文摘
胆红素被认为是人类最有效的内源性抗氧化剂之一。其血清浓度主要影响胆红素UDP-glucuronosyl醛酸转移酶活性(UGT1A1)。我们的目标是分析水飞蓟的潜在bilirubin-modulating天然多酚的影响(Silybum marianum),王亚南草。人类肝母细胞癌HepG2细胞暴露于主要的多酚类化合物分离牛奶蓟。基于在体外研究2 A和B 3-dehydrosilybins被选为最有效的化合物和腹腔内或口头申请七天C57BL / 6小鼠。之后,UGT1A1mRNA表达、血清、肝内胆红素浓度和lipoperoxidation在肝脏组织进行了分析。增加细胞内使用的所有天然多酚浓度的胆红素在atazanavir HepG2细胞相似的程度,一个已知bilirubinemia-enhancing代理。腹腔内的应用2,3-dehydrosilybins A和B(最有效的类黄酮在体外研究)小鼠(50毫克/公斤)导致的差别明显对这些UGT1A1信使rna表达( 的控制, )在肝脏和显著增加细胞内的胆红素浓度( vs。 , )。同时,明显降低lipoperoxidation ( 的控制, )在对待动物的肝组织发现,和类似的结果也观察口服治疗后。重要的是,这两个应用程序路由也导致相当高度的血清胆红素浓度( 和 控件的腹腔和口服后,分别 在这两种情况下)。总之,水飞蓟素中含有多酚化合物,特别是2,3-dehydrosilybins A和B,影响肝脏和血清胆红素浓度,以及lipoperoxidation在肝脏。这种现象可能导致王亚南水飞蓟素的影响。
1。介绍
胆红素、体循环中血红素分解代谢的最终产物,是一种强有力的抗氧化剂物质(1]。尽管几十年来胆红素一直被认为是一种有毒分解代谢的废物产品和肝脏功能障碍的一个不祥的征兆,其作为一个强大的保护分子(越来越多的被认识2]。在体外和在活的有机体内研究表明,胆红素可能抑制脂类的氧化1和有抗炎3,抗增殖4],antigenotoxic [5,抗诱变剂的6),甚至抗老化性能(7]。有趣的是,胆红素被报告为一个强有力的过氧物酶体proliferator-activated受体-α(PPARα)受体激动剂,因此作为一个真正的内分泌分子,与所有潜在的临床后果8]。临床证据是更重要的。胆红素,仅轻度升高时,已被证实能防止各种氧化应激相关疾病,包括心血管疾病、某些癌症和自身免疫或神经退行性疾病(2,9]。事实上,大量的保护作用温和的非结合的高胆红素血,如主题吉尔伯特综合症(良性高胆红素血),动脉粥样硬化疾病尤其是[已报告10]。
胆红素生产取决于血红素加氧酶(HMOX)活动,但系统性胆红素浓度主要影响肝脏胆红素UDP-glucuronosyl转移酶(UGT1A1),其biotransforming酶(11]。提出了部分抑制胆红素glucuronosylation作为一个明智的策略用于诱导“医源性”吉尔伯特综合症(12]。这实际上被证明是一个“副作用”几种药物中使用的各种迹象,atazanavir一般,他们的政府往往是与温和的间接胆红素浓度升高有关。据报道,令人惊讶的是,引起的高胆红素血atazanavir减少氧化应激的标记13和代谢疾病的风险因素14),以及内皮功能(15),但更安全的方法显然是需要的。
由于外源性物质用于临床医学常与潜在的严重副作用,天然化合物干扰UGT1A1肝生物转化系统似乎更好的策略引起轻度高胆红素血。基于稀缺的文献中报道的资料(主要是调查潜在的保健品/ herb-drug交互)的结果,似乎从水飞蓟素类黄酮可能调节这种酶。这种假设是基于事实,许多草药提取物包括水飞蓟素,水飞蓟的种子提取物(Silybum marianum(l)Gaertn),富含酚类底物的植物化学物质UGT1A1甚至展览UGT1A1-inhibiting活动(16- - - - - -18]。事实上,治疗前列腺癌患者高剂量的silybin (silibinin)与非结合的高胆红素血,这被认为是作者的不利影响等治疗(19]。中也发现了类似的发现丙型肝炎患者接受silybin治疗(20.- - - - - -23]。尽管大多数的实验报告以及一些临床数据显示它的有益作用,水飞蓟素通常被认为有一个微不足道的临床重要性(24]。有许多可能的原因:其中一个是定义糟糕的活性成分的内容以及个人纯类黄酮的生物特征属性不当水飞蓟素复杂(25,26]。水飞蓟素是一个混合的5大flavonolignans (silybins a和B, isosilybin silychristin,和silydianin) +花旗松素前体,以及其他小(图上的多酚类化合物1)[27]。其中,2,3-dehydroflavonolignans如2,A和B 3-dehydrosilybins拥有强大的生物活性(28- - - - - -32]。
因此,我们的研究的目的是探讨潜在bilirubin-modulating天然多酚的影响存在于牛奶蓟和相关化合物。
2。材料和方法
2.1。化学物质
水飞蓟素(包含13.0%的silybin 17.9% silybin B, silychristin 14.7%, 9.3% silychristin B + silydianin isosilybin 8.9%, 6.8% isosilybin B,花旗松素3.0%,2 1.9%,3-dehydrosilybin, 2 0.5%, 3-dehydrosilychristin, 6.5%的其他nonidentified 2, 3-dehydroflavonolignans,加上17.5%的其他物质(可能聚合物,对于细节的分析,看到补充数据和辅助数据1- - - - - -3),silybin AB(大约silybin的克分子数相等的混合物和silybin B)、槲皮素和芦丁(quercetin-3 -O- - - - - -β-rutinoside)都是购自Sigma-Aldrich(圣路易斯,密苏里州,美国);atazanavir来自圣克鲁兹(美国圣克鲁斯生物技术、达拉斯、TX)。Silybin A和B Silybin分离得到水飞蓟素(购自辽宁Senrong制药、盘锦,中国;生产批号。120501),如[33]。2 3-Dehydrosilybin 2, 3-Dehydrosilybin, 2, 3-Dehydrosilybin B是由氧化silybin silybin,分别和silybin B (34]。紫杉叶素水合物(92%)从Amagro购买(布拉格,CZ)和异槲皮苷(quercetin-3 -O葡萄糖苷,97%)制备芦丁(Sigma-Aldrich)使用高温α- - - - - -l-rhamnosidase从曲霉属真菌terreus不同的表达毕赤酵母属pastoris(35]。早期解离酶β葡萄糖醛酸酶和硫酸酯酶螺旋pomatia从Sigma-Aldrich获得。
2.2。细胞培养
人类肝母细胞癌HepG2细胞线是用于在体外研究(写明ATCC马纳萨斯,弗吉尼亚州,美国)。在MEM鹰培养基培养细胞,含10%胎牛血清,75厘米2培养瓶,在37°C,在5%的股份有限公司2的气氛。估计的胞内胆红素浓度,细胞被镀在10厘米培养皿和对待自然多酚溶解在DMSO(车辆;0.66%,v/v为24小时)。qPCR测量,细胞培养在24-well盘子和处理天然黄酮类化合物溶解在DMSO(车辆;0.66%,v/v)为4 h。
细胞系是验证在写明ATCC STR分析分布和同时reauthenticated年底前由一个外部实验室研究(Generi生物技术,Hradec Kralove,捷克共和国)。
2.3。MTT细胞毒性分析
5-dimethylthiazol-2-yl MTT (3 - (4) 2, 5-diphenyltetrazolium溴)还原试验以96 -格式是用于测定化合物的细胞毒性测试。HepG2细胞被播种到96孔板的密度 细胞/。24小时孵化后,细胞治疗24小时自然类黄酮浓度为0.1 -200μM溶解在DMSO(车辆;0.66%,v/v)。MTT试验测定spectrophotometrically 540 nm (TECAN。舒乐仪器垂询。布拉格,捷克共和国)。
2.4。RNA隔离和实时PCR
总使用5 ' PerfectPure RNA信使RNA分离培养的细胞装备和5 ' PerfectPure RNA组织工具包(埃普多夫,德国);使用高容量和cDNA生成RNA-to-cDNA大师混合(美国生活技术,卡尔斯巴德,CA)根据制造商的指示。qPCR为细胞培养进行使用SYBR™选择主混合(生命技术)。对于每一个反应,最后20μL成交量由10μL SYBR绿色PCR, 2μL(每个引物(补充表1),6μL 1/5稀释的RT产品。qPCR对肝脏组织进行使用TaqMan®基因表达分析工具(技术)。阈值周期(Ct)值进行了分析使用比较Ct(ΔΔCt)方法作为推荐的制造商(美国应用生物系统公司,培育城市,CA)。对数据进行归一化的表达式hypoxantin phosphoribosyl转移酶(产生HPRT),表示为多样性的变化控制的水平。
2.5。血清肝损伤的标志
肝酶(丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)活性测定的自动分析仪(模块化分析仪,罗氏诊断GmbH德国)使用标准的化验。
2.6。胆红素测定
测定胆红素的HepG2细胞和肝组织,生物材料被用在冰,然后用甲醇提取/氯仿/己烷10/5/1 (v/v/v)对PBS缓冲(pH值6.2)。较低的有机相随后提取到50μL在己烷碳酸盐缓冲(pH值10)。由此产生的极性液滴被加载到一个8反向阶段(卢娜3列μ米, ,美国Phenomenex托兰斯,CA),胆红素安捷伦使用高效液相色谱法测定1200用二极管阵列检测器(美国安捷伦,圣克拉拉,CA)如前所述[36,37]。胆红素的浓度计算nmol / g的湿纸巾或pmol /毫克组织样本的蛋白质或细胞培养,分别。
测定血清中胆红素,质/ MS方法。十μ2.5 L的血清混合μL的内部标准(中胆红素, )和脱去蛋白质的50μL 1%的甲醇,二叔丁基对甲酚的50μL抗坏血酸0.4%甲醇,200μL甲醇(pH值11)。五μL的上层清液加载Poroshell 120 EC-C18 2.1μ米 列(安捷伦),1毫米NH的梯度4F在水中(A)和甲醇(B)如下:60%的B B的变化在5分钟至100%,0.4毫升/分钟的流量和B的3分钟,保持在100%的梯度流量为0.5毫升/分钟。流就维持在0.5毫升/分钟直到梯度程序。B阶段在0.1分钟被改变了回60%,保持在60%,直到项目结束10分钟。质谱是记录在一个安捷伦6470 LC /回调(安捷伦)与电喷雾电离质/女士设备和多个反应监测以一种积极的方式。电喷雾电离源的条件下,气体流动,和潜力的质谱仪是手动调谐的高灵敏度和低信噪比分析物:离子喷涂电压3000 V;源温度、250°C;加热气体,8 L / min;300 psi喷雾器;鞘气体温度、400°C;鞘气流,12升/分钟; and nozzle voltage, 500 V. Within the total scan time of 10 min,米/z585.3→299.1,16个电动汽车碰撞能量(CE)在5.96分钟是胆红素和监控米/z589.3→301.2,20 eV CE中胆红素的6.084分钟。
2.7。HMOX活动分析
二十μL肝用(10%)是孵化15分钟37°C CO-free septum-sealed包含20瓶μL 150年μM血红素和20μL(4.5毫米NADPH,如前所述38]。空白的反应瓶含有磷酸钾缓冲NADPH。反应生成的CO和释放到瓶顶部空间量化了气相色谱法(GC)和减少气体分析仪(峰值实验室、山景、钙、美国)。HMOX活动计算pmol / h / mg鲜重和百分数表示的控制。
2.8。UGT1A1抑制试验
UGT微粒体样品的活动是由UGT-Glo™试验装备根据制造商的指示(WI Promega,麦迪逊,美国)。简而言之,微粒体与重组UGT1A1(0.0125毫克/毫升)和16毫米UDPGA和20孵化μ米多酶的底物浓度增加2,3-dehydrosilybins A和B在37°C为30分钟。然后,40μL(重组荧光素检测试剂包含D半胱氨酸是补充说,发光信号被允许在室温下稳定了20分钟。发光是读协同II板读者(美国VT BioTek)。数据分析使用曲线拟合方法与GraphPad棱镜(GraphPad软件,圣地亚哥,CA)。
2.9。丙二醛测定
组织匀浆丙二醛(MDA)是测量根据遗嘱(描述的方法39),做了一些调整。一个200μL整除的组织匀浆混合2毫升10%的硫代巴比土酸acid-trichloroacetic试剂(分别为15%和0.375)。混合物在水浴加热20分钟的95°C。解决方案被冷却到室温。反应产物(硫代巴比土acid-MDA复杂)通过添加3毫升的提取n丁醇上面的解决方案。pink-colored提取液的吸光度n使用分光光度计丁醇为532 nm(美国Tecan日出)。MDA的含量计算使用的摩尔消光系数 表示为一个百分比的控制。
2.10。2,3-Dehydrosilybin测定血清
2,3-Dehydrosilybin浓度血清样本确定早期解离后二期配合(硫酸盐和葡糖苷酸)。早期解离酶的活动(β葡萄糖醛酸酶和硫酸酯酶)被检查之前选择的葡糖苷酸和硫酸盐的分析。所有的样品都在重复测量。
血清样本的轭合物deconjugated在醋酸缓冲(50毫米,pH值5.0)通过添加β葡萄糖醛酸酶(440 U)与硫酸酯酶(35 U),孵化为2 h 37°C和600 rpm。反应混合物然后冻干,内部标准(2 3-dehydrosilychristin 4.8μg / mL, 150μL,在乙腈/ DMSO 1: 1)补充道。样本孵化(1 h, 37°C, 600 rpm)和离心机(15分钟),上层清液注入质(注入体积25μL)。
2.10.1。质条件
质色谱和质谱得到使用日本岛津公司声望系统DGU-20A3流动相组成的脱气装置,两个LC-20AD溶剂交付单位,SIL-20AC冷却autosampler, CTO-10AS列烤箱SPD-M20A二极管阵列检测器,加上lcms - 2020质量检测器和一个四极,配备了一个电喷雾离子源(日本岛津公司,京都,日本)。
血清样本的质和标准解决方案2,3-dehydrosilybin测量在Chromolith RP-18e ( )列(默克公司)和Chromolith RP-18e ( )precolumn(默克公司)(流动相: 乙腈,HCOOH 0.1%; 乙腈,HCOOH 0.1%;梯度:0分钟20% B, B 5分钟90%,6分钟90% B, B和8 - 10分钟20%;流量:0.4毫升/分钟,25°C)。2的浓度,3-dehydrosilybin血清使用校准曲线进行了计算。女士参数如下:ESI接口电压,4.5 kV;1.15 kV电压检测器;喷洒气流,1.5毫升·分钟−1;干燥气体流,15毫升·分钟−1;加热块温度、200°C;DL温度、250°C;-扫描模式,478.8 - -481.0米/z;和软件,LabSolutions版本。5.75 SP2(日本岛津公司,日本京都)。
2.11。动物研究
女性C57BL / 6小鼠(=每组至少6、8 w老)获得Velaz(布拉格,捷克共和国)获得水和一个标准的饮食随意。A和B的克分子数相等的混合物dehydrosilybins溶解在DMSO(车辆;5%,v/v)应用腹腔内,个人dehydrosilybins口头申请七天的剂量b.wt 50毫克/公斤。经过24小时的最后一个应用程序中,老鼠从他们的牺牲和血液上腔静脉为进一步分析收集。肝脏清洗和存储为块在氮之前使用。RNA分析,100毫克的每个组织立即被放置在1.5毫升microfuge管包含RNAlater和存储制造商的协议后,直到RNA进行隔离。
所有动物研究符合动物保健和使用的标准在实验和动物研究委员会批准第一医学院,布拉格查尔斯大学。
2.12。统计分析
所有的数据表示为 。根据他们的常态,通过分析学生的数据 - - - - - -测试或Mann-Whitney等级测试和克鲁斯卡尔-沃利斯和方差分析邓恩的修正。时被认为是具有统计学意义的差异值小于0.05。
3所示。结果
3.1。水飞蓟素类黄酮的影响及相关化合物HMOX UGT1A1表达式和活动HepG2细胞
在我们的在体外筛选研究,集中在评估可能的水飞蓟素类黄酮及相关化合物的调节效应HMOX1和UGT1A1表情,一系列广泛的化合物(图使用1)。基于MTT检测(表1),HMOX1和UGT1A信使rna表达分析的无毒+ 1/2无毒对HepG2细胞浓度。
重要的HMOX1信使rna超表达是观察槲皮素和异槲皮苷;另一方面,HMOX1出现在暴露于2,差别信使rna对这些3-dehydrosilybins A和B(图2)。更重要的是,HMOX的活动是调节不仅由槲皮素和异槲皮苷,也在暴露于水飞蓟素复杂本身的差别,以及silybins A和b对这些HMOX1信使rna表达2,3-dehydrosilybins A和B(图2)也反映了降低HMOX活动(图3(一个))。
(一)
(b)
重要的underexpressionUGT1A1信使rna HepG2细胞接触后发现克分子数相等的silybins A和B的混合物,槲皮素、异槲皮苷,花旗松素,和2,3-dehydrosilybins A和B(图2)。这些结果反映的抑制UGT1A1活动,确定为2,3-dehydrosilybins A和B (IC50的值 和 ,分别;图3 (b))。
3.2。水飞蓟素类黄酮及相关化合物的影响在HepG2细胞胞内胆红素浓度
调查是否水飞蓟素的影响类黄酮及相关化合物HMOX UGT1A1译成表型变化,我们分析了胆红素浓度24 h后HepG2细胞内单个化合物。
水飞蓟素类黄酮及相关化合物的最显著升高细胞内胆红素(图4)剂量依赖性的方式(数据没有显示)。有趣的是,细胞内胆红素浓度的增加引起的接触的2 A和B 3-dehydrosilybins甚至高于atazanavir造成的,一个已知的抑制剂UGT1A1 [40)(图4)。
基于这些在体外结果2 3-dehydrosilybins A和B的选择在活的有机体内研究。
3.3。2的影响,3-Dehydrosilybins A和B在老鼠体内的胆红素代谢
3.3.1。在血清浓度的2,3-Dehydrosilybins
2以来,3-dehydrosilybins低水溶性和穷人口服生物利用度可能导致临床效率低的水飞蓟素在人类中,我们首先测量浓度的2,3-dehydrosilybins血清来验证他们是否进入体循环。使用应用程序路由(即。腹腔内的口服2 3-dehydrosilybins(50毫克/公斤b.wt。)), 24小时之后,导致大量出现在全身的血液,血清浓度达到300 ng / mL (0.62μmol / L)(图5)。
3.3.2。肝HMOX1 UGT1A1 mRNA和表达式
然后我们分析的影响2、3-dehydrosilybin管理HMOX1和UGT1A1在治疗的老鼠的肝脏mRNA表达。治疗2的克分子数相等的混合物,3-dehydrosilybins A和B(50毫克/公斤b.wt。)腹腔内接种7天以上的差别导致了重大的对这些UGT1A1在肝脏mRNA表达( 没有变化的控制)HMOX1表达式(图6(一))。类似的结果观察口服治疗2,3-dehydrosilybin的差别(对这些UGT1A1信使rna表达 的控制图6 (b));虽然没有效果证明2,3-dehydrosilybin b .个人dehydrosilybins都没有任何影响HMOX1表达式(图6 (b))。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
3.3.3。细胞内和系统性胆红素浓度
腹腔内的应用2,3-dehydrosilybins A和B的混合物显著增加细胞内肝组织(胆红素浓度 , ,图6 (c))。更高增加口服治疗后观察2,3-dehydrosilybin ( , ;图6 (d)),而治疗2,3-dehydrosilybin B只导致一个温和但不是重要的海拔(图6 (d))。
腹腔内和口服的3-dehydrosilybins造成任何增加肝损伤的标记(ALT、AST和高山活动;数据未显示)。
与肝内胆红素浓度的结果一致,腹腔内管理2,3-dehydrosilybins A和B的混合物也显著升高血清胆红素浓度(27%; vs。 ;图6 (e))。甚至更明显的海拔口服治疗后观察血清胆红素浓度的2,3-dehydrosilybin (44%; vs。 ;图6 (f))。2,治疗3-dehydrosilybin B没有造成任何血清胆红素浓度(图的变化6 (f))。
3.3.4。肝Lipoperoxidation
治疗小鼠2,3-dehydrosilybins有一致的抑制性影响肝组织脂质过氧化反应。肝组织中MDA浓度显著降低后腹腔内混合的应用程序2,3-dehydrosilybins ( 的控制;图7(一)),同样的效果也观察口服后的2,3-dehydrosilybins A和B ( 和 分别控制;图7 (b))。
(一)
(b)
4所示。讨论
胆红素、胆色素几十年来只考虑肝脏疾病的一个不祥的征兆,已经重新审视作为一种强有力的抗氧化剂,免疫抑制,cytoprotective代理(2,9,10,41]。甚至单微摩尔的海拔系统性的胆红素浓度,仍在生理范围内,与大量减少心血管疾病的风险,癌症和炎症性疾病(42- - - - - -44),这个协会中一览无遗吉尔伯特综合症,具有温和的系统性的间接胆红素(海拔高度9,45]。这导致了建议诱导吉尔伯特综合症iatrogenically为了抑制氧化应激相关疾病的发展(12]。
最近的报道在我们的研究中,由于动态平衡,存在系统性与胞内胆红素浓度之间的相关性在肝脏(也可能在其他器官和组织)(37]。因此,重要的是要监控肝内胆红素浓度评估潜在的王亚南影响时,特别是当考虑到UGT1A1是主要的肝酶影响系统性的胆红素浓度(11]。UGT1A1 biotransforming酶重要肝不仅对胆红素也对其他多种内源性物质以及外源性物质,包括自然代理通常用作保健营养品,包括flavonolignans和黄酮醇的水飞蓟素复杂。事实上,抑制性影响UGT1A1 silybin报道,对水飞蓟提取物的主要黄酮类成分(46];事实上,治疗这种物质也伴随着显著的非结合的高胆红素血(19]。血清胆红素水平显著增加也在其他人类研究慢性丙型肝炎患者接受silybin治疗(20.- - - - - -23]。这些临床数据与我们的研究结果是一致的,即。,增加细胞内以及系统性的胆红素浓度对水飞蓟素类黄酮。重要的是要强调,这些影响实质上不同个体之间flavonoids-dehydrosilybins A和B是最有效的。
尽管水飞蓟素类黄酮生物利用度普遍偏低,有效的血清浓度的2,3-dehydrosilybins A和B被发现在我们的研究中(300 ng / mL(图50.62),对应的浓度μmol / L)。这个值完全符合silybin的平均血浆浓度峰值,达到后口服700毫克剂量的水飞蓟素(包含大约250毫克的silybin), 0.6μmol / L (46]。非常相似的等离子体silybin浓度是在另一个人的研究报告(0.4、1.4和4μmol / L后360、720或1440毫克的silybin管理每天7天),与相应浓度的肝组织(47),以及研究Barzaghi et al . (silybin等离子体水平的0.38μmol / L后政府的240毫克的silybin每日连续7天)(48),温家宝et al。(等离子体浓度为0.8μmol / L后口服600毫克的水飞蓟素)[49]。
此外,silybin证明强有力地抑制UGT1A1, IC50价值关联与临床相关的血浆浓度(46]。类似的抑制浓度为其他水飞蓟素类黄酮被他人也报道,尽管2,3-dehydrosilybins没有测试这些研究[50]。这些数据与我们的研究结果是一致的,UGT1A1 IC50值为2,3-dehydrosilybin 和血清浓度的平均值是0.62μmol / L。重要的是,我们发现UGT1A1 IC50值为2,3-dehydrosilybin甚至低于报道atazanavir (2.3μmol / L),著名hyperbilirubinemia-inducing药物(40表明这个flavonolignan bilirubinemia-enhancing潜力高。
虽然UGT1A1集成电路50值2,3-dehydrosilybin silybin略高于那些报道,2,3-dehydrosilybin最有效地增加肝细胞内和系统性的胆红素浓度。这样做的原因可能是2,3-dehydrosilybin还影响其他机制涉及肝脏胆红素代谢。这样的一个例子可能包括基底外侧的调制胆红素有机OATP1B1/3 anion-transporting蛋白质,也被水飞蓟素类黄酮(51]。
2 3-Dehydrosilybins连同其他2,3-dehydroflavonolignans,属于小类黄酮的水飞蓟素复杂,通常占所有flavonolignans的1 - 2%(1.8%准备使用在目前的工作;补充图3)。他们的生物效应,然而,可能是真正的临床重要性28]。这是由最近的观察,2,3-dehydrosilybins a / B显著抑制氧化应激秀丽隐杆线虫导致寿命延长(32]。虽然对胆红素代谢的影响并非调查在这项研究中,重要的是要注意,胆红素的延缓衰老的影响已经被证明是我们研究的另一个(7]。在这方面,同样重要的是要强调的抗氧化效果,3-dehydrosilybins观察在我们的研究中。的确,降低小鼠的肝脏MDA浓度处理2,3-dehydrosilybins可能是介导的,至少部分,通过增加细胞内胆红素浓度。因此这些抗氧化效果不可能直接相关的抗氧化活动flavonolignans本身,而是parahormetic行动更重要(52]。
5。结论
中包含的自然水飞蓟素flavonolignans水飞蓟和相关的黄酮醇,特别是2,3-dehydrosilybins A和B,影响肝脏和血清胆红素浓度,以及lipoperoxidation在肝脏。这种现象可能导致的王亚南影响水飞蓟素在许多观察,尽管并不是所有的临床研究。胆红素代谢的调节通过定义良好的天然多酚类物质可以代表一个安全chemopreventive方法对抗氧化stress-mediated疾病包括动脉粥样硬化、癌症、糖尿病、或炎性疾病。
缩写
| UGT1A1: | UDP-glucuronosyl转移酶 |
| HMOX: | 血红素加氧酶 |
| 产生HPRT: | Hypoxantin phosphoribosyl转移酶 |
| ALT: | 丙氨酸转氨酶 |
| AST: | 天冬氨酸转氨酶 |
| 高山: | 碱性磷酸酶 |
| MDA: | 丙二醛 |
| 集成电路: | 抑制浓度。 |
数据可用性
使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。
信息披露
研究的一部分的第68届年度会议上提出了美国肝病研究协会:肝脏会议,华盛顿,美国。资助机构没有参与这项研究的设计或收集、分析和解释数据,或书面的手稿。
的利益冲突
作者宣称他们没有金融或商业利益冲突。
作者的贡献
所有作者造成了数据分析和解释和阅读和批准最后的手稿。
确认
这项工作是GAUK赠款支持337815年SVV 260370/2018,和普洛古莱Q25 / LF1查尔斯大学的布拉格,捷克共和国;AZV 16 - 27317 a和RVO-VFN64165/2018来自捷克卫生部;和格兰特16 - 06008来自捷克科学基金会。
补充材料
补充材料:详细分析HPLC-MS方法测定水飞蓟素flavonolignans一起获得的数据分析,即。、详细的水飞蓟素的合成复杂的研究中使用。补充表1:引物用于基因表达研究。(补充材料)