文摘

氢氧自由基将板式换热器帕拉- - - - - -,元- - - - - -,昊图公司酪氨酸(p酪氨酸,米酪氨酸,o酪氨酸),而板式换热器保持酶的转换p肾脏酪氨酸和糖质新生可以作为衬底。病理亚型米- - -o酪氨酸应该是参与激素抗性的发展。板式换热器的作用和三个酪氨酸亚型在影响胰岛素需要检查在25非糖尿病患者败血症的病人。每日胰岛素剂量(做)和insulin-glucose产品(显卡)计算。血清和尿水平的板式换热器和酪氨酸亚型测定使用rpHPLC-method。尿米酪氨酸/p酪氨酸比率是更高的患者和显卡相比平均低于中位数(和、职责)。尿米酪氨酸和米酪氨酸/p酪氨酸比率显示正相关(和、职责)和显卡(和、职责)。血清板式换热器是一种消极的预测,而血清p酪氨酸/检比率是积极的预测和显卡。尿米酪氨酸和泌尿米酪氨酸/p酪氨酸,o酪氨酸/p酪氨酸,(米酪氨酸+o酪氨酸)/p酪氨酸的比率是积极的预测和显卡。板式换热器和酪氨酸亚型有预测作用,碳水化合物代谢的非糖尿病患者败血症的病人。板式换热器可以作为肾糖质新生衬底通过保持酶的生产p酪氨酸,氢氧自由基派生板式换热器产品可能干扰胰岛素的行动。

1。介绍

肾脏在碳水化合物代谢具有重要作用。有证据肾葡萄糖释放导致很大一部分保持空腹血浆葡萄糖水平(~ 25%)1,2]。随着禁食的长度增加,葡萄糖释放占总体的比例由肾糖质新生增加(3]。释放葡萄糖从肾脏只是糖质新生的结果2]。在人类2型糖尿病,肾葡萄糖释放增加的速度很大程度上(~ 300%),就比得上肝葡萄糖释放(4]。hyperepinephrinemia,肾脏负责大约40%的糖质新生(增加5]。肾葡萄糖释放由胰岛素抑制。这种抑制作用涉及直接激活或失活的酶和降低可用性gluconeogenic基质(6,7]。

肾糖质新生与板式换热器和酪氨酸代谢,由于苯丙氨酸羟化酶,将板式换热器帕拉酪氨酸(p酪氨酸),位于肾上皮细胞(8由于酪氨酸可以作为底物糖质新生通过其代谢产物,如延胡索酸酯(9]。脓毒症被描述为一个异化的状态与糖质新生增加内源性皮质醇的生产过剩(10]。此外,脓毒性休克患者通常需要静脉hydrocortisol管理局,contrainsular效应。葡萄糖稳态在脓毒症也是一个复杂的问题,涉及内源性葡萄糖生产、内源性胰岛素生产,外源性葡萄糖和胰岛素的替代。

脓毒症的一个特征是氧化应激。我们的工作组在以前的研究中,我们发现高浓度的丙二醛(MDA)和髓过氧化物酶(MPO)在脓毒症的早期阶段。有佛波醇的生产增加12-myristate 13-acetate (PMA)刺激活性氧(ROS)在第一和第二天全血脓患者(11]。制品等人研究的更高级别的脂质过氧化反应等离子F2-isoprostane和isofuran等产品被发现在败血症的病人器官衰竭开发(12]。

由此产生的活性氧可能产生伤害等氨基酸。生产过剩的氢氧自由基()法转换成帕拉- - - - - -,元- - - - - -,昊图公司酪氨酸(p- - - - - -,米- - - - - -,o酪氨酸)[13,14]。另一方面,出口p酪氨酸(蛋白质合成所使用的其他器官)形成具有肾脏从板式换热器在生理情况下,通过板式换热器羟化酶,如上面所提到的15]。因此,p酪氨酸氧化过程中可能形成的生理和,米- - -o酪氨酸是氧化应激标志物。因此,高浓度的米- - -o酪氨酸检测羟基radical-induced组织损伤。许多研究已经证明了这一点米- - -o酪氨酸水平与其他氧化应激标记(16- - - - - -18]。

越来越多的研究评估血清和尿酪氨酸在不同疾病亚型。血清和尿o- - -p酪氨酸水平衡量我们组的患者患有糖尿病和慢性肾脏疾病(CKD)。显著降低等离子体p在CKD组酪氨酸水平被发现,而增加尿排泄o酪氨酸在糖尿病/ CKD患者[19]。有趣的是,总尿白蛋白/肌酐和nonimmunoreactive与尿白蛋白/肌酐比值显示良好的相关性o酪氨酸/肌酐比值在缺血性中风患者的手术在我们的其他研究20.]。同时,我们发现高水平的米酪氨酸和o酪氨酸在大雨的镜头的总匀浆21]。这些病理酪氨酸亚型在激素抗性的发展可能有作用,胰岛素或促红细胞生成素抵抗。这最近已经证明了我们组在这两种在体外和人类研究22- - - - - -24]。

基于之前的数据,我们推测,高浓度的羟基radical-derived酪氨酸亚型以及保持酶的产生p酪氨酸可能导致改变了碳水化合物代谢在非糖尿病患者感染性主题,从而预测胰岛素治疗患者。板式换热器和p酪氨酸为肾糖质新生而病理亚型(米- - -o酪氨酸)肾脏可能干扰胰岛素的作用,从而导致胰岛素抵抗。

2。方法

2.1。主题和研究设计

研究伦理委员会批准的协议是大学的医学院佩奇(4422/2012),这是完成按照伦理指南2003年赫尔辛基宣言。所有的患者或最近的亲属提供书面知情同意后的启示。这项研究是25日进行麻醉和重症监护的病人,医学院,佩奇大学2012年9月至2013年10月。这些患者严重脓毒症或脓毒性休克在承认被纳入研究。脓毒症的诊断是基于ACCP / SCCM共识指南(25]。

排除标准药物治疗(如长期使用类固醇和免疫抑制药物)或治疗(例如,电台-和化疗)影响正常的免疫反应和血液恶性疾病和少尿在入学(收集尿液样本是不可能的)。患者根据最近的脓毒症治疗指南(26]。血液样本被录取(第一天)和连续四天(2 - 5天)。每24小时尿液收集和每日数量已经注意到。

为期五天的长期研究选择因为我们已经假定,5天内将打开一个足够宽的时间窗口,可以检测早期变化p- - - - - -,米- - - - - -,o酪氨酸和板式换热器在脓毒症患者的水平。血清和尿肌酐、血清hsCRP和PCT水平测定。每日hsCRP、PCT和肌酐分别败血症的病人的常规监测的一部分,他们进行了实验室医学研究所的佩奇大学。

患者接受静脉注射胰岛素使用perfusor根据一个浮动保持血糖水平在6 - 8更易与L。血糖水平测量使用动脉血气分析每天至少5次。数据每天的胰岛素剂量(做)和葡萄糖概要文件进行评估。insulin-glucose产品(显卡)是基于计算和平均每天的血糖水平。

在脓毒性休克的情况下,液体复苏后(20毫升/公斤晶体溶液)氢化可的松(200毫克/ 24 h)和去甲肾上腺素管理维护地图> 70毫米汞柱。侵入性血液动力学的监测也开始了。如果中央静脉的血红蛋白饱和度(ScVO2)仍低于70%,心脏指数(CI)低于2.5升/分钟/ m²尽管有足够的预加载(胸腔内血容量指数(ITBVI))多巴酚丁胺添加到治疗。每日剂量的这些代理也注意到。

2.2。测量p- - - - - -,米- - - - - -,o酪氨酸和板式换热器的水平

败血症的患者的血液样本来自中央静脉导管。通过离心分离血清。血清和尿液样本存储在−80°C,直到进一步的检查。此后,125年µL三氯乙酸(TCA);Reanal私人有限公司,匈牙利布达佩斯)被添加到500µL血清或尿液,然后样本孵化冰上30分钟。随后沉淀被离心分离。上层清液的过滤是一个注射器过滤器(0.2µ美国马米)(微孔,Billerica)之前的分析。最后血清和尿米- - - - - -,o- - - - - -,p使用反向phase-HPLC酪氨酸和板式换热器水平测定(日本岛津公司美国制造业公司,坎比,或者美国)(C₁₈硅胶柱,250×4毫米)和荧光检测(纳米;酪氨酸和海里纳米;海里的板式换热器)如前所述19]。浓度计算使用外部标准。代表高效液相色谱概要文件的标准和败血症的病人的血清和尿样呈现在图1。

部分分泌物(FE)的三个酪氨酸亚型计算(,,)来确定管处理。铁的物质可以用来检查肾处理特定的物质。它是计算除以间隙测量物质的肌酐的间隙。菲显示过滤物质的多少与尿液排出。因此它表示特定物质的间隙是否大于或小于或等于肌酐的间隙。如果铁物质的100%,这是自由过滤,零净肾脏重吸收和分泌。如果铁小于100%,这表明一个活跃的肾脏重吸收的物质。如果菲超过100%,这表明主动分泌或在代替肾实质的生产。计算24小时间隙和菲各自的血液样本必须在尿液收集获得的。

2.3。统计分析

社会科学统计软件包(SPSS)统计软件,版本20.0(美国IBM公司),用于统计分析。数据被表示为中位数、四分位范围(差25 th -第75个百分位)(标准)和胡须代表5和95百分位数,因为他们的分布被Kolmogorov-Smirnov测试不正常。使用Mann-Whitney组间分析测试。变量之间的相关性评估使用枪兵的ρ测试。多元线性回归模型和分段法用于确定胰岛素需求的预测。的值被认为是重要的。

3所示。结果

3.1。病人的人口数据

25败血症的患者参与这项研究。人口数据、感染源和氨基酸参数总结在表1。八个病人患有严重脓毒症和17从感染性休克和19个病人需要住院期间ICU机械通气。25例,11从ICU出院,而7患者死亡患者在研究期间和7。

我们检查了协会的氨基酸参数和临床结果。这些代谢物显示任何区别幸存者和nonsurvivor科目在1天(数据没有显示)。

3.2。尿米酪氨酸水平和胰岛素的需求

尿米酪氨酸/p酪氨酸比率明显高于在患者在平均比那些低于中位数(7.3 - 92.3和1.7 - 6.3,分别地;)(图2(一个))。同样,尿米酪氨酸/p酪氨酸比率在显卡患者明显高于中位数与显卡相比低于中位数(6.6 - 67.5和1.7 - 7.5,分别地;)(图2 (b))。

3.3。协会的酪氨酸参数与胰岛素的需求

尿米与了酪氨酸浓度显示正相关(;)(图3(一个)与显卡)和(;)(图3 (c))。同样,尿米酪氨酸/p与了酪氨酸比率显示正相关(;)(图3 (b)与显卡)和(;)(图3 (d))。

氨基酸参数测试分别在多元线性回归模型预测的胰岛素需求(显卡)。这个模型的组件是体重,hsCRP, PCT,每日剂量氢化可的松,每日剂量多巴酚丁胺。血清板式换热器是一种消极的预测,显卡,而血清p酪氨酸/检比率与这些碳水化合物代谢参数相关的积极和强烈。血清o酪氨酸/检比率是显卡的积极的预测,但不做的(表2)。尿的米酪氨酸和尿的比率米酪氨酸/p酪氨酸,o酪氨酸/p酪氨酸,(米酪氨酸+o酪氨酸)/p酪氨酸是积极的预测并和显卡(表2)。上述氨基酸参数测试也在另一个模型中,血清肌酐水平的包括,而不是体重。在这个模型中,也获得了类似的调查结果相比,体重的情况(数据没有显示)。

3.4。部分排泄酪氨酸的亚型

这两个和均明显高于(,两个)。也有显著的区别和,因为高出逾3倍吗()(表1)。FE值之间没有直接联系的调查发现了氨基酸和碳水化合物参数。

4所示。讨论

在我们的研究中,我们提供了证据表明,高浓度的羟基radical-derived酪氨酸亚型以及保持酶的产生p酪氨酸可能导致改变了碳水化合物代谢在非糖尿病患者感染性主题,从而预测胰岛素治疗患者。

血清和尿水平和上述氨基酸的比例确实和显卡的强预测因子模型是由已知的高胰岛素需求的预测。在另一个模型中,血清肌酐水平而不是体重,同样的结果,这表明这些协会是独立的肾功能。

上述协会的一个潜在原因的血清水平板式换热器做和显卡,广义hypoaminoacidemia是因为营养不良。我们测试了这种可能性之间执行相关测试血清白蛋白水平,或显卡。也没有与血清白蛋白水平(或显卡显示相关,;,、职责)(数据没有显示)。

这一事实(i)血清水平板式换热器是消极的预测和显卡,(2)血清p酪氨酸/检比率被证明是更积极的一个,而(iii)血清p酪氨酸单不是一个预测和血清(iv)p酪氨酸水平略而不显著降低败血症的患者比健康者(19,23发生在败血症患者)可能表明,板式换热器的转换p-Tyr-at普通板式换热器级结果不仅生产出口p酪氨酸,但生产p酪氨酸也消耗糖质新生在代替在肾脏。

我们意识到,除了氧化应激,也其他因素(如代谢状态、实际水平的炎症、人体测量参数,和药物)也有强烈的对血糖控制的影响。这就是为什么我们随后进行线性回归分析,在调整体重,炎症标记物,剂量的gluconeogenesis-stimulating代理没有导致失踪的之间的联系米酪氨酸和血糖状态的标志。的确,在这个分析,观察统计上非常重要的连接。这表明,除了已知参数,独立的氧化stress-derived氨基酸也扮演一个角色在决定控制碳水化合物。

此外,我们的目标主要是没有建立一个新的日常临床常规标记用于管理个人败血症的病人,而是启发碳水化合物代谢的潜在机制这些病人的板式换热器和酪氨酸代谢。然而,我们也认为这些代谢产物可以作为临床标记,如果他们被认为是与其他现有常规临床参数,还提到了在我们的研究中。在许多其他情况下,个人考虑将正确的方式也在这个特定的问题。

有一个显著的区别和。高出逾3倍吗。同时血清浓度的两个酪氨酸亚型是相等的。这可能表明,肾脏保留米酪氨酸远高于o酪氨酸,导致细胞内的浓度更高米在肾细胞酪氨酸。这可以解释更好的预测作用米酪氨酸。

脓毒性模型被选中是因为快速变化也发生在碳水化合物代谢和血清和尿氨基酸水平可以监控在这些情况下。还短期协会可以观察到碳水化合物代谢和这些氨基酸之间。

在我们的研究中,研究了参数没有任何区别组织基于ICU生存(数据未显示)。然而,在ICU-surviving与nonsurviving患者的比较,两组病例数只与。数量少的情况下可以在一定程度上缺乏意义的背景;绝对值似乎显示对应于我们的假设的趋势;即标记的氨基酸氧化stress-derived似乎有点在nonsurvival高于生存组。

显卡在描述碳水化合物代谢被用作参数指的是胰岛素抵抗。这是类似于荷马_红外等离子体水平的空腹血糖和空腹内源性胰岛素。如果血浆葡萄糖水平以恒定的血浆内源性胰岛素水平增加,反之亦然产品上涨,这指的是胰岛素抵抗。同样的概念应用在显卡的情况下,体内注射胰岛素的量的增加,平均血糖水平。另一方面,根据我们的意见,胰岛素的需要(因此,显卡也预测糖质新生,还从内部产生葡萄糖需要克服的体内注射胰岛素。此外,常规,没有应用在这些患者中,外源性葡萄糖输注葡萄糖代谢比较容易估计。因此我们相信做的胰岛素抵抗和显卡主要是作为描述符+糖质新生。

为期五天的长期研究适合更好的观察肾脏的作用,在这期间肾葡萄糖释放导致总葡萄糖释放越来越多,作为肝葡萄糖输出减少,因为降低肝糖分解(3]。

芳香族氨基酸、板式换热器和酪氨酸,评估了在最近的一项研究预测血糖横向比较年轻的成年人。血清检HOMA-IR在雄性和雌性都呈正相关,而酪氨酸只是预测HOMA-IR男性(27]。

限制我们的研究是这一事实(我)这是一个试点研究相对较少的情况下,(ii)相关和线性回归分析分别在每一天都缺乏,由于相对较少的情况下,和(3)羟基radical-derived板式换热器产品对胰岛素作用的影响肾脏没有直接证明。

5。结论

结论,我们提供的证据表明,板式换热器及其羟基radical-derived产品,以及保持酶的产生p酪氨酸、预测的非糖尿病患者胰岛素治疗败血症的病人,这反映了在糖质新生(i)肾脏的作用,(2)参与的板式换热器p在糖质新生酪氨酸,(iii)的抑制作用羟基radical-derived板式换热器产品(米- - -o酪氨酸)胰岛素的行动。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。