胞术分析(2,5- - - - - -8,10,12,21,32,33,52,53]。此外,这些细胞表达了HLA-ABC抗原,而造血的表达CD34、CD45标记内皮标记CD31、HLA-DR抗原是未被发现的2,5,6,32]。更重要的是,大部分的培养AF-MSCs表达多能性标记如八聚物结合蛋白3/4 (Oct-3/4) homebox转录因子Nanog (Nanog)和stage-specific胚胎抗原4 (SSEA-4) [2,5- - - - - -7,9,21,32,33,52]。

也报道,amniocyte文化包含一个小的人口CD117(酪氨酸激酶特定干细胞因子主要在ESCs和原始生殖细胞)阳性细胞,可以无性繁殖系地扩大在文化7]。CD117的分化特性⁺AFS体内首次进行了测试,证明用这种方法他们的干细胞的身份7]。实验证据表明,AFSCs来自纺锤状成细胞(10]。

为了分析AFSCs亚种群,我们组最近确定了两个形态不同的间充质来源的AFSCs人群,不同的增殖和分化特性,称为纺锤形(SS)和圆的形状(RS) [9]。两个亚种群都表达间充质干细胞标记在相似的水平。然而,它被党卫军殖民地表达高水平的CD90和CD44抗原相比,RS殖民地(9]。

2.2。羊膜干细胞(超导公司)

超导公司的详细immunophenotype分析显示抗原的表达,如CD13、CD29、CD44、CD54, CD49e, CD73, CD90、CD105,存在,间质干细胞标记1 (Stro-1), SSEA-3, SSEA-4,胶原蛋白我和III (Col1 / Col3), alpha-smooth肌肉肌动蛋白(αsma)、CD44、波形蛋白(Vim),纤维母细胞表面蛋白(FSP)和HLA-ABC抗原(10,12,27]。然而,细胞间粘附分子1 (ICAM-1)在非常低的水平和蛋白质TRA-1-60表示,血管细胞粘附蛋白1 (VCAM-1)、血管性血友病因子(vWF),血小板内皮细胞粘附分子(PECAM-1), CD3, HLA-DR没有检测到(10,27]。中最丰富的蛋白质之一是派生细胞层粘连蛋白,在分化中发挥着关键作用,细胞形状和迁移,组织再生(54,55]。rt - pcr分析进一步表明,超导公司表达基因,如Oct-3/4,锌指蛋白42 (zfp42或Rex-1),蛋白质干细胞因子(SCF),神经细胞粘附分子(NCAM)、巢蛋白(NES),骨形成蛋白4 (BMP-4),叫结合蛋白4 (GATA-4)和肝细胞的核因子4α(HNF-4α即使在高段)。Brachyury,纤维母细胞生长因子5 (FGF5),配对盒蛋白(Pax-6)和骨形成蛋白2 (BMP2)成绩单没有检测到10,12]。同样,原子能委员会CD10阳性,CD13、CD29、CD44, CD49e, CD73, CD90、CD105, CD117, CD166 Stro-1 HLA-ABC,和消极CD14、CD34、CD45 CD49d, HLA-DR表达式,由流式细胞仪分析(27,47- - - - - -50]。进一步的调查显示,原子能委员会表达干细胞标记,如SSEA-1 SSEA-3, SSEA-4, Nanog,性别决定区域Y-box 2 (Sox2) Tra1-60 tra1 - 80,纤维母细胞生长因子4 (FGF4) Rex-1,神秘的蛋白质(CFC-1)和prominin 1 (PROM-1) [38,50]。

3所示。转录组

3.1。羊水干细胞

基因表达的功能分析的签名AF-MSCs相比骨髓(BM),脐带血(CB), AM-MSCs最初由蔡et al。11]。基因表达在msc相关来源可以分为三个组(i)细胞外基质重塑(CD44、胶原蛋白II (COL2)、胰岛素样生长因子2 (IGF2)的金属蛋白酶组织抑制剂1 (TIMP1)),(2)细胞骨架调节(urokinase-type纤溶酶原激活物(PLAU)和受体(PLAUR)),(3)趋化因子调控和附着力(α-辅肌动蛋白1 (ACTN1) actin-related蛋白质复合体亚基1 b (ARPC1B)和血小板反应蛋白- 1 (THBS1)), (iv)血纤维蛋白溶酶激活(组织因子途径抑制剂2 (TFPI2)), (v)转化生长因子β(TGFβ)受体信号(窖蛋白1 (Cav1), 2 (Cav2),窖蛋白的细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1 (CDKN1A)),和(vi)基因编码E3泛素连接酶(蓝精灵)[11]。调节基因在AF-MSCs BM -相比,CB -,和AM-MSCs包括分子参与子宫成熟和收缩,如催产素受体(OXTR)和前列腺素合成的监管,如磷脂酶A2 (PLA2G10)。其他调节基因在这一组参与信号转导相关(i)凝血酶触发响应((F2R和F2RL)),(2)刺猬信号((刺猬酰基转移酶(HHAT)),和(3)G-protein-related通路(rho-related GTP-binding蛋白质(RHOF),监管机构5和7 G蛋白信号(RGS5 RGS7)和磷脂酶Cβ4 (PLCB4)) (11]。

最近研究AFSCs,金等人首次描述AFSC总人口的基因表达变化在不同段落的illumina公司微阵列分析。1970个差异表达基因检测和分类根据其表达谱为9不同的集群(56]。基因表达水平逐渐增加包括趋化因子配体(C-X-C主题)12 (CXCL12),钙粘着蛋白6 (CDH6),和叶酸受体3 (FOLR3)。表达下调基因,细胞周期蛋白D2 (CCND2),角蛋白8(美丽),IGF2,利钠肽(BNP)前体B细胞视黄酸结合蛋白2 (CRABPII) [56]。获得进一步的信息,执行衰老基因芯片数据分析和显示upregulation的基因转录,如神经生长因子β(神经生长因子β),胰岛素受体底物2 (IRS-2)、胰岛素样生长因子结合蛋白3 (IGFBP-3)和载脂蛋白E (APOE)。表达的基因,如PLAU E2F转录因子1 (E2F1), IGF2, 1型乳腺癌易感基因(BRCA1), DNA拓扑异构酶2α(TOP2A)、增殖细胞核抗原(PCNA)、forkhead盒M1 (FOXM1) cyclin-A2基因(CCNA2),初露头角的苯并咪唑1同族体β(BUB1B)和细胞周期蛋白依赖激酶1 (CDC2),逐渐在文化表达下调(56]。

Wolfrum等人进行了全球基因表达分析AFSCs相比则来源于ESCs AF (AFiPSC)和(57]。其中,基因与自我更新和多潜能(1299个基因例如,POU类5同源框1 (POU5F1) Sox2, Nanog, microRNA-binding蛋白LIN28)和AFSCs-specificity(665个基因,如OXTR HHAT, RGS5,神经纤维瘤病2型(NF2)合格(CD59)、肿瘤坏死因子超家族成员10 (TNFSF10) 5′核苷酸酶(NT5E))被发现在AFSCs [57]。此外,作者研究了衰老和端粒相关基因的表达在AFSCs早期和后来的通道,为了研究重组的影响绕过衰老AFSC中观察到的文化。六十四年被确认为差异表达基因AFSCs AFiPSC相比。其中,telomere-associated基因和基因参与调节细胞周期,如有丝分裂逮捕deficient-like 2 (MAD2L2)、保利ADP-ribose聚合酶1 (PARP1),复制蛋白A3 (RPA3)的角化病congenita 1 (DKC1中),这个傻瓜同族体6 (MSH6) CHK1检查站同族体(CHEK1) polo-like激酶1 (PLK1), POU类2同源框1 (POU2F1) CDC2、布鲁姆综合症基因RecQ helicase-like (BLM),沃纳综合症RecQ helicase-like (WRN), DNA甲基转移酶1 (DNMT1), DNA甲基转移酶3β种能阻碍DNMT3B(),核纤层蛋白B1 (LMNB1)和DNA复制因子1 (CDT1),相比AFSCs AFiPSCs和ESCs表达下调。相比之下,peptidylprolyl cis /反式异构酶(PIN1),核纤层蛋白A / C (LMNA),增长逮捕和DNA损伤诱导α(GADD45A) chromobox同族体6 (CBX6), NADPH氧化酶4 (NOX4) endoglin (ENG),组蛋白H2B类型双电子(HIST2H2BE) CDKN1A, CDKN2A生长分化因子15 (GDF15)和丝氨酸蛋白酶抑制剂1 (SERPINE1),其中,调节相比,AFSCs AFiPSCs和ESCs [57]。

3.2。羊膜干细胞

使用DNA微阵列已经报道了AM-MSCs转录组分析(11]。这些实验数据提供的信息AM-MSC基因表达模式相比,房颤的基因表达谱,CB, BM-MSCs。几个参与免疫调节基因在AM-MSCs适应监管maternoplacental之间的接口被确定。等,spondin 2 (SPON2),干扰素,α诱导蛋白27 (IFI27),血管舒缓激肽受体B1 (BDKRB1),小诱导细胞因子B亚科成员5和6 (SCYB5 SCYB6)和山口肉瘤viral-related致癌基因相同器官(LYN)被认为是调节11]。此外,其他基因表达增加AM-MSCs相比,房颤,CB, BM-MSCs包括(i)转录因子,如forkhead盒F1 (FOXF1),心脏和神经嵴衍生品2 (HAND2),表达和转录因子21 (TCF21)和(2)的代谢酶,如dipeptidyl-peptidase 6 (DPP6),色氨酸2,3-dioxygenase (TDO2)和sialyltransferases (STs) [11]。

4所示。蛋白质组学

4.1。羊水干细胞

蛋白质组学研究AFSC总人口,包括类上皮(e),羊水特定(AF-type)和成纤维细胞的细胞(f型),显示2400点,导致432种不同的基因产物的鉴定。大多数的蛋白质在细胞质(33%),局部(16%)、线粒体和核(15%)和代表主要酶(174蛋白质)和结构蛋白(75蛋白质)。相对较高的膜和膜相关蛋白比例也呈现(7%)(58]。中检测出蛋白质,9是对应于上皮细胞,如ATP合酶D链(ATP5H) NADH-ubiquinone 30 kDa氧化还原酶亚基(NUIM),膜联蛋白II (Anx2),第四膜联蛋白(Anx4), 40年代核糖体蛋白SA (Rpsa)、谷胱甘肽S-transferase P (GSTP),大穹窿蛋白质,和细胞角蛋白19 - 7 (CK-19 CK-7),而据报道12蛋白表达在成纤维细胞,包括纤连蛋白,原肌球蛋白,transgelin (TAGLN) arp2/3复杂34 kDa亚基(P34-arp) gelsolin (Gsn), 1 -伸长因素β(EF-1β),和其他人。八个蛋白被发现在角化细胞表达,包括角蛋白、核糖核蛋白,Anx2, aetyl-CoA乙酰转移酶(ACAT1),和其他三个被表达在表皮,包括原肌球蛋白和角蛋白,另一个在间充质细胞类型(波形蛋白1 (Vim 1)) (58]。

最近的研究提供了证据,代谢酶表达的多样性羊膜细胞参与代谢和遗传综合征,因此,他们的发现可能对产前诊断非常重要。更详细的分析来确定特定的代谢酶存在于AFSCs报道哦et al。59]。九十九蛋白被鉴定,如碳水化合物处理酶、氨基酸处理酶,嘌呤代谢的蛋白质和酶的中间代谢(59,60]。

蛋白质组学分析是CD117也表现在不同文化的段落⁺AFSCs,展示蛋白表达的变化主要发生在早期的文章(35]。23之间差异表达蛋白质与最早期和晚期的段落表达下调的蛋白质,Col1、Col2,的vinculin (Vcl) CRABP II,的stathmin (STMN1)和cofilin-1 (CFL1)。相比之下,TAGLN和Col3期间增加通道(35]。蛋白质显示沿着通道是26 s蛋白酶特异表达水平调节亚基7 (PSMD7)、泛素羧基末端水解酶同工酶L1 (UCH-L1),异构核ribonuclear蛋白H (hnRNP H)和焦油dna结合蛋白43 (TDP-43) [35]。

2007年,人类AF-MSCs蛋白质组映射的构造和直接与一个来自BM-MSCs [2]。确定了261种不同的蛋白质在AF-MSCs大部分蛋白质局部细胞质中(41%),而另一些被发现在内质网(8%)、核(13%),线粒体(12%)、核糖体(1%)、细胞骨架(6%)、细胞质和细胞核(5%),分泌蛋白质(2%)(2]。AF-MSCs表达的蛋白质和细胞增殖相关的维护,如ubiquilin-1 (UBQLN1),这是众所周知的,控制细胞周期进程和细胞生长、增殖相关蛋白2 g4 (PA2G4),一个核仁的生长调节蛋白质的分泌蛋白质酸性和富含半胱氨酸(SPARC),这是监管在胚胎发生和参与控制细胞周期和细胞粘附和增强剂的基本的相同器官(二)也调节细胞周期2]。TAGLN galectin 1(加1),在干细胞和分化有关,也在AF-MSCs大量表达。其他蛋白质表达高水平在AF-MSCs相关(i)的发展,如Deltex-3-like (DTX3L),和(2)细胞骨架组织和运动,如CFL1 coactosin-like蛋白质(CLP),使蛋白质相同器官(Enah)。正如所料,Vim AF-MSCs也在大量表达。在这项研究中,一个常见的详细比较了蛋白质在房颤细胞(58)和AF-MSCs也描述(2]。

在我们后来的研究(9),我们建立了两种形态不同的蛋白质组地图AF间叶细胞祖细胞类型(SS和RS)两种。25在两个亚种群差异表达的蛋白质。包括蛋白质调节相比,SS-AF-MSCs RS-AF-MSCs reticulocalbin-3前体(RCN3),胶原蛋白α1 (I) (COL1α1),FK506-binding 9蛋白质前体(FKBP9)ρGDP-dissociation抑制剂1 (RhoGDI),氯细胞内通道蛋白4 (CLIC4) tryptophanyl-tRNA合成酶(TrpRS),和70 kD热休克蛋白(HSP70)。酶类2 (Prdx2), 60 kD热休克蛋白(HSP60),在RS-AFMPCs GSTP, Anx4调节。然而,蛋白质中确定RS-AF-MSCs只包括cytokeratin-8, -18年和-19年(-18年CK-8和CK-19),组织蛋白酶B (CTSB),中电控股和整合素αV蛋白质(CD51)。Mesenchymal-related蛋白质,如Vim,加扣,和prohibitin (PHB)均表示在同一人群(9]。

4.2。羊膜干细胞

详细的方法研究人类是蛋白质被霍普金森et al。61年]。在这项研究中,作者进行了蛋白质组学分析的是样品准备人类移植,利用二维凝胶。是样品的清洗媒体也检查和分泌蛋白中被确认。蛋白质中发现我和洗媒体建议部分蛋白质释放发生。这些蛋白质主要是可溶性细胞质蛋白,并分类(根据他们的亚细胞定位和功能61年]。最丰富的和一致的蛋白质的一个例子是是THBS1报道伤口修复中发挥作用,炎症反应和血管生成62年,63年]。Mimecan(也叫osteoglycin / OGN)是另一个蛋白质中发现是代表一个小富亮氨酸蛋白多糖,存在于结缔组织的基质。据报道,Mimecan维护组织的抗拉强度和水化(61年,64年- - - - - -66年]。此外,较大的mimecan形式表达是细胞,容易蛋白水解解理(65年]。TGF -β全身蛋白质ig-h3 (βIG-H3), ECM胶粘剂分子作为膜相关生长因子在细胞分化和伤口愈合,和intergrinα6 (CD49f)的一个组成部分α6β4整合素,是细胞中也存在大量(61年,67年,68年]。众所周知,α6β4 -βIG-H3互动起着重要的作用在调节细胞粘附和伤口修复信号通路69年]。

另一个重要的研究Baharvand et al。70年)是专注于分析epithelium-denuded人类是显示两个定量和定性的差异相比,参与是(61年]。他们的蛋白质组研究人类上皮细胞,这是用作治疗眼缘的干细胞利基表面重建(71年,72年]。515点被发现在所有二维凝胶和43蛋白被确定使用MALDI TOF / TOF MS。最丰富的蛋白质在不同亚型的lumican(亮度)和OGN蛋白(PG)家族成员。特别是OGN可能扮演的角色在许多生物过程包括细胞生长、血管生成,和炎症66年]。其他蛋白质检测包括胶原VIα1 /α2 (Col6a1 / Col6a2),纤维蛋白原β链(FGB),转谷氨酰胺酶2同种型(TGM2A), b-actin变体(ACTB), 70 kD热休克蛋白5 (HSPA5) nidogen 2 (NID2) CD49f,β阻力指标肾炎(锡)[也许可以IG-H3,70年]。本研究中确定的蛋白质也与细胞外基质(ECM)有关。中检测到的,纤连蛋白(FN)、层粘连蛋白、胶原IV (Col4)和七世据报道促进上皮细胞粘附和迁移73年,74年]。

5。Secretome

最近,已取得显著进展的分析从AFSCs分泌蛋白。记录,检查参与组成分泌腺AFSC负责促进血管生成,并能唤起强烈的血管生成反应在小鼠接受75年]。根据这项研究,详细分析AFSC-conditioned媒体透露的存在已知proangiogenic使用Luminex地图技术和抗血管新生因子。血管内皮生长因子(VEGF)、基质细胞衍生因子1 (SDF-1)、白介素8(引发)、单核细胞趋化蛋白1 (MCP-1),和两个血管生成抑制剂,移行细胞(干扰素γ)和干扰素射线诱发蛋白10 (IP-10)被确定为分泌蛋白(75年- - - - - -77年]。也证明了一个相对少量的AFSC足以分泌proangiogenic生长因子和细胞因子的检测量。这些可以调节的分泌剂量依赖性的方式根据初始细胞使用的细胞数量(24,75年]。

系统研究AFSC-secreted蛋白质导致结论proangiogenic可溶性因子从AFSCs可以调解内皮祖细胞在脑缺血大鼠模型的招聘(78年]。特别是条件培养液源自AFSCs可以局部血管生成生长因子和细胞因子的皮瓣缺血大鼠模型和被招聘负责触发内源性修复内皮祖细胞(78年]。

在最近的研究中,我们审查的治疗潜力AF-MSCs及其分泌分子小鼠急性肝衰竭(24]。多种细胞因子和生长因子被发现在AF-MSC条件培养基。等细胞因子白介素10 (il - 10)、白介素27 (IL-27)、白介素17家族(IL-17E)、白介素12 p70 (IL-12p70) interleukin-1β(il - 1β),interleukin-1受体拮抗剂(IL-1ra),负责诱导地方和炎性介质,差别系统对这些被检测到。SERPINE1、MCP-1 SDF-1,负责促进组织修复,还分泌(24,79年,80年]。有趣的是,在高度表达生长因子是内皮细胞血小板源生长因子(PD-ECGF)、血管内皮抑制素/胶原十七(EN / Col17),尿纤溶酶原激活物(uPA)、TIMP1, TIMP2, heparin-binding EGF-like生长因子(HB-EGF), 7 (FGF7),纤维母细胞生长因子和表皮生长因子(EGF),负责肝再生和组织修复24,81年]。

6。总结

到目前为止,当前数据表明羊水和羊膜可能代表有前途的间充质来源的干细胞来源。的确,msc更丰富和广泛的协议被描述为他们的孤立。然而,据报道,相同类型的不同文化条件下的细胞可能会影响他们的差异基因表达模式,代表一个限制的隔离和扩张体外。研究包括表型分析,利用流式细胞术和免疫组织化学等方法,以及转录组、蛋白质组学、检查参与组成分泌腺和分析方法,旨在确定这些细胞的蛋白质剖面(图1)。生成的数据通过这样的研究将阐明微分曲目和验证这些干细胞的分子概要文件。然而,敦促要解决的主要问题是隔离的同质人口可能促进系统的研究这些多功能细胞的功能的说明。

这种方法可能导致的主要抗原识别镜像这些细胞的表型和解释他们的不同的特征属性。这种类型的研究将为一个系统的、高效的分离这些细胞在临床使用。

附录

问题进一步调查

适当的隔离方法和培养条件的AFSCs或超导公司将允许一致的表型的鉴定吗?

有一个标记,可用于AFSCs或超导公司隔离?

AFSC和超导公司人口异构和不同表型和分子特性。隔离的方法会导致一个均匀的细胞群。

AFSCs或超导公司可以作为工具在再生医学:建立以最小或没有动物物质文化条件。

标记的发现
AFSCs和超导公司初始特征可以由immunophenotype分析通过使用良好的细胞表面标记物如AFSCs: CD90、CD73, CD105, CD29, CD166 CD49e, CD58, CD44, HLA-ABC, SSEA-4;超导公司:CD13、CD29、CD44、CD49e CD73, CD90、CD105, CD117, CD166 Stro-1, HLA-ABC, SSEA-3, SSEA-4, Nanog, Sox2, Tra1-60, tra1 - 80, FGF-4 CFC-1, PROM1。

转录组和蛋白质组学等关键标记表示的识别
AFSCs: Nanog、Sox2 POU5F1、NF2 IGF2, PLAU, OXTR, HHAT, RCS5, CDC2、COL2, TAGLN,内脏大神经,Anx4, GSTP, CK-19, Vim, Col1,加;超导公司:OGN,βIG-H3, CD49F。
由于没有共同的标记用于AFSC和超导公司,更广泛的标记需要被使用的面板。这也敦促进一步详细的数组的传导和功能分析,以便于确定最合适的标记AFSC和超导公司鉴定。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

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