文摘

保护作用的镁硫酸镁sodium-metavanadate (MS)——(SMV)诱导脂质过氧化反应(法律流程外包)在活的有机体内和在体外条件进行了研究。0.125的18-week SMV中毒(集团二世/毫升)增强自发的丙二醛(MDA)在大鼠肝脏,与控制(I)组和MS-supplemented动物(第三组,0.06/毫升)。共同服用SMV的女士(第四组,SMV-MS)引起的MDA水平控制的回归值范围。似乎带来的影响独立行动和它对立的相互作用。的在体外治疗肝上层清液(LS)获得所有试验动物组与选定的外生的浓度或表现出增强的MDA生产,而MDA自发形成。它还显示刺激影响法律流程外包(LS我,组我)和显示,MDA生成的变化在LS IV(第四组)可能导致的协同交互与和和拮抗的相互作用与和。结果允许建议摄入足够的Mg的条件在一个特定时期内SMV暴露可能防止V-induced法律流程外包在肝脏。

1。介绍

脂质过氧化(法律流程外包)是一个著名的自由基的过程定义为氧化脂质恶化。使用它作为氧化应激的指标(OS),这发生在平衡生产活性氧(ROS)和自由基(FR)覆盖细胞或组织的抗氧化能力1- - - - - -3]。可能是氧化细胞损伤的可能机制之一由活性氧引起的,并且它可以与许多疾病的发病机理(2,4]。产品中形成醛等法律事务外包,尤其,丙二醛(MDA)是众所周知的有害影响。他们可以改变生物膜组织和修改蛋白质和DNA。另一方面,他们也可以调节信号转导通路,诱导适应性反应,以及增加公差对即将到来的操作系统移植防御能力(5,6]。

钒(V),这是一个广泛分布的元素,具有广泛的工业用途。职业方面,环境相互影响和生物与人类生活7]。承诺书,其毒性取决于给药途径,化学形式,和氧化态,这决定了这个元素的广泛的生物效应(8]。由于其有害健康的影响(9),我们的兴趣都集中在搜索因素可能防止V的有害作用,减弱其prooxidant活动。

redox-active金属,V可以调节细胞氧化还原电位和参与氧化损伤机制。在一定条件下,它可以提高oxygen-derived活性物种的生成,刺激法律流程外包(10]。其prooxidant一直在显示属性在活的有机体内和在体外条件都由我们(11,12)和其他研究人员(10,13- - - - - -21]。另一方面,抗氧化剂V (22],其胰岛素样作用[23),和抗癌的活动(24- - - - - -26也被报道。

反过来,相对无毒和nonredox活性镁(Mg)不能参与氧化还原反应,产生FR。它可能有效地防止FR和过氧化损伤。对法律事务外包已经证明了其抑制的影响在体外(27,28),在活的有机体内在各种动物模型,包括老鼠,29日- - - - - -32]以及人类研究[33,34]。法律流程外包的限制这个元素也被披露的条件下镉和汞暴露在老鼠模型中(35,35]。然而,在某些情况下毫克可能刺激法律流程外包造成操作系统。能力提升提供法律服务外包已经揭示了我们(11,12和其他调查人员27]。

Mg及其有益作用的抗氧化潜力限制法律流程外包和V的强劲prooxidant潜力及其著名的毒性影响以及不足的信息可能保护Mg对V-induced法律流程外包促使我们进行一项实验的老鼠模型来探讨假说是否18-week Mg硫酸镁(管理女士,0.06毫克毫克/毫升)结合偏钒酸钠(SMV)能够有效地限制V-stimulated法律流程外包在肝脏。这个器官是V的网站积累和储存中起着重要作用,许多重要物质的分泌和生产以及维持体内平衡和解毒允许身体功能和生活。外生Mg的影响、V和铁在法律流程外包肝脏上层清液(LS)和它们之间的相互作用的影响,认识到这可能帮助说明的细胞机制应对金属的组合,也被检查。

2。材料和方法

2.1。化学药品和试剂

(SMV), (硫酸、MS)、铁()和硫代巴比土酸(稍后通知)从西格玛化学品(圣路易斯,密苏里州,美国)。所有其他的化学药品和试剂均为分析纯。

2.2。实验设计

实验进行40成人远白化雄性Wistar鼠平均初始体重约267克,,适应一段时间7天的房间后,在传统的控制条件下,被随机分成4组(每组10大鼠)。所有的老鼠都分别安置在不锈钢笼子里(一个鼠笼)实验开始的时候。每天18-week时期,所有的老鼠都无限制地啮齿动物实验室chow (Labofeed B;饲料和浓缩工厂,Kcynia,波兰)12毫米直径的颗粒的形状,他们收到喝:集团我(未经处理的控制)去离子的水;第二组(SMV)——水的解决方案在V 0.125毫克/毫升的浓度;第三组(MS)的水溶液在0.06毫克毫克/毫升的浓度;第四组(SMV-MS)——水的解决方案和在同一浓度为第二组在第三组。提供食物、液体和去离子水随意。在18周期间,体重得到每周和屠杀的时候。动物的行为也被观察到。

股票的解决方案和取而代之的是每2天刚做好的解决方案。每日摄入的水和SMV的解决方案,女士,SMV-MS用量筒测量水和液体摄入量是表示为毫升/鼠/ 24小时。反过来,V的日摄入量和SMV - Mg或/和MS-administered动物估计的基础上24小时消费SMV的女士,SMV-MS解决方案和表达为毫克/公斤b.wt. / 24小时。然而,食物摄入量的基础上计算了24小时消耗的食物老鼠的组织(余下的食物加上额外的溢出称重和减去从整个食品老鼠收到吃)和表达为g /鼠/ 24小时。饮用水中V和镁浓度的基础上选择我们之前在老鼠模型实验(11,12,36和其他研究人员的研究37,38]。V的浓度选择披露其prooxidant潜力,这意味着政府的减毒这个元素结合毫克。毫克的浓度被选自毫克(如不太高)据报道引起腹泻39,40]。

18周后,把所有的老鼠都是8点到11点之间和肝脏,它被用来准备LS测定MDA水平,和其他器官被割开,直接冲在冰冷的生理盐水(0.9%氯化钠),和体重。不立即使用的生物材料存储冻结在-20°C或-80°C的冷藏器HFU 486基本(买了作为项目的一部分题为“建设跨学科研究中心”的框架内实现操作项目“波兰东部发展”2007 - 2013,优先我:现代经济,I.3行动。创新的发展,由欧洲区域发展基金共同投资)(热费希尔科学、德国),直到进一步分析。实验根据实验协议1日当地伦理委员会批准的动物研究在卢布林,波兰。

2.3。分析性程序

LSs, MDA水平决定使用稍后通知,得到从40远6.5月白化雄性Wistar鼠。更多细节关于MDA的LS的准备测量的方法测定这法律外包标记描述了我们之前(11]。LSs获得所有的组大鼠:LS我(我从集团控制),LS II(从第二组,SMV), LS三世(从第三组,MS),和LS IV(从第四组,SMV-MS)被分成几部分,随后孵化(a)没有一个电感器:法律外包自发(),(b)与30μ毫克ydF4y2Ba(),(c) 100、200或400年μM SMV (),或(d)与100年、200年或400年μM女士()。MDA形成计算使用摩尔消光系数1.56×10⁵米⁻¹厘米⁻¹和表达的结果是每克湿nmol组织(nmol / g湿组织)。

2.4。统计分析

结果处理Statistica和SPSS分别PL Windows版本9.0和14.0。数据的分布模式进行评估使用Shapiro-Wilk的正常测试。方差的同质性是用人列文的试验来验证,有时还哈特利的Fmax,科克伦的C和Bartlett的测试。双向方差分析(双向方差分析)与钒(V_结束)和镁(毫克_结束)因素和测试是用来表明V的显著影响_结束、镁_结束或V_结束×毫克_结束交互。此外,三方方差分析方差分析(三通方差分析)和外源性铁()、外生钒()和外源性镁()因素以及测试也被用来揭示的重要影响,,或。值了值小于0.05被认为是具有统计学意义。如果2 -或3路方差分析测试演示了使用或元素之间的交互效应对这些影响趋势,做后续的计算是为了描述的交互显示的字符(拮抗或协同)(41]。的事后对比四个人组使用图基或T3 Dunnett执行测试。比较自然的法律流程外包和法律事务外包修改体内铁_exg,V_exg和毫克_exg被评估的以及依赖或Wilcoxon测试样品。学生的“”以及独立样本也申请检测消耗V剂量之间的显著差异的老鼠在第四组II和和Mg剂量组III和IV。老鼠之间的差异被认为是重要的如果值小于0.05。所有的结果表示为±SEM。

3所示。结果

3.1。一般的观察

没有外表截然不同的差异和运动行为观察18实验周期间的大多数老鼠收到SMV或/和解决女士喝酒,而控制。一些老鼠喝了SMV分别和女士的解决方案(第二和第三组,分别地。)和结合(第四组)有胃肠道障碍,这可能是由于V或/和镁的摄入。只有一个老鼠从第四组一天腹泻在第三和八个星期的实验。反过来,便溏被观察到在一个大鼠组II和III和IV族的三只老鼠在第一或第二周的实验。然而,在两个老鼠二组和三组在一个观察便溏的第五和第六周的实验,在第二和第五周的研究中,分别。

3.2。基本参数

液体和食物摄入量以及身体的老鼠体重增加第四组II和较低,相比之下,那些动物群体中发现我和III(数据1(一),1(c)1(d))。双向方差分析显示,减少上述参数在第四组的老鼠是由于只V(表的独立行动1)。也观察到,老鼠在第四组V(8%)略少,与动物在第二组相比,但这种差异没有统计学意义。反过来,消费Mg的老鼠在第四组明显降低(21%),相比之下,发现动物组三世(图1(b)),这可能是一个减少液体摄入量的影响由于SMV政府(图1(a))。

3.3。自发形成的肝脏MDA

提出了图2(一个)第二,仅接触SMV(集团)显著增强自发生成的MDA的水平,与控制(I)组相比,MS-supplemented(第三组)和SMV-MS-applicated(第四组)大鼠。补充的老鼠女士独自一人没有改变明显MDA形成与控制相比,而女士的管理结合SMV水平降低了62%,而SMV-intoxicated老鼠。也观察到的水平检查法律外包标记相同的值范围内,被发现在控制动物。双向方差分析显示,自发形成的减少MDA在第四组的老鼠受到Mg的独立行动和互动与V(表1)。

3.4。修改菲MDA水平_exg,V_exg,毫克_exg

修改在LS II, MDA水平(图2 (b)),(数据2 (c),2 (d),2 (e))或(数据2 (f),2 (g),2 (h)在LS)显著增加,相比之下,发现我,III, IV孵化在体外条件。此外,在LS IV孵化的浓度,,或,MDA水平显著下降了76%,38.5%,29%,22%,53%,51%,和48%,分别相比,发现在LS II孵化以同样的方式(数字2 (b)- - - - - -2 (h))。此外,在LS IV孵化(图2 (b))或(数据2 (f)- - - - - -2 (h)),MDA水平返回值的范围获得LS我和相同浓度的铁孵化_exg和毫克_exg。的存在或(数据2 (c)和2 (d)),这个法律流程外包的水平标记没有明显升高,而只在LS i V的最高浓度(),明显高于水平,相比之下,LS(图2 (e))。此外,在LS IV孵化(数据2 (c),2 (d)和2 (e)),MDA水平也显著提高,相比之下,发现在LS三世孵化的存在上述V_exg浓度。

它也表明,在LS三世孵化的存在(图2 (b)),(图2 (c)),或(数据2 (f)和2 (h)),MDA的水平降低了48%,51%,45%,和47.6%,分别比LS我和相同浓度的铁孵化_exg,V_exg或毫克_exg。MDA水平LS三世孵化,(数据2 (d)和2 (e)),或(图2 (g))也较低,相比之下,观察LS我,但这些差异不是那么明确。

此外,LS,从控制老鼠,孵化,或表现出更高的MDA生产,而观察LS没有(我孵化)上述浓度的铁_exg或V_exg(图3(一个))或毫克_exg(图3 (b))。更高的MDA生产还演示了LS II, III和IV从SMV-intoxicated获得,MS-supplemented, SMV-MS-administered老鼠,分别在孵化或相比,与自发形成MDA LSs(图3(一个))。反过来,LS的孵化II, III, IV的存在相比,MDA的水平没有明显变化,,分别(图3 (b))。

三方的方差分析显示,LS IV MDA水平的变化(从大鼠补充获得女士在SMV暴露)由外生修改,,或导致V的独立行动_结束和毫克_结束以及从他们的交互或V截然不同的趋势_结束×毫克_结束相互作用(表2)。此外,旁边的三方方差分析表明,影响了V之间_结束和毫克_结束在LS IV, MDA的变化生产孵化也是一个独立行动的结果菲_exg及其与V_结束和毫克_结束以及三个元素之间的交互效应:铁_exg,V_结束,毫克_结束。反过来,MDA的变化代在LS IV孵化,,或另外的独立行动,,和他们的交互与V_结束和毫克_结束(表2)。在孵化的LS IV或,三方方差分析表明LS IV的MDA水平的变化的存在或也影响的独立行动的和。反过来,任何重大的影响在LS IV MDA生产被进行分析(表显示2)。

4所示。讨论

当前报告演示的影响18-week V和Mg政府(SMV和女士resp),单独和组合,对液体和食物摄入量等基本参数的变化,在雄性Wistar鼠体重和身体。它还礼物(a)保护Mg的影响在活的有机体内SMV-stimulated提供法律服务外包的大鼠肝脏,(b)的调制影响体内使用Mg, V,菲在法律流程外包在体外条件,(c)的主要和互动影响上述元素,和(d)的角色交互对探索自由基的变化过程。

的基础上获得的数据,我们可能状态的补充有女士的老鼠在18-week SMV暴露不限制减少液体和食物摄入量和身体体重增加(数据1(一),1(c)和1(d))。类似的效果也被观察到我们以前在大鼠补充在12周女士SMV接触(36,42]。流体的变化和食物摄取和SMV中毒后大鼠的体重增长已经讨论(43]。

正如我们所料,V (SMV)增强法律流程外包(数据1(一)和3(一个))。法律流程外包水平的升高与SMV后大鼠的肝脏中毒或偏钒酸铵(lamv)和LS孵化与钒酸钠在体外系统是由其他研究者也报道(44- - - - - -46]。很强的相关性之间的感应法律流程外包和肝毒性的抑制过程并行的抗氧化剂,建议法律流程外包的决定性作用V-induced肝毒性,也观察到(47]。

执行分析使我们得出结论,MDA的增加生产中观察到LS IV(第四组)的存在或(图3(一个))不仅是一个独立行动的结果两大因素也导致铁之间的协同互动_exg和V_结束和V之间_结束和V_exg(表2)。同样的互动效应被发现之前由我们(11]。这并不奇怪,因为这两个元素可以加强法律流程外包(48]。

反过来,LS的孵化II, III和IV没有显著改变MDA水平,而自发MDA生成,我只有在LS是Mg的刺激行动肝脏MDA形成了(图3 (b))。Mg肝MDA生产的刺激效果也观察到我们以前11]。

另一方面,目前的研究结果清楚地表明,雄性Wistar鼠接受SMV结合女士(第四组)18周明显降低自发MDA水平比暴露于SMV(第二组),肝自发性的MDA生成明显更高,相比之下,发现在控制(I)组和MS-supplemented动物(第三组)(图2(一个))。双向方差分析分析的结果让我们得出这样的结论:Mg的保护性的影响在减少SMV-stimulated肝脏MDA生成18-week SMV和政府造成女士Mg的独立行动_结束并从其敌对的交互与V_结束(表1)。不幸的是,当老鼠在更短的12周女士补充SMV曝光,我们没有展示任何重大下降产生的自发MDA在肝脏,相比之下,发现在SMV-intoxicated老鼠11]。我们可以假设实验周期的持续时间的差异,至少在一定程度上,观察到的差异的原因。

此外,三方方差分析的结果分析还允许我们国家的限制增加MDA在LS IV孵化生产或,相比之下,LS II(数据2 (b)- - - - - -2 (e)),可能与Mg的敌对的交互_结束与菲_exg和V_exg(表2)。无论是对抗性V_结束×毫克_结束、铁_exg×毫克_结束,毫克_结束×V_exg交互和三方互动(铁V××毫克)(表2)已经被我们观察到以前11]。

研究的一个重要的新发现是,Mg的独立行动_结束是一个自发形成的主要影响负责抑制MDA与女士在老鼠的肝脏补充SMV暴露(表吗1)。我们不能排除,Mg的反激进主义的活动可能会成为,至少部分,其有益效果28,49- - - - - -51]。Mg在某些抗氧化剂的效果似乎也值得调查31日,52]。因此,进一步的工作是需要准确解释机制(s)负责Mg的有益作用的18-week条件SMV-MS共同服用。

V_结束×毫克_结束敌对的相互作用也发挥了重要作用的减少SMV-induced自发的法律流程外包的肝脏SMV-MS-coadministered老鼠(表1)。V×Mg互动研究在活的有机体内和在体外条件仍鲜为人知,只有单一的关于这个问题的报道出现在文献[38,53,54]。最近桑切斯et al。55]表明,V和Mg之间的相互作用可能发生在老鼠的消化和肾脏系统。敌对的字符之间的交互显示V_结束和毫克_结束在我们的实验条件需要额外的分析。这似乎是重要的扩展机制的知识特别是钒酸对生物的影响和Mg的潜在作用预防V的毒性。

5。结论

我们所知,目前的保护行动的报告是第一个示范Mg对prooxidant V透露在老鼠模型的潜力。研究表明18-week补充的雄性Wistar鼠毫克(MS)在接触V (SMV)可能防止V-induced肝法律流程外包。研究提供了证据,Mg的有益影响的限制增加肝脏MDA生成期间18-week SMV中毒可能导致从Mg的独立行动和敌对的交互与v .然而,还需要进一步的研究来解释的确切机制(s)占Mg的保护作用与SMV-induced操作系统在我们的实验条件。获得的结果似乎表明,适当的Mg摄入量为一个特定的时间段SMV暴露的条件可能防止V-stimulated法律流程外包在肝脏。

本研究还显示元素的独立行动的程度(V、镁和铁)和使用相互交互可能修改肝脏MDA生产。同时,证实Mg能够促进法律外包在一定条件下通过揭示其刺激行动在探索自由基的过程在体外系统。

缩写

毫克结束:	毫克(MS)从内部管理到老鼠
V结束:	V (SMV)从内部管理到老鼠
毫克exg:	毫克(如增加体内肝上层清液(LS)
Vexg:	V(如增加体内肝上层清液(LS)
菲exg:	铁()增加体内肝上层清液(LS)。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突。