文摘

目的。调查的影响Chamaecyparis obtusa(CO)对人类角膜上皮(HCE)细胞,小鼠实验干眼病(爱德)模型,和抗氧化的功效眼罩干眼病(d)的病人。方法。公司提取0.001%、0.01%和0.1%用于治疗HCE细胞,细胞生存能力,和生产抗氧化酵素,活性氧(ROS)进行评估。之后,公司提取或平衡盐溶液(BSS)应用于埃德。临床和实验参数测量在治疗后7天。此外,d患者被随机分配戴眼罩包含公司提取或安慰剂。临床参数进行评估。结果。HCE细胞的生存能力和抗氧化的酶表达显著提高治疗后公司提取0.1%。老鼠接受公司提取0.1%有明显改善临床参数。试验过程中,临床参数显著提高在4周后治疗组应用程序。结论。0.1%公司提取物能显著促进抗氧化蛋白的表达和活性氧的生产。此外,眼罩包含公司提取物能改善d临床参数。这些表明公司提取可能是有用的作为一个辅助选择d治疗。

1。介绍

干眼病是一种最常见的眼科疾病,导致不适症状,视力障碍,眼泪不稳定与潜在损害眼表面(1]。此外,干眼病是一种慢性眼部障碍影响了大约14.5%的世界人口包括17.9%的女性和10.5%的男性,和患病率持续上升2]。这个条件包括眼部炎症的病理表面,在T细胞是高度相关(3,4]。然而,该病的发病机制尚未完全阐明。

最近,这是认识到,氧化应激中起着显著作用在干眼病5- - - - - -8]。氧化应激是由一个失衡的生产活性氧(ROS)和生物系统的防御机制必要的能力来消除压力(9]。过度的氧化应激与眼部表面上皮损伤,以及泪腺的分泌功能下降(10]。然后破坏上皮细胞释放细胞因子,导致眼部表面炎症,导致干眼病(11]。

各种抗氧化治疗,如ω- 3必需脂肪酸,蓝莓组件,黄原胶,口服沙棘油,和绿茶多酚类物质,可以预防或治疗干眼病(5,8,12- - - - - -14]。在先前的研究中,我们展示了混合药用植物具有抗氧化和消炎的功效与氧化应激诱导的辐照短的波长发光二极管或浆果,压力在人类角膜上皮(HCE)细胞和小鼠模型实验干眼病(爱德)[6,15]。此外,我们还显示,眼镜包含药用植物提取物的抗氧化性质可以改善干眼病患者中主观和客观参数(16]。

Chamaecyparis obtusa(有限公司)是一个热带树种发现在日本和韩国的南部地区;物种有多种生物活性,包括细胞毒性,抗菌,抗真菌,抗氧化、抗凋亡、抗炎效果17- - - - - -24]。此外,尽管生物活性的精油有限公司不是完全理解,油量包含几种类型的萜烯(桧烯、柠檬烯、乙酸龙脑酯,冰片,a-terpineol,和elemol),所有这些已被证明发挥抗氧化和抗炎作用23,25]。

基于这些影响,我们假设公司提取有潜在益处治疗干眼病,类似于对氧化应激的保护作用和炎症在其他器官和组织。在目前的研究中,我们调查这些公司提取的作用在氧化应激和炎症标记物在HCE细胞和小鼠模型的临床参数埃德和干眼患者的疾病。

2。材料和方法

2.1。制备的叶子中提取

收集树叶的公司在韩国Jangseong省。收获后,新鲜的树叶用水洗和干使用强制空气在干燥室的温度下40°C了10天之后,干物质的含水量仍不到5%。干树叶被研磨到0.5毫米使用针式机的大小。

叶提取和超临界处理有限公司₂提取系统(ISA-SCFE系统,Ilshin公司、大田、韩国)的纳米生物研究中心Jangseong省。纯有限公司₂使用一个注射器泵应用。每个地面叶重100克和125克之间,放置在一个单独的房间和超临界提取;有限公司₂曾是主要的开采天然气,C₂H₃哦,是作为助溶剂,在接受了手术治疗的压力200酒吧26,27]。在提取过程中,压力,温度,和有限公司₂流量是通过调整调节阀控制。每个分离容器的温度设定在40°C,一个压力200酒吧,有限公司₂60毫升/分钟的流量和助溶剂3毫升/分钟的流量。参数优化使用进行预测和确定基于提取效果和操作性能。压力和温度进行了优化使用提取的实验设计,因为他们是至关重要的。经过2小时的提取时间,提取血管减压,提取收集。公司提取的特征是明显的黄色液体密度为0.954 g / mL。这是存储在一个干净的瓶−20°C到使用。

稀释的解决方案准备使用磷酸缓冲盐(PBS,在体外实验)或平衡盐溶液(BSS,在活的有机体内实验和临床试验)的浓度为0.001%,0.01%,0.1%。

2.2。细胞培养和生存能力

人类的猿猴病毒40永生的角膜上皮细胞系(HCE-2 crl - 11135;写明ATCC马纳萨斯,弗吉尼亚州,美国)通过28培养在37°C包含5%的湿润孵化器有限公司₂。他们保持在杜尔贝科修改鹰的介质(级联生物制剂,波特兰,或美国)。媒介是每隔一天更换和补充人类角膜增长补充(级联生物制剂)和100与100 U /毫升的青霉素μ克/毫升的链霉素(28]。

细胞生存能力是衡量使用EZ-Cytox分析工具包(Daeillab服务,韩国首尔),基于四唑盐水溶性甲瓒的乳沟succinate-tetrazolium还原酶(29日]。约,HCE细胞(2×10⁵细胞/)被播种在96孔板前24小时治疗和暴露于不同浓度的提取(0.001%,0.01%,0.1%),另一个1小时。此外,细胞(96 -孔板)添加到10μL EZ-Cytox试剂的,盘子是reincubated 3小时有限公司₂孵化器。在570纳米波长吸光度检测,厄尔×808微型板块分光光度计读者(美国BioTek Winooski, VT)使用。过氧化氢(H₂O₂;费舍尔科学、莱斯特、英国)被用作积极控制评估有限公司提取的影响细胞氧化应激后生存能力。使用公司提取细胞进行预处理浓度表示的前1小时暴露在H₂O₂(200μ米)。H₂O₂持续了30分钟。此后,使用EZ-Cytox测定细胞活力测定。公司extract-pretreated和H₂O₂治疗细胞用于其他在体外分析,每个试验进行了一式三份。

2.3。测量细胞内ROS生产

细胞内ROS生产监控使用dihydroethidium(她)试验设备(d - 23107;生命科技™,达姆施塔特,德国)。治疗后12小时在一个96孔板,这些细胞被洗了三次用PBS和孵化5μ在37°C M她在黑暗中30分钟;他们用PBS又洗了三次。细胞荧光量化使用荧光显微镜(Eclipse te - 300;尼康,梅尔维尔,美国纽约)的激发设置518 nm和605 nm的排放设定30.]。她荧光强度的量化使用图像软件(版本1.45;美国国家卫生研究院,马里兰州贝塞斯达)和表示为百分数规范化控制。

2.4。蛋白质的提取和免疫印迹分析

细胞细胞溶解在缓冲区里帕(9806号;细胞信号技术,丹弗斯,美国马)含有蛋白酶抑制剂鸡尾酒(Sigma-Aldrich Corp .,圣路易斯,密苏里州,美国)和二磷酸酶抑制剂鸡尾酒I + (Sigma-Aldrich Corp .)。一个NE-PER核和胞质提取工具包(78835号;热费希尔科学、圣何塞、钙、美国)被用来提取核蛋白质。

酶切的酶类的表达水平——(插件可以)1,血红素加氧酶- 1 (HO)、过氧化氢酶(CAT)和环氧合酶- 2 (COX)被免疫印迹分析检查。蛋白质浓度测定使用布拉德福德的过程。蛋白质从每个变量被十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳分离和转移到硝化纤维膜。膜在室温下孵化在屏蔽解决方案由5%脱脂奶1小时。然后他们被孵化与主抗体在一夜之间在4°C。样本清洗三次使用Tris-buffered saline-Tween-20(10毫米Tris-HCl, pH值7.6,150毫米氯化钠,Tween-20 0.1%);免疫反应性的乐队是然后使用EZ-Western Lumi Pico由增强化学发光免疫印迹检测试剂(Daeil实验室服务)上的发光图像分析仪(图像量化LAS4000迷你,通用电气医疗集团生命科学,小都,白金汉郡,英国)。

2.5。干眼的小鼠模型和实验过程

本研究协议批准Chonnam国立大学医学院研究机构的动物保健和使用委员会学校(制度iacuc - h - 2015 - 11)。所有在活的有机体内研究视觉和眼科学研究协会坚持声明使用动物在眼科和视觉研究。

女性C57BL / 6小鼠年龄在6到8周被用于这些实验。埃德被皮下注射诱导的小鼠模型0.2 0.5毫克/毫升莨菪碱氢溴酸盐(Sigma-Aldrich Corp .)一天四次(早上8点,11点,14点,17点)暴露在一个通风和环境湿度(30%3,31日]。老鼠被随机分配到五到六组基于局部治疗管理如下:(1)未经治疗的控制(UT),不暴露的浆果,压力或局部治疗;(2)埃德控制老鼠收到任何眼药水;(3)埃德小鼠接受BSS(美国爱尔康,沃斯堡,TX);(4)埃德小鼠接受公司提取0.001%;(5)埃德小鼠接受公司提取0.01%;(6)埃德老鼠接受公司提取0.1%。所有治疗组接受3μL的眼药水一天3次(早上8点、12点和下午5点)。以下临床参数包括撕裂体积、泪膜破裂时间(TBUT),角膜荧光素染色评分测定治疗后7天。诱导小鼠安乐死7天后浆果,压力,和多路复用immunobead化验和结膜ROS水平进行分析。

2.6。眼泪测量体积

眼泪体积测量使用苯酚red-impregnated棉线(Zone-Quick;昭和Yakuhin Kako有限公司,日本东京)3个小时最后莨菪碱注射后,如前所述[6,32]。线程被置于外眦,持续20秒。当线程因泪水湿了,它变红了。表达的撕裂,微米的红色线,测量使用显微镜(SMZ 1500;尼康,梅尔维尔,美国纽约)。标准曲线推导距离转换成基本库存解决方案的体积与一个已知的吸收体积(1500毫升0.9%的盐水结合5毫升的5 M氢氧化钠)超过20年代。

2.7。评价泪膜破裂时间、角膜荧光素染色

荧光素(1%;1μL)被灌输进下结膜囊;三个眨眼之后,TBUT被记录在几秒钟内使用裂隙灯活组织镜检查(bq - 900;Haag-Streit,伯尔尼,瑞士)钴蓝色的光。九十秒后,点状的角膜表面染色是蒙面的方式来衡量的。角膜是分为四个象限,每个单独的得分。角膜荧光素染色评分的强度计算使用分制评分:0,缺席;1,表面的点彩micropunctate染色与< 30点;2,点状的染色> 30点,但没有分散染色;3、严重分散染色,但没有积极的斑块/补丁;4、积极荧光素斑/补丁[3]。四个领域的成绩总结生成最终成绩,从0到16。

2.8。多路复用Immunobead化验

一个多路复用immunobead化验(Luminex 200;美国Luminex Corp .)、奥斯汀、TX)被用来测量浓度的白介素- 17 (IL),干扰素(干扰素),γ,肿瘤坏死因子(TNF)α和干扰素-γ全身的蛋白质——(IP) 10结膜,如前所述[28,31日]。组织收集和集中在裂解缓冲含有蛋白酶抑制剂30分钟。细胞提取物被离心机,享年14000岁在4°C 15分钟,和上层清液储存在−直到需要70°C。上层清液总蛋白浓度的决心,和25μL(每个样本用移液器吸取在试验板井中。井包含适当的细胞因子和趋化因子珠的混合物(美国Billerica的微孔,MA),以及小鼠单克隆抗体特定的混合物。接下来,上层清液洗了三次,应用生物素化的二次抗体混合物在室温下在黑暗中30分钟。反应被发现使用一个分析系统(美国xPONENT、奥斯汀、TX) streptavidin-phycoerythrin已被添加。组织细胞因子和趋化因子的浓度在计算样本与已知浓度的标准曲线进行比较。

2.9。测量结膜ROS生产

细胞内ROS水平测量使用DCF-DA试验根据制造商的协议,如前所述[6]。结膜是手术切除和洗用PBS和10μM DCF-DA(分子探针,尤金,或者美国);培养30分钟37°C。细胞颗粒进行了分析使用FACScalibur流式细胞分析仪(美国BD生物科学,圣何塞,CA)激发和发射波长的488和530海里,分别。DCF-DA荧光的相对变化表示为褶皱增加相比,在控制组织(结膜收获从老鼠并没有暴露在干燥剂压力或局部治疗)。

2.10。病人和研究设计

知情同意是获得所有的病人符合赫尔辛基宣言,和研究协议的机构审查委员会批准Chonnam国立大学医院(cnuh - 2015 - 232)。国际标准的随机对照试验(ISRCTN)数量ISRCTN10704205。

患者年龄在20至60年干眼病是招募。患者进入研究的合格标准如下:(1)一个或多个患干燥眼科眼部症状(> 3个月),如干燥、刺激、和烧灼的感觉;(2)眼部表面疾病指数(OSDI)评分> 15;(3)TBUT < 10年代;和(4)Schirmer测试(局部麻醉与应用程序)值小于10 mm 5分钟(16]。孕妇被排除在研究,(1)患者积极的眼睛和眼周的皮肤炎症,维生素A缺乏症(2),(3)眼部手术史的< 3个月前的研究,(4)戴着隐形眼镜的历史,(5)积极治疗干眼的历史(守时阻塞或使用消炎眼药水< 1个月前研究),(6)系统性疾病或药物可能导致干眼。

这项前瞻性研究包括了50个病人招募Chonnam国立大学医院2016年1月。患者被随机分配到治疗或安慰剂组。治疗组接受睡眠眼罩由外部支架与面具,包含公司提取额的内部框架的一部分。在安慰剂组患者有一个相同的帧不包含公司提取的面具。在研究过程中,参与者使用相同的面具,当他们晚上睡7个小时。考试进行基线和眼罩2和4周后的应用程序。在每个访问,每个主题进行了详细的眼部检查包括最佳矫正视力、裂隙灯活组织镜检查,OSDI, TBUT, Schirmer测试。测试参与者在每个访问10点到11点之间。为了安全起见,所有的病人也质疑关于任何眼部症状相关的眼罩。

主观的干眼症状评估使用OSDI得分(范围:0 - 100)33]。以下客观的临床参数进行评估:TBUT(秒)和Schirmer的测试(麻醉)34]。这些测试是由一个调查员(K.C.Y.),如前所述。TBUT评估使用裂隙灯活组织镜检查(bq - 900;Haag-Streit,伯尔尼,瑞士)和钴蓝色滤光片2分钟后2μL 0.5%的荧光素被灌输。这个测试是重复三次,计算平均值。Schirmer滴注法测试了5分钟后的2μL下降0.5%荧光素,0.4%盐酸奥布卡因被灌输在结膜囊。Schirmer标准的测试条被放置在眼角外侧为另一个5分钟,病人闭上他们的眼睛。湿润的地带的长度用毫米范围内测量。所有的参与者包括在分析完成了临床试验参与者没有辍学。合规监控了考官的每一次访问通过穿着时的日记。

2.11。统计分析

数据的平均值±标准偏差。社会科学统计软件包(SPSS)软件(版本18.0;美国SPSS,芝加哥,IL)是用于统计分析。克鲁斯卡尔-沃利斯测试Bonferroni事后分析是用来比较细胞生存能力,细胞因子和趋化因子水平,DCF-DA值各组之间的差异。正态分布的数据验证了使用Kolmogorov-Smirnov测试。统计差异撕裂体积,TBUT,角膜荧光素染色组中决定使用单向方差分析测试Dunnett紧随其后的事后测试(球形假设Mauchly的评估与测试,对于违反,εGreenhouse-Geisser统计的数据进行调整)。在临床研究中,以确保相似性与安慰剂治疗组在基线,一个独立的t以及执行。结果测量的变化在随访期内评估使用重复测量方差分析,其次是Bonferroni事后考验。一个值< 0.05被认为是具有统计学意义。

3所示。结果

3.1。H公司提取减毒₂O₂全身的细胞损失

见图1(一),公司提取0.001%、0.01%和0.1%的浓度没有显著影响细胞HCE的可行性。细胞生存能力明显下降后的阳性对照组暴露于200年μM H₂O₂(75.06%±2.98%, 与控制)。HCE细胞的异常在不同公司预处理组(0.001%,0.01%,和0.1%)97.72%±2.32%,97.85%±1.25%,分别为和94.70%±1.03%(所有 与控制和所有 与H₂O₂控制)。

3.2。公司提取了H₂O₂全身在HCE细胞氧化应激

图2(一个)说明了代表她的图像放大染色,以及相对荧光强度的分析。显著增加在荧光被暴露在200年之后μM H₂O₂。然而,与公司提取物显著降低预处理浓度的方式她强度(0.001%股份有限公司: 与积极的控制;0.01%股份有限公司: 与积极的控制;0.1%股份有限公司: 与积极的控制;和 和0.001%股份)。

3.3。影响公司提取物在抗氧化和抗炎的标记

如图3,HO-1 Prx-1的水平和猫接触H后明显下降₂O₂。然而,他们增加剂量依赖性的方式使用公司提取预处理后。后,cox - 2的水平就会升高₂O₂和公司提取0.1%组显著低于H₂O₂控制、0.001%和0.01%的公司提取组。此外,公司0.001%和0.01%组明显不同的阳性对照组。

3.4。眼泪体积

没有统计上显著的差异在撕卷组在基线(数据未显示)。七天后浆果,强调应用;意味着眼泪卷五组分别为0.046±0.014μL, 0.021±0.006μL, 0.022±0.004μL, 0.023±0.004μL和0.037±0.006μL分别UT, BSS, 0.001%, 0.01%, 0.1%的公司组织。眼泪体积的0.1%股份治疗组显著高于其他组(所有 ;图4(一))。

3.5。眼泪的电影,但

没有统计上显著的差异在TBUT组在基线(数据未显示)。浆果,压力被应用后七天,TBUT被发现1.52±0.16、1.62±0.12年代的埃德和BSS组,分别;这明显短于UT组(4.12±0.33, ;图4 (b))。有限公司0.01%和0.1%提取组(1.84±0.13、1.97±0.36年代,resp) TBUT值明显大于爱德( 和 、职责)和BSS ( 和 、职责)组。然而,0.001%的公司提取组从埃德和BSS组之间没有显著性差异TBUT。(1.68±0.14岁; 和 、职责)。

3.6。角膜荧光素染色

在基线,意思是角膜荧光素染色评分显示各组之间无显著差异(数据没有显示)。7天,角膜荧光素染色评分在0.001%股份有限公司集团是12.40±0.70;它显示与爱德相比无显著差异(13.80±1.32, BSS组)和(12.50±1.18, ;图4 (c))。公司提取0.01%组显示角膜荧光素染色评分显著低于爱德组(12.20±0.79, ),0.1%的公司治疗组显示角膜荧光素染色评分显著低于埃德,BSS, 0.001%和0.01%(10.20±0.92,所有公司团体 )。

3.7。结膜组织炎性细胞因子和趋化因子水平

结膜组织的炎性细胞因子和趋化因子水平在图所示5。干扰素的平均浓度γ为7.73±0.75 pg / mL的0.1%股份有限公司集团。这是明显低于爱德的浓度,BSS, 0.001%公司组(14.54±1.00 pg / mL, 12.84±0.72 pg / mL,和11.24±0.74 pg / mL , , 、职责)。0.01%的公司集团表现出显著降低水平的干扰素-γ比埃德组(9.76±0.86 pg / mL, );然而,水平不低于任何其他团体。

IP-10的平均水平是15.66±0.51 pg / mL, 15.14±1.12 pg / mL,和13.98±0.32 pg / mL的0.001%,0.01%,和0.1%的公司组织,分别经过7天的浆果,压力。公司集团0.1%水平显著低于埃德和BSS组(22.23±1.15 pg / mL和19.21±0.89 pg / mL, 在两种情况下)。有限公司0.001%和0.01%组显示水平显著低于埃德集团( , )。

IL-17和TNF -的浓度α较低的公司比爱德组治疗组,但没有显著差异。

3.8。结膜组织测量ROS水平

DCF-DA荧光强度的代表样本UT,埃德,BSS, 0.001%, 0.01%, 0.1%公司组织图所示6。各自的ROS水平100±0.00、153.33±5.09、142.27±5.10、140.63±5.00、121.80±2.56、106.50±3.68。治疗0.001%,0.01%,0.1%公司提取了明显更大的减少ROS水平相比,在爱德集团( , , 、职责)。此外,治疗有限公司0.01%和0.1%提取导致显著更大的减少ROS水平相比,BSS和0.001%的公司团体(所有 )。

3.9。症状,患者的泪膜和眼表面参数

两组之间未发现显著差异对基线特征(年龄、性别、视力OSDI得分,TBUT, Schirmer的测试成绩,和裂隙灯的发现;数据未显示)。

在安慰剂组,没有明显改善OSDI分数在研究;然而,在治疗组,OSDI分数后4周( )有了显著的提高,在基线和2周后(表1)另外,组间比较显示,OSDI得分显著低于治疗组随访4周后( )。

表2显示的TBUT值两组在随访期间。在治疗组,治疗4周后TBUT显著优于安慰剂组( )。此外,治疗组显示明显改善了基线后4周( )。

如表所示3Schirmer的测试显示,没有重大变化观察到治疗或安慰剂组。此外,两组之间没有显著差异观察在随访中。

4所示。讨论

公司已经认可的保护属性发挥antigastropathic,抗炎,抗氧化活性(35]。然而,鲜为人知的生物活性和潜在的临床意义对人类的眼睛的健康。目前的研究表明,公司可能会对眼睛有利影响和眼表面疾病。在目前的研究中,细胞生存能力降低了巧妙地组的0.1%。我们认为这可能是由于轻度毒性反应类似于一般物质的高浓度。然而,它并没有显示出显著变化的细胞生存能力在目前的研究。我们还表明,公司减少ROS生成和重新平衡体内平衡加氧酶和抗氧化酵素之间HCE细胞暴露于氧化应激,炎症和降低ROS水平在小鼠干眼模型。减少ROS的机制公司如下:酚类化合物已报告公司的主要成分之一(36]。酚类化合物的抗氧化性能与其结构特点相关,众所周知,是由于其作为直接ROS清除,减少,链断裂抗氧化机制(37]。

广泛的研究在过去的十年里已经表明,氧化应激在眼部表面疾病发挥了重要作用,包括干眼病(9,38]。例如,在体外研究表明,脂质和线粒体氧化损伤可能导致HCE炎症细胞(15,38]。此外,在活的有机体内脂质氧化损伤干眼患者的观察,以及那些有干燥综合征(39]。高氧化应激可能也解释了高发病率和更严重的干眼病在老年患者40]。我们之前的研究证实自然混合植物乙醇提取物的抗氧化效果,以及保护作用对浆果,眼表面的压力(6]。

在在体外本研究的一部分,公司提取Prx-1的表达增加,猫,HO-1剂量依赖性的方式。插件可以是一个新的家族灭活活性氧的抗氧化蛋白,从而保护组织免受氧化应激(41]。猫是一种有效的保护从氧化应激,HO-1 cytoprotective效应在各种病理生理刺激条件下,如氧化应激(42]。作为一个非常重要的酶在保护细胞免受氧化损伤,猫显示表达增加预处理后提取。考克斯酶包括两个主要的亚型,COX-1和COX - 2催化花生四烯酸代谢的前列腺素。Upregulation cox - 2是由于氧化应激炎症的共同特征。同理,cox - 2是由脂质过氧化作用刺激,它介导氧化DNA损伤(9,38]。在目前的研究中,cox - 2的表达有限公司组显著下降相比,阳性对照组。这些抗氧化蛋白表达可能增加细胞生存能力恢复了公司提取的结果。此外,分析在目前的研究表明,公司提取物能显著降低活性氧的生产。这些发现表明公司提取可以保护HCE细胞氧化损伤通过重新加氧酶和抗氧化的酶之间的平衡,从而减少ROS水平。

几种抗氧化剂显示有益作用在干眼的小鼠模型,以及在干眼患者(4- - - - - -6,16]。方面的结果从我们以前的研究中,氧化应激过程中发挥了显著作用眼表面炎症的发展。因此,我们假设局部抗氧化提取物可能是有益的治疗干眼病。因此提示,我们评估的临床疗效有限公司提取小鼠干眼模型。

尽管连续暴露在浆果,压力和严格的抗胆碱能治疗各种临床参数包括撕裂体积,TBUT,角膜荧光素染色评分显示临床改善7天0.1%股份有限公司集团与埃德和BSS组。此外,0.01%的公司集团TBUT增加和减少角膜染色分数浆果,诱导后的7天压力相比爱德组。我们也评估了炎症标记物干扰素-γ和IP-10多元immunobead试验表明,眼药水包含公司提取眼表面的减少炎症。先前的研究已经证实,公司提取起到抗炎作用通过调节前列腺素E的生产₂和肿瘤坏死因子-α通过cox - 2基因表达途径(21]。

广泛的文献回顾显示,干扰素-γ最经常增加炎症标记的眼泪干眼病患者,干眼病的发病机制中扮演着重要角色,与免疫调节机制;例如,它增加辅助1型细胞(43]。IP-10干扰素-γ/α和肿瘤坏死因子α诱导趋化因子高表达的各种细胞,包括激活T淋巴细胞、NK细胞和单核细胞44]。我们现在的发现支持了最近的研究结果表明,局部抗氧化剂也有抗炎活动在小鼠干眼模型(6]。此外,ROS水平检测使用DCF-DA尤其是有限公司0.01%和0.1%提取组低于埃德和BSS组,表明公司从浆果,提取保护眼部表面应力通过小鼠干眼模型中的抗氧化防御机制。

最后,我们使用眼罩包含公司提取证明干眼病患者的抗氧化效果。OSDI分数和TBUT都显著提高4周后治疗组的戴着面具。此外,两组之间的显著差异观察OSDI分数和TBUT。总的来说,这些发现表明,本研究中使用的面具包含公司提取提供了主观和客观改善干眼参数,可能通过抗氧化防御系统。

我们的发现与之前的研究结果,表明抗氧化和抗炎剂的功效在改善干眼的参数(3,5,16]。例如,四个天然植物乙醇提取物的混合物降低炎性细胞因子的水平和眼表面的氧化应激标记小鼠干眼模型和抗氧化剂眼镜包含提取物的药用植物改善OSDI分数和TBUT干眼患者的疾病(6,16]。此外,ω- 3多不饱和脂肪酸,如抗氧化剂,已发现可有效改善干眼症状(45]。此外,金正日et al。46维生素A)报道,局部滴眼剂有助于改善视力模糊,TBUT, Schirmer的测试,发现印象细胞学干眼患者的疾病。

总之,公司提取,特别是在0.01%和0.1%的浓度,可以保护你的眼部表面从浆果,压力和合成氧化应激。此外,穿一个包含公司提取物的抗氧化面膜改善干眼症状,以及干眼的临床参数。公司提取可能作为辅助治疗干眼病的治疗选项。

信息披露

本文提出了在下午2016年会暨第五届亚洲角膜社会双年展2016年科学会议。投资者没有参与研究设计、数据收集和分析,决定发表或手稿准备。

的利益冲突

作者都没有任何利益冲突披露。

确认

基础科学研究项目支持的研究是通过韩国国家研究基金会(NRF)由科技部,ICT和未来规划(2017 r1a2b4003367),森林科技项目(项目号S121313L50100)朝鲜森林服务,CNUH生物医学研究所(中国国际广播电台13906 - 22)。