文摘
不平衡的氧化剂和抗氧化剂在心肌梗死地位发挥了重要作用。本研究结合功能型和靶向制剂的临床试验与体内心血管损伤和缺血模型。我们试图确认不平衡的氧化剂和抗氧化状态的协会与冠状动脉慢性完全闭塞(首席技术官)399年非常古老的病人(80 ~ 89年),研究纯化多糖的潜在治疗价值从内皮角质层gigeriae加利(PECGGp)。我们分析了水平循环超氧化物歧化酶3 (SOD3)、一氧化氮(NO)、内皮一氧化氮合酶(以挪士)和丙二醛(MDA)在非常老患者冠状动脉首席技术官。SOD3水平,以挪士,MDA在心肌梗死大鼠心脏组织测量。SOD3水平,以挪士,没有降低()和MDA水平增加()。以挪士PECGGp治疗水平的提高SOD3,没有()在心脏组织,减少MDA的水平()。PECGGp可能抑制不平衡的氧化剂和抗氧化剂在心肌梗塞的地位通过抑制MDA水平和提升,以挪士,SOD3水平。PECGGp可以被视为一个潜在的治疗代理很老患者的冠状动脉首席技术官。
1。介绍
一氧化氮(NO)的关系障碍信号通路和心肌梗死的风险已被确认1- - - - - -3]。没有生物活性,减少活性氧水平升高导致损伤冠状动脉(4]。因此,没有规定可以预防心肌梗塞的新颖的治疗目标和充血性心力衰竭5,6]。
NOS的遗传缺陷可能导致心脏衰竭(5]。体外反搏治疗冠心病患者增强抑制动脉粥样硬化病变的发展通过刺激NOS和信号通路(7,8]。号在心肌显示异常的分子靶点,没有监管nitroso-redox平衡。号可能是心脏病患者的治疗选择(9,10]。
干预通过抑制活性氧的生成或增强内源性抗氧化酶可能限制梗死大小和减弱心肌功能障碍(11- - - - - -13]。提高冠心病患者受损的MDA水平没有生产和MDA水平显著升高在充血性心力衰竭患者14- - - - - -17]。相关的研究提出MDA浓度薄fibroatheroma,复杂的动脉粥样硬化斑块,动脉粥样硬化斑块不稳定和心肌梗死的主要原因。Anti-MDA可以用作发展潜力antiatherosclerosis疫苗(18]。
超氧化物歧化酶(SOD)可以调节活性氧水平并没有显著增加生物活性氧化应激。抗氧化酶SOD的表达减少心血管损伤和antisuperoxide形成中发挥了重要作用,抗氧化应激损伤,动脉血管生成。氧化应激升高活性氧参与动脉粥样硬化和心脏衰竭通过抑制生物活性的血管壁(19- - - - - -22]。SOD是主要抗氧化酵素的墙壁动脉和冠心病患者的严重破坏。SOD活性下降导致没有生物利用度的减少,导致高水平的冠心病患者的氧化应激。没有生物利用度的减少可能促进冠状动脉动脉粥样硬化的发展23,24]。基因转移的SOD提升主动脉内皮修复和预防动脉粥样化形成。草皮被视为主要调制器没有生物活性,可能有潜在的治疗效果在预防或逆转心血管损伤和缺血性心力衰竭。然而,小说自然草皮催化剂在氧化应激是更有价值的25,26]。
冠心病患者主要接受经皮冠状动脉介入是老年的更多。闭塞动脉之间的协同试验和经皮冠状动脉介入与紫杉和心脏手术(语法)试验证明,主要经皮冠状动脉介入不减少主要心脏不良事件的发生率和可能导致缺血性心肌损伤率增加的复发患者的心肌梗死冠状血管再生和重复冠状动脉慢性完全闭塞(首席技术官)。冠状动脉搭桥手术是侵入性比主要经皮冠状动脉介入和执行在老年患者更严重的冠心病(27- - - - - -30.]。
我们的研究结果表明,内人类脐带间充质干细胞改善左心室的射血分数和减少梗塞大小非常非常古老的冠状动脉CTO患者(31日,32]。然而,主要经皮冠状动脉介入程序的时间和有放射性皮肤损伤和急性肾损伤的风险。冠状动脉首席技术官的主要经皮冠状动脉介入手术涉及的主要动脉解剖和穿孔的风险因素动脉解剖和心脏填塞的严重并发症主要经皮冠状动脉介入(28]。因此,还需要进一步的研究来评估潜在的小说在很老的非侵入性治疗冠状动脉CTO患者。本研究旨在证明不平衡的氧化剂和抗氧化状态的协会非常古老的患者的冠状动脉首席技术官和调查潜在的治疗和预防纯化多糖的值从内皮角质层gigeriae加利(PECGGp)。
2。对象和方法
2.1。研究人群
这项研究是通过徐州医科大学和大学附属医院伦理审查委员会根据中国法律、法规,并从参与者获得知情同意是根据《赫尔辛基宣言》。我们研究了连续399非常古老的接受冠状动脉造影的患者(232人;年),从2003年1月1日至2011年12月31日止。入选标准包括:(1)年龄≥80岁,(2)至少一船疾病或一个冠状动脉首席技术官,和(3)心绞痛症状和/或缺血性心脏病。
排除标准(1)最近使用的抗氧化剂补充,(2)不受控制的高血压,(3)急性心肌梗塞,心肺复苏术(4),(5)严重室性心律失常、急性冠状动脉综合征(6),(7)心原性休克,房颤(8)、(9)急性心力衰竭、中风(10),(11)免疫介导性疾病,急性和慢性肝脏疾病(12),(13)血液疾病,恶性肿瘤(14),(15)严重的肾功能损害,(16)急性和慢性炎性疾病,(17)严重碘化对比材料反应,甲状腺机能亢进(18),(19)严重的阻塞性肺疾病,(20)透析,(21)严重贫血,严重的外周动脉疾病(22)。
2.2。研究协议
患者分为有控制(CON)组(),单船疾病(圣)组(),多血管疾病(MVD)没有首席技术官集团(),MVD与首席技术官集团()和MVD与多个CTO集团()。冠状动脉病变直径狭窄< 50%包含在诈骗集团。圣言会被定义为一个冠状动脉狭窄≥70%。MVD被定义为一个主要冠状动脉,狭窄≥70%或左主干狭窄≥50%。首席技术官的诊断是基于孪动脉完全闭塞,collateralization远端血管的腔的直径狭窄100%与心肌梗死溶栓流0级,和持续时间≥3个月的阻塞。首席技术官的树桩可以被定义为锥形。最后显示的时间估计首席技术官在冠状动脉造影图像非常古老的病人,心肌梗死、急性冠脉综合征或劳累型心绞痛和冠状动脉侧枝血管造影术(30.,33]。左心室射血分数数据收集从二维超声心动图。左心室射血分数是分类如下:一级(≥55%);二级(40%至54%);三级(30%至39%);和第四等级(30%)(34]。
2.3。冠状动脉造影和超声心动图研究
患者接受300毫克阿司匹林负荷剂量以及600毫克的氯吡格雷后血液样本的集合。冠状动脉造影是通过股动脉或径向广泛性、方法。在一些病人执行双边动脉血管摄影。冠状动脉血管造影与专用的冠状动脉分叉分析计算机系统(Qangio®XA, 7.3,,医疗成像系统BV、莱顿、荷兰)。分叉病变分为4个片段:中央分岔段的远端部分主要血管,近端部分主要血管,侧枝[35- - - - - -37]。冠状动脉血管造影定量分析了由2个独立的心脏病专家经验和盲目的所有受试者的身份和临床特点。差异解决了三分之一的心脏病专家的共识。根据美国超声心动图学会的标准,一个完整的多普勒超声心动图研究是进行心电图同步由两个独立的心脏病专家对所有受试者的临床试验数据也不清楚描述(31日]。
2.4。等离子体没有和以挪士
病人的血液被卷入肝素化试管,离心机(1000 g×10分钟在4°C),并存储在−70°C。硝酸盐亚硝酸盐降低了硝酸还原酶,血浆水平的量化使用紫外分光光度法(545海里),后跟一个PicoGreen测量。结果表示为μmol / L (38]。
以挪士水平表示为pg / mL,这个试验的范围为0.156到1000 pg / mL。在禁食EDTA-anticoagulated得到了血液样本。血液样本在1200转离心10分钟在4°C和存储为化验−80°C。每个重复的血液样本进行分析,整体intra-assay最佳计算变异系数是3.6%。所有血液样本检测中心实验室和等离子体的浓度以挪士被σ化验的夹心酶联免疫试剂盒根据生产指令(39]。
2.5。测定MDA和SOD3水平
血浆MDA含量测定的高效液相色谱法和荧光检测系统(日本岛津公司、日本)和激发了532海里。MDA的样本被孵化与2-thiobarbituric酸溶液发生反应两个小时60°C。血浆MDA水平表示为nmol / L (40]。SOD3的血样化验离心机在3000 rpm 15分钟。等离子体SOD3活动是由使用酶联免疫吸附试验根据制造商的指示。RANSOD-Randox SOD3的化验设备,英国。从分析的结果表示为U /毫升(41]。
2.6。的制备和纯化多糖从内皮角质层Gigeriae加利
内皮角质层gigeriae加利制备和纯化根据我们的出版程序(42]。简而言之,内皮角质层gigeriae加利被磨成粉末和粉末脱脂形成粉末预处理。10 g的粉末预处理抽出使用蒸馏水和上层清液deproteinated和离心液买得起水溶液内皮角质层gigeriae加利。内皮的角质层gigeriae加利纯化diethylaminoethyl纤维素52色谱法和交联葡聚糖®g - 100。的水溶液内皮角质层gigeriae加利被添加到列diethylaminoethyl纤维素52。的碳水化合物洗脱柱使用phenol-sulfuric酸测定方法。一多糖含水率进一步收集和纯化获得纯化多糖从内皮角质层gigeriae加利(PECGGp)。
2.7。评价心血管PECGGp活动
根据我们的出版程序(42),成年男性Sprague-Dawley老鼠被随机分为5组(每个):A组(对照组),B组(PECGGp-untreated模型组),C组(阳性对照组),D组(PECGGp低剂量组),E组(PECGGp高剂量组)。A组胃强饲法于0.9%氯化钠(25毫升/每公斤体重)。B组给予胃强饲法0.9%的氯化钠(25毫升/每公斤体重)。C组与普萘洛尔治疗胃30毫克/公斤/天。D组和E与每日剂量的胃强饲法PECGGp(80和240毫克/公斤),分别。14天之后,所有大鼠皮下注射治疗与异丙肾上腺素(5毫克/公斤/天)连续两天开发心肌梗死。左心室射血分数是评估使用核磁共振成像。
2.8。免疫组织化学SOD3评估,不,以挪士,MDA, Syndecan-1,核转录因子Erythroid-2-Related因子2 (Nrf2) dt -鼠心肌
鼠心肌匀浆的分离在冰冷的均化缓冲(磷酸盐缓冲剂,0.05米的pH值7.4)由实验室匀浆机。没有和MDA水平取决于使用硫代巴比土酸减少硝酸盐和比色方法。以挪士和SOD3活动进行评估与黄嘌呤氧化酶和化学色度法方法根据制造商的指示42]。心脏组织环磷鸟苷含量测定的酶免疫分析法试题库(研发系统,Inc .明尼阿波利斯,MN)。心肌样本的反应与一只兔子Nrf2多克隆抗体(1:100;圣克鲁斯生物技术公司)。免疫组织化学的syndecan-1心肌部分和执行部分与特定抗体染色syndecan-1 (BD生物科学)。
2.9。统计分析
所有数据被量化为平均值±标准偏差。成对的学生的t以及为每一对数据和单向方差分析应用比较方法。的小于0.05被认为是具有统计学意义的价值。统计程序进行分析(SPSS 13.0, SPSS . n:行情),芝加哥,伊利诺斯州,美国)是用于所有统计分析。
3所示。结果
3.1。患者的基本临床特征
患者的基本临床特征相似(表非常古老的病人1)。76个病人经历了心力衰竭的纽约心脏协会iii iv功能类。病史是相似的和一致的对病人非常古老。非常古老的病人从医院出院在阿司匹林、氯吡格雷、长效口服硝酸盐,ACEI / II受体阻滞剂,β受体阻滞剂,他汀类药物。
3.2。等离子体水平的循环不,以挪士,MDA, SOD3非常古老的冠状动脉狭窄患者
的等离子体水平不,以挪士,SOD3明显减少与一个首席技术官组MVD与MVD相比没有首席技术官集团和进一步降低与多个CTO组MVD与MVD相比有一个首席技术官集团()。血浆MDA水平明显升高与一个首席技术官组MVD与MVD没有首席技术官集团和进一步增加MVD与多个首席技术官与MVD相比有一个首席技术官集团()(表2)。
3.3。水平的不,以挪士,MDA, SOD3和纽约心脏协会功能类的病人
的等离子体水平不,以挪士,SOD3在第三组相比,二组明显减少,进一步减少在第四组相比,第三组()。血浆MDA水平明显升高III组相比,二组,进一步增加了第四组相比,第三组()(表3)。
3.4。水平不,以挪士,MDA, SOD3,左心室射血分数的患者
的等离子体水平不,以挪士,SOD3在左心室射血分数明显降低组(30 - 39%)相比,左心室射血分数组(40 - 55%)()和进一步降低左心室射血分数组(30%)相比,左心室射血分数组(30 - 39%)()。血浆MDA水平明显升高左心室射血分数组(30 - 39%),而左心室射血分数组(40 - 55%),进一步增加了左心室射血分数组(30%)相比,左心室射血分数组(30 - 39%)()(表4)。
3.5。PECGGp对不,以挪士、SOD3 MDA Syndecan-1, Nrf2心肌梗塞大鼠心脏组织的水平
与PECGGp-untreated模型组大鼠,没有水平,以挪士,SOD3心肌组织与对照组相比明显减少(),而心肌组织的MDA含量与对照组相比显著升高。左心室射血分数是在B组与对照组相比显著降低()。
的水平,以挪士,SOD3在D组与B组相比明显增加(,0.01),进一步增加E组与D组(相比)。MDA的水平在D组与B组相比显著下降,进一步减少在E组与D组(相比)。左心室射血分数显著增加在D组与B组相比(相比),进一步增加E组与D组()(表5)。结果表明,PECGGp治疗产生影响抗氧化损伤和恢复心肌梗塞心肌组织的抗氧化能力,从心脏衰竭病人完全康复。
环磷鸟苷含量显著()高PECGGp-treated集团(pmol / mg)相比PECGGp-untreated集团(pmol /毫克)。分析显示高表达在PECGGp-treated Nrf2蛋白质组(35%,)相比PECGGp-untreated组(11%,)()。脱落的syndecan-1被发现显著增加PECGGp-untreated组相比,PECGGp-treated集团()。
4所示。讨论
研究表明,首席技术官是一个频繁的发现非常古老的病人,和主经皮冠状动脉介入和冠状动脉搭桥手术用于治疗CTO (43,44]。冠状动脉疾病病人主要经皮冠状动脉介入主要是老年人。试验结果表明,主要经皮冠状动脉介入并没有减少主要不良心血管事件和可能导致心肌缺血性损伤与提升心肌梗塞复发的利率和重复的CTO患者的冠状动脉血管再生。冠状动脉搭桥手术更昂贵,比主要经皮冠状动脉介入和侵入性表现在老年患者更严重的冠心病(27- - - - - -30.]。结果表明,长期的心血管死亡风险和不良临床结果后冠状动脉旁路移植手术在老年患者更糟比年轻患者(44]。冠状血管成形术过程需要更长的时间和有放射性皮肤损伤和急性肾功能衰竭的风险。冠状血管成形术手术所涉及的冠状动脉CTO重要风险因素对冠状动脉的解剖和冠状动脉穿孔和心包填塞28]。因此,我们的研究评估了强大的潜力,小说在非常古老的非侵入性治疗患者冠状动脉首席技术官。它调查了氧化/抗氧化失衡与冠状动脉首席技术官协会非常古老的病人和证明PECGGp为潜在的预防和治疗的代理。
没有信号通路的研究表明,功能障碍增加心肌梗死的风险。增加活性氧水平抑制没有生物活性和生产,导致冠状动脉损伤。心血管疾病常常抑制信号通路和增强心肌梗死风险(1- - - - - -5]。Upregulation小说的水平可能是一个潜在的治疗目标,抑制心肌梗塞和慢性充血性心力衰竭(5,6]。研究结果表明,活性氧在心肌抑制以挪士表达式,活动和以挪士的缺失导致心肌梗塞。以挪士降低动脉粥样硬化内皮细胞和肌细胞过度和postmyocardial梗塞的病理生理学的影响。心脏myocyte-specific以挪士转基因超表达减少氧化应激和梗死面积和改善冠状动脉结扎后心脏功能。潜在的监管机构的临床翻译以挪士表达式可能会提供一个潜在的新疗法对预防肌细胞之间的不平衡生产和清除活性氧(9]。
我们的研究表明,水平没有明显减少,以挪士与一个首席技术官组MVD和进一步减少与多个CTO组MVD。与PECGGp-untreated模型组大鼠,没有水平,以挪士,心肌梗塞和SOD3心脏组织明显减少,而心肌组织MDA水平明显升高。PECGGp的水平没有增加,以挪士在心肌梗塞和心脏组织恢复左心室射血分数,显示关键的保护角色没有和以挪士在心肌梗死和心力衰竭。我们的数据表明,PECGGp潜在的预防和治疗非常古老的心力衰竭患者的冠状动脉首席技术官。
MDA含量增加导致提高自由基的产生和减少了抗氧化活性。活性氧生成的抑制或增强内源性抗氧化酶可能会降低心肌梗塞大小和改善心肌功能障碍(11- - - - - -14]。几项研究表明,SOD3是最强大的抗氧化酶,辩护缺血性心肌抑制活性氧。血管SOD3活动严重降低冠状动脉段狭窄的冠状动脉疾病患者和SOD表达式和活动在减少冠状动脉粥样硬化性斑块。进一步的研究可能会导致一种新型抗氧化剂代理可以增加SOD水平或降低MDA水平,心肌梗塞和慢性心力衰竭(19,23- - - - - -26]。我们发现MVD与首席技术官水平显著升高血浆MDA和SOD水平,降低和MVD与多个首席技术官进一步增加MDA和SOD水平降低。MDA水平显著增加,SOD水平明显降低心肌梗塞的心肌组织和左心室功能障碍。PECGGp显著增加SOD水平和减少心肌梗塞的心肌组织MDA含量和改善左心室射血分数。
得出结论,表达SOD3体内没有直接影响动脉粥样硬化的发展。SOD3的关键调节器没有血管壁的生物利用度。低血管SOD3表达发挥了重要作用在受伤后狭窄重建,促进氧化剂eNOS-derived减少压力和生物利用度。
MDA含量增加导致提高自由基的生产减少了抗氧化活性和MDA水平提升心肌梗死的主要原因(8]。动脉粥样硬化与无生物活性降低有关MDA-mediated抑制后以挪士和SOD3保护没有退化的关键。以挪士是一个积极监管机构SOD3表达式和以挪士的减少导致了减少表达式SOD3 [9]。我们的观察表明,水平不,以挪士,SOD3明显降低,MDA含量明显升高MVD患者一个首席技术官和进一步减少和增加MVD患者多个首席技术官。老鼠,水平不,以挪士,心肌梗塞和SOD3心脏组织明显减少,而心肌组织MDA水平明显升高。PECGGp恢复抗氧化酶的活动(以挪士和SOD3)和抗氧化剂(没有)和抑制MDA在心肌细胞。没有生成心肌内以挪士发挥了关键作用在降低心肌梗塞大小。SOD3是最强大的抗氧化酶,为抑制活性氧的心肌梗死。PECGGp对抗氧化损伤的保护作用可能是由于内源性细胞抗氧化系统和MDA的upregulation清除活动。目前的研究表明,PECGGp心血管效应对心肌梗死和心力衰竭,的心血管效应可能与增加内源性抗氧化剂,抗氧化状态持续在心肌梗死,海拔不,以挪士,SOD3水平,减少MDA水平。
先前的报道表明,SOD3派生心血管损伤恢复通过增加促有丝分裂的信号转导,减少炎症和细胞凋亡。目前的报告表明,SOD3源于心血管损伤恢复通过减少炎症和细胞凋亡。
心血管疾病常常抑制信号通路和增强心肌梗塞的风险。增加活性氧水平抑制没有生物活性和生产,导致冠状动脉损伤。没有信号通路的障碍增加心肌梗死的风险。Upregulation小说的水平可能是一个潜在的治疗目标,抑制心肌梗塞和慢性充血性心力衰竭(16,17]。以挪士降低动脉粥样硬化内皮细胞和肌细胞过度和postmyocardial梗塞的病理生理学的影响。血管SOD3活动严重降低冠状动脉段狭窄的冠状动脉疾病患者和SOD3表达和活动减少冠状动脉粥样硬化性斑块。SOD3是最强大的抗氧化酶,辩护的缺血性心肌抑制活性氧。进一步的研究可能会导致一种新型抗氧化剂代理可以SOD3水平增加或减少MDA水平心肌梗死和慢性心力衰竭(18- - - - - -22]。PECGGp的水平没有增加,以挪士在心肌梗塞和心脏组织恢复左心室射血分数,显示关键的保护角色没有和以挪士在心肌梗死和心力衰竭。PECGGp显著增加SOD3水平和减少心肌梗塞的心肌组织MDA含量和改善左心室射血分数。这是知道Ras-Erk受体信号转导通路和G蛋白耦合增加SOD3表达式,然后增加损伤的愈合。我们的研究结果表明,PECGGp可能抑制不平衡在心肌梗塞氧化剂和抗氧化剂地位,冠状动脉损伤,动脉粥样硬化斑块,心力衰竭发展通过抑制MDA水平和提升,以挪士,SOD3水平。Ras-Erk促有丝分裂的途径和G蛋白耦合受体信号转导中扮演重要的角色增加SOD3表达式,进一步解释我们的观察SOD3-mediated效果的伤害(45,46]。
上游和下游信号通路的活化分子SOD3已经进行了研究。信使分子不施加其影响的刺激不敏感guanylyl环化酶导致增强细胞内信使环磷鸟苷的生产。环磷鸟苷保护内皮祖细胞免受氧化应激。环磷鸟苷含量显著升高PECGGp-treated集团提供证据表明PECGGp显著水平的提高SOD3和SOD3表达心肌梗塞环磷鸟苷水平升高的心脏组织。的参与没有心肌梗塞/环磷鸟苷途径确认(47,48]。
核因子红色的两个相关因子(Nrf2)的上游调节器SOD3表达式是一个主要的抗氧化剂转录因子调节抗氧化基因的表达。我们的研究结果表明,MDA可以通过Nrf2行为调节抗氧化防御基因的表达。Nrf2作为分子传感器的细胞氧化还原内稳态扰动和SOD3表达式代表一个强大的工具。SOD3被Nrf2调节转录因子和Nrf2高架SOD3表达心肌梗塞的心肌组织。MDA Nrf2的稳定性和转录功能的影响。值得注意的是,建议PECGGp激活SOD3表达式通过Nrf2通路,防止老鼠的心脏氧化损伤减少MDA水平(49]。
它也发现SOD3的损失可以促进syndecan-1容易受到氧化应激和导致syndecan-1脱落和SOD3抑制oxidant-induced syndecan-1脱落。我们的研究结果表明,SOD3 syndecan-1增加心脏组织的减少,减少心肌梗塞。更重要的是,目前的研究表明,MDA在心肌梗塞导致syndecan-1脱落,SOD3保护心脏免受氧化性损伤的通过限制MDA-induced脱落syndecan-1 [50]。
我们的研究结果表明,PECGGp可能抑制不平衡在心肌梗塞氧化剂和抗氧化剂地位,冠状动脉损伤,动脉粥样硬化斑块和心力衰竭发展通过抑制MDA水平和提升,以挪士,SOD3水平。这些发现表明PECGGp可能为预防和治疗提供一个潜在的新疗法不平衡生产和清除活性氧MVD患者非常古老,与多个首席技术官和心脏衰竭。
5。结论
目前的研究表明,PECGGp心血管效应对心肌梗死和心力衰竭,的心血管效应可能与增加内源性抗氧化剂,抗氧化状态持续在心肌梗死,海拔不,以挪士,SOD3水平,降低MDA。因此,PECGGp可能被认为是一个潜在的治疗剂预防或治疗CTO和很老患者的心脏衰竭。然而,还需要更多的研究来研究的临床疗效PECGGp在预防或治疗CTO和心脏衰竭,这可能为小说提供临床证据的预防和治疗策略不平衡的氧化剂和抗氧化剂现状和首席技术官非常古老的心力衰竭患者。
相互竞争的利益
作者宣称没有利益冲突有关的出版。
作者的贡献
Youdong胡锦涛和本文Fenglin张同样的贡献。