文摘

背景。颞下颌紊乱(tmd)的女性在怀孕期间经历一些痛苦的改进。怀孕期间,孕激素急剧增加稳定。钠离子通道1.7 (Nav1.7)在疼痛认知中起着重要的作用,就是明证删除Nav1.7单独导致完全丧失的痛苦。在先前的研究中,我们表明,在三叉神经节(TG) Nav1.7参与异常性疼痛发炎的颞下颌关节(颞下颌关节)。孕激素的调节异常性疼痛发炎颞下颌关节是否通过Nav1.7 TG还有待调查。方法。新鲜的孕酮对钠电流的影响孤立TG神经元使用全细胞记录检查。雌性老鼠切除卵巢的和治疗的剂量的孕激素增加10天。完全弗氏佐剂是关节内的管理引起颞下颌关节炎症。颞下颌关节疼痛的反应被头提取阈值评估。实时聚合酶链反应和免疫印迹被用来检查Nav1.7 TG mRNA和蛋白表达。Immunohistofluorescence被用来检查孕酮受体(PR的colocalizationα/β在TG)和Nav1.7。结果。全细胞记录表明孕激素可以减弱钠电流。此外,孕激素剂量依赖性下调Nav1.7 mRNA表达和减少颞下颌关节的敏感性伤害感受在切除卵巢的老鼠。此外,孕激素治疗颞下颌关节发炎的减毒触诱发痛在剂量依赖性的方式和压抑inflammation-induced Nav1.7 mRNA和蛋白表达在切除卵巢的老鼠。孕激素受体拮抗剂,ru - 486,部分逆转孕激素的异常性疼痛发炎颞下颌关节的影响以及颞下颌关节inflammation-induced Nav1.7 mRNA和蛋白表达。结论。孕酮,通过调制三叉神经节Nav1.7,可能代表一个有前途的代理来防止发炎颞下颌关节的异常性疼痛。

1。介绍

颞下颌紊乱(TMD)育龄妇女的发病率最高,暗示性激素可能参与TMD疼痛处理(1,2]。以前,我们报道,雌激素可能加剧颞下颌关节(颞下颌关节)炎症和疼痛3]。然而,很难解释为什么tmd的女性在怀孕期间经历一些痛苦的改进(4,5),即使在孕期雌激素水平显著提高。病例对照研究发现tmd的患病率在非孕组为45.5%,只有15.2%的怀孕。大大降低这些疾病的患病率在怀孕孕妇表明防止TMD症状和体征(4]。类似于雌激素,孕激素也大幅增加,怀孕期间稳定。此外,妇女没有任何tmd有更高的孕酮水平(11.6±10.4 ng / ml)相比,tmd的女性(8.4±6.8 ng / ml) (6]。因此,孕激素水平没有TMD的女人越高表明孕激素可以提高TMD症状。

孕酮对痛觉的影响是复杂的,与雌激素(7,8]。大脑的神经元和神经胶质细胞,胸神经节,前脑,subesophageal神经节,腿神经节和脊髓表达各种孕激素受体(PR) (9),包括古典PRs,公关α,和β,使这些细胞敏感目标的类固醇。大量研究报道,孕激素并不影响痛觉或减少伤害感受;不同的孕酮对伤害感受的影响可能是由于测试网站和孕酮的模式管理7,10- - - - - -13]。此外,孕酮证明减少神经元兴奋性通过直接抑制电压门控钾通道,通道、钙和钠离子通道14]。这些研究表明,孕激素可能发挥作用在疼痛知觉。因此,是否以及如何孕激素导致颞下颌关节炎症和疼痛仍不清楚。

电压门控钠通道1.7 (Nav1.7)在疼痛知觉中起着重要的作用。三个人类疼痛综合症是由这个基因的突变:先天性无法体验痛苦(15],主要erythromelalgia [16],阵发性极端痛苦障碍(17]。Nav1.7交感神经节中高度表达,背根神经节(DRG), TG和其他疼痛感知神经(18),它可以放大这些神经元刺激疲软和作为射击动作电位阈值通道(19]。Nav1.7在炎性疼痛也起着重要的作用。两疱疹vector-mediated击倒Nav1.7在初级传入纤维在小鼠和nociceptor-specific敲除小鼠的Nav1.7减毒inflammation-induced触诱发痛(20.,21]。此外,我们先前的研究使用荧光逆行神经示踪DiI标签TG和颞颌关节的正常显示三叉神经节神经元Nav1.7是专门调节神经元支配的颞下颌关节后颞下颌关节炎症的感应22]。

因此,我们假设三叉神经节Nav1.7可能参与progesterone-mediated衰减颞下颌关节炎症引起的疼痛。因此,切除卵巢的老鼠注射孕激素剂量的0μ克,350μg或700μg模拟生理孕激素波动的发情周期正常雌性老鼠,然后,我们探讨孕激素是否能减弱颞下颌关节疼痛和孕激素是否能调节Nav1.7表达式TG减弱颞下颌关节异常性疼痛。

2。方法

2.1。动物

在这项研究中,成年女性Sprague-Dawley (SD)大鼠(180 - 200克)。实验协议被北京大学生物医学伦理委员会批准(没有实验动物福利伦理分支。la2008 - 004,北京)。河鼠房间保持清洁、安静和整洁。老鼠被安置在22°C±1°C在12:12 h光/暗周期和随意访问提供食物和水。动物每天至少监测一次,包括周末和假期,和动物监控康复后每天至少两次麻醉,或手术对卵巢切除术,或诱导颞下颌关节炎症,或更换的孕酮(P4)和孕激素受体拮抗剂。在这项研究中,九十六只老鼠都牺牲了,他们两个死在麻醉下基于相同的麻醉治疗(1%戊巴比妥钠,40毫克/公斤,i.p)和相同的护理。然而,它是可能的,他们中的一些人可能死于个人敏感应对麻醉。没有动物成为重症。所有的努力都是尽量减少动物痛苦。 At the end of each experimental test, the rats were euthanized by an anesthesia overdose with 1% pentobarbital sodium (100 mg/kg body weight).

2.2。药物

弗洛伊德所使用的药物在这个study-Complete佐剂(CFA,颞下颌的炎症诱导物),P4,米非司酮(RU486孕激素受体拮抗剂)都从Sigma-Aldrich购买。

2.3。动物的群体划分,治疗

检查P4的影响颞下颌关节疼痛,雌性老鼠(180克- 200克)被分成4组(n= 7),如下所示:对照组(sham-ovariectomized老鼠处理车辆10天),0μg P4集团(切除卵巢的老鼠接受车辆10天),350年μ350 g P4集团(切除卵巢的老鼠接受μg P4 10天),700年μ700 g P4集团(切除卵巢的老鼠接受μg P4 10天)。

测试P4和炎症的影响颞下颌关节疼痛,雌性老鼠(180克- 200克)被分成5组(n= 7)如下:对照组(sham-ovariectomized老鼠处理车辆10天),假+ CFA集团(sham-ovariectomized老鼠接受10天的工具和注射50μl完成Freund佐剂(CFA)为两国颞下颌关节引起颞下颌关节炎症),0μg P4 + CFA集团(切除卵巢的老鼠接受车辆和注射50μl为两国颞下颌关节CFA), 350年μg P4 + CFA集团(切除卵巢的老鼠接受350μ50 g P4和注射μl为两国颞下颌关节CFA), 700μg P4 + CFA集团(切除卵巢的老鼠接受700μ50 g P4和注射μl为两国颞下颌关节CFA)。颞下颌关节炎症诱导在P4的十天治疗,和控制老鼠注射车辆(50μl盐水)。

检查孕酮受体的影响颞下颌关节疼痛,雌性老鼠(180克- 200克)被分成4组(n= 7),如下所示:对照组(sham-ovariectomized老鼠处理车辆10天),炎症组(sham-ovariectomized老鼠处理车辆10天),700μ700 g P4集团(切除卵巢的老鼠接受μg P4), 700μg P4 + RU486集团(切除卵巢的老鼠接受700μg P4和RU486)。最后三组注射50μ为两国颞下颌关节诱导l CFA颞下颌关节炎症,而对照组注射车辆(50μl盐水)。

2.4。细胞制备和膜片箝记录

新孤立TG神经元获得从180年到200年g雌性SD大鼠(n= 3),如前所述23)与轻微的修改。短暂,TGs孤立和收集在4°C课时中、被切成块和胶原酶消化后IA(σ化学品,圣路易斯,密苏里州;1毫克/毫升)和胰蛋白酶(σ化学品,圣路易斯,密苏里州;0.3毫克/毫升)37°C 40分钟。单个细胞分离,通过吸量管磨碎,然后镀和孵化到poly-L-lysine菜包含F12培养基预处理。因为Nav1.7主要是位于小神经元和神经元介质如我们之前的研究(3,22(15 - 25),TG神经元µ米直径)使用1 - 8 h后准备或培养24小时后使用。

全细胞记录了使用一个EPC / 10放大器(HEKA Elektronik Lambrecht /法尔兹,德国)和脉冲软件。补丁吸量管3 - 4 M期间使用电压钳位,和细胞−举行80 mV。数据分析与伊戈尔软件(Wavemetrics、奥斯维戈湖或)。意义的变化进行了测试使用双尾未配对的学生的t以及( )。当前记录钠,细胞外的解决方案包含(毫米):CdCl 5氯化钾、氯化钠150 0.2₂2.5 CaCl₂10玫瑰10葡萄糖,和20 TEA-Cl与氢氧化钠(pH值7.4调整)。20毫米四乙基氯化铵(TEA-Cl)和0.2毫米CdCl₂向细胞外阻断内源性电压门控钾电流和钙电流;细胞内的解决方案包含(毫米):107 CsF, 1 CaCl₂,10氯化钠,2 MgCl₂10 TEA-Cl 10玫瑰,10 EGTA,和4 NaATP与CsOH (pH值7.2)。孕酮(P4)储存在乙醇和稀释50 50 mMµM细胞外记录解决方案使用。研究稳态激活,TG细胞被激活各种测试50毫秒的潜力持有−100 mV的潜力。钠电导(峰值G)是标准化的最大峰值电导(G_马克斯),然后适合的玻耳兹曼函数形式G/G_马克斯= (1 + exp ((V_米−V_½)k)−1 (V_米膜电位;V_½half-activated电压;k斜率因子)。测量稳态失活,细胞举行前脉冲可能从500−120 mV 30 mV女士,然后被测试为50毫秒脉冲−10 mV。归一化适应了玻耳兹曼函数峰值电流我/我_马克斯= (1 + exp ((V_米−V_½)k)−1,我_马克斯在峰值电流激活−10 mV−前脉冲后120 mV。

2.5。感应的颞下颌关节炎症

CFA(油/生理盐水的比例1:1、0.025毫克结核分枝杆菌σ)注入双边颞下颌关节为24小时引起颞下颌关节炎症详细描述之前(22,24]。

2.6。测量头撤军的阈值

行为测试是在盲目的基础上进行的,研究人员在大鼠治疗的蒙蔽。头部提取阈值,这是负相关的机械灵敏度orofacial地区(25),进行了报道之前(22,24,26,27),结果被计算成平均值±标准偏差(SD)基于5测量每个关节和4大鼠每组。简单地说,老鼠习惯后的后爪和倾斜对实验者的工作手套。老鼠可以自由移动,但在测试会话保持不动。在老鼠牺牲前2 h,灯丝的尖端电子·冯·弗雷anesthesiometer (IITC生命科学,森林山、钙、美国)被放置在皮肤上面进步的颞下颌关节,增加力量,颞下颌关节区,直到头被撤销;作用力是自动记录。

2.7。P4管理

与1%戊巴比妥钠麻醉后(50毫克/公斤体重)腹腔内接种,切除卵巢的老鼠双边或sham-operated(控制和sham-ovariectomized组)和允许恢复1周。P4是溶解在乙醇和稀释的盐水在成交量为100年的10%μl前管理。P4的治疗组大鼠去卵巢后的骨骼状况,由腹部皮下注射每天早上,在剂量的350μg或700μ每鼠g P4,根据集团10天。相同数量的车辆在对照组注射,虚假的集团,集团收到0μg P4。在实验小组,老鼠sham-ovariectomized和切除卵巢的组织收到50μl注射弗氏完全佐剂(CFA;σ)(1:1油:盐水乳剂)到每个颞下颌关节,引起两国的颞下颌关节炎症治疗24小时P4的第十天。大鼠对照组收到50μ我向每一个颞下颌关节注入生理盐水。

2.8。P4的决心

血从那些切除卵巢的老鼠获得与实验中不同的P4管理或组织诱导后24小时的颞下颌关节炎症。证实了卵巢切除术的有效性和P4替代测量血清P4如图1(一)和2(一个),P4的血清水平是衡量使用贝克曼库尔特访问免疫分析系统等。

2.9。孕激素受体拮抗剂的应用

特定于孕激素受体拮抗剂RU486,溶解在乙醇和稀释的盐水在成交量为100年的10%μl前管理。雌性老鼠被分成4组(控制,炎症,700μg P4集团,700年μg P4 + RU486集团);控制,炎症,和700年μg P4组腹腔注射,和700年μg P4 + RU486组腹腔注射ru - 486(5毫克/鼠)在24小时内,两次之前和之后立即CFA注入。ru - 486被修改的应用程序和剂量的使用在先前的研究28,29日]。头退出阈值测量2小时前(基线)和22小时后CFA注入。TG切割CFA注射后24小时。

2.10。实时定量聚合酶链反应和免疫印迹分析

Nav1.7 mRNA表达的TG检测如前所述[3,22]。简而言之,总RNA提取试剂盒(表达载体,卡尔斯巴德,CA);进行逆转录iScript cDNA合成设备(Bio-Rad大力神,CA)和实时PCR与权力执行SYBRGreen PCR反应混合液(应用生物系统公司,培育城市,CA)使用7500实时PCR系统(应用生物系统公司)。引物对大鼠的效率β肌动蛋白和Nav1.7被确认之前22]。

Nav1.7蛋白表达的TG前面详细评估后通过免疫印迹方法描述(22]。主要的抗体anti-Nav1.7抗体(美国微孔1:500年,AB5390)和反β肌动蛋白抗体(sc - 1616 r 1: 1000年,圣克鲁斯,美国)。

2.11。Immunohistofluorescence

完整的雌性老鼠与过量戊巴比妥钠麻醉和安乐死transcardiac灌注(250毫升的体温,0.1米PBS和pH值7.4,其次是200毫升,300毫升冰冷的4%多聚甲醛在0.1 PBS和pH值7.4)。在4%多聚甲醛灌注之后,TGs后缀4 h,孵化在30%蔗糖溶液(0.1米PBS)一夜之间在4°C,冷冻−20°C,切割5μ米厚的低温恒温器。部分被安装在poly-L-lysine-coated幻灯片,阻止了10%山羊血清30分钟在室温下,一夜之间和孵化主要抗体在4°C。兔多克隆抗体anti-Nav1.7(美国微孔1:500年,AB5390)和鼠标单克隆anti-PRα/β抗体(sc - 810 1: 500年,圣克鲁斯生物技术、美国)使用相应抗体作为主要评价colocalization Nav1.7和公关α/β。与PBS广泛的洗涤后,部分被孵化与四甲基罗丹明isothiocyanate-conjugated anti-rabbit或荧光素isothiocyanate-conjugated anti-mouse二级抗体(1:200;美国杰克逊ImmunoResearch,圣克鲁斯,CA)在室温下30分钟,然后用PBS。部分和4′复染色,6-diamidino-2-phenylindole 1分钟(5毫克/毫升)和PBS洗了三次,覆盖着荧光安装介质。共焦显微镜图像获得使用蔡司激光扫描显微镜(德国卡尔蔡司LSM 510年,耶拿),和图像处理使用LSM 5 4.2版本软件。我们之前研究使用荧光逆行神经示踪DiI标签TG神经元支配的颞下颌关节和显示DiI-positive神经元和Nav1.7-positive神经元主要是位于延髓区域分支毗邻上颌部(22];因此,吻侧区域TG是我们实验的关注焦点。

2.12。统计分析

使用SPSS统计分析了13为Windows。所有数据被当作平均数±标准差。对比分析了两组使用一个独立的样品t以及,对比分析了两组多使用由单向方差分析(方差分析)其次是图基的多重比较测试。任何价值 被认为是显示统计学意义。

3所示。结果

3.1。在TG神经元钠电流的衰减P4

在TG神经元钠电流(15 - 25µ米直径)被膜去极化检测范围从−80 mV 30 mV与5 mV步骤5 s在50毫秒的时间间隔从控股的潜力开始后每一步−100 mV。细胞外的应用P4 (50µ米)可逆减钠电流的新孤立TG神经元(图3(一个)),它的峰值下降约21%在5分钟(n=(图6)3 (b))。研究P4的稳态激活钠电流的影响,conduction-voltage曲线适合玻耳兹曼函数;P4负激活曲线向右移动了大约5 mV(控制:V_1/2=−33.78±0.75 mV,k= 6.43±0.63;P4: V_1/2=−28.36±0.21 mV,k= 4.37±0.19;n= 5,图3 (c))。相比之下,通道失活曲线拟合的玻耳兹曼函数几乎没有受到P4(控制:V_1/2=−47.18±1.12 mV,k= 12.2±1.03;P4:V_1/2=−50.4±1.24 mV,k= 10.77±1.14;n= 3,图3 (d))。

3.2。卵巢切除术和黄体酮的确认管理

血清水平的P4测量证实卵巢切除术的有效性和P4替换。如图1(一)切除卵巢的组,血清水平的P4剂量依赖性增加,正如预期的那样,与最低水平(4.3±1.5 ng / ml)在0μg P4组和最高(25.6±3.2 ng / ml)在700年μg P4组,分别。P4的血清水平在对照组(16.1±6.5 ng / ml)高于0μg P4集团( ),相当的350μg P4组(17.2±3.0 ng / ml; ),低于700μg P4集团( )。此外,血清水平的P4切除卵巢的组织都是在生理层面上观察到的发情周期正常雌性大鼠(30.]。

3.3。P4下调Nav1.7表达式在TG和减毒颞下颌关节伤害感受的敏感性

提取阈值,为颞下颌关节伤害感受化验,是最高的700年μg P4集团( )(图1 (b)),而Nav1.7 mRNA和蛋白表达是700年最低μg P4集团( )(数据1 (c)和1 (d))。这些结果表明,P4的血清水平的差别可能与对这些Nav1.7表达和降低对颞下颌关节伤害感受的敏感性。

3.4。P4剂量依赖性衰减异常性疼痛发炎颞下颌关节和颞下颌关节Inflammation-Induced Nav1.7表达TG大鼠去卵巢后的骨骼状况

证实了卵巢切除术的有效性和P4替代血清P4的测量。如图2(一个)、血清水平的P4高剂量依赖性的方式。如图2 (b),退出阈值显著降低假+ CFA组的价格相比对照组( )。然而,颞下颌关节inflammation-induced头部提取阈值的减少切除卵巢的组织被P4减毒剂量依赖性的方式( ),表明P4替换可以部分逆转颞下颌关节的撤军差别inflammation-induced对这些阈值。如数据所示2 (c)和2 (d),Nav1.7 mRNA和蛋白表达显著调节假+ CFA组与对照组( ),切除卵巢的组和颞下颌关节inflammation-induced Nav1.7表达式部分由P4剂量依赖性地抑制( )。这一结果表明,P4可以防止颞下颌关节inflammation-induced Nav1.7表达式在TG和减弱颞下颌关节inflammation-induced触诱发痛。

3.5。阻塞公关部分逆转P4的压制效果异常性疼痛在TG颞下颌关节炎症和Nav1.7表达式

检查是否P4发挥其监管作用通过影响公关中介Nav1.7表达式,公关拮抗剂ru - 486应用。如图4(一)之间,有colocalization Nav1.7和公关α/β在TG神经元。血清水平的P4检测确认的有效性P4替换(数据未显示)。如图4 (b),退出阈值显著降低炎症组与对照组相比 ),和700年μg P4的差别部分减毒颞下颌关节inflammation-induced对这些撤军阈值。ru - 486部分减毒的影响P4头上撤军阈值( )。如数据所示4 (c)和4 (d),Nav1.7 mRNA和蛋白表达在炎症组与对照组相比显著调节( ),而Nav1.7 mRNA和蛋白表达在700μg P4组与炎症组相比均有显著下调。因此,inflammation-induced Nav1.7 mRNA和蛋白表达是到700年减毒μg P4。此外,Nav1.7 mRNA和蛋白表达在700μg P4 + RU486组显著调节与700年相比μg P4集团和表达下调与炎症组相比,表明ru - 486部分减毒的压制效果P4 Nav1.7表达式( )。

4所示。讨论

在这项研究中,我们已经表明孕激素能够表达下调Nav1.7 TG表达式,从而衰减异常性疼痛从颞下颌关节炎症。我们发现孕酮可逆减钠电流在新鲜分离TG神经元。这些影响与progesterone-mediated Nav1.7表达的差别存在剂量依赖的相关性对这些TG和颞下颌关节伤害感受灵敏度降低。此外,孕激素剂量依赖性衰减异常性疼痛发炎颞下颌关节和颞下颌关节inflammation-induced Nav1.7 TG的表达式。最后,孕激素受体拮抗剂ru - 486部分减毒孕激素的影响,其机械痛阈和Nav1.7表达式。我们总结的结果,提出了一个模型,孕激素可以减弱异常性疼痛炎症通过调制三叉神经节Nav1.7图颞下颌关节5。颞下颌关节炎症诱导细胞因子的表达,如肿瘤坏死因子α,il - 1β和神经生长因子(31日]。这些细胞因子作用于神经末梢,启动脉冲,TG和诱导Nav1.7表达。孕激素可能下调三叉神经节Nav1.7表情,减少神经元的刺激,通过孕激素受体(PRα/β),然后变弱异常性疼痛炎症颞下颌关节。这些发现增加我们的理解在颞下颌关节伤害感受性荷尔蒙的复杂作用,可能在一定程度上解释了为什么女性TMD-related疼痛在怀孕期间的一些改进。

Progesterone-induced电压门控钠电流的变化(INa) TG神经元可能有助于抑制神经元的兴奋性。从边缘疼痛的刺激输入取决于艾娜的存在,和颞下颌关节炎症可能会增加颞下颌关节传入纤维的兴奋性32]。此外,当神经元兴奋性抑制通过阻断钠通道与利多卡因等药物,疼痛是抑制(33]。在这项研究中,孕酮可逆减毒艾娜在新鲜分离TG神经元和艾娜的高峰值降低。这右转去极化激活孕激素可能会导致更高的阈值,进而减缓活化,减少神经元兴奋性。因此,孕激素可能通过抑制在发挥镇痛作用。这些结果一致认为,通过直接抑制孕酮减少会引起电压门控钠通道、钙通道和钾离子通道(14,34,35]。虽然我们在这项研究中证明的全部面板钠离子通道参与艾娜progesterone-mediated萧条,而钠离子通道发挥主要的作用需要进一步探索。

孕酮可以改善通过TG Nav1.7颞下颌关节炎性疼痛。这一发现提出了一个可能的外周机制黄体酮对颞下颌关节疼痛的影响。在这项研究中,我们表明,孕激素可以剂量依赖性降低Nav1.7表达式和颞下颌关节伤害感受的敏感性。Nav1.7报告设置获得疼痛信号(19),所以这是Nav1.7表达差别合理相信对这些可能导致颞下颌关节伤害感受的衰减,Nav1.7 TG可能是孕激素的目标。此外,我们表明,增加血清孕激素的剂量与减少颞下颌关节炎性疼痛的严重程度由CFA注入,和孕激素剂量依赖性衰减inflammation-induced三叉神经节Nav1.7表达式,表明孕激素可以保护你的颞下颌关节发炎的差别从触诱发痛到对这些Nav1.7 TG。根据,这些结果还强烈表明积极的关系之间存在的异常性疼痛发炎颞下颌关节和TG Nav1.7表达式。考虑到改善孕酮对颞下颌关节的影响异常性疼痛在TG Nav1.7的差别与对这些基因的表达,它看起来令人费解,Nav1.7表达式不是调节,触诱发痛并没有加重的0μg P4 + CFA组,血清孕酮低于假组(图2)。下降的原因可能是另一种荷尔蒙切除卵巢的老鼠起相反作用的孕激素在调节异常性疼痛和Nav1.7表达式。例如,雌激素增加颞下颌关节炎性疼痛[报道32,36,37),和我们之前的研究表明,雌二醇可能加剧发炎颞下颌关节的异常性疼痛上调Nav1.7 TG (3]。孕激素和雌激素的综合效应,或其他一些激素,在颞下颌关节触诱发痛和Nav1.7表达尚不清楚。

孕激素可能减毒颞下颌关节inflammation-induced触诱发痛和Nav1.7表达在TG规范化孕激素受体信号通路。孕酮对其影响主要通过转录监管机制由孕酮绑定公关α或公关β在细胞核38]。在这项研究中,我们首先确认colocalization Nav1.7和公关之间α或公关β在TG神经元,这提供了概念,孕激素可能会影响Nav1.7表达式。然后,我们封锁了孕激素受体与ru - 486抑制孕酮的压制效果Nav1.7表达式和颞下颌关节炎性疼痛。这些研究结果确实表明孕激素可能会减弱颞下颌关节炎性疼痛,至少部分通过孕激素受体,Nav1.7。RU486对抗P4的行动与公关允许二聚和绑定的绑定与dna人力资源但避免转录(39]。虽然我们用足够的RU486预处理,孕激素的影响是不能完全逆转。可能会有一些其他机制参与的Nav1.7差别progesterone-mediated对这些基因的表达。例如,据报道,孕激素减少的表达cyclooxygenase-2 (cox - 2)40),我们先前的研究显示Nav1.7参与颞下颌关节炎性疼痛由cox - 2 / PGE2信号(41]。此外,我们的研究结果显示,孕酮改善颞下颌关节异常性疼痛,和其他人表明孕激素减弱excitotoxic脊髓损伤后疼痛的行为(42)和inflammation-induced热痛觉过敏(43];有一些研究人员报道,自行车高水平的孕激素不能减少CFA-induced颞下颌关节伤害感受(30.]。这些差异表明,孕酮的作用还没有完全理解。并发症的孕酮的作用可能与孕激素受体的复杂影响,例如,提高子宫肌层的细胞公关α来β比压制孕酮受体的抗炎活性β(44]。

总之,我们显示,孕酮改善颞下颌关节红肿疼痛,这孕酮的镇痛效应可能部分通过颞下颌关节的镇压inflammation-induced Nav1.7 TG的表达式。这些数据可能在一定程度上解释了为什么女性TMD经历疼痛在怀孕期间的一些改进。孕激素,调节Nav1.7 TG,可能代表一个有前途的医学干预防止TMD疼痛的发展。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

作者要感谢小星寇先生为他的技术援助。这项研究由北京大学和医院口腔修复(批准号PKUSS20150113)和中国国家自然科学基金(批准号81271173)。