在文章开头“吡格列酮减弱药物洗脱Stent-Induced促炎状态的病人通过阻断泛素化PPAR”(1),还有其他方法,应该添加的文章主要是关于PPARγ绑定和泛素化的方法。额外的方法如下所示:

2.8。免疫印迹。蛋白质水平的p65 p50, PPAR -γ,Gapdh跨国公司和圣克鲁斯被免疫印迹检测抗体p65亚基(sc - 372), p50亚基(sc - 114), PPAR -γ(sc - 7273)和Gapdh (sc - 48166)如前所述 。单核细胞细胞溶解在缓冲区里帕(美国Cybrdi,马里兰州)含有蛋白酶抑制剂(罗氏诊断,印第安纳波利斯,美国)。等量的蛋白质被加载到4 - 12% Bis-Tris预制凝胶电泳和被electrotransferred到PVDF膜(罗氏诊断)。阻塞1 h后在室温下,膜是顺序孵化主要Abs在4°C隔夜和二级Abs在室温下1 h。蛋白质化学发光检测的信号,所有的值被加载与Gapdh纠正。

2.9。免疫沉淀反应。免疫沉淀反应进行了化验如前所述 。细胞提取准备通过修改里帕缓冲区(细胞信号技术)。细胞溶解产物(300μg)与1孵化μ克PPAR Ab (sc - 7273)在一夜之间在4°C和沉淀蛋白g琼脂糖珠(Santa Cruz)在4°C 2 h。免疫沉淀反应蛋白质分离通过sds - page和转移到PVDF膜。膜被顺序孵化主要泛素化Ab (sc - 8017)和次要Abs。乐队被使用ECL可视化系统。

此外,下面的部分应该被添加到第三段后讨论:

“过氧物酶体proliferator-activated受体-γ(PPAR -γ)是核受体超家族成员的ligand-dependent转录因子调节脂肪细胞的分化,葡萄糖稳态和巨噬细胞的激活 。PPAR -γ在脂肪细胞,发现了泛素化和降解的差别和蛋白酶体抑制剂抑制了对这些PPAR -γ 。Proinflammation细胞因子还发现诱导PPAR -γ退化 。这里,我们发现一个新颖的机制,这样PIO增强PPAR -γ绑定活动虽然抑制泛素化降解,这可能是重要的服用tzd临床使用。”

此外,以下引用的引用列表中应包含: x t . Chen, b·h·克劳福德et al .,“心脏保护新生儿心脏的氧化应激激活的PPARg由过氧化氢酶介导的,”自由基生物学和医学,53卷,不。2、208 - 215年,2012页。 谢,t . Yagai y罗et al .,“激活肠道低氧诱导因子2α在肥胖导致肝脂肪变性。”自然医学,23卷,不。11日,第1308 - 1298页,2017年。 问:赵,d .周干扰素- h . et al。。γ加剧血管内膜增生诱导内质网应激和凋亡的巨噬细胞通过促进ubiquitin-dependent肝X受体-α退化。”美国实验生物学学会联合会杂志没有,卷。31日。12日,第5331 - 5321页,2017年。 l . Fajas d . Auboeuf大肠Raspe et al .,“组织、启动子分析、基因和表达人类PPARgamma,”《生物化学》杂志上,卷272,不。30,pp.18779 - 89, 1997。 豪泽s, g . Adelmant p . Sarraf h·m·莱特·e·穆勒,b . m . Spiegelman”退化的过氧物酶体proliferator-activated受体γligand-dependent激活有关,”《生物化学》杂志上,卷275,不。24日,第18533 - 18527页,2000年。 k·j·韦特,z . e .弗洛伊德·Arbour-Reily j·m·斯蒂芬斯”Interferon-gamma-induced监管过氧物酶体proliferator-activated受体γ和统计在脂肪细胞,”《生物化学杂志》上,276卷,没有。10日,7062 - 7068年,2001页。