文摘
Ethnopharmacological相关性。胸腺linearisBenth。墙是在巴基斯坦吉尔吉特Baltistan省广泛使用和销售的改善肥胖和糖尿病等病症。然而,这种ethnomedicinal使用仍然缺乏任何科学支持。基于这种传统的使用,本研究旨在科学验证其在代谢综合征的预防作用。材料和方法。提取库(正己烷(NH)、乙酸乙酯(EA)、甲醇(M)、蒸馏水(DW),并结合提取(CE)是标准化的使用在体外植物化学的、抗氧化剂和α淀粉酶抑制化验,之后选择的保护作用即“,”。CE对代谢综合征,确定在活的有机体内,用高脂肪饮食喂养的大鼠补充额外的胆固醇。CE为雄性sd大鼠中在高剂量为100毫克/公斤羧甲基纤维素(CMC)(1毫升;DW的0.75%)和低剂量组在CMC 50毫克/公斤(0.5毫升;0.75%在DW)。10周后,CE对胰岛素抵抗的影响,脂质代谢,非酒精性脂肪肝病(NAFLD),氧化应激,和基因毒性评估通过组织学、生化,血液调查。结果。植物化学的分析提取的产物包括分析表明,类黄酮和酚醛树脂(杨梅酮、山柰酚、芹黄素),之前所知对肥胖和糖尿病是有效的,存在于提取物。抗氧化剂的研究表明,植物具有高度显著( )抗氧化剂的浓度。令人满意的α淀粉酶抑制活动也被观察到在体外实验。在活的有机体内研究表明,CE-administered动物显著( )低体重和脂肪细胞小于对照组。此外,CE抵制任何重要的( )器官重量的变化。从其传统使用类似于发现,植物提取物对胰岛素抵抗的影响积极的调节和高血糖。研究还表明,CE拒绝高脂肪食源性血脂紊乱及反击任何病变肝酶由fat-infused饮食引起的。此外,研究内源性抗氧化剂水平表明,CE是有效的在维护过氧化氢酶和过氧化物酶水平在正常范围内,抵制硫代巴比土酸活性物质的脂质过氧化作用的影响。结论。原则上,当前的研究结果科学验证的含义t . linearis在代谢综合征和建议进一步研究分子的洞察力观察治疗活动。
1。介绍
在上个世纪1980年代的“X综合症”,代谢综合征(大都会)现在定义为装配相关的代谢异常,如脂质代谢(高胆固醇血症和血脂异常),高血压,打乱了葡萄糖代谢和中央型肥胖。实现建立阈值的三个五个因素赋予综合征的存在(1]。尽管非酒精性脂肪肝是不包括在大都会的诊断标准,其与大都会的表现是很常见的。考虑到肥胖的主要贡献者,非酒精性脂肪肝被认为是肝代谢综合症的表现(2]。
研究代谢综合征患病率在亚太地区的成年人认为巴基斯坦城市地区的最高记录患病率(49%)。突然和迅速改变发展中国家的高纤维,低脂肪,低热量饮食高总脂肪,红肉,精制碳水化合物以及无节制消费的廉价植物油似乎发展的主要角色扮演的因素条件有利于代谢和心血管违规行为(3]。
与流行的看法相反,脂肪组织不能仅仅作为一个能源水库,但它也是一个至关重要的功能作为一个内分泌腺。它产生并释放多种生物活性物质称为adipocytokines,包括“进攻”adipocytokines如肿瘤坏死因子α白介素6、纤溶酶原激活物inhibitor-1血管紧张肽原单核细胞化学引诱物蛋白1,抵抗素和“防御性”adipocytokines如脂联素和瘦素。肥胖相关代谢综合症的发病机制涉及到这些adipocytokines不完善的监管。由于代谢综合征的特点是改变了氧化剂和抗氧化的平衡,因此氧化应激与代谢综合征及相关并发症密切相关。尽管高级研究和越来越多的人意识到在这一领域,目前的管理策略肥胖相关代谢综合征无法产生持续的影响。因此,在既定的主要病原体这个条件的发展,应该针对氧化应激新疗法的发展(4]。
胸腺linearisBenth。(家庭:唇形科)植物名称检查了http://www.theplantlist.org)是一种多年生植物,在巴基斯坦的高山地区,尼泊尔、印度和阿富汗。它通常被称为“喜马拉雅百里香”英语。其他常见的名称包括“蔓延性百里香”、“Jangli Ajwain,”“Satar波斯语,”和“Tumuro。“传统上,它已被用于生产咳嗽、高血压、痉挛,头痛和发烧和炎症(5]。它也被用于治疗皮肤,眼睛,肝脏疾病,还发现被用来对付钩虫[6]。这种植物也被发现有抗菌、抗病毒和抗癌活动(5]。此外,它也被用作滋补,杀菌,治疗感冒以及花草茶(7]。
2。材料和方法
2.1。收集和识别
天线的部分t . linearis收集从罕萨吉尔吉特Baltistan,巴基斯坦,2017年8月。谢尔•瓦利•汗博士,植物学、喀喇昆仑国际大学,吉尔吉特Baltistan,确定了植物胸腺linearisBenth。凭证标本与加入# 521年榜单在药用植物的标本,注册药房,真纳大学,伊斯兰堡,巴基斯坦。
2.2。提取和样品制备
天线部分的植物被清洗和阴影在室温下干燥一段三个星期。干植物材料地面形成细粉(2500克)当时受到polarity-guided sonication-assisted浸渍技术所描述的法蒂玛et al。8]。使用的溶剂正己烷、乙酸乙酯、甲醇和蒸馏水。粉植物第一次被浸泡在正己烷,三天在1000毫升厄伦美厄烧瓶间歇地用在25 kHz。首先,棉布是用于过滤,然后,滤纸用于精细过滤。溶剂提取的滤液用旋转蒸发器操作在40°C的压力下。程序都是相同的第二次使用相同的溶剂。类似的程序修改剩下的液体,即EA, M, DW。天然植物提取物被保存在正确标签容器和保存在冰箱里他们已经完全干后在4°C。
五个测试样本中提取获得正己烷(NH)、乙酸乙酯(EA)、甲醇(M)和蒸馏水(DW),以及合并后的混合物(CE)通过结合四种溶剂提取物的比率等于他们的提取率8]。
2.3。的标准化提取物
2.3.1。植物化学的分析
(1)总酚含量(TPC)估计。测试样品(20μl;4毫克/毫升DMSO)涨跌互现Folin-Ciocalteu (FC)试剂(90μl;1:10在蒸馏水),和碳酸钠(90μl;6% )被添加到混合物中。反应混合物的吸光度是记录使用标仪(美国800年Elx Biotek)在630 nm孵化后37°C 30分钟。没食子酸和DMSO作为积极的和消极的标准,分别。TPC当时使用标准曲线的线性方程计算由没食子酸在不同浓度的吸光度(1.56、3.12、6.25、12.5和25μg / ml)。合成TPC表示为μ每毫克g没食子酸当量(GAE)提取(9]。
(2)总类黄酮含量(交通)估计。混合物包含20μl的测试样本(4毫克/毫升DMSO) 10μl(乙酸钾(1米),10μ氯化铝(10%的l ),和160年μl蒸馏水孵化了30分钟在室温(22°C)。吸光度测量。校准曲线是在相同的实验条件下使用不同浓度的槲皮素(2.5、5、10、20和40μg / ml)积极控制和DMSO -控制。计算交通被表示为μg槲皮素每毫克当量(QE)提取(9]。
(3)反相高效液相色谱法(rp)分析。描述的方法和装置法蒂玛et al。8了用细微的修改。使用安捷伦高效液相色谱法进行化学站启B.02-01-SR1(260)和安捷伦1200系列二元梯度泵加上二极管阵列检测器(爸爸;安捷伦科技,德国)。Zorbex-C8分析列( ,5μ米粒子大小、安捷伦、美国)是用于反相色谱分析。溶剂的流动相是由acetonitrile-methanol-water-acetic酸的比例5:10:85:1,而溶剂B由acetonitrile-methanol-acetic酸比40:60:1。溶剂流率被设定为1毫升/分钟。股票的解决方案18植物化学的标准,即。,vanillic acid, plumbagin, thymoquinone, gallic acid, catechin, syringic acid, coumaric acid, emodin, gentisic acid, caffeic acid, ferulic acid, luteolin, apigenin, myricetin, quercetin, and kaempferol, were prepared. The stock solutions prepared in methanol were then diluted to obtain final concentrations of 10, 20, 50, 100, and 200 μ克/毫升的甲醇。在操作开始之前,所有流动相的解决方案,解决方案的标准,和样品脱气膜过滤器过滤(微孔),0.45μm大小。环境温度保持在色谱操作。列是二手10分钟之间的分析。结果表示为μg /毫克。保留时间和紫外可见光谱从分析获得样本的结果相比,多酚类物质的识别和量化标准。
2.3.2。在体外抗氧化试验
(1)自由基清除实验。2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl——(DPPH)为基础的技术被比比et al。10)之后,一些细微的修改。反应混合物组成的10μl的测试样品(4毫克/毫升DMSO)和190年μl DPPH解决方案(9.6毫克/ 100毫升甲醇)在37°C在黑暗中孵化后60分钟的最大吸光度计算在515海里。抗坏血酸(1毫克/毫升)作为积极和DMSO作为消极的控制。百分比清除活动是由下列公式计算:
百分之五十抑制浓度(IC50)的样品展示 评估使用稀释法样品浓度较低(200年,66.6,22.22,和7.4吗μg / ml)。
(2)确定总抗氧化能力(TAC)。Phosphomolybdenum-based比色测定用于估计总提取物的抗氧化能力11]。测试样品(100μl;4毫克/毫升DMSO)和900年μl TAC试剂(4毫米钼酸铵,0.6 M硫酸,和28 mM磷酸钠)被添加到埃普多夫管和孵化在95°C水浴90分钟。冷却后,反应混合物的吸光度测量在630海里。抗坏血酸(100μl;1毫克/毫升)和DMSO作为积极的和消极的控制,分别。试验进行了一式三份。校准曲线最终浓度的抗坏血酸(100年,50岁,25岁,12.5,6.25,和3.12μg / ml),和总抗氧化能力表示为μ每毫克g抗坏血酸当量(AAE)提取。
(3)总还原能力的测定(TRP)。程序基于减少氯化铁后如前所述的艾哈迈德et al。11]。测试样本(100μl;4毫克/毫升DMSO), 200μl 0.2磷酸盐缓冲剂(pH值6.6),和250年μl钾铁氰化物(1% )被添加到埃普多夫管和孵化在50°C水浴20分钟,随后的200年μ三氯乙酸(10%的l )。混合物在3000转离心10分钟。上层清液(150μl)的混合物然后转移到96孔板的相应的油井已经包含50μ铁氰化物(0.1%的l )解决方案。最后,吸光度测量在630海里。相同的过程又积极的(没食子酸)和消极(DMSO)控制。校准曲线最终浓度的抗坏血酸(100年,50岁,25岁,12.5,6.25,和3.12μg / ml),和总提取物的还原能力表示为μ每毫克g抗坏血酸当量(AAE)提取。
2.3.3。α淀粉酶抑制试验
的抑制作用α淀粉酶活性评估根据程序之前跟着Zahra et al。12]。简单地说,10μl(样品溶液(4毫克/毫升)准备在DMSO溶液添加到井的96孔板以及25μl (α淀粉酶储备溶液(0.12 U /毫升在50 mM磷酸盐缓冲剂,pH值6.8),15μl磷酸盐缓冲剂(50 mM;pH值6.8)和40μl淀粉溶液(2毫克/毫升磷酸盐缓冲剂)。板然后孵化在50°C 30分钟紧随其后的20倍μl 1 M盐酸和90年μl的碘溶液(5毫米碘、5毫米碘化钾)显色。积极的和消极的控制由取代测试样本与阿卡波糖(250μ米)和DMSO溶液,分别在指定的井。空白的解决方案是更换同等数量的样品准备的磷酸盐缓冲剂。吸光度测量在540 nm使用紫外可见分光光度计(美国800年Elx Biotek)。的α淀粉酶抑制活动使用下面给出的方程计算。 在哪里测试样品的吸光度,是空白的吸光度,是负面的吸光度控制。
测试样品表现出抑制受到IC≥50%50决心在200,66.6,22.22和7.4μg / ml样品浓度。
2.3.4。选择提取
的提取受到在体外测试显示一系列多样化的结果,例如DW提取显示酚醛含量最高而EA提取类黄酮含量最高,大量的α-淀粉酶抑制活性。米提取物抗氧化活性最高(TAC和TRP)而CE提取值得注意的自由基清除活性。因此,CE extarct被选为进一步在活的有机体内测试。此外,CE提取物也表现出了优秀的在体外抗氧化和抗糖尿病的潜力。
2.4。动物和造型
高脂肪食源性肥胖模型描述Fraulob et al。13]又做了一些调整。28男性雄性sd大鼠中(~ 150 - 250 g)被选为实验和维护在12 h光/暗周期和温度28°C。动物们被允许免费获取食物和水。经过一个星期的适应环境,实验动物被分成7组( 每个)。组的分布如表所示1。
三组在标准实验室饮食喂养(STD)和四个高脂肪饮食(HFD)。标准实验室饮食修改包括牛脂高脂肪食物做准备。美联储HFD组也与5毫克胆固醇/鼠悬浮在10% 椰子油的10周。所有的实验根据QAU伦理委员会的指导方针,形成自己的特色,巴基斯坦,动物保健。实验是信# bec -下批准的边后卫- qau2019 - 141。这项研究计划根据国家健康研究所(NIH)的指导方针,伊斯兰堡和最小不适,疼痛,痛苦到测试动物是确保在研究过程中。
2.5。口服葡萄糖耐量试验
那天血糖测量,改变了食物了,笼子里床上用品(减少粪食性)7 - 8 h在测量之前13]。Zero-minute葡萄糖测量是由血液撤出老鼠的尾巴静脉(3μl)和分析通过glucometer (Accu-Chek活跃、罗氏、德国)。葡萄糖(25%,2毫升)是nonsedated动物的口服药物。葡萄糖政府后,葡萄糖读数又在5、15、30、60分钟。
2.6。安乐死
后10周期间,动物麻醉与氯仿的帮助下,并使用心脏穿刺方法收集血液样本。等离子体是通过离心分离在6000 rpm和15分钟4°C,和样本存储在-20°C,直到他们进行生化分析。
肝脏、脂肪垫(腹膜后和附睾,肠系膜)、肾脏、大脑和心脏是孤立的,用冰冷的正常生理盐水洗净,称重。不同组的权重比较高脂肪饮食的影响分析和CE器官重量。肝脏组织病理学研究部分存储在10%福尔马林(13]。
2.7。测定稳态模型胰岛素抵抗(HOMA-IR)
在实验的最后一天,7小时禁食后,血糖和血清胰岛素计算使用glucometer (Accu-Chek活跃、罗氏、德国)。血清以前收集和存储用于胰岛素估计通过酶联免疫试剂盒(美国Elabscience生物技术有限公司)。计算值是放置在HOMA-IR的方程,从而计算(14]。
2.8。组织学分析
肝脏和脂肪垫被切成小块,用生理盐水冲洗。部分被切割然后用10%福尔马林固定25μm组织部分。部分与伊红染色和苏木精。脂肪部分光学显微镜下观察(DIALUX 20 EB) 40 x,和图片拍摄使用HDCE-50B相机为了评估脂肪细胞大小后来通过ImageJ软件测量。肝脏部分也观察到任何脂肪堆积的迹象(13]。
2.9。血清学分析
高密度血脂(高密度脂蛋白胆固醇)估计通过比色和沉淀剂方法采用高密度脂蛋白胆固醇沉淀剂酶工具包(Dialab、奥地利)。胆固醇、总甘油三酸酯含量和肝酶(ALT和AST)化验的帮助下酶比色包(Inoline、默克、巴基斯坦)。低密度脂质(低密度)使用Friedewald公式计算(15]。
2.10。内源性抗氧化评价
2.10.1。过氧化氢酶活性评价
过氧化氢酶活性分析显示血清方法采用伤势严重et al。16]。测试250组成的混合物μl(磷酸盐缓冲剂(50毫米,pH值5.0),40岁μl H2O2(5.9毫米)和10μl的血清进行了分析。每分钟吸光度的变化率是使用微型板块读者观察到240海里(800年Elx Biotek美国)(0,1,2分钟。吸光度的变化每分钟0.01个单位被认为是过氧化氢酶的活动,1个单位和结果表示为单位每分钟蛋白质(U /分钟的蛋白质)。
2.10.2。过氧化物酶(POD)活性的评估
纳兹等人采用的方法。17过氧化物酶活动的)是用于评估。分析混合物由10μ250年20毫米愈创木酚,lμl(50毫米磷酸盐缓冲剂(pH值5.0),30岁μl H 50毫米2O2,10μ血清l。反应混合物的吸光度被记录在470 nm使用标(美国800年Elx Biotek)每分钟2分钟后,和过氧化物酶1个单位活动确定的吸光度变化每分钟0.01个单位。结果计算单元每毫克蛋白(U /毫克蛋白)。
2.10.3。超氧化物歧化酶(SOD)的活性评价
根据前面描述的方法(17),反应混合物是由混合11μl(吩嗪methosulphate (186μ132),μl焦磷酸钠的缓冲区(0.052毫米;pH值7.0)和10μ血清l。22的反应是由公司发起的μl 780年μ110年的米NADH和停止μl冰醋酸。反应混合物的吸光度被记录在560 nm,和结果表示为单位每毫克蛋白(U /毫克蛋白)。
2.11。脂质过氧化反应的评估
信德et al。(描述的协议18)是随访评估在血清和组织匀浆脂质过氧化作用。反应混合物组成的20倍μl氯化铁(100毫米),200年μl抗坏血酸(100毫米),580年μl磷酸盐缓冲剂(0.1 M;pH值7.4),和200年μ血清l是孵化在37°C水浴一段1小时。反应停止了1000年的合并μl 10%的三氯乙酸1000紧随其后μl 0.66%的硫代巴比土酸。混合物管放在沸水了20分钟之后,他们在冰浴冷却和离心机 10分钟。为了量化的硫代巴比土酸活性物质(TBARS)样品,样品和试剂空白的吸光度(包含所有的试剂测试样本除外)为535 nm,结果被表示为摩尔TBARS每分钟每毫克蛋白(nm TBARS /分钟/毫克蛋白)。
2.12。基因毒性的评估
基因毒性的潜力t . linearis提取是通过彗星试验评估大脑,心脏,肝脏和肾脏匀浆。该方法建立了开斋节et al。19)之后,methanol-dipped显微镜幻灯片被烧死在火焰为了删除任何机械石油或灰尘。无菌盘浸满1%正常熔点琼脂糖溶液,然后被允许冷却25°C。一小部分的脂肪垫被碾碎成1毫升冷赖氨酸的解决方案,和混合浸渍组织和85年μl低熔点琼脂糖(LMPA)是分布在涂幻灯片。幻灯片立即就被覆盖着盖玻片,放在冰块凝固。一层80μl LMPA之前添加到幻灯片凝固的第二轮。切除后的封面,盘子被放置在准备电泳冷赖氨酸解决方案2小时在4°C。电泳是在一个电泳槽进行充满电泳缓冲。在25 V的过程进行了20分钟之后,幻灯片和中和缓冲两次浸渍。幻灯片然后用溴化乙锭染色的,电子显微镜下检查。DNA损伤评估的帮助下完成了CASP 1.2.3。b软件。
2.13。统计分析
提出了获得的数据的形式 偏差。数据进一步分析使用单向方差分析统计图基紧随其后的多重比较检验。统计学意义是设定在P< 0.05。图形设计的帮助下GraphPad 5。
3所示。结果与讨论
的花草茶t . linearis广泛用于中药对糖尿病和肥胖;然而,没有科学证据迄今为止。因此,目前的研究中,经过科学证明植物对代谢综合征的有效性,验证ethnopharmacological使用Tumuro肥胖和糖尿病的茶。
本研究介绍了首次全面调查治疗的潜力t . linearis的提取对代谢综合征的不同方面。它建立了提取能有效地减少高脂肪饮食喂养的老鼠的体重增加。提取也成功在调节脂质代谢和血糖和胰岛素耐受。肝酶实验显示,表示提取维护肝酶在正常范围内,即使高脂肪饮食增加了管理的水平在对照组。此外,先前的研究表明,植物的地上部分具有抗高血压属性(20.]。由于这些属性,t . linearis提取可以被设想为一个有价值的草药对代谢综合征。
3.1。比例提取收益率
比例提取产量的评估显示,DW的最高数量的植物化学物质提取提取(表2)。四个提取混合比率(0.39:1.28:1.57:6.74)%提取对应各自的产量提取为了形成一个混合或结合提取(CE)。
3.2。植物化学的分析
植物提取物植物化学的分析表明,植物丰富的酚类物质和类黄酮组成的。总酚含量的最高浓度相当于没食子酸被发现 DW的提取。最高的类黄酮浓度相当于槲皮素存在于 EA(图1)。
详细的产物,第一次执行t . linearis提取物,表明类黄酮的最突出的植物成份有杨梅酮、山柰酚、芹黄素(数字2(一个)- - - - - -2 (d))。最值得注意的酚醛是没食子酸浓度为0.18μCE提取和g / mg杨梅黄酮的提取(1.43μg / mg)(表3)。酚醛树脂和类黄酮,通过许多机制,治疗不同生理失调。这个属性是后来在这项研究与治疗相关植物的属性。
(一)
(b)
(c)
(d)
3.3。抗氧化潜能
所示的植物提取物有显著的抗氧化潜力在体外化验。FRSA测定植物表现出优秀的活动,%清除高达94.7% (CE提取(图)3)。这个结果是完全同意与先前的抗氧化剂研究[21)进行植物,水提物清除在100年显示95%μ克/毫升。此外,著名的活动显示了M和DW TAC和TRP化验(图3)。植物化学物质在植物提取物中发现之前已经表现出优异的抗氧化性能。杨梅酮和山柰酚拥有出色的能力清除DPPH (2, 2-diphenyl-1-picrylhydrazyl)自由基。优秀的DPPH的清除能力t . linearis提取可能是由于这些植物成份的存在22]。
3.4。α淀粉酶抑制活性
这项研究第一次调查的影响t . linearisglucose-metabolizing酶,α淀粉酶。这是发现EA和CE提取物抑制α淀粉酶酶(图4),从而有助于降低餐后高血糖。这种效应也可以与杨梅酮的存在表明意义重大α在先前的研究[淀粉酶抑制活动23]。
的在体外研究有助于选择的提取在活的有机体内测试。Polarity-guided连续提取了四种不同极性提取物。这些提取显示不同的结果在体外研究。因此,当务之急是准备一个提取个人提取所展现出来的拥有所有这些属性。记住这一点,结合提取包含四种不同的提取比例等于他们的提取效率。CE本身显示显著的结果在体外测试。
3.5。对肥胖的影响
代谢综合征的第一个最重要的方面是肥胖。三个不同的参数,即。,amount of weight gained, organ weight, and diameter of adipocytes, were assessed to analyse the effect of plant extract on obesity. Different groups were simultaneously fed on normal diet, high-fat diet, and the plant extract. There was no significant difference in the animal weights up to 5 weeks, after which the animals fed on high-fat diet started gaining weight. By the end of the 10th只一周,高脂肪饮食组有显著提高( )重量extract-administered组相比,表现出显著减少体重增加(图4)。这是观察到这种阻力改变剂量依赖性的方式。提取抵制体重显著增加,尽管政府的高脂肪的饮食。植物提取物的各类典型财产减少剂量依赖性的方式,和高剂量的活动相当的销售各类典型药物奥利司他。此外,动物的提取也能够减肥美联储标准饮食。器官重量相比还显示,CE能够检查体重增加肝、附睾的、腹膜后、肠系膜脂肪垫和器官(肝、附睾的和腹膜后脂肪垫)的老鼠喂食高脂肪的饮食。没有显著差异在大脑,心脏,肾脏重量(表4)。此外,脂肪细胞肥大,肥胖的指标,也进行了研究。脂肪细胞储存脂肪,过量的脂质积累,增加脂肪细胞的大小。这导致脂肪组织发炎,因此导致胰岛素抵抗和2型糖尿病的发展(24]。我们的研究表明,高脂饮食诱导显著( )脂肪细胞肥大,但动物的脂肪细胞接受口服t . linearis提取(100毫克/ 0.75% CMC溶液)没有出现肥大,因此没有出现肥胖尽管政府高胆固醇饮食(数字5和6)。
杨梅酮的研究表明,它具有显著的典型属性。在一个特定的在活的有机体内在老鼠身上进行的研究杨梅酮在大鼠肝脏脂肪酸氧化的过程加速,从而减少体重和脂肪积累(22]。此外,另一个研究老鼠preadipocyte 3 t3-l1细胞突出了黄酮醇的antiadipogenic活动像山柰酚和杨梅酮。类黄酮的减少脂肪细胞的脂质积累。他们实现这一目标通过抑制preadipocytes成熟脂肪细胞的分化。这导致减少脂质积累。这一中断的区别是保的差别与对这些CEBPA, PPARγ,FABP4基因是与脂肪细胞的分化22]。另一项研究表明,黄酮,芹黄素,呈现类似影响老鼠3 t3-l1细胞通过激活AMPK途径和减少脂肪形成的基因的表达,从而减少体重增加和减少身体脂肪含量(25]。此外,阿魏酸显示各类典型属性类似于销售药品,西布曲明。这类黄酮减少体重和抑制内脏脂肪堆积时的口服药物瑞士老鼠以及高脂肪食物通过降低血浆瘦素,饥饿激素的水平。的典型活动t . linearisCE也可以归因于没食子酸的存在促进在体外抑制胰脂肪酶和在活的有机体内抑制体重增加(26]。
3.6。对高血糖和胰岛素抵抗的影响
我们研究的第二部分关注的效果t . linearis在胰岛素抵抗。胰岛素抵抗可以被认为是链接的骨干肥胖、糖尿病和肝脏条件。HOMA-IR评估胰岛素抵抗是一种方便的方法。进行的研究显示,100毫克的CE提取显著( )抑制胰岛素抗性的发展明显由HOMA-IR值与对照组相比。高剂量有更好的胰岛素调节的影响比销售药物,奥利司他。
葡萄糖代谢,胰岛素可以严重影响代谢条件,在人体细胞生长抗胰岛素代谢的影响。一个疯狂的葡萄糖代谢是2型糖尿病的直接前体27]。葡萄糖耐量试验表明,葡萄糖耐量降低与喂食高脂肪的饮食,因此,老鼠纳入HFD-Cnt成为葡萄糖不能容忍与时间评估血糖水平所花费的时间达到正常水平后血糖管理。老鼠把植物提取物抵制葡萄糖耐受不良的发展甚至在高脂肪饮食。组织标准饮食没有任何差异的葡萄糖耐量(数字7(一)- - - - - -7 (d))。
(一)
(b)
(c)
(d)
杨梅酮、类黄酮中发现之一t . linearis提取,显示显著改善胰岛素抵抗。它达到通过增加GLUT4的表达和增强一种蛋白激酶的磷酸化(也称为蛋白激酶B)和胰岛素受体底物1 (IRS1)。同样,山柰酚也以类似的方式,降低高血糖和提高葡萄糖吸收细胞通过增加的一种蛋白激酶的表达,增强营地,和增强合成胰岛素的胰岛细胞。山柰酚也表现出刺激葡萄糖摄取的蛋白激酶C和PI3K通路(26]。另一个黄酮类,芹黄素,也获得了改善胰岛素抵抗和高胰岛素血症的声誉。它能达到这个通过抑制肝酶参与糖质新生,和减少这种抑制会导致胰岛素抵抗28]。此外,阿魏酸,由于其强大的抗氧化活动,用于与其他抗糖尿病的药物的协同效应(28]。
3.7。对脂质代谢的影响
病理改变脂质代谢(血脂异常和高胆固醇血症)是重要的代谢综合症的表现(29日]。t . linearisCE提取,甚至在高脂肪饮食管理,显著( )反对增加甘油三酯和胆固醇水平比高脂肪饮食,低剂量,和标准药物组。提取还导致高密度脂质水平(表的增加5)。这是在协议与以前的研究t . linearis(兹et al ., 2016)。然而,与之前的研究,目前的研究显示减少甘油三酸酯水平,但对低密度脂蛋白水平无显著影响。此外,研究植物的降脂效果更加明显在组喂高脂肪饮食比组美联储在标准实验室的饮食。
先前的研究表明,没食子酸,苯酚检测植物提取,建立了活动在减少高脂血症显著降低低密度脂质和增加甘油三酯和高密度脂质(30.]。这是在我们的研究中观察到相同的模式。此外,杨梅酮已被证明有效地改善高胆固醇血症、高甘油三酯血症。诱导肝PPARγ表达和减少的表达,如杨梅酮的血浆lipid-regulating机制(31日]。山柰酚通过相同的机制可以降低血浆甘油三酯水平(32]。
3.8。对非酒精性脂肪肝病的影响
非酒精性脂肪肝被描述为增加肝脏中脂肪聚集,增加5 - 10%超过通常的重量。进行研究旨在建立的影响t . linearis通过研究非酒精性脂肪肝的肝脏组织学幻灯片。然而,脂肪肝的幻灯片不能显示合适的发展控制(图8)。因此,我们缺少证据建立提取有效或无效的脂肪酸在肝脏浸润。理解的原因可能是,这项研究并没有持续很长时间,因此,发展脂肪肝可能无法实现。非酒精性脂肪肝的另一个重要方面是改变肝酶。改变肝酶表明肝损害。肝酶水平在评估当前的研究显示海拔在对照组喂食高脂肪的饮食,尽管他们仍然控制extract-administered组(表6)。
研究表明,杨梅酮在治疗肝脂肪变性可能是有效的,因为它规范化肝酶和防止肝脂质积累通过增加肝脏核Nrf2的易位,增强表达血红素oxygenase-1 (HO-1)和NAD (P) H醌脱氢酶1 (NQO1) [33]。山柰酚诱发肝PPAR的自噬通过激活α和PPARδ,这可以减少脂滴堆积在肝脏34]。
3.9。影响内源性抗氧化剂和脂质过氧化作用
内源性抗氧化剂也评估了我们的研究以建立更好的关系t . linearis的影响及其抗氧化潜能。内源性抗氧化剂(CAT和POD)明显下降( )HFD-Cnt组相比HFD-CE-HD组,但是没有突出影响SOD值(图8)。此外,高脂肪饮食造成很大( )脂质peroxidation-as TBARS明显的价值,高剂量的植物提取物抵制异常。低剂量和积极控制未能TBARS浓度(图任何明显的变化9)。
先前的研究显示,杨梅酮是有效恢复内源性抗氧化剂的活性,过氧化氢酶,但未能显示重要SOD-restoring能力(35]。这与我们研究植物所表现出的活动。山柰酚也拥有强大的潜力修理内源性抗氧化剂和氧化压力诱导脂质过氧化反应36]。类似的结果在鼠肝准备接受杨梅酮(37]。
3.10。基因安全评估
植物提取物对遗传物质的影响也被观察到。比标准的控制,我们的结论是,植物显示无意义的尾部DNA迁移,因此,它不是有害的鼠遗传物质(图10和表7)。本研究提出的第一个报告基因的安全性t . linearisBenth。提取物。
提取的机制t . linearis。Benth在墙抵抗肥胖的发展,糖尿病和非酒精性脂肪肝病可能与各种植物化学物质的存在对这些条件是有效的。通过各种途径,这些类黄酮的作用机制研究植物的提取物可能是其中一个途径。另一个可能的提取物对氧化应激的作用机制可能是通过高脂肪饮食诱导。所介绍,代谢综合征的病理生理学包括形成不同的自由基,这进一步扰乱adipocytokines的释放。这些提取物可能通过氧化途径减轻代谢综合症的不同方面。进一步研究机制需要更多有关这个主题。
4所示。结论
胸腺linearisBenth在墙上也称为喜马拉雅百里香由于其传统的使用评价对代谢综合征其潜力。值得注意的活动体外以及显著的减重,葡萄糖和脂类代谢稳定,王亚南属性对高脂肪饮食的影响证明胸腺linearis可以是一个值得注意的领导作为代谢综合征的药物。这些重要的属性可以归因于异常出现的植物化学物质量化在高效液相色谱分析中,抗氧化剂,和优秀的能力来恢复内源性抗氧化剂的雄性sd大鼠中。
缩写
| AMPK: | 腺苷单磷酸盐激活蛋白激酶 |
| 阵营: | 环腺苷酸 |
| CE: | 结合提取 |
| CMC: | 羧甲基纤维素 |
| DPPH: | 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl |
| DW: | 蒸馏水 |
| EA: | 乙酸乙酯 |
| FABP: | 脂肪酸结合蛋白 |
| FRSA: | 自由基清除实验 |
| GLUT4: | 葡萄糖转运体类型4 |
| 高密度脂蛋白胆固醇: | 高密度脂 |
| HFD: | 高脂肪饮食 |
| HFD-CE-HD: | 高脂肪饮食+高剂量的累积提取 |
| HFD-CE-LD: | 高脂肪饮食+低剂量的累积提取 |
| HFD-Cnt: | 高脂肪饮食+控制 |
| HFD-Pos: | 高脂肪饮食+积极 |
| HO-1: | 血红素oxygenase-1 |
| HOMA-IR: | 内稳态模型胰岛素抵抗 |
| 特色: | 伊斯兰堡 |
| 密度: | 低密度脂 |
| M: | 甲醇 |
| 大都会: | 代谢综合征 |
| NADPH: | 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 |
| 非酒精性脂肪肝: | 非酒精性脂肪肝病 |
| 尼克-海德菲尔德: | 正己烷 |
| 国家卫生研究院: | 国家卫生研究所 |
| PI3K: | 磷酸肌醇3-kinases |
| 圆荚体: | 过氧化物酶 |
| PPARγ: | 过氧物酶体proliferator-activated受体γ |
| QAU: | 真纳大学 |
| 反: | 反相高效液相色谱法 |
| SOD: | 超氧化物歧化酶 |
| ,如: | 甾醇regulatory-element结合蛋白 |
| STD: | 标准实验室饮食 |
| STD-CE: | 标准饮食+累计提取 |
| STD-Cnt: | 标准的饮食+控制 |
| STD-Veh: | 标准饮食+车辆 |
| t . linearis: | 胸腺linearis |
| 2型糖尿病: | 2型糖尿病 |
| TAC: | 总抗氧化能力 |
| TBARS: | 硫代巴比土酸活性物质 |
| TRP: | 总还原能力。 |
数据可用性
所有数据都包括在内。
伦理批准
实验研究是批准后进行的协议利用动物。真纳大学的伦理委员会,伊斯兰堡,巴基斯坦,授权执行上述的实验在体外和在活的有机体内实验动物保健和信(信# QAU-PHM-037/2016 # QAU-PHM-043/2016)。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
作者的贡献
IH提出的概念的研究,实验监测和监督执行,给文章发表的最终批准。YY设计并进行了实验,解释数据,本文以书面形式提出。MWB导致实验设计的发展和传导的实验。BNK显著协助办理的实验。阿兹协助在动物研究。高频批判性的分析文章,对文章的贡献修订。ARP手稿提出了宝贵的建议。阅读和批准所有的作者都最后的手稿。
确认
作者要感谢谢尔瓦利Khan博士教授喀喇昆仑国际大学,吉尔吉特Baltistan,巴基斯坦,识别植物样本。