文摘

高血压是一种疾病,全球高发病率和高死亡率。此外,各种因素,如遗传倾向、生活方式因素,和器官的异常与血压有关,参与高血压的发展。然而,目前,很少有可用的高血压药物不会引起副作用。虽然姜在高血压的治疗效果已经很成熟,确切机制尚未阐明。因此,本研究旨在评估6-gingerol的降压机制,生姜的主要成分之一,协助开发新的治疗高血压药物没有副作用。6-gingerol的降压效果和机制被确定通过逆转录聚合酶链反应(rt - pcr),西方墨点法,并采用免疫染色生物标志物参与高血压在人类脐静脉内皮细胞(HUVECs),人类胚胎肾细胞(HEK293细胞),和鼠标preadipocytes (3 t3-l1细胞)。3 t3-l1分化细胞的脂质积累评价采用油红O染色。6 -姜辣素增加内皮一氧化氮合酶的磷酸化水平(以挪士)蛋白质但减少血管细胞粘附蛋白1 (VCAM1)和肿瘤坏死因子-α(TNFα在HUVECs)。在HEK293细胞,上皮细胞钠离子通道的表达蛋白质减少6-gingerol(钠)。脂质积累被6-gingerol减毒治疗3 t3-l1细胞分化。监管这些影响是通过过氧物酶体proliferator-activatedδ受体(PPARδ)。6-Gingerol改善生物标志物的表达通过PPAR参与高血压的发展δ在HEK293 HUVECs和分化3 t3-l1细胞。

1。介绍

血压是指血液的力量推动对血管壁产生的抽上来的心;高血压是血压持续增加的状态(1]。一般来说,高血压的原因有很多,如生活方式、性别、年龄、肥胖、遗传问题,肾脏功能障碍。在全球范围内,大约有40%的25岁及以上的成年人在2008年被诊断为高血压(2),和高血压的并发症负责每年大约有940万人的死亡3]。因此,高血压及其并发症降低生活质量和社会和国家代表一个巨大的负担。尽管许多抗高血压药物开发和销售,有那么多有降压药物的副作用。需要发现和开发新的、更安全的药物来治疗高血压,因此,一个优先级。

高血压可引起动脉粥样硬化(动脉硬化的一种);然而,动脉粥样硬化本身也诱发高血压。高血压诱发动脉损伤和动脉内粥样硬化斑块的形成。动脉粥样硬化斑块,由胆固醇、脂肪成分,钙,纤维素,和泡沫细胞,诱发动脉硬化和缩小,并可能导致严重的cerebrocardiovascular疾病或死亡(4]。高血压和肾脏功能障碍有相互影响:高血压诱发肾血管损伤通过容器拉伸;相比之下,肾脏损伤导致积液船只,排泄不合理,高醛甾酮症,和高钠重吸收,然后这些缺陷提高血压。因此,异常血管和肾脏反射的高血压状态的身体。除了异常与维管组织和肾脏,肥胖是一个严重的高血压发病危险因素(5,6]。因此,高血压和肥胖产生不利影响,相互引起。

姜(生姜)是世界上最常见的食用香料之一(7),被认为是人类历史上一个重要的医学。根据Dongui Bogam(韩国传统医学百科全书),生姜暖身体,加强肠胃系统,减少呕吐。 - - - - - -姜辣素(1 - (4′-hydroxy-3′-methoxyphenyl] 5-hydroxy-3-decanone)是主要的辛辣成分姜的各种治疗效果负责。在南亚,众所周知,姜对心血管疾病的影响(8,9]。最近的研究对姜辣素提取的角色和姜辣素,主要在代谢紊乱,引起了以下结论:姜辣素提取减少食源性肥胖,增加耐力能力通过增加脂肪通过PPAR利用率δ信号(10],6-gingerol调节血压的影响通过抑制血管紧张素ⅱ1型受体(AT1R)激活11),提高葡萄糖吸收通过AMPK分化社会应激大鼠骨骼细胞(12),通过AMPK活化和抑制炎症在结肠炎13]。尽管大量的研究进行了姜辣素在各种疾病的影响条件下,有相对较少的研究在高血压姜辣素的作用。

血压的调节主要是相关血管收缩的调制,肾脏的重吸收钠离子,和脂质代谢紊乱。因此,在这项研究中,探讨6-gingerol对高血压的影响和潜在的机制,我们测量了蛋白表达与血压相关的生物标志物在HEK293人类胚胎肾细胞暴露于高盐条件和人类脐静脉内皮细胞(HUVECs)保持在高胆固醇和脂肪酸的条件。此外,6-gingerol对脂质积累的效果和机理进行了分化3 t3-l1细胞。

2。材料和方法

2.1。材料

HEK293人类胚胎肾细胞系3 t3-l1小鼠胚胎成纤维细胞(preadipocytes)和CPAE牛肺动脉内皮细胞行从朝鲜购买细胞株银行(首尔,韩国)。HUVECs被Geum-Joon曹博士捐赠(韩国大学妇产科学系,古鲁医院)。细胞培养试剂,包括杜尔贝科的修改鹰介质(DMEM),胎牛血清的边后卫,胎牛血清(FCS)和antibiotic-antimycotic解决方案(AA),购自WELGENE Inc .(韩国大邱)。的™2 BulletKit™,内皮细胞生长介质套件,从收购LONZA(瑞士巴塞尔)。蛋白质提取解决方案和prestained标记基因内区获得生物技术(Seongnam-si、京畿道、韩国)。食盐(氯化钠),6 -姜辣素,3 - (((2-Methoxy-4 - (phenylamino)苯基)氨基磺酰)2-thiophenecarboxylic酸甲酯(PPARδ对手,也称为GSK0660), dorsomorphin (AMPK抑制剂,也称为复合C),和油红O试剂购自Sigma-Aldrich(圣路易斯,密苏里州,美国)。柯达GBX开发者和固定器试剂Carestream买来健康,Inc .(美国罗彻斯特,纽约)。主要的抗体β肌动蛋白和血管细胞粘附分子1 (VCAM1)和适当的二次抗体从圣克鲁斯生物技术获得,Inc .(美国达拉斯,TX)。主要抗体内皮一氧化氮合酶(以挪士)磷酸化以挪士(p-eNOS) 5′腺苷一磷酸激酶(AMPK)和磷酸化AMPK (p-AMPK)从细胞信号技术,购买Inc .(丹弗斯、马、美国)。主要抗体检测过氧物酶体proliferator-activatedδ受体(PPARδ)和过氧物酶体proliferator-activated受体γ共激活剂1α(PGC-1α)由Abcam(英国剑桥)。的主要抗体检测抗肿瘤坏死因子-α(TNFα)和上皮细胞钠离子通道(钠)购买的罗福斯(美国利特尔顿有限公司)。试剂盒®试剂购买从英杰公司(美国纽约大岛)。权力互补脱氧核糖核酸合成装备,PCR预混料、和DNA梯(100碱基对)获得基因内区生物技术(Seongnam-si、京畿道、韩国)。

2.2。细胞培养

HEK293细胞在DMEM培养包含10%的边后卫和1% AA 37°C的5%的股份有限公司₂孵化器。提供新鲜的培养基是每48 - 72 h。实验,细胞之间通过镀59,63人的密度5×10⁵细胞每口井(9.6厘米²)在6-well文化板块。细胞培养24 - 48 h在37°C公司5%₂孵化器,介质改为DMEM包含1%的边后卫。此后,HEK293细胞同时用生理盐水治疗(54.75更易),6-gingerol (50μ摩尔),GSK0660 (50μ摩尔)24 h。HUVECs内皮细胞培养基上培养,用新鲜的培养基为实验,提供每48 - 72 h。HUVECs通道7和12之间镀6-well文化板块的密度1×10⁶每口井的细胞和培养24 - 48 h 37°C的5%的股份有限公司₂孵化器。新媒体媒介交换后,HUVECs同时治疗胆固醇(0.1更易),棕榈酸酯(0.1更易),6-gingerol (50μ摩尔),GSK0660 (50μ摩尔)24 h。CPAE细胞在DMEM培养包含10%的边后卫和1% AA 37°C的5%的股份有限公司₂孵化器。提供新鲜的培养基是每48 - 72 h。实验中,CPAE细胞通道35到40之间镀6-well文化板块的密度1×10⁶每口井的细胞和培养24 - 48 h 37°C的5%的股份有限公司₂孵化器。在媒介交换DMEM包含1%的边后卫,CPAE细胞同时接受胆固醇(0.1更易)和6-gingerol (50μ摩尔)24 h。

3 t3-l1细胞之间通过9和18在24-well镀(1.9厘米²/)或6-well文化板块的密度5×10⁴或2×10⁵每口井的细胞,分别在含10%小牛血清DMEM和1% AA的解决方案。当达到3 t3-l1细胞融合、分化培养基用于细胞除了6-gingerol (50μ摩尔)和PPARδ拮抗剂(50μ摩尔)。分化培养基含有0.0125μ12.5摩尔/毫升地塞米松μ摩尔/毫升3-isobutyl-1-methylxanthine 10μg / mL胰岛素,和10%的边后卫。分化2天后,媒介是胰岛素介质(包含10所取代μg / mL胰岛素和10%的边后卫)。在孵化后胰岛素中2 - 4天,介质为维护交换介质,只包含10%的边后卫。

2.3。半定量逆转录聚合酶链反应(rt - pcr)

总RNA提取使用试剂盒®试剂根据制造商的指示。互补DNA合成使用的权力从总RNA互补脱氧核糖核酸合成装备,为人类PPAR和聚合酶链反应δ,人类AT1R人类肿瘤坏死因子α,人类β肌动蛋白、鼠标PPARδ、鼠标PPARγ、鼠标脂肪酸合酶(FAS),鼠标β肌动蛋白,牛PPARδ,牛单核细胞化学引诱物蛋白1 (MCP-1),牛3 -磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)使用PCR进行预混料设备。使用的引物序列如下:向前5 -aaggccttctccaagcacat-3和扭转,人类PPAR 5“-aagacgtgcacgctgatctc-3”δ(产品尺寸- 239碱基对);提出5 -tcccaaaattcaacccttcc-3和反向,5”——gtggggaatccaggaaaaga-3”对人类AT1R(产品尺寸- 216碱基对);提出5 - ccctcaacctcttctggctc-3和反向,5“-agctgtaggccccagtgagt-3”对人类肿瘤坏死因子α(产品尺寸- 163碱基对);提出5 - gcttggtcacttcgtggcta-3和反向,5“-caaaccgcttccaactcaaa-3”人类β-肌动蛋白(产品尺寸- 522个碱基对);5 -ggcagagttgctagggttcc-3和扭转,5 ' - caaggaacaccccaagacct-3 PPAR老鼠δ(产品尺寸- 212碱基对);5 ' - agccgtgcaagagatcacag-3和扭转,5 ' - aggcttttgaggaactccc-3 PPAR老鼠γ(产品尺寸- 147碱基对);提出5 - gaaacctgacggcatcattg-3和反向,5“-cggtgtcctcagagttgtgg-3”鼠标FAS(产品尺寸- 281碱基对);提出5 -ctaggcaccagggtgtgatg-3和反向,5 - ctacgtacatggctggggtg-3鼠标β肌动蛋白(产品尺寸- 281碱基对);5 ' - catcattctgtgcggagacc-3和扭转,5为牛PPAR -gcttggggaagaggtactgc-3δ(产品尺寸- 134碱基对);提出5 -cctcctgtgcctgctactca-3和反向,5为牛——gtcctggacccatttctgct-3 MCP-1(产品尺寸- 238碱基对);5 ' - ccgttcgacagatagccgta-3和扭转,5 ' - aagatggtgatggcctttcc-3牛GAPDH(产品尺寸- 280个碱基对)。反应混合物cDNA预热5分钟在95°C作为初始变性步骤。变性的聚合酶链反应包括一步20年代在95°C,一个退火步骤10年代55°C,一个扩展一步30年代在72°C,和最后一个扩展步骤3分钟在72°C。

2.4。免疫印迹分析

首先,细胞均质蛋白分离解决方案中,细胞的蛋白质浓度提取使用布拉德福德方法估计。对于每一个样本,10μ克提取的蛋白质被加载到10%钠十二烷基sulfate-polyacrylamide凝胶电泳(SDS -页面)凝胶。蛋白质被转移到硝化纤维膜使用electroblotting 90分钟在100 V,和非特异性结合的膜在一夜之间被孵化膜5%脱脂牛奶的解决方案。三10分钟后洗Tris-buffered盐水含0.05%渐变20 (TBS-T),膜被孵化的解决方案主要抗体在室温(25°C) 2 h。以下主要抗体被用于1:1000稀释:PPARδ在Thr172, AMPK p-AMPK(),以挪士,p-eNOS (Ser1177), PGC-1α,β肌动蛋白。TBS-T三个10分钟后清洗,膜与辣根孵化peroxidase-conjugated二级抗体室温1 h。以下稀释被用于二次抗体:1:5000为PPAR anti-rabbit IgG抗体δ,AMPK p-AMPK p-eNOS, PGC-1以挪士α和1:5000 anti-mouse IgG抗体β肌动蛋白。随后,细胞膜在TBS-T 10分钟洗了三次,一次在TBS 10分钟,然后用化学发光底物和增强器解决方案。获得的图像使用开发人员手动和固定器试剂,并使用图像J软件结果进行了分析。

2.5。免疫细胞化学

细胞被固定在冰冷的甲醇的室由应用程序幻灯片15分钟。内在的过氧化物酶活性在细胞治疗消除了PBS含有0.3% H₂O₂和0.3%正常血清。在PBS 5分钟洗后,10分钟的细胞被孵化PBS含有0.25% Triton x - 100和在PBS再次洗5分钟。然后细胞在正常孵化阻止血清(PBS稀释1:10 0)切除后20分钟。阻止血清,这些细胞被孵化1 h和主要的抗体溶液,洗5分钟,30分钟和孵化二级抗体解决方案。5分钟后洗在PBS, VECTASTAIN®ABC试剂添加到细胞,培养30分钟再洗。随后,3、3′-diaminobenzidine (DAB)衬底的解决方案是补充道,和孵化一直持续到预期的颜色发生变化。与PBS三洗后,细胞与苏木精复染色,用蒸馏水洗净。细胞室幻灯片干,覆盖着玻璃,并使用光学显微镜观察。图像密度估计反复使用图像J软件在每次实验如下。图像密度测量在指定区域在图中定义(面积大小是相同的所有免疫细胞化学图像)。接下来,同一单位的区域中指定的其他部分图及其密度测量。每一个图像量化随机重复十次。量化工作重复每次免疫细胞化学实验。 Finally, the numerical density data obtained through repeated experiments were statistically analyzed using Prism software.

2.6。油红O染色

细胞被播种在24-well文化板块、固定在4%甲醛溶液30分钟,用PBS 5分钟,然后洗净沾油红O解决方案1 h。30年代洗后40%的异丙醇,PBS的细胞被洗两次5分钟,使用光学显微镜观察和拍照。绝对异丙醇(1毫升)被添加到每个好,之后,筛选了油红O的吸收是通过测量量化使用Spectramax + 384 - 530海里好标(分子设备有限责任公司,桑尼维尔,美国)。

2.7。耗氧率分析

耗氧速率(OCR)分析3 t3-l1细胞估计使用海马XFp系统(美国安捷伦,圣克拉拉,CA)根据制造商的协议。细胞被镀在每口井的10000个细胞,细胞的结算后,6-gingerol被添加到媒体,和细胞孵化隔夜37°C, 5%的公司₂孵化器。传感器盒+工具板包含calibrant是一夜之间在孵化有限公司₂无孵化器在37°C。当天的分析,分析媒体准备类似文化传媒(25毫米葡萄糖和4毫米谷酰胺),和pH值调整到7.4。的XFp miniplate洗两次分析媒体和媒体分析(180年第四卷μl)被添加到细胞。然后,XFp miniplate被允许平衡在一个有限公司₂无孵化器在37°C在试验开始前60分钟。(寡霉素,羰基cyanide-4) - trifluoromethoxy苯腙(FCCP)和抗霉素A /鱼藤酮分别注射在每个传感器盒+药物港口公用事业板块和孵化有限公司₂无孵化器的10分钟。3 t3-l1分化细胞,这些细胞被对待6-gingerol 24 h在细胞分化的最后一天,然后是OCR测量。

2.8。统计数据

数据的均值±SEM(标准误差的措施)。两组之间的差异统计学意义计算使用学生的学习任务,和单向方差分析被用来检查统计差异超过三组。p < 0.05的值被认为是表明统计上显著的差异。

3所示。结果

3.1。6-Gingerol改善mRNA水平与高血压相关的生物标志物在HUVECs HEK293细胞,分化3 t3-l1细胞在病理条件下

6-Gingerol PPAR的mRNA水平增加δ与疾病控制群HUVECs相比,3 t3-l1 HEK293细胞和分化细胞。治疗6-gingerol AT1R的水平下降(血管收缩的一个重要因素)mRNA增加胆固醇和棕榈酸酯治疗在HUVECs(图1(一)),表达下调肿瘤坏死因子增加αmRNA水平引起的生理盐水治疗在HEK293细胞(图1 (b))。此外,6-gingerol PPAR的水平下降γ和分化3中FAS t3-l1细胞(图1 (c))。HUVECs 6-gingerol的影响,HEK293细胞,分化3 t3-l1细胞被PPAR逆转δ拮抗剂,GSK0660(图1)。

3.2。6-Gingerol PPAR的蛋白质含量增加δ、p-AMPK PGC-1α,p-eNOS HUVECs处理高浓度的胆固醇和棕榈酸酯,和它的函数依赖PPARδ

在血管内皮细胞中,以挪士催化反应产生一氧化氮(NO),这是一个血压的主要监管机构。以挪士的激活是通过磷酸化诱导特定的残渣(14,以挪士的规定通常是PPAR有关δAMPK, PGC-1α。因此,我们评估PPAR的蛋白表达δAMPK, PGC-1α血管内皮细胞,以挪士处理棕榈酸酯和胆固醇在最后50浓度μ摩尔。

6-Gingerol PPAR的蛋白表达增加δ和PGC-1α后胆固醇和棕榈酸酯治疗;然而,这个表达式是减少GSK0660治疗(图2(一个))。p-AMPK表达式,它降低了胆固醇和棕榈酸酯治疗,仅是升高后6-gingerol治疗和减少GSK0660治疗(图2 (b))。虽然p-eNOS的表达是胆固醇和palmitate-treated组高于对照组,更显著增加表达式6-gingerol治疗后观察。然而,GSK0660抑制增加p-eNOS表达式由6-gingerol(图2 (c))。复合C, AMPK拮抗剂,减少p-AMPK而不影响PPAR的水平δ在HUVECs(图2 (d))。

3.3。6-Gingerol减少肿瘤坏死因子α和VCAM1蛋白质表达HUVECs处理高浓度的胆固醇和棕榈酸酯

炎症参与了动脉粥样硬化的发展,以及血管壁的异常;因此,它诱发血管收缩15]。肿瘤坏死因子α是一个代表炎症细胞因子,参与动脉硬化的发展(16]。此外,肿瘤坏死因子α增加细胞粘附分子的表达,比如VCAM1参与动脉粥样硬化斑块的发生(17]。6-Gingerol治疗减少肿瘤坏死因子α和VCAM1表达,增加胆固醇和棕榈酸酯治疗。然而,GSK0660治疗抵消6-gingerol在肿瘤坏死因子的抑制效果α和VCAM1(图3)。

3.4。即蛋白表达增加了生理盐水治疗但减少6-Gingerol在HEK293细胞治疗

肾脏血管紧张素-醛固酮系统的一个组成部分,调节血压和体液内稳态。特别是,肾脏钠具有不可或缺的功能在血压调节(18]。因此,评估即表达在肾细胞是一个重要的工具来帮助识别6-gingerol在高血压的作用机制条件。

增加钠氯化钠治疗后表达被压抑与6-gingerol控制细胞的治疗水平,和PPAR 6-gingerol被逆转的影响δ拮抗剂,GSK0660(图4)。

3.5。6-Gingerol PPAR增加δ和p-AMPK蛋白质含量在HEK293细胞中氯化钠浓度高,处理及其函数依赖PPARδ

在动物喂食高盐饮食,p-AMPK表达减少;然而,5-aminoimidazole-4-carboxamide 1 -治疗β-D-ribofuranoside(爱卡,AMPK受体激动剂)AMPK活性增加。此外,激活AMPK诱导肾小管重吸收钠(19]。

作为AMPK调节钠离子在肾小管的重吸收,我们研究了AMPK蛋白表达在HEK293细胞中氯化钠浓度高的治疗。

PPAR的蛋白表达减少δ和p-AMPK氯化钠引起的治疗恢复了6-gingerol;然而,增强诱导6-gingerol被PPARδ拮抗剂,GSK0660(图5(一个))。AMPK拮抗剂,复合C, AMPK的磷酸化蛋白下降但没有影响PPAR的蛋白表达δ在HEK293细胞(图5 (b))。

3.6。6-Gingerol分化3 t3-l1细胞脂质积累减少,但影响是PPAR所抵消δ拮抗剂

油红O染色3 t3-l1细胞分化6-gingerol和GSK0660表明脂质积累被6-gingerol减少治疗和减少被PPAR逆转δ拮抗剂,GSK0660(图6)。

3.7。6-Gingerol治疗增加PPARδ、p-AMPK PGC-1α蛋白质含量在3 PPAR t3-l1细胞分化δ端依赖方式和提高ocr 3 t3-l1细胞未分化和分化

我们证实了6-gingerol的抑制作用在分化3 t3-l1细胞脂质积累,并检查6-gingerol antilipid积累机制,我们估计PPAR的蛋白表达δ、p-AMPK PGC-1α在分化3 t3-l1细胞。治疗细胞分化3 t3-l1 6-gingerol PPAR的蛋白表达增加δ、p-AMPK PGC-1α相比之下,在控制细胞分化水平。然而,PPAR 6-gingerol是抵消的效果δ拮抗剂(图7(一)和7 (b))。AMPK拮抗剂,复合C,减少蛋白质的表达p-AMPK但没有改变PPAR的蛋白表达δ3 t3-l1 preadipocytes(图7 (c))。分解代谢的ATP(三磷酸腺苷)最终是通过电子传递链使用氧作为电子受体。因此,OCR反映了细胞的分解代谢的程度。增加了OCR 6-gingerol治疗未分化和分化3 t3-l1细胞(图7 (d))。

4所示。讨论

血压是直接调制的血管收缩和放松;从这个角度看,以挪士在血压调节中起至关重要的作用。换句话说,以挪士通过血管放松在高血压的条件下,降低血压,以挪士是证明是积极的表达受AMPK, PGC-1α,PPARδ在一些研究20.- - - - - -24]。此外,PPARδ调制AMPK和PGC-1的表达α作为上游调节器在肝细胞和脂肪细胞hyperlipidemic条件下(25,26]。以挪士相比,AT1R,当激活血管紧张素ⅱ和atherosclerosis-inducing TNF等因素α并通过血管收缩(VCAM1导致高血压16,17,27]。此外,在以前的研究中,高血压的海拔条件诱导AT1R HUVECs mRNA水平(28]。在我们的研究中,在HUVECs 6-gingerol p-eNOS的蛋白水平升高。相比之下,6-gingerol降低TNF的表达α、VCAM1和AT1R。从HUVECs中的结果,我们认为6-gingerol直接缓解高血压血管舒张的刺激和抑制血管收缩;此外,它部分地改善高血压的差别通过对这些炎症和动脉粥样硬化。除了VCAM1, MCP-1已知的一个主要趋化因子诱导动脉粥样硬化的发展。(29日]。rt - pcr结果支持在CPAE细胞HUVEC的意义数据;异常表达PPARδ和MCP-1胆固醇,引起与6-gingerol规范化治疗(附加图(可用在这里))。此外,6-gingerol断定是介导的影响通过PPAR的连续调节δampk。

除了血管血管,肾脏是密切参与调节血压、肾的功能,研究在血压调节中报道:钠的远端肾单位肾包含三个子单元(α,β,γ)形成一个通道对钠离子的重吸收。因此,肾脏调节血压通过钠离子的重吸收钠的低血压。此外,肾脏钠的增加表达参与高血压的发展(30.];另一项研究也支持这个通过调查AMPK在钠的影响。即AMPK抑制钠函数通过促进钠之间的交互和泛素连接酶Nedd4-2在HEK293细胞(31日]。通常知道高血压引起的高盐摄入起源于增加钠潴留和等离子体体积32,33]。

此外,高盐食源性高血压的主要原因之一是钠mRNA表达的高度(34,35]。在雄性SD (SD)中与高盐饮食喂养的老鼠,p - AMPK的表达低于正常饮食组,但增加了爱卡(19]。此外,激活AMPK的二甲双胍钠诱导蛋白表达的增加减少了高盐条件HUVECs [36]。这些研究表明,AMPK监管的核心即表达,和高盐条件增加钠通过AMPK的抑制。

在我们的研究中,治疗高氯化钠浓度增加钠在HEK293细胞的蛋白表达;相反,PPARδ和p-AMPK蛋白质含量下降。这些结果是一致的与其他研究对高盐食源性高血压。此外,我们的研究结果的基础上,6-gingerol规范化博命,PPARδ,p-AMPK蛋白质含量在HEK293细胞中处理高氯化钠,和PPARδ是更有效的比AMPK上游监管机构对钠的表达。因此,钠在HEK293细胞6-gingerol正常化处理可能发生高钠氯通过PPAR顺序δampk途径。

此外,最近的研究强烈建议肾发炎和高血压之间的相关性(37,38]。在这项研究中,TNF的mRNA水平α升高的氯化钠下降了6 -姜辣素治疗,和肿瘤坏死因子的调节α由6-gingerol PPARδ端依赖。因此,我们认为肾细胞的减少炎症6-gingerol治疗后观察到的一个重要因素导致高血压正常化的条件。

肥胖诱导的高血压是一个重要的因素;,减肥引起的运动和其他疗法改善高血压的症状(39- - - - - -41]。根据世界卫生组织(世界卫生组织)的定义42),肥胖是一种身体状态,异常和过度积累的脂肪会损害健康。此外,发病的正常分泌脂肪组织由肥胖状态,干扰和发病的异常分泌可能诱发高血压内皮功能障碍(43,44]。因此,抑制脂质积累的脂肪组织和细胞直接降低高血压。脂肪组织的脂质积累可以减少脂肪酸的氧化磷酸化的刺激,和PPAR等生物标志物δAMPK, PGC-1α主要涉及在脂肪酸在脂肪组织分解代谢。PPARδ激活降低脂质含量通过upregulation脂肪酸氧化相关基因(45,46]。类似于PPARδ,AMPK刺激脂肪酸的机会,但也通过调节荷尔蒙抑制脂类分解脂肪酶在脂肪细胞47,48]。

PGC-1α执行一个重要的角色转换的白色脂肪组织褐色脂肪组织和参与寒冷暴露条件下适应性生热作用[49,50]。此外,PGC-1α不可或缺的作用在脂肪组织和细胞脂肪酸氧化,是由AMPK:在小鼠脂肪组织缺乏PGC-1吗α脂质氧化相关基因,基因的表达和生热作用是减少;而在PGC-1α-overexpressing 3 t3-l1细胞,基因的mRNA表达参与脂肪酸氧化是升高(51- - - - - -53]。

在一些报道,6-gingerol抑制脂质积累在3 t3-l1细胞和施加降血脂药效果缺少瘦素受体的db / db老鼠们注入了(54- - - - - -56]。类似于从其他研究发现,6 -姜辣素可以减少脂质积累在分化3 t3-l1细胞通过PPAR的刺激δAMPK, PGC-1α参与脂肪酸分解代谢的研究。此外,海拔3 t3-l1 OCR 6-gingerol治疗后的细胞支持的降脂效果6-gingerol主要归因于脂肪酸的氧化磷酸化。此外,PPAR的mRNA水平γ和FAS参与脂肪酸合成下降了6 -姜辣素治疗3 t3-l1细胞和表明6-gingerol另外可以抑制脂质积累的差别通过对这些脂肪酸合成相关的生物标志物。此外,3 t3-l1 6-gingerol细胞的降脂效果是PPAR依赖δ。这些结果表明,6-gingerol可以发挥典型药物和降血脂药效果在活的有机体内。因此,6-gingerol可能有助于降低高血压通过改善高脂血症和肥胖。

5。结论

因此,建议的假想的降压功能6-gingerol源于两种途径。首先是降低血压通过改进p -以挪士和AT1R表达的差别在血管内皮细胞和对这些钠和肿瘤坏死因子α在肾细胞。第二个是改善高血压通过降低脂质积累的脂肪细胞。此外,所有的降压功能通过PPAR 6-gingerol可能施加δ监管(图8)。

我们的研究是第一个系统描述的降压机制6-gingerol使用细胞实验。然而,进一步的调查机制的抗高血压作用6-gingerol今后将澄清在活的有机体内研究。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。

的利益冲突

没有利益冲突声明。

作者的贡献

Yong-Jik李设计的研究,完成所有实验,写了这篇文章。Yoo-Na张成泽、Yoon-Mi汉和金队伍参与了分子生物学实验。Hong-Seog Seo从事研究设计和研究方向。

确认

这项研究受到了一个校内的格兰特(2 e26990)从韩国科学技术研究院,韩国国家研究基金会的资助(NRF - 2016 r1a2b3013825),高丽大学拨款,高丽大学古鲁医院格兰特(O1801781)和格兰特BK21 +韩国大学医学研究生课程。

补充材料

PPAR 6-gingerol在mRNA水平的影响δ和MCP-1 CPAE细胞病理条件。(补充材料)