文摘
高血压是一些心血管疾病的危险因素和氧化应激参与病理生理学的建议。抗高血压药物氯压定行动改善氧化应激没有很好地研究。因此,本研究调查的影响可乐定对氧化应激标记和月一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶抑制剂,N-nitro-L-arginine甲酯(L-NAME)管理萎缩。雄性老鼠被分成四组(月,月+可乐定(SHR-C),月+ L-NAME月+可乐宁+ L-NAME (SHRC + L-NAME)]。老鼠(SHRC)管理与可乐定(0.5毫克公斤−1一天−1)4周在饮用水和28周L-NAME(25毫克公斤−1一天−1从16周)28周SHRC + L-NAME。收缩压(SBP)测量。28周结束时,所有的老鼠都牺牲了,在他们的心脏匀浆,氧化压力参数和评估。可乐宁治疗显著提高总抗氧化状态(助教)(),减少了thibarbituric酸活性物质(TBARS) ()和蛋白质羰基含量(PCO) ()。这些数据表明,氧化应激参与高血压器官损伤和可乐定不仅降低了SBP还改善氧化应激在月和月+ L-NAME。
1。介绍
在全球范围内,近十亿人有高血压;其中,三分之二是在发展中国家,全球每年造成近800万人死亡,近150万人在东南亚地区每年大约有三分之一的成年人在这个地区有高血压1]。第六届联合全国委员会的报告预防、检测、评估和治疗高血压(JNC VI)定义高血压或高血压出现持续达到或超过140/90毫米汞柱。
高血压的一个危险因素几个心血管疾病如动脉粥样硬化、心肌梗死(2),肾功能衰竭(3)、中风和死亡(4]。
越来越多的证据表明,氧化应激在高血压的病理生理学中起着重要的作用[5]。高血压与氧化剂抗氧化状态的失衡导致脂质过氧化(变更6)超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶(7在过氧化氢[]和更高的生产8]。
一氧化氮(NO) (endothelium-derived放松因素)是合成生物系统中一氧化氮合酶(NOS)和血管扩张性效果(有很强的9]。NOS抑制剂如N-nitro-L-arginine甲酯(L-NAME)因果作用在氧化应激(10- - - - - -12),以及促进持续的高血压和进步的心血管损害(13]。周和Frohlich [13)建立和发展L-NAME /月模型,模拟与自然产生的渐进损伤相关的病理生理改变的心脏和肾脏功能和结构。他们回顾了一系列研究设计使用L-NAME /月调查的影响降压药在预防、发展、恶化,甚至逆转高血压肾硬化。每个报告记录抗高血压药的病理生理行为的干预与或随后L-NAME之后。然而,钙拮抗剂的研究专注于病理生理效应,angiotensine转换酶抑制剂和醛固酮拮抗剂。使用L-NAME /月模型,因此,我们想确定可乐定的影响,一个a-adrenoceptor受体激动剂,另一个类抗高血压药物的氧化应激标记(硫代巴比土酸活性物质(TBARS),蛋白质羰基(PCO)、总抗氧化状态(助教)和一氧化氮水平的月和月+ L-NAME。
2。方法
本研究通过马来西亚理科大学动物伦理和福利委员会。岁男性月4周得到从动物研究和服务中心(ARASC)、健康校园马来西亚理科大学,坐落在单个笼子在标准环境(°C 25日- 27日)室温下12小时光和12小时黑暗周期(灯0700 - 1900小时)。动物喂养与商业老鼠食物颗粒和可乐定(美国σ)是通过饮用水。老鼠被分为4组:(1)月(治疗),(2)月接受可乐定(0.5毫克公斤−1一天−1;4-28周)(SHRC),(3)月管理L-NAME(25毫克公斤−1一天−1)(不)(月/ L-NAME),和(4)月管理L-NAME(25毫克公斤−1一天−1)接受可乐定(0.5毫克公斤−1一天−1;4-28周)(SHRC / L-NAME)每组由6个动物()。慢性L-NAME管理开始于大鼠年龄在16周直到28周组3和4。正常血压Wistar-Kyoto (WKY)老鼠分裂和处理氯压定与月集团以类似的方式。
收缩压(SBP)是在实验期间每两周使用尾部体积描记法血压分析仪(美国IITC生命科学)。老鼠体重28周的最后牺牲。心脏收集和均质(美国Glas-Col) 0.05钠磷酸盐缓冲剂(pH值7.4)。心脏匀浆上清液储存在−70°C到用于生化分析。
脂质过氧化作用被确定为硫代巴比土酸活性物质(TBARS)根据Chatterjee等的方法。14]。MDA,脂肪酸过氧化反应的最终产物,与稍后通知形式的复杂反应最大吸光度在532海里。1,1,3,3-Tetraethoxypropane (TEP);一种MDA作为标准分析。0.1%的心脏匀浆或MDA标准(2μ米,4μ米,6μ8 M,μ米)吸管进试管。试管是漩涡,然后在沸水浴在95°C为60分钟。冷却后,管在3000×g离心10分钟。一毫升的上层清液被转移到semimicrocuvette和分光光度计吸光度是阅读532海里。
蛋白质羰基(PCO)水平测定使用蛋白质羰基分析工具包(开曼群岛、美国)根据Rohrbach说道的方法等。15]。DNHP与蛋白质羰基反应,形成相应腙席夫碱生产。protein-hydrazone产生的数量是量化spectrophotometrically吸光度之间的360和385海里。
总抗氧化状态(助教)是根据评估的方法Koracevic et al。16]。它是基于标准化的原则解决Fe-EDTA Fenton-type反应复杂与过氧化氢反应,导致羟基自由基的形成。这些活性氧苯甲酸降解,导致TBARS的释放。抗氧化剂的添加样品抑制引起的心脏匀浆的生产TBARS与他们的浓度成正比。这个反应测定spectrophotometrically在532 nm和色彩发展的抑制被定义为助教。
一氧化氮(NO)是决定使用硝酸盐或亚硝酸盐比色测定设备根据方法Yui et al。17]。硝酸还原酶利用NADPH的酶还原硝酸盐亚硝酸盐。亚硝酸盐产生与格里斯试剂反应1其次是格里斯试剂2生产偶氮产品。偶氮的浓度测量获得的产品的样本540海里的吸光度。
3所示。统计分析
数据分析使用单向方差分析与事后图基测试。数据分析使用社会科学统计软件包(SPSS)软件版本20。显著水平被设定为()。数据表示为平均值和标准错误意味着(平均±SEM)每组六个动物。
4所示。结果
4.1。SBP、氧化压力参数,没有可乐定的处理和未经处理的月和月+ L-NAME
SBP的可乐定的处理和未经处理的月和月+ L-NAME呈现在图1。SBP的萎缩治疗可乐定(SHRC)从8周时显著降低,直到28周相比,未经处理的萎缩(,* * *)。L-NAME是老鼠在16岁周管理。因此,月+ L-NAME对待可乐定(SHRC + L-NAME)显示显著增加而未经处理的月+ L-NAME (c * * *,),在L-NAME实施之前这些仍然代表了SHRC而萎缩。L-NAME管理后,月+ L-NAME显示显著增加SBP在26周(b * *)和周28 (,b * * *)而萎缩。也有明显降低的SBP可乐宁治疗月管理L-NAME (SHRC + L-NAME)相比,未经处理的月+ L-NAME从20周,直到周28(20周:d * 22和24周:d * *, 26和28周:d * * *)。
4.2。助教
图2代表了可乐定的助教水平处理和未经处理的月和月+ L-NAME。助教的水平是显著增加与可乐定治疗萎缩(,* * *)。然而,在助教水平无显著差异L-NAME管理月相比萎缩。在助教水平显著增加是明显可乐定治疗月管理与L-NAME (SHRC + L-NAME)相比,未经处理的月管理L-NAME月+ L-NAME) (c * * *)。没有观察到显著差异SHRC + L-NAME相比,可乐定治疗月没有L-NAME (SHRC)。
4.3。TBARS
可乐定的TBARS水平处理和未经处理的月和月+ L-NAME图中提供3。可乐定TBARS水平治疗月明显低于未经处理的萎缩(,* * *)。在月管理的水平TBARS L-NAME月+ L-NAME)相比显著高于萎缩(b * * *)。显著下降很明显在可乐宁治疗月TBARS水平管理L-NAME (SHRC + L-NAME)相比,未经处理的月管理L-NAME月+ L-NAME) (c * * *)。没有观察到显著差异SHRC + L-NAME相比,可乐定治疗月没有L-NAME (SHRC)。
4.4。PCO
图4代表PCO的可乐定治疗水平和未经处理的月和月+ L-NAME。可乐定对PCO水平萎缩明显低于未经处理的萎缩(*)。水平显著增加在PCO月管理L-NAME月+ L-NAME)相比,月(b * * *)。在可乐定对PCO水平显著下降是明显萎缩管理与L-NAME (SHRC + L-NAME)相比,未经处理的月管理L-NAME月+ L-NAME) (c *)。也观察到显著增加SHRC + L-NAME相比,可乐定治疗月没有L-NAME (SHRC) (d * * *)。
4.5。没有
可乐定的没有水平处理和未经处理的月和月+ L-NAME图5。没有水平可乐宁治疗月和月+ L-NAME增加但不显著而未经处理的萎缩。显著减少观察没有水平的月管理L-NAME月+ L-NAME)相比,月(b * * *)。在没有水平没有显著差异明显可乐亭月治疗管理与L-NAME (SHRC + L-NAME)相比,未经处理的月管理L-NAME月+ L-NAME)。明显降低也观察到在SHRC + L-NAME相比,可乐定治疗月没有L-NAME (SHRC) (d * * *)。
4.6。SBP、氧化压力参数,没有可乐定的处理和未经处理的WKY和WKY + L-NAME
SBP WKY大鼠显示正常。正如所料,L-NAME政府WKY显著增加了SBP在18周()和20周开始()与WKY相比。可乐宁治疗显著降低SBP的WKY + L-NAME相比WKY + L-NAME未经处理(数据没有显示)。
表1参数显示,氧化应激和血压正常的人没有WKY大鼠。显著增加(b * * *,)是明显TBARS和PCO WKY + L-NAME WKY相比。然而,在助教的水平没有显著差异明显WKY + L-NAME WKY相比。可乐宁治疗显著升高WKY助教水平相比,未经处理的WKY (* * *,),但无显著差异的PCO的水平。TBARS水平显示,可乐定对WKY显著增加(*,)和WKY + L-NAME (c *,)相比,他们与治疗组。显著下降(b * * *和* * *,)在无明显水平L-NAME管理组。然而,在没有水平没有显著差异明显可乐定对WKY和WKY + L-NAME相比,他们与治疗组。
5。讨论
这项研究的结果表明,SBP在月显著升高了在先前的研究18,19]。管理L-NAME在16周最初没有提升SBP在萎缩。然而,在周26和28,SBP在月+ L-NAME升高。Gerova et al。20.]表明,使用L-NAME NOS抑制剂改变调节血压,伴有心血管疾病的发展。它已经表明,慢性的合成减少导致高血压(20.,21和减少内皮血管舒张22- - - - - -24和心肌肥厚25]。这项研究的结果表明,可乐定会减弱发展高血压和终末器官损害在月和月+ L-NAME没有合成的重要抑制产生的内皮功能障碍。自1960年以来,可乐定被认为通过降低血压等模式的行动刺激a-adrenoceptors心血管中心与交感神经活动和去甲肾上腺素释放减少(26,27)对肾上腺髓产生抑制性的影响函数,减少肾上腺交感神经活动(28- - - - - -30.),和nonadrenergic压板途径的激活,激活的压力(31日,32]。
可乐宁治疗也推迟发病和减毒L-NAME抑制产生的高血压的严重程度。Rizzoni等人报道,月4周的血压正常的年龄和发展高血压、心脏肥大和血管功能障碍,8 - 12周(33]。
收缩压在月的增加伴随着变化氧化应激的标记,如降低心脏总抗氧化状态,高硫代巴比土酸活性物质,蛋白质羰基含量和海拔。正如前面了,这意味着增加活性氧的生产,进而产生更高的系统性和心脏氧化应激在月5]。变更oxidant-antioxidant平衡在月演示了在这个研究可能导致高血压的生成和/或维护通过促进血管平滑肌细胞增殖、肥大以及胶原蛋白沉积,导致血管增厚媒体和血管管腔的狭窄的审查,格罗斯曼(34]。此外,增加氧化应激可能损伤内皮细胞,损害endothelium-dependent血管放松,和增加血管收缩活动35]。
目前的研究表明一氧化氮合酶抑制L-NAME减少一氧化氮水平萎缩。相比之下,政府的L-NAME并不影响助教。L-NAME抑制血管舒张药一氧化氮的生产。
关于可乐宁治疗,研究在此显示,可乐定治疗升高的数据总抗氧化状态在萎缩。进一步评价可乐定对hypertension-associated氧化应激的影响,脂质过氧化产物(TBARS)和蛋白质氧化产物(PCO)在心脏检查。可乐宁治疗降低脂质过氧化水平的产品和蛋白质氧化心月和月管理L-NAME相比治疗组。
可乐定的保护作用可能有多个组件在其行动。可乐定,α2-adrenergic受体激动剂,被认为是降低血压,导致放电率降低交感神经与中枢神经系统内的轨迹行动(36]。相同的报告还表明,可乐定治疗导致低血压患者月通过交感神经血管收缩神经纤维的动作。α2-Adrenoceptor受体激动剂,如可乐定,减弱诱导损伤大脑和视网膜神经元的作用机理可能涉及a-adrenoceptors的刺激。相比,可乐定管理WKY和WKY + L-NAME(表1),可乐定管理月和月+ L-NAME显示显著减少氧化应激参数显然表明,可乐定是减少氧化应激在月和月+ L-NAME。
从这项研究中,因此,它的结论是一些明显的发现支持的想法,除了可乐定的降压效果,这个抗高血压药物提高抗氧化剂水平现状和改善氧化应激可能减少高血压诱发心脏损伤在月和月+ L-NAME。更好的理解氧化应激和高血压的复杂性,一氧化氮的作用,开发新的抗高血压药物,改善氧化应激可能是未来研究的方向,防止高血压和高血压诱发心血管并发症。
利益冲突
没有利益冲突,金融或否则,由作者声明。
确认
本研究支持的研究型大学资助计划(俄文1001 / PPSP / 811167)由马来西亚理科大学提供。第一作者感谢马来西亚理科大学提供奖学金在超声电机奖学金计划。