突变的主要脂质结合位点ATP13A2抑制活动但不是亚细胞定位。(一)多个带正电的残留在发现脂质结合位点14)(蓝、下划线)代替阿拉巴马州。LBS3重叠的可变剪接站点呈现一个插入5个额外的ATP13A2剪接变体1中残留。妈,膜相关地区。(b)的表达水平,分析了ATP13A2主要通过免疫印迹anti-ATP13A2抗体相比GAPDH加载控制。磅突变蛋白的分解蛋白酶体是评估通过蛋白酶体抑制剂治疗mg - 132 (100μ米)6 h。相同的凝胶之间ATP13A2细胞系的表达提供了在低和高强度。OE,超表达。(c)自身磷酸化化验(EP)的微粒体ATP13A2 WT或磅突变表达SHSY5Y细胞。顶部,相同的凝胶是描述在不同曝光时间的两倍。下面,等于证实了蛋白质加载在sds - page凝胶Coomassie染色。我们考虑到双波段可见LBS2和LBS3长曝光时间背景水平,而实际ATP13A2相关EP乐队(可见LBS1和WT-OE)位于之间,但靠近乐队的两倍。量化ATP13A2表达式(b) ATP13A2 / GAPDH和自身磷酸化水平((c) EP / Coomassie)进行描述。(d)的表达和定位内生(美国人),WT-OE, LBS1, LBS2, LBS3或LBS1.2.3 ATP13A2经colocalization实验与溶酶体标记LAMP-1并使用奥林巴斯IX73荧光显微镜捕获。代表放大图像的colocalization细胞系提供了图像插入。 Data are representative of 3 independent experiments. Scale bars represent 10 μM。