文摘

两rs1801133突变Methylenetetrahydrofolate还原酶(MTHFR)基因和转录因子过氧物酶体proliferator-activatedγ(PPARG)与血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平和高血压。然而,它们在屏蔽高血压中的作用尚不清楚。在这项研究中,我们第一次测试之间的关系rs1801133基因型和h形Hcy水平高血压使用收集的临床资料203例患者治疗前后用马来酸依那普利二和叶酸片(EMFAT)。然后,我们构建了一个以路径分析探讨rs1801133-PPARG信号通路的作用在屏蔽高血压及其治疗。虽然提出了类似的血压,rs1801133的TT基因型患者更年轻( 值< 0.05),明显高于Hcy水平( 和 )CC和CT基因型组。路径分析表明,T-allele rs1801133可能抑制叶酸水平差别PPARG通过对这些基因的表达和upregulation Hcy水平,增加高血压和半胱氨酸的风险。治疗使用EMFAT导致同样减少患者Hcy水平对所有不同的基因型( ; ),这可能部分通过激活PPARG发生。此外,即使在治疗后,患者TT基因型仍呈现明显高于Hcy水平( 和 )。我们的结果支持,rs1801133突变可以扮演一个角色在屏蔽高血压、PPARG的差别可能部分通过对这些基因。此外,PPARG也可能参与治疗使用EMFAT屏蔽高血压。

1。介绍

屏蔽高血压是原发性高血压伴有血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平升高(≥10μmol / L) [1]。Hcy水平通常是男性高于女性,随着年龄的增加2,3]。高Hcy水平已经与许多疾病的发生[4- - - - - -6),包括凝血和屏蔽高血压(7,8]。在中国,高血压的患病率是29.6%9,目前约75%的高血压患者同型半胱氨酸水平升高(10]。

Hcy是一种含硫的氨基酸蛋氨酸代谢,代谢的两种途径:remethylation或transsulfuration。Methylenetetrahydrofolate还原酶(MTHFR)是一种同型半胱氨酸代谢的关键酶,提供一个甲基Hcy remethylation蛋氨酸和维持体内正常的Hcy水平(11]。MTHFR基因的突变降低MTHFR酶活性,阻止Hcy remethylation并增加血浆Hcy水平(11,12]。MTHFR基因至少有两个功能多态性,677 t和1298 c。的MTHFR C677T (rs1801133)突变较为常见,这就增加了高Hcy水平的风险(13]。

多项研究已经进行rs1801133多态性和屏蔽高血压之间的关系。但是,结果仍然是有争议的。例如,最近一项涉及241例的临床研究发现显著更高的TT基因型流行屏蔽高血压患者( μ比non-H-type mol / L)高血压患者( μmol / L),表明TT rs1801133的变异可能与屏蔽高血压(11]。然而,另一个最近的研究涉及185名患者没有发现关联rs1801133多态性和屏蔽高血压8]。

过氧物酶体proliferator-activated受体γ(PPARG)是II型核受体(蛋白质调节基因)由PPARG基因编码(14]。许多研究证实,PPARG在高血压中起着保护作用[15,16]。几项研究也显示,增加PPARG可以降低血浆Hcy的活动(17),而半胱氨酸被发现减少PPARG[的蛋白表达18,19]。然而,没有研究报道直接PPARG和屏蔽高血压之间的关系。

这里,我们综合临床数据分析和大规模的完美途径分析研究潜在PPARG和rs1801133突变之间的关系和他们的潜在作用屏蔽的发病机理和治疗高血压。我们的研究结果表明,rs1801133-PARG与屏蔽相关信号通路可能是马来酸在其使用卡托普利治疗高血压和扮演的角色和叶酸片(EMFAT)。

2。材料和方法

这项研究的其他组织如下。我们首先检查rs1801133不同基因型之间的关系和血浆Hcy水平屏蔽高血压使用收集到的203例患者的临床资料。使用EMFAT治疗效果也进行了研究。然后,我们进行了大规模的以路径分析构建信号通路之间的关系,探索rs1801133突变,PPARG,屏蔽高血压。

2.1。临床资料收集

从各种新诊断的h形高血压患者临床资料收集诊断在内蒙古呼伦贝尔人民医院从2017年10月到2018年10月。所有患者遇到的标准中国高血压防治指南(2010)与等离子体 μmol / L。入选标准如下:患者遇到了H型高血压的诊断标准。内蒙古呼伦贝尔医院的伦理委员会批准了这项研究,和所有参与者提供告知后同意参与这项研究的协议。排除标准如下:所有受试者使用以下条件被排除在外,包括继发性高血压、恶性肿瘤、免疫疾病、肝脏和肾脏功能障碍(肝酶:3倍高于正常范围, μmol / L),那些服用的药物可能影响血浆Hcy水平在6个月内,如叶酸、维生素、甲氨蝶呤和口服避孕药。

总共203名患者通过了招聘标准,并纳入本研究。根据他们的MTHFR基因型,这203 h形高血压患者分为三组:CC(野生型纯合子)组,CT(杂合的)组和TT(突变等位基因纯合子)组。记录病人的基本的人口统计信息,包括性别、年龄和种族。此外,临床参数记录和组间相比,包括Hcy、血压(收缩压和舒张压),血脂(包括胆固醇和甘油三酯TG TC),空腹血糖值,和颈动脉彩色多普勒超声检查。所有的病人都接受口服EMFAT三个月,与Hcy水平测量之前和之后的治疗。

2.2。MTHFR基因测定

聚合酶链扩增(PCR)和MX3005p荧光标记探针用于检测677 c / T多态性的基因型网站的MTHFR基因在临床标本。整个基因的DNA提取血液样本和检测到的荧光PCR技术。MTHFR基因型的样本被荧光的差异区分。

2.3。测定血浆Hcy

患者的空腹静脉血收集。一个同型半胱氨酸酶循环试验是评估使用罗氏模块化分析P800自动化学分析仪。血浆Hcy评估使用罗氏模块化分析P800化学分析仪。提供的工具包是Oursa公司。

2.4。统计分析

SPSS21.0软件是用于统计分析。测量数据所描述的 ( )。单向方差分析被用于比较组符合正态分布,rank-sum测试被用于比较团体不符合正态分布,和 测试是用于统计数据。 被认为是具有统计学意义。

2.5。为屏蔽高血压rs1801133-PPARG信号通路

爱思唯尔的帮助下通路工作室(版本12.4.0.3:数据库功能关系和哺乳动物蛋白质的途径;爱思唯尔),构造了一个rs1801133-PPARG信号通路探索之间的联系rs1801133突变,PPARG及其潜在的角色的病理学和治疗高血压和半胱氨酸。内的实体通路包括马来酸依那普利二的两个主要组件和叶酸片(叶酸和卡托普利),MTHFR基因C677T多态性(rs1801133),两种疾病(半胱氨酸和高血压),蛋白质PPARG和小分子同型半胱氨酸。实体之间的关系在信号通路被发表在先前的研究结果,支持涵盖完整的PubMed摘要和超过6.9爱思唯尔和第三方全文。方向、极性和可靠性的关系是手动检查作为质量控制的过程。类似的方法后,我们还编译路径探索老化的影响对屏蔽高血压及其治疗。

3所示。结果

3.1。患者基线特征

病人展示在表的基线特征1。共有203名患者被诊断为h形高血压是包括在这项研究中,其中114是女性和89人。根据他们的MTHFR基因型,所有的病人被分为三组,包括55例CC组,96年CT,分别在TT和52。CT型H高血压患者占总数的47.29%,表明大多数病人至少有部分突变( 值< 0.05)。

表1
患者基线特征。

如表所示1CC的平均年龄,CT和TT组 年, 年了, 年,三组之间没有显著差异( 值> 0.05)作为一个整体。然而,CT组和CC组的平均年龄明显高于TT组( 值< 0.05),这表明,屏蔽高血压患者的发病年龄可能根据不同的rs1801133表型发生变化。性别和民族,三组中没有发现显著差异( 值> 0.05)。此外,血压、血脂、血糖、和动脉粥样硬化的变化测量和比较三个基因型组中,发现无显著差异( 值> 0.05;见表2)。这些研究结果表明,种族,性别,和血液指标(血糖、胆固醇和TG)屏蔽高血压患者不得与rs1801133突变。

表2
比较三组的测量指标。
3.2。rs1801133多态性和Hcy水平之间的关系

rs1801133多态性之间的关系和屏蔽高血压患者Hcy水平进行了分析。对患者Hcy水平测定治疗前后使用EMFAT。如表所示2,在治疗之前,Hcy水平CC组CT组和TT组 , ,和 ,分别显示重要的协会与rs1801133多态性( , )。Hcy水平TT组显著高于CC组和CT组( 值< 0.05)。这些发现表明,rs1801133多态性显著相关屏蔽高血压患者Hcy水平升高。

所有的患者在三个不同的治疗组口服EMFAT(10毫克)一天一次。三个月的治疗后,Hcy水平CC组CT组和TT组 , ,和 ,明显低于治疗前( 值< 0.05)。注意,治疗效果通过EMFAT所有三组相似的降低Hcy水平( )。此外,群体间的差异Hcy水平仍然高治疗后( ),这强调了rs1801133突变的影响在屏蔽高血压患者Hcy水平。

3.3。为屏蔽高血压rs1801133-PPARG信号通路

信号通路构建通过文献数据分析提出了图1。由通路rs1801133突变之间的可能联系,PPARG,同型半胱氨酸,叶酸,卡托普利,半胱氨酸和高血压。具体地说,它表明rs1801133突变可以促进血浆同型半胱氨酸和抑制叶酸,导致减少PPARG表达和增加高血压和半胱氨酸的风险。同时,使用叶酸和卡托普利治疗增加PPARG的mRNA水平和表达,这导致血浆同型半胱氨酸水平和血压的降低。通路建议rs1801133突变和PPARG可能在屏蔽高血压的病理发展中发挥作用。此外,它可能会添加新的见解理解EMFAT在屏蔽高血压的治疗效果。


图1
为屏蔽高血压MTHFR-C677T-PPARG信号通路。
3.4。角色的老化屏蔽高血压

当我们注意到患者TT组更年轻比CT和CC组,我们组成的路径探讨衰老的作用在屏蔽高血压的发病机制及其治疗。如图2同型半胱氨酸水平的增加,衰老是一个风险因素(20.),降低尿酸(21),和叶酸缺乏症(22),它会增加高血压和半胱氨酸的风险。事实上,年轻患者TT组提出了类似血压的患者(TC和CC组)可能会强调高Hcy水平对血压的影响。


图2
通路显示屏蔽高血压衰老的作用及其使用马来酸依那普利二和叶酸治疗表。

有趣的是,格里芬等的使用大鼠模型的研究表明,卡托普利不仅阻止了血压的增加,即使废除了血压升高与衰老(23),这部分解释了使用EMFAT屏蔽高血压的治疗效果。

4所示。讨论

MTHFR的病原反应酶甲基循环,其中包括同型半胱氨酸为蛋氨酸的转换。C677C T突变催化地区的MTHFR基因可能诱导缬氨酸取代丙氨酸,导致酶的热失稳性和抑制MTHFR活动,减少转换从5,10-methyltetrahydrofolate 5-methyltetrahydrofolate (24,25]。因此,血浆Hcy水平的增加,导致特定的病理变化,包括血管内皮损伤、血管平滑肌增殖,抑制一氧化氮产量,和高血压的发展26- - - - - -29日]。

在这项研究中,203年rs1801133的多态性进行了分析屏蔽从呼伦贝尔地区高血压患者。结果表明,27.09%的患者是野生型纯合子(CC), 47.29%是杂合的(CT),剩下的人(25.62%)突变等位基因纯合子(TT),表明大多数病人有杂合的(CT) ( 值< 0.05)(表1)。注意,CT基因型的分布类似于以前的研究(49.95%)(30.),支持临床资料用于本研究的有效性。

没有rs1801133基因型的分布差异基于性别和种族( 值> 0.05),符合大多数以前的研究报告(11]。然而,我们注意到患者TT基因型明显比病人年轻CC或CT基因型组( 值< 0.05)。衰老是最常见的危险因素高血压的发展(31日和半胱氨酸20.),这也与图中给出的路径2。换句话说,老比年轻人更敏感的高血压的风险。临床数据分析显示,患者在TT基因型组明显高于Hcy水平( , 治疗前; , 治疗后)。综上所述,这些研究结果表明rs1801133 TT基因型的患者患高血压的风险更高在年轻的时候,这可能与Hcy水平的增加有关。我们的研究结果表明,rs1801133 TT基因型与屏蔽有关高血压。

以路径分析(图1支持我们的临床资料分析结果,rs1801133可能导致增加Hcy水平和减少叶酸水平(30.),因此屏蔽高血压的可能是一个潜在的风险因素。此外,rs1801133突变对屏蔽高血压的影响可能是通过抑制PPARG部分。一方面,同型半胱氨酸是一种抑制剂PPARG [19由rs1801133 TT突变[],它得到了晋升30.]。另一方面,rs1801133 TT突变降低血浆叶酸(30.PPARG[的],这是一个启动子32]。因此,rs1801133的突变可以作为PPARG的抑制剂。然而,PPARG可以发挥保护作用,高血压(15和已经证明降低血浆同型半胱氨酸17]。的差别从这个意义上说,对这些PPARG可能部分解释rs1801133突变的影响发展的h形高血压。

此外,通路分析还显示,这两个主要组件的EMFAT,卡托普利和叶酸,已被证明unregulate PPARG [32,33]。因此,高血压和半胱氨酸的抑制剂,PPARG也可能参与屏蔽高血压的治疗使用EMFAT(图1)。

这项研究也有一些局限性,需要未来的工作。首先,收集临床数据从内蒙古呼伦贝尔地区有限的样本大小(203例),这可能不能代表屏蔽一般高血压患者。我们的结果应该测试使用更大的临床资料不同人口的地区。第二,构建的途径在这项研究是基于以前的研究有不同的背景。途径应该使用直接屏蔽高血压研究的数据进行验证。

5。结论

我们的研究结果支持rs1801133突变可以屏蔽高血压的发展中发挥作用,这可能是部分PPARG的差别通过对这些基因。此外,PPARG也可能参与使用EMFAT屏蔽高血压的治疗。

数据可用性

的数据在我们的研究可从相应的作者在合理的请求。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

作者的贡献

Xiuwen梁和婷婷他贡献了同样的工作。

确认

这项研究部分由呼伦贝尔市科技局科研计划项目——马来酸依那普利二叶酸片的疗效观察h形高血压患者MTHFR基因多态性在呼伦贝尔地区(项目号2018 ns021)。