文摘

米糠油(投)由各种营养素和植物化学物质表现出几个健康的好处。没有研究无关的功能不同的颜色效果。本研究旨在比较白的成分和抗氧化活性米糠油(WRBO)和彩色米糠油(CRBO)。每个RBO显示出类似的游离脂肪酸的概要文件。然而,大量的维生素E,植物甾醇,类胡萝卜素和叶绿素被发现在CRBO,较低γ比WRBO谷维素含量。氧化应激诱导的雄性老鼠的过量对乙酰氨基酚(APAP即)300毫克/公斤体重。老鼠被喂食了投在等效剂量100毫克/公斤体重γ谷维素APAP即三小时后,牺牲了六小时后治疗。100毫克的管理γ谷维素相当于CRBO APAP-induced改善小鼠的肝毒性强烈超过100毫克γ谷维素相当于WRBO,血清ALT的显著减少,肝细胞坏死,肝脂质过氧化作用。CRBO可以改善xenobiotic-metabolizing和抗氧化酶活动,包括谷胱甘肽 - - - - - -转移酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶,谷胱甘肽还原酶,并增加各种antioxidant-responsive基因的mRNA的表达。维生素E、植物甾醇、类胡萝卜素和叶绿素可能保护化合物在CRBO缓解APAP-induced肝毒性的中断APAP即代谢和抗氧化系统的激活转录和酶的水平。这些发现可能会提供保护作用的CRBO氧化应激与一些退化性疾病有关。

1。介绍

氧化应激的结果之间的不平衡消除自由基的积累及其抗氧化系统,导致损伤脂质等生物分子,DNA和蛋白质(1]。氧化应激可以加快发展多个退化性疾病,如糖尿病、关节炎、心血管疾病、神经退行性疾病,multiorgan失败,和癌症,衰老过程中也扮演了一个角色(2]。多项研究表明,这些疾病与下降造成的抗氧化潜力增加自由基产量随着浓度的降低抗氧化酶,也诱导的炎症状态(3]。抗氧化剂是一种防御机制,保护生物系统免受活性氧和氮物种(罗恩)由几个过程3]。内源性抗氧化剂包括酶和非酶的途径。超氧化物歧化酶(SOD)将超氧化物阴离子(O2•- - - - - -过氧化氢(H)2O2)和氧气。H2O2进一步催化水和氧气分子,过氧化氢酶(CAT)。谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)也催化过氧化氢和脂质氢过氧化物的分解与减少谷胱甘肽(GSH)反应形成氧化谷胱甘肽(GSSG)。谷胱甘肽还原酶(GR),那么减少再生谷胱甘肽(GSSG4]。此外,非酶的抗氧化剂包括胆红素、维生素E、β胡萝卜素、白蛋白和尿酸是分子与自由基和终止链式反应(5]。有趣的是,外源性抗氧化剂也中和罗恩。他们防止细胞膜的脂质过氧化反应,如维生素C、维生素E、酚类化合物、乙酰半胱氨酸、石油卵磷脂抑制病理条件(6]。因此,预防战略,特别是膳食抗氧化剂的消费在日常生活中,建议减少氧化应激和其对疾病的潜在影响。

植物油被推荐用于日常烹饪由于其高单不饱和脂肪酸和ω6多不饱和脂肪酸及其内容积极健康益处心脏病和癌症的临床研究[7,8]。先前报道的健康食用油。橄榄油含有β胡萝卜素、叶黄素、生育酚、角鲨烯和酚类化合物表现出抗氧化,抗炎,抗菌,抗动脉硬化,抗致特征(9]。芝麻油和其组件显示抗氧化剂和抗炎作用,并减轻心血管疾病(10]。红花油,螺丝从种子中提取的紧迫,展示了强大的抗氧化作用和对皮肤病原体的抗菌活性11]。

米糠油(投)从表皮和外壳之间的谷物中提取得到的碾米过程。全球市场投是美国40.4亿年的2018美元,到2025年将增加到51.2亿美元。虽然没有被广泛用作食用油,其作为一种健康的石油需求在应用程序和功能食品一直在稳步增加12]。RBO包含一个植物化学物质的重要来源,如生育酚和tocotrienols,γ-oryzanols,植物甾醇(13)提供健康优势包括抗氧化、抗炎、抗癌、降血脂药属性(14,15]。在泰国,茉莉花大米主要是种植和出口产品虽然Riceberry白米,最广泛的新有机紫色水稻品种从杂交获得注册,已成为最受欢迎的大米闻名的健康益处。几项研究已经报道抗氧化活动的白色米糠油(WRBO),但很少有研究彩色米糠油(CRBO),特别是在在活的有机体内实验。因此,本研究旨在比较WRBO之间的植物营养素和植物化学物质的内容和CRBO及其抗氧化性能使用对乙酰氨基酚(APAP即)全身的氧化应激和肝毒性小鼠模型。这个经典模型被用来研究治疗的王亚南化合物(16]。

2。材料和方法

2.1。化学物质

APAP即, - - - - - -乙酰半胱氨酸(NAC),硫代巴比土酸(稍后通知),5、5 - - - - - -dithiobis-2-nitrobenzoic酸(DTNB)、黄嘌呤、黄嘌呤氧化酶、氮蓝四唑,GR,减少谷胱甘肽,phenylmethylsulfonyl氟化物(PMSF), - - - - - -硝基酚( - - - - - -NP), - - - - - -nitrocatechol,叔丁基氢过氧化物(t-BHP)从西格玛奥德里奇公司购买(圣路易斯,密苏里州,美国)。牛血清白蛋白(BSA)和1-chloro-2 4-dinitrobenzene (CDNB)获得热费希尔科学公司(美国沃尔瑟姆,MA)。三氯乙酸(TCA)和H2O2买了从默克密理博(美国伯灵顿,MA)。UDP-glucuronic酸是由美国提供的生物(美国马Salem)。βnadph获得Nacalai Tesque(日本京都)。氯化钾、氯化镁、碳酸钠和甘油从VWR购买公司(美国宾夕法尼亚州,二)。乙二胺四乙酸(EDTA)获得Vivantis技术(雪兰莪州们•,马来西亚)。高效液相色谱级丁醇、正己烷、异丙醇,乙酸乙酯,乙酸,甲醇,乙腈是来自RCI Labscan有限公司(泰国曼谷)。

2.2。RBO准备

白色和彩色大米(栽培稻l .)获得Kurk碾米机(泰国清莱省)种植在Wiang茶区从2018年10月至12月,泰国清莱。白人与有色人种的水稻品种在这项研究中的应用是考105年邮政马里Riceberry,分别。WRBO和CRBO提取使用机械压力机机,然后由纸过滤去除沉淀。在那之后,RBO被媒体过滤进一步纯化。RBO收集到一个玻璃瓶与光保护和保存在室温下直到调查。

2.3。植物营养素和植物化学物质的分析

游离脂肪酸概要分析了食品研究所的研究和产品开发,Kasetsart大学,曼谷,泰国,使用气相色谱谱技术根据内部方法基于泰国食品分析方法的纲要,第1版,2003年版。

的评估γ-oryzanols执行根据的方法Pintha et al。17]。高效液相色谱系统由1260连接到一个安捷伦高效液相色谱二极管阵列检测器(模型G1311 C;美国安捷伦科技,圣克拉拉,CA)。分析了RBO溶解在乙醇使用C18柱原药的高效液相色谱(Inertsil ODS-3 ,5μm;GL科学公司,日本东京)。流动相包括甲醇和乙腈(65:35)和权力平等主义的洗脱流速为1.0毫升分钟1。用于监控波长325 nmγ-oryzanols。

总量的测定维生素E或母育酚是由高效液相色谱使用修改后的黄的方法等。18]。这个系统由1100连接到一个安捷伦高效液相色谱荧光检测器(1046 a;美国惠普,帕洛阿尔托,CA)。20毫升的样品被注入一个正相硅胶柱(VertiSepTM UPS ,5μm;垂直色谱有限公司,Nonthaburi、泰国)。流动相是一个权力平等主义的梯度己烷:异丙醇:乙酸乙酯:醋酸(97.6:0.8:0.8:0.8, )最小流量1毫升1,在室温下。母育酚与激发荧光检测,在294 nm和排放在326海里。

植物甾醇分析方法后Pokkanta et al。13]。高效液相色谱系统由1100连接到一个安捷伦高效液相色谱二极管阵列检测器(模型G1315;美国安捷伦科技,圣克拉拉,CA)。每个样本(5μL)被注入Kinetex PFP列( ,5μ托兰斯,m, Phenomenex公司美国CA),逐步筛选了由甲醇和水混合溶液流速为1.0毫升分钟−130分钟。每个形式的植物甾醇检测的波长210 nm。

类胡萝卜素和叶绿素含量用分光光度法测定。RBO己烷(溶解在10% )。类胡萝卜素含量测定用吸光度在446纳米,而叶绿素含量测定波长的吸光度630,670和710 nm和计算使用方程所描述的Pohndorf et al。19]。

2.4。动物和实验协议

12个男Mlac: ICR小鼠,重约40 - 50 g,从国家实验室动物中心购买,那空Pathom、泰国Mahidol大学。笼子里的老鼠都遵循标准条件包括温度25°C在暗光下周期和喂养随意与基底饮食和饮水。实验动物伦理委员会批准的协议是医学院,清迈大学(07/2561)。42小鼠随机分为7组,每组6个老鼠。所有小鼠禁食过夜12 - 15小时前APAP即治疗。组1 - 3是口头管理0.9%热盐水(车辆),而组4 - 7和300毫克公斤口头美联储1体重(BW) APAP即。APAP即归纳了三小时后,组1和4然后再辅以15毫升公斤1BW蒸馏水。组2和5与WRBO口头管理,而组3和6治疗与CRBO等效剂量100毫克公斤1BW的γ-oryzanols。集团7用1200毫克公斤1BW NAC作为阳性药物控制(图1(一))。之后,小鼠安乐死APAP即治疗后6小时麻醉下腹腔内注射的200毫克公斤1BW pentothiol钠。肝门静脉的血液收集然后离心机在3500 g和4°C获得血清丙氨酸转氨酶(ALT)分析使用一个自动分析仪的小动物医院,兽医学院,清迈大学。肝组织切除,称重后,进一步削减部分储存在-80°C到生化评价或在磷酸盐10%福尔马林固定的组织病理学分析通过苏木精和伊红染色())。

(一)
(一)
(b)
(b)
图1
(一)实验协议APAP-induced RBO治疗的老鼠。雄性小鼠口服禁食管理与车辆或300毫克公斤BW APAP即。三小时后,小鼠注射用蒸馏水,WRBO CRBO或NAC然后安乐死APAP即治疗后6小时。(b)肝histomorphological APAP-treated老鼠RBO治疗后的变化)染色,光镜观察。在100 x放大显微图所示。箭头表示坏死区域。APAP即:对乙酰氨基酚;WRBO:白色米糠油105;CRBO:彩色米糠油;南京: - - - - - -乙酰半胱氨酸。
2.5。制备肝匀浆、胞质和微粒体

肝脏组织在一个冰冷的均质化均质缓冲区包含1.15% 氯化钾PMSF和0.25毫米。匀浆离心机在10000 rpm 20分钟在4°C。上层清液收集然后离心机在4°C 100000 g 60分钟获得胞质上层清液和微粒体颗粒。微粒体分数被均质化缓冲和resuspended微粒体悬浮缓冲pH值7.4,包含30% ( )二硫苏糖醇甘油和1毫米。胞质和微粒体分数都保持在-80°C到分析。洛瑞的蛋白质含量测定方法使用BSA作为标准。

2.6。肝脏硫代巴比土酸活性物质水平

肝脏中脂质过氧化反应测定使用硫代巴比土酸活性物质(TBARS)试验如前所述Noeman et al。20.]。肝匀浆与柠檬酸preincubated五分钟,然后离心重6000克,为20分钟4°C。上层清液是孵化煮10分钟稍后通知。由此产生的粉红色在丁醇提取色原体。混合物在3000 g离心10分钟,使用最优密度和上层的监控波长532纳米。

2.7。谷胱甘肽含量

总谷胱甘肽决心使用谷胱甘肽循环系统(21]。肝匀浆是离心机在14000 rpm, 20分钟4°C。由此产生的上半部分是混合与反应混合物组成的6毫升单位1GR和1.5毫克毫升125°C的DTNB 5分钟然后40毫克毫升1的βnadph是补充道。黄色是发达,吸光度测量活动5分钟的405海里。总谷胱甘肽是计算使用校准曲线和表达为nmol毫克1蛋白质。GSSG测量,肝胞液处理4-vinylpyridine 1 h之前添加反应混合物。GSSG内容从标准曲线计算并表示为nmol毫克1蛋白质。减少谷胱甘肽含量是通过减去GSSG从总谷胱甘肽的水平。

2.8。Xenobiotic-Metabolizing酶的活动

细胞色素P450 2 e1 (CYP2E1)活动是由测量 - - - - - -nitrocatechol形成从 - - - - - -NP。肝脏微粒体添加到反应混合物分析缓冲区, - - - - - -NP,辅酶ii+、磷酸D-glucose-6 MgCl2•6小时2O, glucose-6磷酸脱氢酶,然后孵化为30分钟37°C。反应与10%柠檬酸和停止在10000 g离心5分钟。上层清液是用氢氧化钠中和。4-nitrocatechol,最终产品是监控波长535 nm (22]。

UDP-glucuronosyl转移酶(UGT)活动的决心使用修改后的方法Chariyakornkul et al。23]。反应混合物 - - - - - -在pH值8.5 NP, Tris-HCl缓冲区,MgCl2在37°C与微粒体preincubated分数5分钟。UDP-glucuronic酸添加到反应混合物,然后,这是孵化为20分钟37°C。与10%柠檬酸,停止反应后混合物当时在10000 g离心5分钟。上层清液与0.5 M氢氧化钠碱化。的共轭 - - - - - -在405 nm NP是量化。UGT活动,表示为pmol - - - - - -NP共轭形成最小1毫克1蛋白质。

谷胱甘肽年代转移酶(GST)活性进行了分析使用的方法Chariyakornkul et al。23]。反应混合物中含有磷酸钾缓冲在pH值为6.5,谷胱甘肽,CDNB,胞质分数。执行的反应是90年代在37°C。然后,吸光度在340 nm记录和计算使用的消光系数9.6 M1厘米1。

2.9。抗氧化酶的活动

确定SOD活性(24),含有黄嘌呤,胞质与反应混合物preincubated氮蓝四唑,EDTA,碳酸钠,BSA在25°C为30分钟。停止使用CuCl反应2添加黄嘌呤氧化酶和进一步孵化后25°C为20分钟。生产甲瓒决心波长560纳米。SOD活性被表示为单位毫克1蛋白质。

确定猫活动(25),反应混合物组成的H2O2和磷酸盐缓冲(pH值7.0)与胞质混合样品。猫的活动是由吸光度的减少H2O2在波长240 nm和表达为nmol H2O2最小值1毫克1蛋白质。

确定GPx活性(26),反应混合物Tris-EDTA缓冲区(pH值8)、谷胱甘肽,βnadph, t-BHP和GR与胞质混合分数。的减少βnadph GPx活性成正比的吸光度340海里。GPx活性表达为单位毫克1蛋白质。

确定GR活性(27),反应混合物中含有肝细胞溶质,GSSG,βnadph和磷酸钾缓冲pH值7.0。的吸光度下降βnadph在340 nm决心spectrophotometrically 37°C。具体活动表示为单位毫克1的蛋白质。

2.10。测定肝抗氧化和Xenobiotic-Metabolizing涉及APAP即代谢酶和转录因子在mRNA水平

解冻冷冻的肝组织,信使rna提取使用Purezol试剂(Bio-rad、大力神、钙、美国)。信使rna提取是反向转录cDNA使用高容量cDNA逆转录工具包(美国应用生物系统公司,培育城市,CA)。抗氧化剂和xenobiotic-metabolizing基因的RNA水平包括SOD1,猫,GCLC, GSTA, GPX1, GSR和核因子erythroid-derived 2-like2 (NFE2L2)进行评估定量逆转录聚合酶链反应(存在)使用特定引物与SensiFAST™SYBR®Lo-ROX工具包试剂(Bioline、伦敦、英国)QuantStudio™6 Flex系统(热费希尔科学、沃尔瑟姆,妈,美国)。表1演示了每个目标基因的引物序列。放大过程运行在95°C 2分钟,其次是40周期在95°C 5 s和60°C 35 s。目标基因的RNA表达水平正常化β肌动蛋白mRNA然后表现为褶皱感应使用∆∆Ct方法(28]。

表1
引物序列中存在。
2.11。统计分析

所有数据被表示为 。执行统计分析使用社会科学统计软件包(SPSS) 17.0版本软件(美国SPSS Inc .,芝加哥,IL)。团体之间的显著差异在每个实验分析了用单向方差分析(方差分析)其次是至少显著差异(LSD)测试。的值 被认为是具有统计学意义。

3所示。结果

3.1。植物和植物化学的成分无关

首先,我们比较了主要部件在WRBO和CRBO。总结,如图2、游离脂肪酸概要WRBO和CRBO非常类似的大量饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸。游离脂肪酸主要是油酸,其次是亚油酸(ω3)和棕榈酸,分别。植物化学物质通常存在于RBO如表所示2。除了γ-oryzanols,大量的维生素E,植物甾醇、类胡萝卜素和叶绿素在WRBO CRBO大于。总γ谷维素含量WRBO g(66.50毫克1RBO)高于CRBO g(56.74毫克1无关,β-sitosteryl ferulate作为一个专业γ谷维素。虽然CRBO包含更高的总数量的维生素E(1467 .24点μg g1比WRBO无关(1151 .41点μg g1无关,γ-tocotrienol维生素E是一个杰出的同种型无关。所有亚型的维生素E在CRBO高于WRBO,除了α生育酚和α-tocotrienol。此外,植物甾醇、类胡萝卜素和叶绿素,主要发现在食用油,被发现在CRBO大量。


图2
RBO主要游离脂肪酸组成分析的气相色谱分析-质谱法(含油量的百分比)。
表2
维生素E,γ谷维素、植物甾醇、类胡萝卜素和叶绿素无关。
3.2。王亚南投在APAP-Induced小鼠的肝毒性

APAP即过量会导致肝损伤、肝功能的变化参数APAP即感应后检查。APAP即过量显著增加APAP-treated组的血清ALT水平677倍相比,控制(表3)。WRBO治疗轻微降低血清ALT水平( )。而CRBO治疗和南汽在老鼠三小时后APAP即政府显著降低ALT水平相比APAP-treated单独组。政府仅投没有显著的影响。各种rbo对氧化应激的影响标记组成的丙二醛(MDA)、总谷胱甘肽含量和GSSG /谷胱甘肽比例也表所示3。MDA水平增加和减少总谷胱甘肽含量APAP-fed小鼠的肝脏。RBO单独治疗并不影响MDA水平。然而,APAP即管理,其次是CRBO或NAC喂食,可以减弱观察APAP即组MDA水平的增加( )。CRBO管理,NAC APAP-treated组恢复肝脏总谷胱甘肽的水平,这在谷胱甘肽再生NAC是最有效的。出乎意料,GSSG /谷胱甘肽的比例在所有组没有明显不同。这些结果显示CRBO王亚南属性的APAP-induced肝损伤。

表3
的变更在APAP-induced小鼠肝损伤和氧化应激标记管理各种无关。
3.3。RBO对小鼠肝Histomorphological APAP-Induced老鼠的变化

代表图像的H&E-stained肝脏部分如图1 (b)。对照组显示正常的肝脏出现肝脏中央静脉和肝小叶结构正常。中央静脉周围正常肝和血窦绳索。同样,从小鼠肝脏组织的部分处理RBO单独有类似肝histomorphological模式。相比之下,肝脏单独APAP-treated集团提出了一个大面积的肝细胞坏死和炎症。拥挤的中央静脉充满红细胞和包围与正弦扩张肝索。固缩和中性粒细胞和淋巴细胞浸润也明显发现。有趣的是,政府CRBO或NAC APAP即治疗后显示的改进APAP即肝毒性的存在轻微的肝坏死区域的恢复架构。

3.4。APAP-Metabolizing和肝脏抗氧化酶的活动

RBO解毒和抗氧化系统的有益效果如图所示3。APAP-metabolizing酶活性的变化包括CYP2E1和UGT无法观察到,在所有的治疗方法。然而,销售税明显的活动( )减少APAP-treated老鼠相比,控制。CRBO或NAC管理后,这种酶的活性显著增加( )三小时后APAP-treated相比单独组(图3(一个))。我们可以看到在图3 (b),数据表明,治疗APAP即引起显著减少肝脏抗氧化酶的活动包括SOD、CAT、GPx, GR与对照组的老鼠。政府投仅微不足道的增加的活动引起的肝脏中的每个酶相比,控制老鼠。此外,政府CRBO或NAC显著增加SOD, CAT, GPx和GR活动仅在肝脏与APAP-treated组。

(一)
(一)
(b)
(b)
图3
RBO政府对小鼠肝xenobiotic-metabolizing和抗氧化酶的活动。(一)APAP-metabolizing包括CYP2E1酶活动,与UGT,销售税。(b)抗氧化酶活动包括SOD、CAT、GPx和GR。结果表示为 ( )。 从车辆明显不同。# 从APAP即显示显著差异。CYP2E1:细胞色素P450 2 e1;UGT: UDP-glucuronosyltransferase;销售税:谷胱甘肽年代转移酶;SOD:超氧化物歧化酶;猫:过氧化氢酶;GPx:谷胱甘肽过氧化物酶;格:谷胱甘肽还原酶;APAP即:对乙酰氨基酚;RBO:米糠油;WRBO:白色米糠油;CRBO:彩色米糠油;南京: - - - - - -乙酰半胱氨酸。
3.5。APAP-Metabolizing和抗氧化剂反应基因的表达在肝脏

CRBO或NAC治疗提高销售税,SOD, CAT, GPx和GR活动APAP-treated老鼠的肝脏。因此,分析存在这些抗氧化酶基因表达和转录因子是执行和结果如图所示4。转录因子的表达NFE2L2和抗氧化反应的基因包括GSTA1 GCLC, SOD1,猫,老鼠GPX1, GSR增加美联储APAP即( )。管理WRBO、CRBO或NAC APAP-treated老鼠并不影响SOD1的表达,猫,GPX1, GSR基因单独APAP-administered组相比。治疗WRBO CRBO, NAC APAP即感应显示GSTA mRNA水平的增加相比单独APAP-treated组。GSTA mRNA APAP即与CRBO-fed组织中高度表达。此外,mRNA水平GCLC(酶催化谷胱甘肽的生物合成单元)的显著增加小鼠接受APAP即连同CRBO或NAC APAP即治疗组相比。有趣的是,CRBO治疗提高了NFE2L2氧化response-transcription因子基因( )在mRNA水平APAP-induced老鼠。这些结果表明,CRBO不仅提高了抗氧化性能的酶活性,而且在转录水平。


图4
RBO政府对肝脏的抗氧化反应基因的mRNA水平APAP-treated老鼠。结果表示为 ( )。 从车辆明显不同。# 表明APAP即显著不同。美元 从APAP即+ CRBO明显不同。NFE2L2:核因子erythroid-derived 2-like2;GSTA:谷胱甘肽年代转移酶A1;GCLC: glutamate-cysteine连接酶催化亚基;SOD1:超氧化物歧化酶1;猫:过氧化氢酶;GPX1:谷胱甘肽过氧化物酶1;GSR,谷胱甘肽还原酶;APAP即:对乙酰氨基酚;RBO:米糠油;WRBO:白色米糠油;CRBO:彩色米糠油; NAC: - - - - - -乙酰半胱氨酸。

4所示。讨论

在异常环境压力下,罗恩的生产过剩造成重大损害重要的生物分子。这种损害可能发生细胞结构和功能,并对几个病理影响的潜在影响。天然和合成抗氧化剂可以降低氧化stress-mediated疾病的发病率。抗氧化剂的研究活动从膳食纤维等各种生物活性化合物,酚类化合物,母育酚、植酸、植物固醇是越来越感兴趣的临床试验29日]。比较研究表明,彩色米糠中含有大量的植物化学物质等γ-oryzanols和维生素E比白人米糠和还显示更高的抗氧化活性30.,31日]。彩色米糠提取物显示抗增殖活动比布朗米糠提取物对MCF-7和乳腺癌mda - mb - 231细胞系(32]。此外,脱脂的紫米糠提取物可以抑制肿瘤出现前的病变形成carcinogen-induced hepatocarcinogenesis五周的大鼠治疗相比,白色的米糠中提取衰减的炎症和细胞增殖33]。尽管米糠据报道,研究比较rbo很少。森古普塔et al。34]报道的抗氧化效果改进RBO arsenite-induced氧化应激在老鼠的猫,SOD、GPx和GR活性和脂质过氧化的抑制作用。目前的研究表明,RBO获得彩色大米(Riceberry)也减少了小鼠的肝毒性,表现出抗氧化活动过量APAP即。

APAP即或 - - - - - -乙酰- - - - - - -氨基酸通常用于治疗疼痛和发烧35]。APAP即使用的推荐治疗很重要,因为过量浓度APAP即会导致氧化应激严重的肝损伤,导致急性肝衰竭。APAP即overdose-induced肝肝毒性是一个著名的药物引起的肝损伤。急性肝衰竭的最常见原因是在一些国家,取代病毒性肝炎(36]。广泛的氧化应激是APAP即肝毒性的特点在APAP即新陈代谢。APAP即主要是催化在肝脏的解毒UGT和sulfotransferases(饥饿)治疗剂量。然而,APAP即过量CYP2E1代谢的活性代谢物 - - - - - -乙酰- - - - - - -苯醌亚胺(NAPQI)和排泄的谷胱甘肽共轭形式销售税。过量NAPQI耗尽肝脏谷胱甘肽商店和目标蛋白加合物通过绑定他们的半胱氨酸组,尤其是线粒体蛋白质。线粒体电子传递系统的损伤导致活性氧的形成,线粒体通透性转换(MPT),氧化应激,最后肿胀的坏死(16]。

经典的肝组织损伤的机制肝毒素如APAP即是肝细胞酶泄漏诊断血清ALT(增加37]。ALT异常在APAP-treated老鼠在这项研究中观察到。CRBO APAP即ALT活动过量的增加减少。CRBO王亚南的NAC治疗相似,被广泛用作药物治疗肝衰竭APAP即中毒(38]。此外,肝坏死和失败从APAP即过量可能观察到的组织病理学改变。与ALT水平的结果一致,管理300毫克公斤1BW APAP即显著发达肝细胞坏死引起的横截面的肝组织,以前在老鼠身上所观察到的类似[39]。政府CRBO给肝脏部分近正常架构和正常肝细胞APAP-induced老鼠。脂质过氧化反应是氧化应激的结果之一被细胞内ROS浓度高。MDA是一个著名的生物标记产生的氧化应激反应的多不饱和脂肪酸过氧化反应(40]。生产过剩的MDA与APAP-induced组织损伤。结果表明,大大增加APAP-treated老鼠的肝脏MDA水平是减少政府CRBO或南京,来显示他们的属性来抑制脂质过氧化作用。这些发现暗示的可能性使用王亚南CRBO如图所示的显著复苏肝坏死,同时与降低血清ALT水平。

在治疗剂量,APAP即主要是转化为活性葡糖苷酸和硫酸配合UGT和饥饿,分别。APAP即也是略微代谢的细胞色素P450形成高活性物种NAPQI,谷胱甘肽与谷胱甘肽共轭容易解毒 - - - - - -转移酶在正常情况下。然而,饱和的解毒途径APAP即过量导致谷胱甘肽的耗竭和NAPQI生产过剩,主要由CYP2E1代谢,直接与细胞生物分子结合。绑定在线粒体的半胱氨酸残基的蛋白质会引起线粒体功能障碍,包括电子传递抑制线粒体氧化应激和线粒体渗透性转换。这导致减少能源生产,最后细胞坏死(41]。UGT和CYP2E1的结果表明,该活动并没有改变APAP-treated孤独和APAP即RBO处理组与对照组相比。Glucuronidation引起饱和度高毒性剂量,CYP2E1活动1小时后APAP即政府[长大41,42]。我们的数据表明UGT和CYP2E1可能不会参与王亚南投。然而,销售税增加活动在APAP-treated老鼠CRBO管理或NAC 3小时后。销售税表达活性高于其他xenobiotic-metabolizing和抗氧化酶由于低 NAPQI (15μ米),它提出了一个关键角色的销售税NAPQI解毒的谷胱甘肽形成APAP-GSH加合物(43]。这也是总谷胱甘肽相关内容。谷胱甘肽是一种重要的细胞抗氧化剂在细胞维持在一定水平(44]。总谷胱甘肽对小鼠肝脏的数量减少1小时后过量的APAP即300毫克/公斤体重稳步直到6小时,然后再生(39]。我们的研究结果证实,肝脏谷胱甘肽水平明显下降后6小时APAP即政府相比,汽车集团。CRBO或NAC治疗增加谷胱甘肽水平APAP即治疗后3小时。正如预期的那样,南汽,谷胱甘肽的生物合成的前体,可能允许更多的谷胱甘肽NAPQI解毒。此外,肝GSSG /谷胱甘肽比率在6小时后小鼠显著增加,这可能是由于在小鼠肝脏氧化应激(39]。不幸的是,GSSG的比率:谷胱甘肽在这项研究并没有显示出任何实质性的变化每组。谷胱甘肽可能被对乙酰氨基酚,而不是氧化自由基。有趣的是,结果表明CRBO治疗可以促进谷胱甘肽复苏,然后促进销售税APAP-treated老鼠活动发挥重要作用在NAPQI解毒的谷胱甘肽APAP-GSH形成加合物。因此,从CRBO hepatoprotection机制可能涉及APAP即新陈代谢与谷胱甘肽共轭,从而减少氧化应激。

SOD、CAT、GPx和GR是主要的内源性酶防御系统防止细胞氧化应激损伤的有氧(4]。结果表明,每个抗氧化酶APAP-treated小鼠组降低了活动由于过度活性氧的生产。这个建议他们APAP即肝毒性的预防至关重要的作用。治疗和CRBO NAC可以恢复的SOD水平,APAP-induced老鼠的猫,GPx和GR活动相比,仅APAP-treated组。SOD活性最高而其他抗氧化酶的活动。与SOD超氧化物的反应是一阶,最伟大的 对超氧化物浓度对活细胞暴露于氧气的国防45]。结果表明,CRBO具有抗氧化作用导致降低APAP即引起的氧化应激。

核因子红细胞两个相关因子2 (Nrf2)是一个关键的转录因子编码NFE2L2基因控制表达的抗氧化剂和二期xenobiotic-metabolizing基因调节正常和氧化应激的条件。活性氧激活Nrf2的离解Keap1因此把和绑定到抗氧化反应元素(是)在细胞核中,诱导反应基因的表达,如GSR GCLM, GCLC, GPX, HMOX, G6PD1 [46]。CRBO政府NFE2L2的mRNA水平显著增高,GSTA, GCLC APAP-treated小鼠的肝细胞。这些结果表明,CRBO不仅表现出抗氧化特性的生化活动水平,但这也是诱导基因表达的水平。因此,CRBO目标作为抗氧化是一种很有前途的代理。

不仅RBO含有丰富的多不饱和脂肪酸,还等植物化学物质的重要来源γ-oryzanols tocotrienols,维生素e和植物甾醇为平衡氧化还原性质提供健康福利(47]。尽管类似的脂肪酸概要,WRBO含有较高数量的γtocotrienols -oryzanols,而水平的天然维生素e,植物甾醇,类胡萝卜素和叶绿素在CRBO更高。根据浓度相等γ-oryzanols在这项研究中,rbo CRBO显示有效的抗氧化性能。这可能是由于更高水平的维生素E,植物甾醇和植物色素CRBO与WRBO相比。先前的报道表明,口服补充200毫克/公斤体重的tocotrienol富分数(1克包含41.02,6.58,9.96,和23.8毫克α-tocotrienol,β-tocotrienol,γ-tocotrienol,δ分别为-tocotrienol)基因和蛋白质表达的增加引起的小鼠肝GST同功酶(48]。口服的δ-tocotrienol 12周的300毫克每日两次显示功效大于安慰剂通过减少氧化应激标志物包括血清ALT、高敏c反应蛋白、MDA在非酒精性脂肪肝患者(49]。此外,在25毫克/公斤BW口腔喂食β谷甾醇调制肝功能酶、脂质过氧化反应和增加细胞内SOD和CAT活动碳tetrachloride-induced氧化应激和老鼠的肝毒性50]。类胡萝卜素也表明王亚南影响通过恢复APAP-treated老鼠的肝脏抗氧化酶水平后收到10毫克/公斤体重β胡萝卜素(51]。等植物色素,叶绿素的13.54毫克/公斤BW 50毫克/公斤BW pigment-protein复杂,可以降低MDA的碳tetrachloride-induced高程,血清ALT和AST活动也恢复了抑制肝SOD,猫,老鼠和GPx活动(52]。政府的γ-oryzanols在100毫克/公斤体重的每个RBO治疗组、CRBO-treated老鼠总tocotrienol获得大量的,δ-tocotrienol,β谷甾醇、类胡萝卜素和叶绿素(1702、95.58、9197、17.38和57.67μ分别为克/公斤体重)比WRBO-treated老鼠(1127、60.16、1732、9.74和14.33μ克/公斤体重)。这些每个化合物的浓度可能不会有效剂量如上述所示报告但可以协调活动CRBO APAP即改进的毒性。我们的研究表明CRBO可能是一个有前途的产品,因为它是一个证明抗氧化剂。

5。结论

比WRBO CRBO表现出更强的抗氧化潜力。管理CRBO减毒APAP即过量引起的肝毒性对小鼠通过抗氧化系统的激活和APAP即新陈代谢的中断恢复谷胱甘肽和增加销售税活动NAPQI在肝脏解毒。包括CRBO tocotrienols抗氧化植物营养素和植物化学物质,植物甾醇,类胡萝卜素和叶绿素。

数据可用性

没有数据被用来支持本研究。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

确认

我们要感谢Kurk碾米机,清莱RBO准备。这项研究工作是部分支持的清迈大学。我们也承认当地Lanna水稻的研发中心和大米产品,泰国清迈大学。这项研究是由研究人员和研究工业(RRi)泰国研究基金会(格兰特数量:PHD59I0088)和医学院,清迈大学(格兰特数量:bio - 2561 - 05403)。