补充膳食共轭亚油酸PPAR的差别会导致对这些基因的转录在肉鸡和减少脂肪细胞的细胞结构

文摘

共轭亚油酸(CLA)作为一种重要的核受体配体脂肪形成和脂肪沉积在哺乳动物和鸟类物种。本研究旨在确定类似的效果是否合理的禽流感腹部脂肪脂肪细胞大小,以及腹部脂肪形成的转录水平。各级班是补充,即(i)基底饮食没有CLA棕榈油(5%)(CON),(2)基底饮食CLA 2.5%和2.5%的棕榈油(LCLA),和(3)基底饮食CLA (HCLA)为5%。的内容独联体9日,反式-11班是介于1.69和2.3倍大()比反式-10年,独联体-12班的腹部脂肪LCLA和HCLA组。腹部脂肪的脂肪形成的能力得宝LCLA和HCLA喂鸡与减少脂肪细胞和单不饱和脂肪酸的比例(MUFA)。脂肪细胞的转录水平的蛋白质(aP2)和过氧物酶体proliferator-activated受体(PPARγγ)下调了1.08 - 2.5倍的CLA补充饮食,分别。这是推测喂养CLA的肉鸡减少脂肪细胞的大小和PPAR使之抑制γ和aP2控制脂肪细胞的细胞结构。海拔CLA同分异构体在脂肪组织提供了一个潜在CLA-rich源供人类食用。

1。介绍

现代鸟类品种往往积聚过多的脂肪(1]。这种趋势已经被证明是一个主要问题为家禽养殖者对肉用鸡行业今天它有一个负面影响,因为过多的脂肪堆积导致肉产量降低(2]。有证据的增长模式在鸡的脂肪仓库会受到饮食因素的影响(3- - - - - -5]。班是一个主要的混合物独联体9日,反式-11年和反式-10年,独联体-12年同分异构体。众多的生物效应描述了CLA的6- - - - - -9]。在活的有机体内和在体外CLA的研究表明,包含饮食调节细胞生长、养分利用率、营养存储和脂质代谢主要在啮齿动物和猪(10,11]。许多研究也证实,CLA能够调节脂肪沉积模式在鸡12- - - - - -14]。

脂肪组织中的脂肪形成的基因的转录水平是由许多转录因子(15),其微分转录是扮演着一个关键的角色在家禽脂肪细胞的脂质代谢16]。PPAR受体属于核受体超家族。三种亚型的PPAR已确定,PPAR,PPAR,PPAR(17]。Houseknecht et al。18)首次报道膳食CLA的抗糖尿病的作用和PPAR链接在老鼠身上。在哺乳动物中,PPAR在脂肪组织中表达的高度19]。研究Larkina et al。20.)表明,PPAR转录诱导高度在肝脏脂肪鸡,而不是脂肪。这可能是由于分歧PPAR鸟类和哺乳动物之间的信号转导机制。

PPAR刺激合成代谢过程,如甘油三酯的合成,葡萄糖吸收,和脂肪酸吸收等直接或间接调节目标基因aP2,脂蛋白脂肪酶(LPL), GLUT4和脂肪酸移位酶(CD-36 /脂肪)(21]。康等。22)报道,反式-10年,独联体-12班减少脂肪细胞的转录因子的转录水平PPAR,脂肪细胞基因脂肪酸合成酶(FASN)和aP2 vehicle-treated对照组相比3 t3-l1脂肪细胞的细胞。

过多的脂肪沉积增加脂肪细胞的大小密切相关。这两个在体外和在活的有机体内研究在单胃的物种证明,CLA减少脂肪细胞的细胞结构通过减少脂肪细胞的增殖(23,24)或脂肪细胞大小(24- - - - - -26]。已报告在老鼠,CLA减少大鼠的脂肪细胞大小和直径(27]。事实上,CLA-induced老鼠的身体脂肪量的降低是由于减少脂肪细胞的大小,而非脂肪细胞数(25]。同样,巴恩斯et al。28)表示,在CLA-fed猪肌内脂肪的增加似乎被关联到一个比数量更大的增加在肌内脂肪细胞大小。相比之下,在CLA-fed牛,据报道,肌内脂肪组织增加通过肥大和增生(29日]。因此可能存在物种差异在脂肪细胞反应中CLA的细胞环境。

家禽的脂肪组织仓库可能拥有不同的脂肪形成的具体由各州完成基因的转录和监管,导致脂肪吸积差异为增长和发展进步。研究表明,小脂肪细胞减少FASN和LPL酶活动导致更少新创脂蛋白的合成脂肪酸和减少吸收存储在老鼠和人类30.]。FASN mRNA在人类脂肪组织被证明与胰岛素敏感性和增加正相关与吡格列酮治疗后(PPAR受体激动剂)31日]。

当前的工作报告在肉用仔鸡CLA的身体fat-decreasing效应与脂肪形成的相关基因。定量的变化引起的CLA对脂肪细胞的大小和分布也将调查。因此,我们评估了意味着脂肪细胞区域(μ米²)腹部脂肪描述得宝的脂肪细胞大小和调查是否以及在多大程度上补充CLA腹部脂肪细胞大小变化及相关转录在肉用仔鸡标记。

2。材料和方法

2.1。实验鸟类和饮食

总共180天的男性肉用鸡小鸡从本地鱼种场(500年科布)获得。抵达后,小鸡是单独wing-tagged,称重,随机分配到三个治疗组。鸟儿接到起动饲料从第一天到天21天22之间的和决定性的饲料和42。每个治疗组有六个复制的鸟类和在18层架式鸡笼钢丝层长大。笼子在传统的开放式的房子与循环温度(最低,24°C;最大,34°C)。相对湿度在90%至80之间。提供饲料和水随意和照明是连续的。雏鸡接种鸡新城疫7天。从第一天开始,六个笼子里的鸟儿被分配给一个3饮食组:(i)基底饮食(5%的棕榈油)没有课,(ii) 2.5%的班和2.5%的棕榈油(LCLA:低CLA)和5%(3)班(HCLA:高CLA)。本研究中使用的CLA商业饲料级(Lutrell BSAF, SE,路德维希港,德国)。饮食在土豆泥形式。实验饮食的成分是制定以满足或超过美国核管理委员会(32)建议。表1和2显示实验的化学成分和脂肪酸饮食,分别。这三个实验饮食,等热量的,如表所示1。的平均代谢能量范围从3080年到3150年Mcal /公斤的干物质(DM)的内容,而蛋白质含量为22% (DM)为起动器和20.5% (DM)修整器的饮食。在所有治疗组粗脂肪5%。


成分(% DM)	起动器(21天)			修整器(22-42天)
成分(% DM)	反对	LCLA	HCLA	反对	LCLA	HCLA

玉米	51.17	51.17	51.17	58.9	58.9	58.9
大豆	40.56	40.56	40.56	32.22	32.22	32.22
棕榈油	5	2。5	- - - - - -	5	2。5	- - - - - -
食盐	0.4	0.4	0.4	0.4	0.4	0.4
¹维生素预混料	0.05	0.05	0.05	0.05	0.05	0.05
¹矿物质预混料	0.05	0.05	0.05	0.05	0.05	0.05
DL-methionine	0.26	0.26	0.26	0.3	0.3	0.3
赖氨酸	- - - - - -	- - - - - -	- - - - - -	0.5	0.5	0.5
²化学成分
粗蛋白(% DM)	22.00	22.00	22.00	20.5	20.5	20.5
代谢能(我)(千卡/公斤)	3080年	3080年	3080年	3150年	3150年	3150年
磷(% DM)	0.45	0.45	0.45	0.42	0.42	0.42
钙(% DM)	1.00	1.00	1.00	0.9	0.9	0.9
蛋氨酸(% DM)	0.55	0.55	0.55	0.5	0.5	0.5
赖氨酸(% DM)	1.20	1.20	1.20	1	1	1
Na (% DM)	0.20	0.20	0.20	0.15	0.15	0.15

反对:控制;LCLA:低共轭亚油酸;HCLA:高共轭亚油酸。
¹预混料造成以下每公斤全价配合饲料营养成分:维生素A、2300国际单位;维生素D₃400国际单位;维生素E, 1.8毫克;维生素B₁₂,3.5毫克;核黄素1.4毫克;泛酸、2毫克;烟酸,7毫克;吡哆醇、0.25毫克;0.15毫克叶酸;甲萘醌,0.3毫克;维生素b1, 0.15毫克;氧化锰,35毫克;硫酸亚铁,35毫克; zinc oxide, 30 mg; copper sulfate, 60 mg; cobalt carbonate, 5 mg; potassium iodine, 0.6 mg; selenium vanadate, 0.09 mg. CLA used in this study was Lutrell pure,德国巴斯夫(BASF),它既包含60%的同学同分异构体。饮食包含CLA 5%和2.5%等于3.0%和1.5%的两个班分别同分异构体。
²计算值。


脂肪酸	起动器(21天)			修整器(22-42天)
脂肪酸	反对	LCLA	HCLA	反对	LCLA	HCLA

C12:0	0.73	0.48	0.23	0.76	0.51	0.26
C14:0	3.19	1.69	0.19	3.23	1.72	0.22
0	23.00	15.72	8.43	23.34	16.06	8.78
C16:1	0.53	0.28	0.03	0.53	0.28	0.03
C18:0	2.71	14.52	26.32	2.81	14.62	26.42
C18:1n-9	29.74	23.53	17.30	31.33	25.12	18.90
C18:2n-6	12.00	10.05	8.03	12.18	10.20	8.20
C18:3n-3	0.79	0.54	0.29	0.82	0.57	0.32
独联体9日,反式-11班	0.00	2.97	5.97	0.00	3.00	5.95
反式-10年,独联体-12班	0.00	2.92	5.90	0.00	2.93	5.91
^一个国家林业局总	29.63	32.41	35.18	30.13	32.91	35.69
^b总MUFA	30.27	23.81	17.34	31.86	25.40	18.94
^c总n PUFA	0.79	0.54	0.29	0.82	0.57	0.32
^d总n-6 PUFA	12.00	10.05	8.03	12.18	10.20	8.20
总PUFA	12.79	10.59	8.33	13.00	10.77	8.52
^en-6: n-3FAR	15.16	18.54	27.53	14.77	17.75	25.27
PUFA:国家林业局	0.43	0.33	0.24	0.43	0.33	0.24
^f总班	0.00	5.89	11.86	0.00	5.93	11.86

反对:控制;LCLA:低共轭亚油酸;HCLA:高共轭亚油酸。
^一个总SFA = C12:0之和+ C14:0 + 0 + C18:0。
^b总MUFA = C16:1 + C18:1n-9之和。
^c总n PUFA = C18:3n-3之和。
^d总n-6 PUFA = C18:2n-6之和。
^en-6: n - 3脂肪酸比例(远)=笔C18:2n-6÷C18:3n-3之和。
^f总CLA =之和独联体9日,反式-11班+反式-10年,独联体-12班。

2.2。动物福利

这个实验协议进行研究的指导方针政策的马来西亚Putra大学动物伦理。

2.3。总脂质提取

总脂质提取进行实验动物的腹部脂肪组织收割。从腹腔脂肪组织得到从10鸟从每个治疗组屠宰后42天。组织在−snap-frozen和存储20°C,直到进一步的分析。总脂肪酸从腹部脂肪组织提取和饲料使用chloroform-methanol (2: 1 v / v)溶剂系统根据Folch et al。33)和修改Rajion et al。34)所描述的Ebrahimi et al。35]。简而言之,脂肪酸甲基酯(名声)准备使用0.66 N氢氧化钾(KOH)三氟化硼甲醇和14% methanolic(男朋友₃)(西格玛化工有限公司,圣路易斯,密苏里州,美国)。

2.4。脂肪酸分析

脂肪酸甲基酯是由气液色谱法分离和量化(美国安捷伦科技模型7890)使用100米0.32毫米身份证毛细管柱(sp - 2560, Supelco, Inc . Bellefonte, PA,美国)。氢气作为载气在40毫升/分钟。喷油器温度在250°C编程,检测器温度为300°C。列温度程序启动运行在120°C, 5分钟,增加到170°C在2°C /分钟和15分钟举行,增加到200°C 5°C / min,然后举行200°C 5分钟然后加热到235°C 2°C /分钟和10分钟。峰的识别是通过比较等效链长度参考标准(混合C4-C24甲基酯;西格玛奥德里奇,Inc .,圣路易斯,密苏里州,美国)和CLA标准组合(独联体9日,反式-11班,反式-10年,独联体-12班,Sigma-Aldrich公司,圣路易斯,密苏里州,美国)。使用安捷伦气相色谱峰面积测定自动Chemstation软件(美国安捷伦科技)作为描述Ebrahimi et al。36]。的脂肪酸浓度表示为百分比的总和总确定峰值测量每个样品。

2.5。RNA提取

腹部脂肪样本收集,在液态氮snap-frozen,储存在−RNA提取80°C。每个组织的总RNA提取样本使用试剂盒提取,RNeasy脂质组织迷你工具根据制造商的指示。总RNA浓度然后量化通过测量光密度。吸收的比率在260/280 nm 1.8和2.0之间的一切准备工作就绪。

2.6。实时聚合酶链反应(PCR)

五μg的RNA从每个样本reverse-transcribed使用QuantiTect牧师转录工具包(试剂盒、希尔登,德国)根据制造商的协议。定量实时PCR进行测量PPAR的转录水平,PPAR,aP2。肌动蛋白和GAPDH是用作参考基因正常化。引物序列和优化PCR退火温度在表列出3。这些引物从1号基地购买寡核苷酸合成(1号基地、新加坡)。放大过程中执行20μL反应体积的最终浓度1 x QuantiFast SYBR绿色PCR试剂盒(试剂盒、希尔登,德国),1μg cDNA、400 nM / 500 nM的正向和反向引物,和8.5μL核糖核酸酶游离水。以下使用热循环条件:PCR初始激活在95°C(10分钟)和40变性的周期在95°C(15秒),在不同温度退火(20秒根据目标基因表中列出3),和扩展(20秒72°C)。每个目标的效率和参考基因被滴定验证各自的cDNA六点模板PCR实验系列稀释。引物对重新检验它的效率值低于90%和110%以上。对所有目标基因在这项研究中,研究最优效率在94%和110%之间的各自的引物配对。实时PCR进行使用Bio-Rad CFX96触摸实时PCR系统(美国Bio-Rad)光学级板使用QuantiFast SYBR绿色PCR试剂盒(试剂盒、希尔登,德国)。平均每个样本运行一式三份,一式三份被用来分配Cq(量化周期)值。模板控制包含在每次运行。更高的初始浓度与Cq价值较低,因此具有较高的转录水平。描述的转录水平计算Vandesompele et al。37]。实时PCR数据由两个参考基因的几何平均归一化,即GAPDH和肌动蛋白,在这项研究中。PPAR的转录水平,PPAR,aP2治疗组与对照组相比。转录水平的控制总是用1-fold表示。


基因	感觉引物(5′3′)	大小	退火温度	参考

PPAR	F-AGGCCAAGTTGAAAGCAGA R-GTCTTCTCTGCCATGCACAA	217年	60	K国家行业集团公司等。61年]
PPAR	F-GACCTTAATTGTCGCATCCAT R-CGGGAAGGACTTTATGTATGA	237年	61年	Zhang et al。62年]
aP2	F-GAGTTTGATGAGACCACAGCAGA R-ATAACAGTCTCTTTGCCATCCCA	107年	63年	佐藤et al。63年]
GAPDH	F-TGAAAGTCGGAGTCAACGGATT R-CCACTTGGACTTTGCCAGAGA	81年	60	Ojano-Dirain et al。64年]
肌动蛋白	F-ATGAAGCCCAGAGCAAAAGA R - GGGGTGTTGAAGGTCTCAAA	223年	62年	K国家行业集团公司等。61年]

F:前进。
接待员:逆转。

2.7。隔离和脂肪细胞细胞的文化

一克的腹部脂肪被屠杀后立即烤肉。隔离的脂肪细胞是根据Rodbell方法(38)与一些修改Tekeleselassie et al。30.]。脂肪是碎成小片段使用剪刀。切碎的脂肪组织是放置在一个塑料管含有磷酸缓冲盐(PBS)补充5毫升的2毫克/毫升的II型胶原酶hemolyticum梭状芽胞杆菌(σ,Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州,美国)。脂肪组织是在37°C水浴孵化了50分钟,偶尔摇晃。年底的孵化,未消化的纤维组织使用钳被移除。为了抑制胶原酶的活性,增加了PBS和悬挂在200×g离心5分钟。infranatant是使用塑料巴斯德吸管被温柔的愿望。后者过程重复两次。最后,添加了PBS将暂停5毫升的总量确定的数量和直径脂肪细胞的细胞。

2.8。腹部脂肪细胞结构的确定

整除的暂停脂肪细胞被放置在一个血球计数器和一个奥林巴斯显微镜下观察BX51(奥林巴斯、东京、日本)和照片被使用一个图像分析软件(cc-12软成像系统)。脂肪细胞被枚举使用照片和他们的直径测量。脂肪细胞直径均值计算的平均直径200细胞。

2.9。统计分析

脂肪酸和腹部脂肪和转录数据分析使用多元方差分析(方差分析)过程的SAS软件包,版本9.1 (SAS研究所Inc .卡里,NC)。明显不同的意思是值进一步阐明利用邓肯的测试。结果表示为均值和汇集均值的标准误差(SEM)。时被认为是具有统计学意义的差异。

3所示。结果

3.1。腹部脂肪的脂肪酸组成

一般腹部脂肪的脂肪酸形象的一面镜子,膳食脂肪酸概要文件有几个明显的差异,如表所示4。的内容独联体9日,反式-11班范围从1.69 - 2.3倍大()比反式-10年,独联体-12班的腹部脂肪LCLA和HCLA组。国家林业局HCLA组明显高于主要是由于十四(C14:0)的浓度的增加,棕榈(0),硬脂酸(C18:0)。腹部脂肪的不饱和脂肪酸被发现的欺诈和LCLA组相比HCLA动物。腹部脂肪明显MUFA ()降低HCLA欺诈和LCLA相比治疗组。的变化在HCLA MUFA可以追溯到9 -十六碳烯的浓度的降低(C16:1)和油酸(C18:1涂有n - 9)。然而,总PUFA没有显著()不同的治疗饮食。n-6的比率:n - 3脂肪酸、PUFA:国家林业局的腹部脂肪HCLA治疗组相比明显降低欺诈和LCLA治疗组。CLA同分异构体没有发现肉鸡脂肪组织的美联储控制饮食。也指出,腹部脂肪在鸡的CLA含量随着剂量的增加CLA来源从0.00 (CON) 1.30 (LCLA)和4.07 (HCLA)。


脂肪酸	反对	LCLA	HCLA	扫描电镜	价值

C12:0	0.10	0.18	0.23	0.039	0.379
C14:0	0.97^b	0.91^b	1.11^一个	0.028	0.004
0	29.54^b	28.88^b	32.39^一个	0.500	0.002
C16:1	4.22	4.03	3.51	0.160	0.143
C18:0	7.80^b	7.32^b	14.16^一个	0.755	< 0.0001
C18:1n-9	40.67^一个	40.30^一个	27.96^b	1.370	< 0.0001
C18:2n-6	16.03	15.81	15.33	0.199	0.305
C18:3n-3	0.44^b	0.47^b	0.89^一个	0.057	< 0.0001
独联体9日,tran-11班	0.00^c	0.92^b	2.56^一个	0.214	< 0.0001
反式-10年,独联体-12班	0.00^c	0.39^b	1.51^一个	0.131	< 0.0001
C20:4n-6	0.21	0.78	0.35	1.404	0.197
^一个国家林业局总	38.42^b	37.30^b	47.88^一个	1.230	< 0.0001
^b总MUFA	44.90^一个	44.34^一个	31.47^b	1.472	< 0.0001
^c总n PUFA	0.44^b	0.47^b	0.89^一个	0.057	< 0.0001
^d总n-6 PUFA	16.25	16.59	15.68	0.217	0.192
总PUFA	16.69	17.06	16.57	0.223	0.632
^en-6: n - 3比	36.93^一个	35.29^一个	17.61^b	7.392	0.033
PUFA:国家林业局比	0.45^一个	0.46^一个	0.35^b	0.001	0.0007
^f总班	0.00^c	1.30^b	4.07^一个	0.344	< 0.001

反对:控制;LCLA:低共轭亚油酸;HCLA:高共轭亚油酸。
数据表示为总额的比例确定脂肪酸。
^一个总SFA = C12:0之和+ C14:0 + 0 + C18:0。
^b总MUFA = C16:1 + C18:1n-9之和。
^c总n PUFA = C18:3n-3。
^d总n-6 PUFA = C18:2n-6 + C20:4n-6之和。
^en-6: n - 3 =之和(C18:2n-6 + C20:4n-6)÷(C18:3n-3)。
^f总CLA =之和独联体9日,反式-11班+反式-10年,独联体-12班。
数据作为意味着池扫描电镜(= 10)。^a、b行中的平均值没有常见的上标显著差异(< 0.05)。

3.2。腹部脂肪PPAR和aP2转录水平

PPAR的变化,PPAR,aP2 HCLA基因在脂肪组织和LCLA饮食组,CON组相比,数字所示1,2,3,分别。没有显著差异()PPAR的水平转录在所有治疗组观察(图1)。然而,PPAR和aP2转录显著降低()在LCLA HCLA对待动物,相对于对照组(CON)如图2和3,分别。这一观察表明,PPAR和aP2下调1.08 - 2.5倍之间CLA膳食补充。

图1

PPAR的比较相对转录水平的腹部脂肪与反对食物喂养的鸡,LCLA, HCLA。值与参考基因,规范化肌动蛋白和GAPDH。然后,对待样本相对于转录表达水平的诈骗集团。价值观是指标准错误()。缺点:没有课;LCLA:低班;HCLA:高班。LCLA HCLA发现相比没有显著差异的诈骗集团()。

图2

PPAR的比较相对转录水平的腹部脂肪与反对食物喂养的鸡,LCLA, HCLA。值与参考基因,规范化肌动蛋白和GAPDH。然后,对待样本相对于转录表达水平的诈骗集团。价值观是指标准错误()。缺点:没有课;LCLA:低班;HCLA:高班。信上标表示与CON组相比显著差异()。

图3

比较aP2相对转录水平的腹部脂肪与反对食物喂养的鸡,LCLA, HCLA。值与参考基因,规范化肌动蛋白和GAPDH。然后,对待样本相对于转录表达水平的诈骗集团。价值观是指标准错误()。缺点:没有课;LCLA:低班;HCLA:高班。信上标表示与CON组相比显著差异()。

3.3。腹部脂肪细胞结构

面积大小、直径和腹部脂肪细胞的数量数据所示4,5,6,分别。数据清楚地表明,膳食脂肪的类型对脂肪细胞的细胞结构有明显的影响。腹部脂肪的平均每克脂肪细胞的数量在HCLA补充组相比显著降低欺诈和LCLA组。腹部脂肪细胞的平均直径和面积CLA-supplemented饮食明显小于CON组。

图4

饮食共轭亚油酸(CLA)对脂肪细胞面积分布在鸡的腹部脂肪与反对美联储(控制),LCLA(低共轭亚油酸),和HCLA(高共轭亚油酸)6周。数据表示的意思是细胞区域。数据提出了的意思扫描电镜。不同的计算单元内标尺寸范围表示显著差异()。

4所示。讨论

尽管大量的已知影响CLA PPAR在其下游靶基因的转录,啮齿动物和人类一样,有一个数据检查PPAR不足转录和功能在鸡的脂肪。PPAR基因是比人类短,缺乏同种型(2]。这可能导致脂质和糖代谢的差异观察鸡相比,哺乳动物。为了理解在鸡脂肪沉积的动力学,是必要的和有价值的脂类代谢的理解,形态学变化,转录调控基因参与的鸡脂肪组织。

4.1。腹部脂肪的脂肪酸组成

在目前的研究中,内容的独联体9日,反式-11班范围从1.69 - 2.3倍大()比反式-10年,独联体-12班的腹部脂肪LCLA和HCLA组。独联体9日,反式-11班反式-10年,独联体-12班内容增加线性的CLA含量的增加,饲料。这些表明,饲料中的CLA含量影响腹部脂肪的脂肪酸组成,这是符合Suksombat et al。39)和Szymczyk et al。40]。这可能是由于这一事实独联体9日,反式-11年和反式-10年,独联体-12班同分异构体在过氧化物酶体代谢速度不同。这可能导致较低的积累反式-10年,独联体-12同分异构体组织(41]。整个鸡CLA含量腹部脂肪从0增加到1.30和4.07的案子,LCLA和HCLA分别。

当前的研究清楚地表明,CLA-fed鸡经历了国家林业局的增加和减少MUFA内容在他们的腹部脂肪。这是由艾登(与结果一致42]在鸽子喂饮食中含有班和大鼠(43,44]。国家林业局的增加为代价MUFA最有可能产生的抑制作用9 desaturase酶系统,负责SFA稀释,SFA转换成MUFA [45]。PUFA的数据还显示,大多数,尤其是长链n - 3 PUFA,受饮食影响CLA补充。n - 3 PUFA的增加可能是更高的结果和脂酰desaturase活动(46]。亚油酸(C18:2 n-6)和花生四烯酸(C20:4 n-6)水平没有显著不同的腹部脂肪组织CLA-fed鸡。这最有可能是因为CLA具有类似的变更与亚油酸(LA),但微妙的异构体差异,这可能会降低沉积的脂肪组织丰富的中性脂质中CLA优先积累[41]。因此,LA转化为花生四烯酸(AA)最终将降低。此外,Du et al。47)观察减少C18:2 n-6, C18:3 n - 3, C20:4 n-6蛋鸡消耗2.5%混合班同分异构体相比控制。有人建议,减少脂肪形成的脂肪酸,如洛杉矶和AA可以降低甘油三酸酯含量(不是以本研究)是重要的前列腺素合成,这可能调节脂肪生成(48]。

4.2。PPAR的转录表达的基因

基于表中的结果1显然,CLA腹部脂肪的脂肪酸组成的影响。脂肪细胞尤其如此,显示下降程度的脂肪酸不饱和现象。这一转变可能在脂肪酸概要文件可能与修改膜脂肪组织通过CLA脂肪细胞基因的改变和减少浓度和活动的9 desaturase酶(49]。

似乎相关的基因中CLA的影响是PPAR [23]。许多报道表明PPAR是脂肪细胞的转录和分化的一个组成部分。PPAR调节脂质稳态,从而控制转录基因参与细胞代谢和分化22,50]。在这项研究中,CLA-fed鸡展出PPAR的mRNA水平下降在腹部脂肪()。类似的观测指出Granlund et al。51的差别),他们报告说,对这些PPARC / EBP, aP2转录3 t3-l1preadipocyte通过CLA混合同分异构体负责衰减preadipocyte分化。两个班同分异构体PPAR的亲和力较低PPAR相比(40]。这可能表明,CLA对脂肪组织可能表现出很少或没有影响,这个过程显然是由PPAR(52]。因此,通过减少PPAR CLA可以调解转录preadipocytes和脂肪细胞(21]。另外,研究表明,CLA PPAR可以操作拮抗剂(53]。这就解释了CLA的机制能够改变脂肪组织没有一个强有力的PPAR受体激动剂。

大部分的PPAR目标基因在脂肪组织直接参与脂肪生成的途径,例如,aP2涉及的吸收和运输脂肪酸在脂肪组织。aP2基因包含一个PPAR-response元素(PPRE) [54)和CLA是PPAR的配体。在目前的研究中,CLA aP2转录可能升高,PPAR平行转录的肉鸡脂肪组织。这些观察表明,通过PPAR CLA也可能功能。事实上aP2基因被PPAR监管(17]PPAR导致脂肪细胞的分化被认为是脂肪细胞分化的“支配性调控因子”。

我们的数据表明PPAR转录水平没有显著影响饮食CLA摄入量()。PPAR可怜的脂肪形成的诱导物(55]。Peters等人的发现了。56),这表明PPAR可能不是一个关键的转录因子在脂肪组织。

4.3。腹部脂肪细胞结构

腹部脂肪细胞结构研究的结果证明了不同的膳食补充CLA对数量的影响,直径和面积脂肪细胞。MUFA与脂肪细胞区域,突显了一个微分的理论代谢和desaturase活动。考虑到9是关键酶SFA转换成MUFA和牢记最MUFA和脂肪细胞之间的密切联系,将是合理的推测,高脂肪细胞皮下脂肪中发现的区域负责高稀释活动(57]。在我们的研究中,包含低MUFA CLA补充饮食,这与减少脂肪细胞的数量。减少脂肪细胞的大小是一个有效的方法来减少身体脂肪。较小的意思是腹部脂肪细胞体积产量较小数量的脂肪。这种成熟减少腹部脂肪细胞可能负责减少脂肪组织的大小。事实上,由于脂肪细胞前体细胞的(即。,preadipocytes) presence throughout the life, inhibition of the fattening process may be mediated not only by reducing body fat accumulation in differentiated adipocytes, but also by inhibiting the differentiation of preadipocytes into adipocytes. This hypothesis is supported by several papers, carried out in3 t3-l1细胞培养,这表明CLA抑制脂肪细胞分化[58,59]。

我们的研究结果显示,5%同学包括饮食中减少腹部脂肪细胞的数量。减少腹部脂肪细胞数量在鸡可能减少腹部脂肪前体细胞的结果由于CLA异构体。Sisk et al。27)表明,CLA减少脂肪细胞的体积Sprague-Dawley老鼠充分考虑减少脂肪组织质量。我们的数据表明,CLA能够抑制体内脂肪积累减少preadipocyte号码。Preadipocytes可能抑制分化的目标,CLA可能导致细胞的数量减少可能能够成为成熟的脂肪细胞,从而间接地减少身体脂肪量。Brandebourg和胡60)最近发现CLA异构体抑制猪preadipocyte PPAR的差别分化的机制涉及到对这些信使rna。CLA同分异构体也减少preadipocyte分化通过下调过氧物酶体PPAR在人类转录(50]。综上所述,我们的数据表明CLA PPAR使之抑制aP2,随后导致减少脂肪细胞的大小、数量和面积腹部脂肪细胞。

5。结论

综上所述,可以得出结论,相对转录模式的脂肪组织的脂肪形成的基因和细胞结构特征是受同学的影响。结果还表明,独联体9日,反式-11班,而不是反式-10年,独联体-12班,是占主导地位的异构体的腹部脂肪垫LCLA和HCLA组。CLA治疗组转录PPAR水平较低和aP2。这是与较小的意思是腹部脂肪细胞体积和小数量的脂肪减少的结果能力储存脂肪。也明显的脂肪形成的关键基因的转录和脂肪细胞结构中扮演了重要的角色使膳食CLA影响肉鸡脂肪组织的脂肪酸组成。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

作者的贡献

所有作者的贡献同样这项工作。

确认

作者非常感谢兽医学院,马来西亚Putra大学,热带农业学院。这项研究是由马来西亚政府支持基础研究资助计划(德意志联邦共和国)。

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PPAR研究