文摘
脯氨酸是由自己的专门的酶代谢与他们自己的组织和亚细胞本地化和监管机制。中央酶在代谢系统是脯氨酸氧化酶,黄素腺嘌呤dinucleotide-containing酶膜紧密地绑定到线粒体内膜。电子从脯氨酸可用于生成ATP或可以直接减少氧气形成过氧化物。虽然脯氨酸可能源自于饮食和biosynthesized开,微环境中的一个重要来源是由基质金属蛋白酶降解细胞外基质的。先前的研究表明,脯氨酸氧化酶是一种p53诱导基因及其超表达可以通过内在和外在都发起proline-dependent细胞凋亡途径。另一个重要因素调节脯氨酸氧化酶是过氧物酶体扩散者激活受体(PPARγ)。重要的是,在一些肿瘤细胞,脯氨酸氧化酶PPAR的可能是一个重要的中介刺激产生的ROS和诱导细胞凋亡。击倒的脯氨酸氧化酶表达反义RNA这些PPAR明显减少刺激的影响。这些发现表明一个重要的角色在拟议的PPAR的抗肿瘤效应。此外,脯氨酸氧化酶可能PPAR可能导致其他代谢的影响。
1。介绍
PPARγ可以调节炎症反应,防止慢性炎症(1),但更重要的是,它扮演着一个重要的角色在传感和代谢调节2]。这些函数,特别是代谢的规定,可能参与PPAR的记录能力γ调节的恶性表型(3]。这方面的PPARγ一端兴趣的复苏新陈代谢和癌症(4,5]已强调了华宝50多岁的发现,肿瘤细胞的代谢紊乱;有氧糖酵解而不是氧化磷酸化是肿瘤代谢的模式(6]。最近的研究表明,许多癌基因和抑制蛋白质目标代谢途径,华宝的早期发现的背景下,他们形成一个新的,露出范式(7]。生存和恶性肿瘤的潜力是非常依赖于其适应各种压力情况和营养限制。产生足够的能量相对低效的糖酵解途径的通量葡萄糖乳酸必须保持在一个较高的率(8]。因此,多血管和neoangiogenesis作为响应不仅缺氧,而且消耗的营养发挥重要作用在肿瘤进展9]。在这种背景下,动员的脯氨酸降解细胞外基质的肿瘤微环境已经到了我们的注意。脯氨酸作为替代的使用压力底物和反应的监管压力信号一直是我们研究工作的焦点。
2。脯氨酸代谢
脯氨酸是唯一次要氨基酸组成的蛋白质。因为阿尔法氮是包含在一个吡咯烷环中,脯氨酸不能由通用的氨基酸代谢酶,也就是说,转氨酶、脱羧酶、消旋酶(10,11]。相反,一个特殊的酶家族进化自己的亚细胞定位和监管机制。有一个小重叠这些酶的活性和通用的氨基酸。因此,代谢系统是不同的,可以适应特殊的代谢需求。脯氨酸代谢的酶计划被1960年代特征和一般系统示意图见图1。Pyrroline-5-carboxylate,与谷氨酸-互变异构平衡γ-semialdehyde中央中间。不仅是脯氨酸的承诺的前兆,但也立即脯氨酸降解的产物。重要的是,它是一种专性中间过渡性尿素循环和三羧酸循环,可以发挥anaplerotic作用的代谢周期(10,11]。完整的代谢系统并非存在于所有的组织。
脯氨酸在蛋白质的作用特点和审查由别人12,这个主题超出了本文的范围。然而,蛋白质功能超出其贡献也承认在各种各样的动物和植物物种。在原核生物中,脯氨酸被认为有抗氧化和osmoprotective功能11]。监管角色提出了寄生吸虫虽然不理解的机制13]。在各种各样的高等植物,脯氨酸被认为是osmoprotectant和脯氨酸的代谢与多酚类化合物的合成14]。脯氨酸已被确定为一个关键代谢底物的起始飞行昆虫。此外,昆虫可以检测和脯氨酸所吸引。发现脯氨酸在高浓度植物花蜜导致脯氨酸的提议是共同进化的基础优化insect-mediated授粉(15]。分子生物学爆炸的1990年代,脯氨酸代谢的基因克隆从各种各样的来源,使可能的研究定义功能特殊的代谢系统。
脯氨酸代谢的一个有趣的特性是,脯氨酸和pyrroline-5-carboxylate形成的互变现象脯氨酸循环。脯氨酸氧化酶(痘),又名脯氨酸脱氢酶(PRODH),是紧密地绑定到线粒体内膜(酶将指定的痘,但基因将被称为PRODH)。脯氨酸的酶是黄素蛋白和电子传递到电子传递链现场II与细胞色素c作为电子受体(10,11]。Pyrroline-5-carboxylate,脯氨酸降解的产物,可转化为谷氨酸α酮戊二酸贡献anaplerotically柠檬酸循环(11]。然而,它也是转换回脯氨酸pyrroline-5-carboxylate还原酶的胞质形成代谢循环。耦合通过吡啶核苷酸(辅酶ii / NADPH优先在NAD / NADH),脯氨酸循环形成一个代谢联锁与glucose-6-phosphate脱氢酶和磷酸戊糖途径作为氧化还原穿梭降低磷酸戊糖途径的潜在转换成一个类似的系统在线粒体16- - - - - -18]。ATP生成的大小,然而,小于三羧酸循环,氧化磷酸化。糖酵解途径,优化流量,也可以更有效地产生ATP。因此,脯氨酸循环氧化还原和能量的贡献被认为是微不足道的。然而,随着移植机制阐明痘,很明显,该系统作为一个重要的辅助源压力条件下的能源。
脯氨酸可以从膳食蛋白质和可以从谷氨酸或biosynthesized鸟氨酸(10,11]。然而,一个丰富的来源是降解细胞外基质的胶原蛋白,结缔组织和骨(19]。由于25%的残留在胶原蛋白是脯氨酸或羟脯氨酸和胶原蛋白是最丰富的蛋白质在体内(以质量计),它是脯氨酸的充足的水库。另外,基质金属蛋白酶(MMPs),家庭的酶降解细胞外基质胶原蛋白和其他蛋白质,是在各种条件下显著调节。重要的是,upregulation基质金属蛋白酶在肿瘤进展和入侵20.,21)以及在炎症和伤口愈合22,23]。MMP upregulation入侵被认为是一个重要的物理组成部分,允许对肿瘤细胞逃避他们的基底膜的网站,通过组织迁移。最近,它已被证明,多种生物活性因子释放结合位点在ECM的激活基质金属蛋白酶(24]。然而,利用脯氨酸和羟脯氨酸的代谢底物没有被考虑。降解的胶原蛋白发生在致癌作用在皮肤肿瘤模型已经令人信服地证明(25]。最近,使用乳腺癌和前列腺癌异种移植和新颖的成像方法,调查表明,缺氧介导胶原纤维分解和重组26]。
3所示。痘和细胞凋亡
P53癌症抑制蛋白(被认为是最重要的27]。突变在人类所有肿瘤的85%,在李法美尼症候群p53导致生殖细胞突变,一个家族综合征与早期癌症易感性在各种组织(28]。为目标基因p53屏幕,波里亚克et al。29日)使用一个adenoviral-p53表达式构建和基因表达的系列分析。只有14岁的7202个基因监测感应超过7倍,痘是其中的一个和指定为p53诱导gene-6 (PIG6)。使用一个构造,痘表达式是四环素的控制下,产生的痘过度proline-dependent ROS (30.和proline-dependent诱导细胞凋亡31日- - - - - -35]。随后,这是表明痘过度产生的影响通过代proline-dependent线粒体超氧化物(图2)[34]。正是这种超氧化物中扮演着一个关键的角色在信号产生不仅从线粒体细胞色素c的释放和激活还存在的内在(线粒体)肢体的程序性细胞死亡,但也激活了外在(死亡受体)肢体通过增加生产的跟踪(35]。其他一些信号系统应对POX-mediated MEK / ERK的磷酸化(差别信号包括对这些35cox - 2与降低产生PGE2的差别),对这些基因和封锁的进展通过细胞周期36]。
从组织培养系统研究结果已被翻译成一种动物模型。在研究使用DLD-POX细胞形成异种移植在无胸腺的老鼠,痘的表达显著抑制肿瘤形成(37]。小鼠给予强力霉素抑制痘DLD-POX细胞中表达,或在动物注射DLD-vector细胞,肿瘤迅速形成。第2周所有这些动物在第三个星期里明显的肿瘤和开发,动物必须牺牲由于肿瘤的大小。相比之下,在老鼠身上没有强力霉素痘的过表达,一些肿瘤被发现。第2周,只有1的16动物有明显的肿瘤。因此,痘的表达显著抑制异种移植的形成。
这些变化的相关性在痘在人体组织所追求的免疫组织化学研究。九十二配对正常和癌组织从各种肿瘤使用免疫组织化学检查。发现引人注目的胃肠道肿瘤(胃癌、结肠、胰腺)痘表达水平明显下降或检测不到79%的肿瘤(36]。我们目前正在研究的遗传或表观遗传机制减少痘表达式,但基于这些发现,我们建议痘是一种潜在的抑癌蛋白。
POX-mediated的机制,proline-dependent代超氧化物可能是由于泄漏的电子从电子传递链的机制提出了其它来源的线粒体超氧化物。然而,结构生物学的最新研究显示,生成过氧化物酶的固有属性。白等。38使用重组]描述了有趣的发现栖热菌属酸奶痘/ PRODH。与痘/ PRODH某些原核的物种,例如大肠杆菌双功能酶,体现痘和pyrroline-5-carboxylate脱氢酶的活动在一个单一的蛋白质,酶t .酸奶是单功能的并产生pyrroline-5-carboxylate的方式类似于酶在动物组织中,因此可以作为一个好的模型对人类痘(38]。这些工人发现黄素腺嘌呤二核苷酸位于域暴露于溶剂氧气。因此,电子从脯氨酸可以用来降低氧气过氧化物(图3)。此外,他们发现一个邻边α螺旋可以屏蔽时尚和阻止其进入溶剂氧气。解释这些结果包含了有趣的可能性,痘可以切换从一个类似的函数superoxide-producing函数。虽然很多超氧化物酶已经被提议作为发电机,这些酶是胞质(黄嘌呤氧化酶)或与细胞膜(NADPH氧化酶)和自己的指定的功能。
这些提到的痘功能强调相关性癌症,但另一个函数值得提及。脯氨酸作为一种神经递质,抑制glutamatergic神经元(39]。此外,高亲和性运输机被发现和克隆从大脑39]。相关的神经系统延伸到更低的物种。突变痘/ PRODH导致“迟缓”黑腹果蝇(40)和PRO / Re老鼠,缺陷在痘/ PRODH,表现出“闸门”缺陷,功能神经缺陷(41]。在人类身上,突变PRODH与早期精神分裂症的风险相关(42]。虽然有许多研究支持或反驳这一结论,证据支持的相关性痘突变。它已经表明,突变PRODH与神经综合症有生化表型相关活动明显减少酶(43]。
4所示。痘的监管
痘的感应p53暗示它特殊的功能,不仅仅是一个“管家酶。“为潜在的监管机构,屏幕Pandhare et al。44]POX-promoter, luciferase-reporter构造,cotransfected各种相应的转录因子结合位点的识别PRODH启动子。虽然小君,”丛书,p65 NF -κB产生适度的刺激效果(< 2倍),明显的激活PRODH启动子与cotransfection PPAR的观察γ。这个发现很有趣,因为这多效性的因素不仅代谢中发挥着重要作用(2],特别是脂肪细胞,而且它是一种重要的炎症反应(调制器1]。的广泛使用噻唑烷二酮类)在2型糖尿病高血糖的管理是前者的一个例子45]。对于后者,一些调查人员表明,PPARγ提供一个机制来表达下调炎症应激反应,避免慢性炎症的病理后果(46]。正吸引越来越多的关注最近的发现服用tzd各种培养的癌细胞将阻止细胞增殖和诱导细胞凋亡47- - - - - -49]。流行病学数据2型DM患者服用tzd对待PPAR的表明这些配体γ预防肺癌,但不反对结肠或前列腺癌50]。令人印象深刻的体外数据和暗示从流行病学调查结果,肿瘤学家PPAR的提议γ是癌症治疗的一个有吸引力的目标。
5。服用tzd的诱导机制PRODH
Pandhare et al。44)表明,cotransfection PPARγ激活了PRODH启动子8番troglitazone,一种广泛使用的TZD起飞之前市场由于副作用的原因,进一步增加了这个激活的大小。PPAR的结合γ表达和troglitazone治疗激活了PRODH启动子(图10倍以上4)。可以推广到各种影响结直肠癌细胞和服用tzd可以由四种不同引起。,通过PPAR troglitazone诱导痘γ相关的酶介导的绑定到元素扩散者反应显示使用几种方法。首先,电泳转移流动性试验显示troglitazone-stimulated核的形成复杂的标记PPRE序列PRODH启动子。,PPARγ出现在这个复杂与染色质免疫沉淀反应化验显示。在这个检测,甲醛用于交联DNA蛋白质复合物,然后DNA被声波降解法剪切。与特定的anti-PPAR后免疫沉淀反应γPPRE序列的抗体PRODH启动子是放大使用聚合酶链反应。
(一)
(b)
(c)
尽管这些研究表明,PPARγ及其药物配体直接参与激活的PRODH子,PPAR的集成信号γ组装的生理调节PRODH表达式可能会更复杂。视黄素x受体(RXR)的交互是PPAR的必要的γ函数(51]。此外,许多辅活化因子与配体相互作用PPARγ和RXR形成一个活跃的转录复杂。这些包括类固醇受体PPARγ-coactivator-1 (PGC-1)和类固醇受体coactivator-1 (SRC-1) [52]。具体共激活剂可能取决于细胞类型和刺激。上下文中的新陈代谢,PGC-1可能就尤其重要了,因为它响应信号从其他调节激素和细胞因子(53]。这些辅活化因子的具体影响PRODH表达,然而,尚未阐明,但它是我们当前工作的重点领域。
6。痘的PPAR的贡献γ对ROS和细胞凋亡的影响
发现PPARγ对培养的肿瘤细胞刺激有明显抑制作用的大量研究使用各种癌细胞。服用tzd扩增分化、减速增殖和诱导细胞凋亡。虽然这种影响通常被观察到,有一些报道称,服用tzd实际上刺激某些培养肿瘤细胞的生长(54]。然而,研究表明,服用tzd抑制增长的优势(47- - - - - -49]。虽然这种影响的机制并不清楚,几个调查人员发现,服用tzd诱导活性氧的生成,他们得出的结论是,ROS是诱导细胞凋亡的机制已经报道了很多实验模型。实际服用tzd活性氧引起的生产机制,然而,仍然未知。
因为痘是一种p53诱导基因,已经建立了一个机制来生成过氧化物,启动细胞凋亡,PPARγ诱导痘了有吸引力的假设痘可能参与观察服用tzd与凋亡机制。要回答这个问题,Pandhare et al。44)表明,大肠癌细胞,troglitazone不仅引起痘,但也明显增加了活性氧的生产已被证明在其他培养细胞由别人。更重要的是,廉价的痘的反义RNA明显减少troglitazone-stimulated ROS的生成。这些研究充分表明,ROS假定TZD-stimualted细胞凋亡的机制是由于,至少在某种程度上,痘的感应。因此,痘服用tzd的凋亡效应中起着重要的作用,至少在组织文化。这一发现很快就被证实了。使用nonsmall细胞肺癌细胞,金正日et al。55通过ROS-dependent]表明罗格列酮诱导细胞凋亡机制,而感应痘的罗格列酮生产细胞凋亡中发挥了关键作用。这些令人兴奋的发现,但需要进一步确证和扩展到其他培养的癌细胞。
服用tzd的影响在培养细胞一直延伸到几个动物肿瘤模型,结果令人鼓舞。在无胸腺的老鼠,增长率异种移植卵巢、甲状腺和膀胱癌明显受到各种各样的PPAR的影响γ刺激因子(47- - - - - -49]。不仅是肿瘤生长抑制宿主动物长期的生存。尽管这些影响的作用机理尚不清楚,似乎在肿瘤细胞凋亡可能是由于降低cox - 2的表达(56]。最近的工作在我们的实验室联系痘cox - 2(差别表达对这些36]。对肿瘤有直接影响,以及对血管生成的影响。没有PPAR的影响的研究γ在动物痘表达式或在调节PPAR的痘的作用γ介导的抗肿瘤作用。
7所示。矛盾和可能的解决方案
PPAR的热情所产生的这些抗肿瘤效应γ服用tzd和有点迟钝的C57Bl / 6 j-apc发现分钟/ +老鼠,PPAR的激活γ介导的信号促进而不是抑制结肠肿瘤的发展(57]。APC的肿瘤抑制蛋白腺瘤息肉病杆菌和Wnt /不可分割的一部分β连环蛋白信号系统。最小值突变块的形成四聚物的复杂(APC、轴蛋白GSK-3β,β连环蛋白),允许磷酸化β连环蛋白导致其蛋白酶体降解。积累β连环蛋白把核形成转录复合体TCF / LEF诱导目标基因扩散(58]。然而,符合PPAR的早些时候报道说,激活γ或其配体有抗肿瘤作用,最近的研究表明显著降低肿瘤生长或生存的动物和各种PPAR腹膜癌扩散γ配体。这些最近的研究包括卵巢癌(47),甲状腺未分化癌(48),和膀胱肿瘤(49]。因此,争论仍在继续:“。。。PPAR的作用γ在细胞周期、增殖、分化和凋亡似乎依赖于细胞类型和/或癌症的突变事件使组织发展”(58]。辅活化因子或辅阻遏物的重要性在怎么强调都不为过。微环境的相互作用和贡献也必须考虑在理解这些不同的影响。
这些信号通路的共同目标是基质金属蛋白酶(MMP) [59,60]。微分对这些酶的影响可以解释,在某种程度上,PPAR的可变性在上述影响γ激活。增加PPARγ信号将下调MMP而某些MMP的目标基因β连环蛋白/ TCF-LEF。由APC转录系统既定的调节最小值突变增加MMP-7的表达。这些机制如何调控表达MMP的尚不清楚。然而,在上述的背景下感应PPAR的痘γ对MMP的可能相关,微分的影响。在给定的实验模型中,ECM的可用性和对MMP的影响可能确定相对可用的脯氨酸作为压力痘的衬底。此外,痘感应的后果也可能是双刃的。p53的刺激下,痘可以使用脯氨酸生成线粒体超氧化物启动细胞凋亡的内在和外在途径(34]。最近的研究表明,痘过度也会阻滞细胞周期(61年]。因此,upregulation痘的MMP生成游离脯氨酸的存在将激活抗肿瘤机制。另一方面,痘也可以产生ATP的差别,它是调节对这些mTOR养分胁迫的信号。与脯氨酸的可用性,upregulation痘可以支持细胞生存的62年]。像一些介质代谢监管机构,例如,p53和PPARγ,痘也可以发挥两刃的监管作用。
8。痘PPAR的抗肿瘤效果的作用γ
需要额外的工作来翻译这些发现在培养癌细胞最终动物模型和临床试验。作为第一步,研究被进行监控痘的表达在老鼠服用tzd管理。假设某些组织在培养细胞完整的动物也会回应,痘upregulation在自发肿瘤的影响,组织可以调查。痘的抑制脯氨酸类似物或基质金属蛋白酶的封锁,特别是脯氨酰氨基酸酶,可能会限制脯氨酸的可用性的组织。同时,控制饮食脯氨酸可能是重要的。这些动物研究与见解,可以设计临床试验POX-mediated的扰动影响的药物攻击的辅助手段服用tzd或其他PPAR的使用γ活化剂。此外,PPARγ激活有或没有痘可以与其他化疗方法相结合使用。
9。痘其他PPAR的贡献γ介导的影响
痘的后果在PPAR感应及其作用γ介导的代谢影响其他比癌症还没有探索。然而,令人吃惊的是,完善的PPAR代谢的影响γ可以通过感应部分介导的痘。然而,已知的痘和PPAR的影响γ邀请猜测,但这些实验具体问题没有解决。因此,这些问题仍在未来计划的范畴。有以下几点特殊考虑的PPAR的影响γ:(1)增加胰岛素敏感性,(2)减少炎症,和(3)增加骨量减少。
有潜在的脯氨酸降解之间的联系和insulin-related代谢的影响。当然,痘用脯氨酸生成中间体回补的柠檬酸循环可以使氧化代谢更有效率。调查人员称这些中间体作为构建块的重要性,而不是能源基质。此外,脯氨酸的代谢联锁周期和葡萄糖代谢通过磷酸戊糖途径会影响胰岛素敏感性,因为它打开葡萄糖代谢的另一个途径。因此,葡萄糖不仅会被氧化磷酸化在三羧酸循环和代谢转化为乳酸通过糖酵解,但也会被转换成有限公司2通过磷酸戊糖分流互变现象和骑自行车。
的PPARγ信号通路经常被认为是炎症反应压力,防止慢性炎症。炎症细胞如巨噬细胞对炎症反应的信号,如前列腺素,这将引起痘在巨噬细胞和诱导细胞凋亡。此外,cox - 2可能是由水痘的表达和proline-mediated ROS的生成36]。
最终代谢考虑是服用tzd展示了动物和人类的影响,将导致骨量减少(63年]。从组织学和代谢研究,PPARγ降低骨生成和增加osteoloysis。有减少数量的成骨细胞和破骨细胞的数量增加64年]。自骨主要是由钙化的胶原蛋白,也就不足为奇了胶原蛋白合成减少,胶原蛋白降解增加。由于胶原蛋白合成需要的脯氨酸,脯氨酸的降解增加痘会是一个生化过程符合监测功能。
另一个有趣的领域包括生理/病理生理的PPAR天然配体的来源γ,氧化低密度脂蛋白(oxLDL)。前体,低密度脂蛋白(LDL)是在人体肝脏内合成,并是运营商60%的血清总胆固醇,他们被广泛称为“坏胆固醇。“最近的研究表明,低密度脂蛋白被氧化在人类血液和组织在不同病理条件。OxLDL可能是一个重要的球员在动脉粥样硬化的发展,促进内皮细胞凋亡,增加增殖的平滑肌细胞,移植在巨噬细胞炎症信号。结果是动脉粥样硬化斑块的形成。oxLDL-induced机制影响正在深入调查,但有相当多的证据支持PPAR的角色γ激活(65年]。此外,氧化低密度脂蛋白激活p53 [66年,67年和刺激线粒体活性氧的形成68年诱导细胞死亡。因为所有这些机制都与痘活动,人们很容易推测痘成分。
尽管oxLDL主要是与动脉粥样硬化有关,一些研究指出人类血清oxLDL水平与癌症风险之间的相关性(69年,70年]。这促使我们研究可能的角色的痘oxLDL-mediated对致癌途径的影响。首先,我们转染乳腺癌、前列腺癌、结肠癌、宫颈癌,卵巢癌和肺癌细胞系的痘promoter-luciferase记者激活了痘子,发现oxLDL治疗剂量和时间的方式。这种效应是通过增加2.5毫米脯氨酸进一步增强。我们还发现,oxLDL治疗痘比nonoxidized低密度脂蛋白基因表达增加,或溶剂控制(Zabirnyk O和Phang JM,未发表的结果)。这些初步研究表明一个角色对PPAR oxLDL-mediated脯氨酸氧化酶的影响γ激活和启动凋亡细胞死亡。
总之,痘,p53诱导基因,明显调节PPAR的过度γ或服用tzd的加法。效果可以存在多种细胞和服用tzd的所有。这种效应的机制似乎是通过转录激活激活的痘子PPRE网站。的PPARγ对细胞凋亡的影响是由活性氧的生成,以及可拆卸的痘的siRNA明显减少或块PPAR的影响γ在结直肠癌细胞活性氧的形成和细胞凋亡或nonsmall细胞肺癌细胞,分别。这些发现表明,在PPAR痘可能起到至关重要的作用γ介导的抗肿瘤作用。此外,它可能会提供一个解释不一致的发现不同的动物系统中观察到。它还可以提供一种辅助治疗方法优化PPARγ介导的抗肿瘤作用。最后,投机提议的清晰度和PPAR POX-dependent代谢对代谢综合征的影响γ激活。
缩写| NFAT: | 核转录因子激活的t细胞 |
| P5C: | Δ1-pyrroline-5-carboxylic酸 |
| 痘: | 脯氨酸氧化酶 |
| PPARγ: | 过氧物酶体proliferator-activated受体γ |
| PRODH: | 脯氨酸脱氢酶 |
| ROS: | 活性氧 |
| 记录: | 肿瘤坏死factor-related凋亡诱导配体 |
| 服用tzd: | thiazolidinediones |
确认
这项研究是由美国国立卫生研究院的校内研究项目,国家癌症研究所癌症研究中心。这个项目也已经与联邦基金资助的部分从美国国家癌症研究所,国立卫生研究院的合同没有。n01 - co - 12400。该出版物的内容并不一定反映的观点或政策卫生和人类服务部的部门,也没有提及贸易名称、商业产品,或组织意味着美国政府支持的。