文摘
的目标是。氧化应激参与腹腔疾病的发病机制是一个因素(CD),可能影响的疾病和celiac-related并发症。我们评估氧化过程的强度和抗氧化防御儿童乳糜泻的效率。方法。组我 )由CD无谷蛋白饮食治疗,患儿和组二世( )由传统饮食健康的儿童。抗氧化和氧化状态评估,测量血清总抗氧化能力(TAC),总氧化剂能力(TOC),氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)和氧化应激指标的基础上(OSI)。结果。在血清TAC没有明显差异,TOC, ox-LDL, OSI CD和儿童健康的儿童之间。聚类分析显示,该集团的CD不均匀的患儿血清TAC和TOC的水平。大约50%的这些孩子水平TAC < 1.3更易/ L和TOC含量> 0.35更易/ L。结论。严格遵守无谷蛋白饮食的CD的孩子似乎对维持oxidative-antioxidant平衡很重要。然而,需要进一步的研究来确定潜在的因素负责氧化应激增加一些儿童乳糜泻尽管坚持无谷蛋白饮食。
1。介绍
乳糜泻(CD)是一种自身免疫,对小肠炎症性疾病,发生在人与遗传倾向。这是一个常见的遗传性疾病,患病率从1:100 1:200在欧洲和美国人口1]。虽然没有精确的数据,这种疾病的患病率在波兰人口,似乎只有一小部分检测到所有的情况下。腹腔疾病的特征是遗传和环境因素之间的复杂的相互作用。这种疾病是由一个持久麸质不耐受,这是一个存储蛋白质中发现谷物。麸质实际上是由两个主要的蛋白质组:麦胶蛋白,也称为醇溶谷蛋白和麦谷。腹腔疾病麸质不耐症包括某些分数的醇溶谷蛋白、醇溶蛋白在小麦、黑麦secalin发现,大麦醇溶蛋白中发现大麦(2]。我们理解生化和免疫学方面和参与这些醇溶谷蛋白的毒性的机制(也有许多醇溶谷蛋白在谷物,包括大米和玉米,没有毒性)正在增长。然而,研究正在进行中,以更好地了解疾病的发病机制。粘膜损伤乳糜泻患者被认为是由先天和适应性免疫反应之间的相互作用摄入麸质。研究表明,醇溶蛋白序列包含地区CD发病机制中发挥重要作用的发挥细胞毒性或免疫调节活动。其他地区负责引发氧化应激和诱导促炎细胞因子的释放3- - - - - -9]。
氧化应激是由增加产量的活性氧(ROS),超过生理抗氧化系统的能力(10,11]。炎症和氧化应激由于活性氧的增加和减少的抗氧化防御似乎参与腹腔疾病的分子机制。它不能被排除在外,他们使患者CD和其他自身免疫性疾病(6,12- - - - - -14]。这似乎是特别真实的诊断或诊断但未经处理/不当治疗疾病(15,16]。
高效抗氧化机制、酶和非酶的保护身体免受自由基伤害。抗氧化酶包括,例如,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、谷胱甘肽还原酶(GR)、谷胱甘肽S-transferase(销售税)和glucose-6-phosphate脱氢酶(G6PDH)。非酶的机制包括,谷胱甘肽(GSH)、维生素C(抗坏血酸)、维生素E (α生育酚),β胡萝卜素、维生素A(视黄醇),类黄酮,和绑定proteins-transferrin,血浆铜蓝蛋白和白蛋白16]。一些非酶的抗氧化剂是必不可少的饮食成分,存在于许多食品。
总抗氧化能力(TAC)是一个完整的表达能力中和氧自由基,引发氧化损伤。TAC包括等因素,如尿酸(32 - 65%)、硫醇蛋白质组(10 - 50%),抗坏血酸(6 - 24%),维生素A和E(5 - 10%),和albumin-bound胆红素(7%)。尽管尿酸和硫醇代表TAC的最大比例的贡献,他们的抗氧化能力较低而维生素,这被认为是高效的非酶的抗氧化剂。标记确定氧化过程包括的强度,尤其,TOC(总氧化剂能力),测量血清中的总氧化剂能力,和ox-LDL(氧化低密度脂蛋白),表明脂质过氧化作用的强度(17]。
从临床的角度来看,CD的特点是临床异质性,范围从无症状到严重症状,发病率和死亡率增加。严格坚持一生无谷蛋白饮食是目前唯一可用,有效和安全的治疗乳糜泻(18,19]。
问题是是否使用一个严格的无谷蛋白饮食在CD足以维持患儿血清氧化/抗氧化平衡这些孩子。
这项研究的目的是评估氧化过程的强度和抗氧化防御机制的效率在儿童乳糜泻治疗无谷蛋白饮食。
2。材料和方法
进行这项研究是根据赫尔辛基宣言的原则和伦理委员会批准的研究所的母亲和孩子在华沙,波兰。知情同意了从研究参与者的父母和孩子年龄超过16岁。这项研究是作为法定的一部分进行任务醯亚氨号码OPK 510-25-48。
2.1。主题
研究了56个孩子,其中包括27个女生(48%)和29个男生(52%)7岁至18年,参加胃肠病学研究所的门诊母亲和孩子在华沙和胃肠病学儿童医院的门诊在什切青市“Zdroje”(SPS ZOZ“Zdroje”)。依照欧洲儿童腹腔疾病诊断儿科胃肠病学肝病学会和营养(ESPGHAN)包括在我组( )。这些孩子在一个严格的无谷蛋白饮食,就是明证缺乏血清IgA和免疫球蛋白anti-transglutaminase (tTG)抗体(至少在去年18]。对照组II包括24个健康的儿童,其血清学筛查检测是负的,谁没有任何慢性疾病史。
排除标准是急性和慢性炎症,食用含有与抗氧化活性物质,的膳食补充剂和慢性并发症,可能会增加氧化应激在儿童乳糜泻。
2.2。人体测量数据
儿童营养状况评估的基础上,体重和身高。体重(公斤)和身高(m)被用来计算身体质量指数(BMI)和体重(公斤)除以身高的平方(米2)。与体重指数BMI值比较规范,根据奥拉夫标准年龄和性别,从而获得BMI z分数,这是独立于年龄和性别的归一化相对体重指标(20.]。
2.3。血液采样和生化分析
对于生化测试,静脉血(3.0毫升)是在早晨小时禁食的病人。血液收集以通常的方式,但全血计数样本收集与肝素钠实际上管。为了获得等离子体,血液是离心机在4°C 2500×g 10分钟。血浆和血清样本冷冻(−70°C),直到测量IgA免疫球蛋白反tTG抗体(IgA tTG ab,免疫球蛋白tTG ab)和浓度的生化参数(TOC, TAC-max 4周,ox-LDL、维生素E、铁蛋白,和尿酸acid-max 6个月)进行。tTG抗体血清水平评估使用商业FluoroEnzymeImmuno分析工具包(Phadia、瑞典),和一个值低于7 U / mL被认为是消极的(21]。血清总抗氧化能力(TOC)和总抗氧化能力(TAC)评估通过比色/光度测定使用商用设备(LDN劳动Diagnostika Nord GmbH & Co .公斤,德国)。决定的TOC和TAC是基于过氧化物和过氧化物酶的反应后显色底物的颜色反应tetramethylbenzidine。TOC的分析灵敏度0.06更易/ L,和内部interassay变异系数(CV)分别为4.90%和7.33%,分别。TAC的敏感性为0.08更易与L和内部interassay简历分别为5.00%和6.92%,分别为(22]。
根据制造商的参考数据(LDN劳动手册Diagnostika Nord GmbH & Co .公斤,德国),TOC的期望值是< 0.35更易/ L,而TAC表明足够的抗氧化能力是> 1.3更易/ L和指示边缘抗氧化能力在1.0和1.3之间更易与L。同时,研究Drabko和Kowalczyk [23),健康的儿童有一个总抗氧化状态的平均值在1.3的水平更易与L。
氧化应激指数(OSI)被定义为TOC含量的百分比比TAC的水平。
氧化的低密度脂蛋白(ox-LDL)水平测定酶联免疫吸附试验(ELISA) (Immundiagnostik AG, Bensheim,德国)。内部和interassay发现变异系数小于5.7%和9.0%,分别。检出限为4.13 ng / mL。
维生素A(视黄醇)和E的血浆浓度(α生育酚)的高效液相色谱测定(高效液相色谱法、KNAUER、德国)的使用方法基于过程Zaman et al。24]。
血清c反应蛋白(CRP)的水平,铁蛋白,尿酸和总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL - c)、低密度脂蛋白胆固醇(低密度脂蛋白)和甘油三酯(TG)含量测定用标准方法Integra Cobas 400 +分析仪(瑞士罗氏诊断)。
2.4。统计分析
适当的区别意义的测试,如学生的t以及为变量正态分布和方差齐性以及Mann-WhitneyU测试变量和非正态的分布,被用来评估儿童之间的差异与CD和控制的人体测量和生化分析变量。
提出了数据作为变量的平均值和标准偏差与正态分布或中位数和四分位范围为变量和非正态的分布。Shapiro-Wilk测试用于测试变量的常态分布。
皮尔森相关系数(皮尔森)计算氧化和抗氧化状态指标和其他生化参数以及选择人体测量和临床变量。聚类分析与执行(CA)——方法识别组织的孩子不同的氧化和抗氧化状态。两个定量变量、TOC和TAC,以及定性变量组成员(CD /健康儿童)用于CA。 被认为是具有统计学意义。Statistica 12 PL用于统计分析。
3所示。结果
儿童学习的特点,提出了在桌子上1。
男孩和女孩的比例是相似的两组的儿童,在我组50% / 50%和45.8% / 44.2%组II。儿童乳糜泻在无谷蛋白饮食时间平均为7年。
两组儿童的年龄没有显著差异,体重或身高。尽管BMI儿童和体重指数z分数显著降低CD, BMI z分数的价值指向一个适当的营养状况的儿童从两组(BMI z分数<−1,+ 1 >)。
如表所示2没有明显差异,血清TAC, TOC, ox-LDL, OSI CD患者和健康的孩子。维生素A和铁蛋白水平明显高于CD患者与健康儿童( )。没有明显的差异意味着血清维生素E和尿酸水平在两组之间。
oxidative-antioxidative状态标记的血清浓度之间的相关性及临床儿童/生化参数与CD展示在表3。
一个积极的铁蛋白和TOC水平之间的相关性被发现( )和高密度脂蛋白胆固醇和ox-LDL水平( )与腹腔疾病群孩子。此外,维生素a和ox-LDL水平之间的负相关( )以及高密度脂蛋白和OSI ( 这一群体所示)。
基于聚类分析的执行方法,则三组(集群)的儿童不同的TOC和TAC水平包括两组儿童乳糜泻是确定的:CD1 ( 1.80)水平意味着TAC的更易/ L和平均TOC含量的0.167更易/ L;张( )与TAC / TOC含量的0.89更易更易/ L L和0.41,分别;第三组包括健康儿童( )水平意味着TAC的1.34更易与L和意味着TOC更易/ L(图0.29的水平1)。
聚类分析显示,该集团的儿童乳糜泻不均匀的血清TAC和TOC的水平,约50%的患者(CD2集群、 )与TAC水平被认为是适当的抗氧化剂防御不足(< 1.3更易/ L)和TOC含量表明增加氧化过程(TOC > 0.35更易/ L)(图1)。
CRP水平差异两张cd和孩子们呈现在图2。
儿童乳糜泻(CD1)与TOC和TAC水平范围内的期望值降低CRP水平(平均0.23;四分位范围0.12 - -0.34)相比,儿童乳糜泻(张)与血清TOC和TAC水平不是对应于预期值(平均0.41;四分位范围0.26 - -0.65)(图2)。
4所示。讨论
乳糜泻患者消费谷蛋白诱导活性氧的生产过剩,引发一连串的反应,引起氧化应激在小肠粘膜和全身的水平。氧化应激是负责重要的自由基破坏细胞结构,因此不利修改功能(25- - - - - -28]。许多研究已经进行评估选择标记的抗氧化和氧化过程在儿童乳糜泻(6,15,29日- - - - - -31日]。我们的研究的一部分,讨论无谷蛋白饮食是否足够维持血清氧化/抗氧化平衡儿童乳糜泻。这似乎值得怀疑的地方,尽管严格遵守饮食(超过12个月),一些乳糜泻患者仍然经历持续或复发难治性乳糜泻的症状(RCD) [32]。可用的文献中,很少有研究使用标记如TAC, TOC, ox-LDL, OSI评估氧化/抗氧化失衡在腹腔疾病的孩子。我们的研究表明氧化/抗氧化过程的强度没有差异评估基于上述参数之间儿童乳糜泻治疗无谷蛋白饮食和健康的孩子,虽然参数如铁蛋白和维生素a的水平包括在TAC在腹腔组显著提高。这可能表明,无谷蛋白饮食维持氧化/抗氧化平衡就足够了。然而,一群孩子经历氧化应激,尽管严格的饮食依从性,被发现在CD患者。
文献数据表明抗氧化潜能评估基于各种标记在肠粘膜和体液(血液、尿液)显著降低在新诊断乳糜泻患者与健康人相比,虽然氧化过程的强度较高(6,15,29日- - - - - -31日]。结果表明,醇溶蛋白扰乱pro−/抗氧化平衡通过活性氧的生产过剩不仅影响人的小肠粘膜(33]。一个有趣的观察,提出了由Stojiljkovićet al。15),表明粘膜病变的严重程度在乳糜泻患者显著相关的评估指标激进的损害。因此,一个积极的组织学病变的严重程度之间的相关性被发现肠道粘膜SOD活性以及LOOH(脂质过氧化物)的水平,和猫的活动,GPx, GR和谷胱甘肽的浓度与粘膜病变的程度负相关。似乎较低的抗氧化潜力麸质过敏症患者可能是由于,其中,增加抗氧化剂必要补偿需求升高活性氧的生产,从而防止其不利影响。肠道粘膜损伤引起的活性氧,导致其次受损的抗氧化营养素的吸收,也可能发挥重要作用[30.]。
无谷蛋白饮食通常是与临床相关的改进,消失的血清学标记特定的疾病,和小肠粘膜的再生乳糜泻患者。这应该是伴随着显著改善氧化/抗氧化平衡。无谷蛋白饮食的有益影响抗氧化状态被证明Ferretti et al。34]。作者表明,尽管血清TAC水平确实低乳糜泻患者使用无谷蛋白饮食与控制相比,这些水平相比仍明显高于新诊断的患者不是无谷蛋白饮食。Ferretti et al。相反,我们的研究显示乳糜泻患者之间没有显著差异意味着TAC水平无谷蛋白饮食和健康的孩子。它不能被排除在外,除了无谷蛋白饮食,饮食时间也很重要对于维护氧化/抗氧化平衡;然而,我们的研究表明在这方面没有明显的相关性。天然抗氧化剂的饮食似乎也发挥重要作用。记录,几个膳食成分发挥抗炎和抗氧化作用和对肠道上皮细胞的保护作用35- - - - - -37]。在我们的研究中,儿童乳糜泻的血清维生素A水平与对照组相比显著提高,α生育酚含量两组之间没有差别。Szaflarska-Poplawska et al。13]显示血清维生素A和E水平无显著差异之间的儿童乳糜泻治疗无谷蛋白饮食和健康儿童;然而,这些抗氧化剂的水平显著降低患者治疗与治疗CD。维生素E,氧自由基的清道夫,能保护多不饱和脂肪酸(PUFA),一个主要的结构部件的细胞膜过氧化反应(38]。之间的协同交互维生素E和维生素A对脂质过氧化是记录(39]。在我们的研究中,儿童这些维生素的摄入量与腹腔疾病可以影响缺乏显著差异不仅在TAC和TOC含量和OSI值也在ox-LDL水平之间的儿童乳糜泻和健康的孩子。这可能表明维生素A和ox-LDL水平之间的负相关组中发现与腹腔疾病的孩子。此外,我们还观察到高密度脂蛋白胆固醇之间的反向关系,证明抗炎和抗氧化活动,与OSI患者人群。然而,同时高密度脂蛋白胆固醇之间的正相关关系被发现和ox-LDL暗示HDL对氧化应激的影响与预期相反。然而,OSI似乎更好的定义氧化应激程度。
Sayar et al。29日)表明,IMA(缺血修饰白蛋白压力标记),TOS(总氧化剂状态),和AOPP(高级氧化蛋白质产品)水平明显下降后30个月的无麸质饮食,而TAC和SH巯基水平显著提高。同样,在研究Ertekin et al。40),血清一氧化氮水平在CD的孩子被发现是高于对照组,而这些水平被发现后回归实现无谷蛋白饮食。这些发现表明,氧化应激后退化的引入在乳糜泻患者无谷蛋白饮食。然而,我们在研究中发现,尽管严格遵守饮食,大约50%的儿童乳糜泻(张)TAC水平和高TOC水平相对较低,这将表明氧化应激。在同一组孩子,CRP水平高而儿童乳糜泻(CD1)和相对较高的TAC和TOC含量低,但仍参考标准的范围内。这些结果似乎证实了其他作者的研究结果。Stojiljkovićet al。15)指出,氧化应激也可能出现在儿童CD在无谷蛋白饮食,就是明证抗氧化酶的活性差异及谷胱甘肽(GSH)观察在这一组。Szaflarska-Poplawska et al。13]也观察到显著差异水平自由基的标记DNA损伤(8-oxodG DNA分离白细胞和尿液样本)与健康的儿童相比,儿童乳糜泻;然而,他们没有发现这些参数之间的这种差异在治疗儿童和麸质过敏症。同样,研究Odetti et al。30.乳糜泻)表明,氧化还原平衡坚持即使无症状。作者发现增加了标记的氧化损伤脂质(硫代巴比土acid-reactive物质和脂质氢过氧化物)和蛋白质(羰基组)血清的乳糜泻患者与健康人相比。根据作者,氧化还原平衡可能是造成的吸收不足,即使轻微的。因此,他们建议膳食补充剂与抗氧化分子可能会带来一些好处。这些结果表明,无谷蛋白饮食能够只是部分改善肠粘膜的功能,导致有关此主题的必要性进行进一步的研究。
我们的研究有一些局限性。首先,儿童的研究包括相对较小的团体,尽管与其他作者调查的。此外,组儿童乳糜泻是均匀的,因为所有孩子严格遵守无谷蛋白饮食就是明证血清抗体组织转谷氨酰胺酶的缺失。其次,数据内容的抗氧化剂,例如维生素A、C和E,或LC-PUFA(长链多不饱和脂肪酸)儿童饮食人失踪。然而,考虑到增加儿童维生素A水平与乳糜泻和维生素E水平两组相似,它可以假定这些孩子们的饮食平衡。
结论,严格遵守无谷蛋白饮食儿童乳糜泻维护oxidative-antioxidant平衡似乎是一个重要的条件,就是明证缺乏TAC的差异,TOC, ox-LDL, OSI层次之间的孩子由于腹腔疾病和治疗控制。然而,需要进一步的研究来确定潜在的因素负责氧化应激增加一些儿童乳糜泻尽管坚持无谷蛋白饮食。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突存在。
作者的贡献
所有作者都知道并同意手稿的内容,批准最终提交的版本,并同意被列出作为一个作者的手稿。所有作者的手稿直接参与的执行和分析研究。