文摘
客观的。脂质过氧化反应中起关键作用burn-induced等离子渗漏、和乌司他丁报道减少脂质过氧化反应在不同的模型。本研究旨在研究乌司他丁是否减少流体要求通过脂质过氧化的抑制猪燃烧模型。方法。四十微型猪受到40%回溯烧伤和被随机分配到下列四组:直接乳酸林格液的复苏(劳工关系),立即LR含有乌司他丁(劳工关系/乌里),延迟LR复苏(DLR)和延迟LR含有乌司他丁(DLR /城市)。血流动力学变量,净流体积累和等离子体硫代巴比土酸活性物质(TBARS)浓度测定。心脏、肝脏、肺、骨骼肌和回肠在燃烧后48小时收获评价TBARS浓度,抗氧化酶的活动,组织含水量。结果。乌司他丁显著降低肺血管通透性指数(PVPI)和肺血管外的水指数(ELWI),净流体积累,和含水量的心脏,肺,和回肠立即或延迟复苏组。此外,乌司他丁注入浓度显著降低血浆和组织TBARS立即或延迟复苏组。结论。这些结果表明,乌司他丁能够减少流体需求通过抑制脂质过氧化作用。
1。介绍
烧伤是一种最严重的损伤形式,唤起强烈的身体和情感反应,产生相当大的发病率和死亡率。数据由国家伤害预防与控制中心显示,2010年有412256(133.53/100000)非致命的火灾/火烧伤和3194(1.03/100000)/燃烧死亡在美国(1,2]。火/烧伤的成本,包括医疗成本和生产力损失、成本非常高,总共花费75.46亿美元(2000年3]。低血容量性休克后可以迅速发展主要燃烧伤害,和当前治疗烧伤休克主要关注与早期保持足够的组织灌注,足够的液体复苏。目前使用最广泛的液体复苏在烧伤的公式是公园公式,主张提供4毫升的林格氏乳酸/公斤/ %回溯(全身表面积)燃烧/ 24小时后燃烧,一半的液体注入头8个小时,剩下的注入在接下来的16个小时(4]。然而,烧伤休克发展和进步尽管液体复苏,因为大部分注入液体泄漏到血管外的空间,有时大量液体复苏会加剧间质水肿、产生危及生命的并发症,如腹部筋膜室综合征(5,6]。此外,尽管早期,足够的液体复苏几乎是可行的在正常情况下,有效的治疗是一个具有挑战性的问题在大规模伤亡事件自然的力量或意外或故意造成的爆炸和火灾,环境条件,大量人员伤亡,和逻辑约束阻止强化液体复苏的可用性。因此,药物复苏的发展策略可以降低燃烧的液体要求伤害将是有益的在民用燃烧或燃烧的灾难。
先前的研究已经表明,burn-induced低血容量性休克主要是由于全身毛细血管通透性增加和随后的等离子体泄漏4,7]。先前的研究还表明,活性氧(ROS)导致微血管通透性增加,水肿形成,组织损伤后燃烧伤害(8- - - - - -12]。重大人身伤害后,外围灌注和氧下降;然而,恢复氧气交付期间积极液体复苏将发起一个有害的一连串的事件,导致破裂的氧自由基,导致脂质过氧化的影响许多细胞功能(13]。细胞膜的生理功能改变,因为膜的脂质过氧化反应修改属性如膜电位、流动性和渗透性不同物质(14]。血浆和组织水平的增加脂质过氧化作用的产品,如丙二醛(MDA),已经有据可查的热损伤后(13,15- - - - - -20.]。此外,抗氧化剂的使用已被发现是有效的减少流体要求燃烧受伤后(21- - - - - -27]。
乌司他丁是一个从人类尿液的蛋白酶抑制剂,并据报道自由自由基清除属性在不同的模型(28- - - - - -30.]。我们最近的研究也表明,乌司他丁减毒vasopermeability体内和体外(31日]。本研究测试的假设乌司他丁会减弱脂质过氧化反应和组织水肿,从而减少流体要求后猪模型的主要燃烧伤害。
2。材料和方法
2.1。猪燃烧模型和治疗
中国四十岁女性,天生的五指山小型猪(4 - 6个月的时间,20 - 25公斤,购买动物科学研究所,中国农业科学院,北京,中国)。他们适应动物季度我们实验室两周。所有的动物都禁食16小时,水被保留为4 h在手术之前。氯胺酮麻醉与肌内注射(Gu-Tian制药、傅剑,中国),动物然后用热稀释法检测导管PICCO-PLUS监测(推进有限公司、德国)测量主动脉的血流动力学变量,和血管导管定位图的上腔静脉血样和输液。手术后,所有的动物都是1小时,以确保监测血流动力学稳定,和基线数据被记录下来。动物被注入了5毫克/公斤的异丙酚,以确保足够的麻醉和受到40%回溯全层诡计燃烧伤害。膀胱的尿导管插入和连接到一个商业集尿袋。动物被赋予丁丙诺啡(10微克/公斤注射。,Sigma, St. Louis, MO) immediately after burn injury and every 12 hours thereafter for sedation and pain control. The animals were kept in special slings for monitoring. All animal experiments were approved by the Committee of Scientific Research of First Hospital Affiliated to General Hospital of PLA, China, and were conducted in accordance with the National Institute of Health Guide for the Care and Use of Laboratory Animals.
受伤的动物被随机分配到下列四组:立即复苏与乳酸林格液(劳工关系),立即复苏与乳酸林格液含有乌司他丁(ILR-ULI),延迟复苏与乳酸林格液(DLR);延迟复苏与乳酸林格液含有乌司他丁(DLR-ULI),每组10头猪。劳工关系和ILR-ULI组,每头猪充满4毫升/公斤乳酸林格液的单独或乳酸林格液含有乌司他丁(80000 U /公斤)/ 30分钟后立即燃烧伤害,其次是乳酸林格液的连续输液,输液速度的调整保持每小时尿量的1 - 2毫克/公斤/小时。DLR和DLR-ULI组,每个猪最初充满4毫升/公斤或乳酸林格液含有乌司他丁(80000 U /公斤)/ 30分钟在燃烧后6小时,紧随其后的是乳酸林格液的连续输液,输液速度的调整保持每小时尿量的1 - 2毫克/公斤/小时。烧伤后24小时,第二次剂量的40000 U /公斤乌司他丁与连续乳酸林格液同时被ILR-ULI和DLR-ULI团体。
2.2。实验测量
血流动力学变量包括平均动脉压(MAP)、心输出量(CO)、肺血管通透性指数(PVPI)和肺血管外的水指数(ELWI)测量使用PICCO-PLUS监控(推进,德国)。
净流体积累被定义为累积注入流体体积-累积尿量,测量每小时如前所述Dubick et al。24]。
收集血液样本测定红细胞比容和硫代巴比土酸活性物质(TBARS)浓度。Hematocri由我们医院临床实验室的决定。TBARS测定脂质过氧化的索引使用商业套装(南京建成科技有限公司,南京,中国)根据制造商的指示。在燃烧后48小时,猪被安乐死,和心脏、肝脏、肺、肌肉和回肠收获TBARS浓度的确定,抗氧化酶的活动(过氧化氢酶、铜-锌和锰超氧化物歧化酶)使用商业套装(所有购自南京建成科技有限公司,有限公司,南京,中国)。含水量的百分比的收获组织测量干/湿比率如前所述[31日]。
2.3。统计分析
采用SPSS 13.0统计软件,所有结果表示为平均数±标准差。单向方差分析被用于所有组之间比较,其次是Student-Newman-Keuls (SNK)测试比较两组。时被认为是具有统计学意义的差异。
3所示。结果
3.1。血流动力学变量
热损伤后,没有明显的变化映射或公司立即复苏组(表1)。地图和公司之前减少延迟复苏组开始复苏。复苏后,地图和公司延迟复苏组逐渐恢复到接近基线水平;然而,公司在DLR-ULI组相比略高的经销商集团(表1)。PVPI和ELWI增加热损伤后尽管复苏;然而,乌司他丁明显减毒的增加PVPI和ELWI立即或延迟复苏组(表1)。
没有明显变化,比容热损伤(图后立即复苏组1)。在延迟复苏组,比容增加等离子体体积燃烧伤害造成损失后,然而,复苏后回到附近的基线水平,显示出足够的恢复两组血浆体积(图1)。
3.2。乌司他丁对净流体积累的影响
热损伤后,猪立即或延迟与调整输液速度复苏,保持尿液输出1到2毫升/公斤/ h。烧伤损伤导致尿液减少输出在延迟复苏组之前复苏;然而,当复苏开始,尿液输出在所有组(图中是相似的2(一个))。复苏导致不同程度的净液体积聚在所有组;然而,乌司他丁显著降低净流体积累直接和延迟复苏组(图2 (b))。
(一)
(b)
3.3。乌司他丁对TBARS浓度和抗氧化酶的影响的活动
燃烧的侮辱和复苏导致等离子体TBARS浓度的增加,这是更加突出在烧伤后延迟复苏动物早期(图3)。乌司他丁明显阻碍了增加等离子体TBARS立即和延迟复苏组(图3)。TBARS浓度在不同的器官,尤其是肺和肝脏组织,降低在ulinastatin-treated动物,尽管他们中的一些人没有达到统计学意义(图4)。然而,抗氧化酶的活动(超氧化物歧化酶和过氧化氢酶)在心脏、肝脏、肺、骨骼肌肉,在所有组(表和回肠是相似的2)。
3.4。乌司他丁对含水量的影响在不同的器官
乌司他丁的含水量明显减少心脏,肺,和回肠立即或延迟复苏组(图5)。然而,所有组之间没有显著差异在肝脏和骨骼肌组织的含水量(图5)。
4所示。讨论
低血容量性休克是一个关键因素影响死亡率在早期阶段的主要燃烧伤害。当前的努力改善烧伤休克的结果主要关注早期和足够的液体复苏。密集的液体复苏,然而,可能会加剧间质水肿,引起严重不良事件,如腹部筋膜室综合征。此外,强化从烧伤休克液体复苏通常是困难的在严峻的环境中(战场、森林火灾或地震)由于环境条件,大量人员伤亡,和逻辑约束。因此,药物可以减少燃烧衰减伤等离子渗漏的液体要求将受益伤亡在平民烧伤或燃烧的灾难。
新出现的证据表明,热后脂质过氧化损伤中起关键作用的增加血管通透性和随后的等离子体泄漏(4]。乌司他丁是一个从人类尿液的蛋白酶抑制剂,据报道,减少脂质过氧化反应在各种模型(29日,32- - - - - -35]。我们最近的研究也表明,乌司他丁减毒vasopermeability体内和体外(31日]。然而,它仍然未知乌司他丁治疗是否会降低脂质过氧化作用和流体要求在猪模型的主要燃烧伤害。
在本研究中我们采用了40%的猪模型回溯烧伤病人探讨乌司他丁对脂质过氧化的影响和流体的要求。我们在这个猪燃烧模型表明,乌司他丁治疗对抗脂质过氧化作用,组织水肿,和净流体积累,从而减少流体的要求。
乌司他丁是一种相对安全的药物,剂量从5000年到1000000 U /公斤已报告在不同的动物模型(36- - - - - -38]。在这项研究中,我们使用高剂量的乌司他丁(80000 U /公斤在烧伤后第一个24小时,然后另一个40,000 U /公斤24小时后在第二燃烧)为了获得更重要的保护作用。
我们首先评估了乌司他丁对流体的影响要求烧猪随后立即复苏或延迟复苏的调整率根据尿量。血流动力学反应燃烧伤害和复苏是类似于先前的报道24,39,40]。没有显著变化,地图和CO立即复苏组。虽然有一个地图和减少公司在烧伤后延迟复苏组损伤,他们逐渐复苏启动时恢复到基线水平附近。同样,比容增加燃烧伤害造成损失后等离子体体积,然而,复苏后回到基线水平附近延迟复苏组。这些结果表明,适当的恢复实现等离子体体积在复苏策略。PVPI的增加和ELWI观察热损伤后尽管复苏,然而,乌司他丁明显减毒burn-induced PVPI增加和ELWI立即或延迟复苏组。这表明,乌司他丁能减弱burn-induced肺损伤和水肿是由其他研究[41,42]。PVPI和ELWI经销商和经销商/乌组明显高于劳工关系和劳工关系/乌组在伤后6小时,经销商和经销商/乌里没有给予液体复苏组。可能ELWI和PVPI高估了山顶系统由于血容量减少的山顶系统[的局限性43]。
在这个实验中,尿量维持在1 - 2毫升/公斤/小时通过调整输液率。尿量是相似的动物有或没有乌司他丁治疗。然而,乌司他丁明显减毒净流体积累直接和延迟复苏组。此外,含水量的心脏,肺,回肠ulinastatin-treated动物的显著降低。这些发现与之前的研究,我们和其他人(31日,42),表明乌司他丁能够减弱burn-induced增加血管通透性和等离子体体积,从而减少流体损失的要求。
自自由radical-induced脂质过氧化是建议涉及burn-induced增加血管通透性和随后的等离子体泄漏(4),乌司他丁报道减少脂质过氧化反应在各种模型,包括燃烧模型(29日,32- - - - - -35,44]。因此,我们进一步研究乌司他丁的保护作用是否burn-induced增加血管通透性和等离子体体积损失与降低脂质过氧化作用有关。我们测量了等离子体浓度和组织TBARS脂质过氧化的索引。在与以前的研究一致44),我们发现燃烧的侮辱,导致脂质过氧化增加,乌司他丁政府有效地减毒burn-induced脂质过氧化作用。我们进一步测量了抗氧化酶活动心,肝、肺、肌肉和回肠收获后48小时燃烧。然而,与以往相比,这个调查Shimazaki et al。44),无显著差异在抗氧化酶活动是所有组中观察到。岛崎博士的研究结果和我们之间的差异可能是由于不同的动物,组织,或组织收获时间,需要进一步的研究来证实乌司他丁在抗氧化酶活动的影响。
5。结论
总之,乌司他丁、蛋白酶抑制剂、变弱burn-induced血管渗透性增加和净流体积累和治疗作用在减少流体热损伤的要求。乌司他丁的保护作用可能是介导通过burn-induced脂质过氧化反应的抑制作用。这项研究提供了一个潜在的小规模液体复苏战略打击主要燃烧伤害。
利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
确认
作者感谢张Hui-Ping技术帮助。我们的研究支持了(1)中国国家基础研究计划(973计划,格兰特2012 cb518101),和(2)天普医药研究基金。02100917,Techool制药有限公司,中国。赞助商不涉及研究设计,在收集、分析和解释数据,在论文的写作,在决定提交投稿。