文摘

这项研究的目的是确定脂质过氧化产物的浓度,选择抗氧化的活性和溶酶体酶,蛋白酶抑制剂在肾细胞癌患者接受根除性肾脏切除手术。研究小组包括44例:21人接受开放手术,而23日接受了腹腔镜检查。三次血液样本收集:在治疗和12小时,肾切除术后5天。血的参与者,硫代巴比土酸活性物质的浓度(TBARS)、过氧化氢酶(CAT)的活性、超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和酸性磷酸酶(AcP)的活动,arylsulfatase (ASA),组织蛋白酶D (CTSD),α₁抗胰蛋白酶(AAT)化验。没有在统计上有显著差异的调查研究团体之间的参数被发现。此外,TBARS浓度和猫,SOD、GPx活性没有改变的过程中,两种类型的手术。五天之后开放和腹腔镜肾切除术技术,AAT活动高于其活动过程后12小时。结果表明,腹腔镜检查可用于肾切除术有效开放手术不创建更大的氧化应激。减少时间的恢复期患者在腹腔镜检查可能是由于严重的急性期反应蛋白较少。

1。介绍

肾细胞癌(RCC)是最常见的肾脏癌症起源于肾小管细胞(1]。尽管肾细胞癌是相对罕见的与其他癌症相比,其发病率仍在增长(2]。吸烟、肥胖、高血压、和/或相关药物牵扯风险因素(3]。本地化RCC,根除性肾脏切除手术仍然是最主要的外科治疗,然而,正在修改的技术(4]。自推出以来,已经建立了腹腔镜根治性肾切除术作为标准治疗局部肾细胞癌的手术治疗5,6]。腹腔镜手术似乎比开放手术有相当大的优势,如减少失血,减少术后疼痛,减少发病率,以及缩短住院时间(7- - - - - -9]。然而,腹腔镜检查需要特殊技能使用不熟悉的设备,有有限的泌尿科医生,训练在腹腔镜检查6,9]。此外,气腹腹腔镜手术期间有几个当地的感应和系统性作用[10]。仍然很是知之甚少的影响不同的切除技术antioxidant-oxidant平衡和炎症标记物在RCC患者。

一个失衡的生产活性氧(ROS)和一个人类系统的解毒能力或者很容易修复产生的ROS可能导致氧化应激。通常调查过程参与活性氧生成细胞脂质过氧化作用。脂质过氧化作用的产品,如硫代巴比土酸活性物质(TBARS),改变生物膜的能力(11]。最终结果的结构性障碍引起的细胞成分ROS是其功能的改变,甚至细胞死亡(12]。然而,人类有机体具有复杂的抗氧化防御机制保护他们免受活性氧形成和增加他们的反应和细胞的化合物。基于抗氧化防御机制之一是酶活性,包括超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx) [13]。氧化应激也会导致溶酶体膜的一些干扰,因此,引起了一些参与血清酶活性的变化。这些酶参与家务管理任务,如营业额胞内蛋白的抗原,和骨重建,但是他们也知道被发现外溶酶体在某些病理条件和参与多种疾病(14]。

本研究的目的是确定两个不同的影响肾切除术技术在脂质过氧化产物的浓度,主要的抗氧化酶的活性,以及选定的溶酶体酶的活性蛋白酶抑制剂在肾细胞癌患者接受开放手术和腹腔镜检查。

2。材料和方法

群的研究泌尿外科的病人参加1月Biziel地区医院的台灯。患者入选标准≥18岁接受根除性肾脏切除手术的局部肾细胞癌,同意自愿参与实验。患有其他疾病的患者被排除在研究治疗可能影响血液中抗氧化剂水平。排除标准也烟吸烟和使用包含抗氧化剂补充饮食。血样从总数获得44个科目(24男性和20名女性)年龄在30岁至76岁。所有的病人接受根除性肾脏切除手术;然而,使用两种不同的技术,因此,受试者分为两组。第一组包括21人接受开放手术,而另一个包含23个学科与腹腔镜治疗。

从贵要静脉血样采集之前切除和12小时,5天之后开放手术和腹腔镜检查。当地的生命伦理委员会执行管理委员会Medicum ToruńNicolaus哥白尼大学的协议,和所有学科给了他们的书面知情同意。

硫代巴比土酸活性物质水平确定在血浆和红细胞根据Buege和欧斯特(15)方法Esterbauer和Cheesman修改(16]。彩色的方法包括创建复杂的脂质过氧化反应产品之间和硫代巴比土酸在100°C的温度和酸性环境。发生复杂的最大吸收波长532纳米。脂质过氧化反应的主要产品与硫代巴比土酸丙二醛(MDA)水平,因此,TBARS在等离子体被表示为MDA nmol /毫升和红细胞MDA的nmol /迷奸。

抗氧化酶的活性测定红细胞。啤酒和筛选器(17)法测定过氧化氢酶活性。这种方法是基于测量吸光度降低过氧化氢,过氧化氢酶分解的,测量的波长240 nm。猫活动表示为10⁴国际单位/迷奸。超氧化物歧化酶活性是由Misra Fridovich方法(18]。这个过程是基于SOD阻碍肾上腺素的自动氧化作用的反应在碱性环境中肾上腺素红。SOD活性表达为U /迷奸。谷胱甘肽过氧化物酶活性测定根据屋和情人节(19]的方法基于测量吸光度的变化在一个波长340 nm,造成氧化还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)。NADPH的辅酶还原二硫化谷胱甘肽。获得的氧化谷胱甘肽是谷胱甘肽过氧化物酶反应的产物催化了。GPx活性被表示为U /迷奸。

溶酶体酶和蛋白酶抑制剂的活性测定血清。酸性磷酸酶的活性决定通过Bessey的方法(20.]。活动措施的数量p-nitrophenol 4-nitrophenylphosphate酶法水解期间生成的二钠盐作为衬底。罗伊的方法修改Błeszyński [21)被用来测定arylsulfatase活动。这里采用的衬底是4-nitrocatechol硫酸(4-NCS)和测量记录的数量4-nitrocatechol在酶法水解释放。组织蛋白酶D活动决心使用安森方法(22]基于测量酪氨酸CTSD血红蛋白水解期间发布的数量。的活动α₁抗胰蛋白酶决心根据埃里克森(23]。这个过程依赖于胰蛋白酶抑制水平的评价AAT在1毫升的血清。

所有结果统计分析的因素重复测量方差分析测试与事后分析(图基的范围测试)。在运行方差分析之前,模型假设也测试(Shapiro-Wilk测试正常和盒子的协方差的同质性检验)。相关系数()之间的参数关系的评价也估计。变化的意义被认为是具有统计学意义。

3所示。结果

TBARS的浓度在血浆和红细胞的肾细胞癌患者切除后不改变病人开放或腹腔镜手术相比,手术治疗前的值(表1)。也没有在统计上有显著差异的硫代巴比土酸活性物质浓度两组之间的碾压混凝土的病人。然而,一些越来越倾向于TBARS水平注意到12个小时,手术后5天比干预前的值。

考虑过氧化氢酶的活性、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶在调查组患者中,没有发现显著变化的结果彻底的切除。也没有接受开放手术和腹腔镜检查的患者显著差异(表1)。然而,一些统计上显著的抗氧化酶研究之间的相关性被发现。在治疗之前,有一个正相关(,)之间的猫和SOD活性组患者接受开放手术和负相关(,)之间的猫活动和TBARS水平腹腔镜检查前患者的红细胞。患者在腹腔镜肾切除术后12小时,正相关(,)发现猫和GPx活性之间的关系。

活动的调查中发现了没有明显的统计学差异之间的溶酶体酶和蛋白酶抑制剂与开放手术治疗的患者相比,患者接受腹腔镜检查。然而,一些活动的变化被发现是外科治疗的结果。变化的模式是类似的两组患者,但是发现了一些差异。arylsulfatase减少肾切除术后的活动相比,干预前的值(表2)。与开放手术治疗的患者,它减少了约26% ()和22%(12小时)肾切除术后5天。在受试者接受了腹腔镜检查,甚至更多,减少了约37% ()和45% (肾切除术)12小时,5天之后,分别。反过来,CTSD活动在统计上显著的群体增加手术治疗(表的结果2)。与开放手术治疗的患者,CTSD活动过程高出77%(12小时后手术后5天),而高89% (比治疗前)。腹腔镜检查12小时和5天后,CTSD活动为61% ()和高55% (),分别。比较蛋白酶抑制剂的活性在治疗的过程中,其活动12小时后切除减少这两种技术,但这在统计学上并不显著。5天治疗后,AAT活动统计上显著增加价值相比(表12小时后治疗2)。在患者接受开放手术,AAT活动高出84% (),而在受试者接受腹腔镜检查,它高出51% ()。没有统计上显著的变化在AcP活性开放手术或腹腔镜检查表2)。

考虑相关系数之间的所有研究溶酶体酶和蛋白酶抑制剂,正相关了亚撒和AcP活动(,)和亚撒和AAT活动(,)和CTSD和ASA活动之间的负相关(,开放手术患者在治疗后5天。在患者接受腹腔镜,CTSD之间负相关和ASA活动被发现12个小时(,)和后5天(,肾切除术。

此外,在研究中,提出一些参数之间的相关性被发现氧化应激和溶酶体的酶。十二个小时开放手术后,负相关(图1)观察SOD与CTSD活动(,),而腹腔镜手术后12小时,负相关(数字2和3SOD和CTSD活动之间)显示(,)以及与GPx CTSD活动(,)。五天后患者接受开放手术的外科治疗,统计上显著的负相关(图4)观察SOD与CTSD活动()。在一群病人腹腔镜检查,5天后干预,显著负相关(图5)是观察之间的猫捉CTSD活动(,),以及SOD和ASA活动之间的正相关关系(,)。此外,TBARS之间的正相关关系_等离子体水平和AAT活动(,)被发现。

4所示。讨论

腹腔镜手术已成为最重要和受欢迎的技术在普通外科和选择的过程几乎所有类型的腹部操作,开放手术(因为它的优势10]。虽然有很高的技术,腹腔镜检查提供了RCC患者改善生活质量恢复期间减少止痛的需求,更少的并发症,更快速恢复期(24,25]。然而,也有一些报道更高的死亡率和更常见的故障救援后腹腔镜检查可能由于经验的外科医生和医院差(24,25]。尽管所有的优势,腹腔镜手术可以有几个地方和系统性后果相关气腹用于促进视觉领域的感应。吹气的二氧化碳进入腹腔导致酸碱平衡变化,血液气体,和心血管和肺生理(26),导致可逆的肾功能障碍(27,28]。气腹的影响取决于很多因素,比如压力程度和天然气使用(29日]。例如,氦似乎限制术后氧化反应后腹腔镜更高的MDA和羰基反应和巯基消费后显示有限公司₂吹气与氦(30.]。

最近,一些临床和实验研究表明,建立气腹导致氧化应激。腹腔镜检查等可能改变活性氧的生产,因为二氧化碳在过氧硝酸盐代谢的影响31日]。氧化应激在手术损伤也是由于缺血/再灌注损伤。在腹腔镜、腹腔压力增加引起的气腹可能导致内脏缺血再灌注紧随其后由于通货紧缩32]。脂质过氧化增加产品立即术后期间和腹腔镜术后减少内源性抗氧化剂后,但不开放胆囊切除术后,显示了Glantzounis et al。32]。作者认为自由基生成的腹腔镜手术,可能由于气腹引起缺血再灌注现象。氧化应激增加由于气腹腹腔镜捐肾切除术,期间也观察到肾脏捐赠者和剩余的(25]。

在我们的研究中,没有统计上显著的脂质过氧化水平产品的变化和抗氧化酶的活性显示12小时和开放手术或腹腔镜手术后5天。也没有参数的差异不同的肾切除术患者氧化应激之间的技术。文献的数据开放和腹腔镜手术技术对参数的影响的氧化应激是明确的。吉et al。33]表明,腹腔镜和开放结肠手术期间可能会导致氧化损伤肠系膜牵引并立即结束后操作。Bukan et al。34)表明,开放和腹腔镜胆囊切除术技术引起的氧化应激增加;然而,腹腔镜检查明显氧化应激诱发低于开放手术。其他人认为胆囊切除术,开放或腹腔镜,造成只有温和的氧化应激(31日]。SOD活性和总抗氧化状态后没有改变这两个程序,而内源性脂质过氧化水平较高onday干预后7。此外,他们发现,氧化低密度脂蛋白的水平更高的手术后,才打开胆囊切除术。另一方面,开放捐肾切除术相比,腹腔镜捐肾切除术,retroperitoneoscopic捐肾切除术,未发现差异的氧化应激标志物的肾组织样本(35]。

尽管缺乏外科治疗后氧化应激标志物的变化,一些显著的变化在ASA活动发现了RCC肾切除术后患者的血清。然而,众所周知,这种酶是家庭一员的硫酸酯酶激活半胱氨酸氧化formylglycine (36]。反过来,formylglycine-generating酶被氧化的抑制半胱氨酸由于增加活性氧生成(37]。可能因此而减少了ASA活动在我们的研究中观察到肾切除术后的结果存在的限制因素相关活动增加活性氧的生成后的手术治疗。

比较开放和腹腔镜肾切除术技术组织蛋白酶D活动被发现没有明显的统计学差异;然而,这两个程序后,其活动贴切地增加。在溶酶体水解酶中,组织蛋白酶在细胞中发挥主要作用蛋白水解作用[38]。最初,组织蛋白酶被认为只参与终端蛋白质降解在坏死和自噬死亡。如今,它已是不争这些酶执行许多特定功能参与重要的生理过程(39]。血清CTSD活动的增加可能是由于它的释放到胞质不稳定溶酶体膜后。尽管不稳定溶酶体膜的机制仍然知之甚少,代理列表能够破坏膜非常全面,包括活性氧,打扰了的过氧化脂质膜(40]。统计上没有显著改变抗氧化酶活性和脂质过氧化水平作为根除性肾脏切除手术的结果被发现,但一些抗氧化酶之间显著负相关性和组织蛋白酶D活动后被发现两组患者的手术治疗。这可能表明手术后抗氧化防御不足,这可能会导致一些氧化损伤,如溶酶体破坏。确认增加活性氧的水平一代肾切除术后可能是越来越倾向于TBARS水平观察。积累的数据表明罗斯不仅充当破坏性的享受,但也可能带来重要的有益功能(41]。活性氧发生手术后可能扮演一个角色在laparotomic伤口的愈合31日]。

组织蛋白酶活动监管的主要方式是通过互动与他们的内源性蛋白酶抑制剂(42]。在人血浆丝氨酸蛋白酶抑制剂约占总蛋白的10%,其中70%α₁抗胰蛋白酶(43]。AAT现在被认为是一个急性期蛋白质增加3 - 5倍的正常血浆水平在多种生理和病理条件下如压力、感染和炎症(44]。在目前的研究中,12小时后切除,的活动α₁抗胰蛋白酶统计无关紧要的减少,但术后5天,其活性高于治疗前,治疗后12小时。越来越多的证据表明,AAT拥有不仅抑制蛋白酶的能力,还能发挥抗炎和组织保护作用独立于蛋白酶抑制(45]。AAT与其他蛋白质可能是参与保护细胞外空间从蛋白质错误折叠和降水尤其是在压力条件下46]。尽管没有统计上显著的差异患者两组学习,它可以注意到的崛起AAT活动开放手术后高,这可能表明腹腔镜手术后更强烈的炎症反应。这些结果与一些研究协议相比,炎症反应在开放和腹腔镜胆囊切除术技术(47- - - - - -49]。他们发现更显著增加急性期炎症标记物,如α₁抗胰蛋白酶,打开后比后腹腔镜手术。他们假定腹腔镜胆囊切除术,这与组织损伤少,引发更强烈的应激反应。加et al。50)还表明,开放和腹腔镜手术诱导急性期蛋白水平的变化,自由基介导的反应,嗜中性粒细胞的功能。然而,腹腔镜在这些参数引发更强烈的反应。考虑开放和腹腔镜肾切除术后的炎症反应技术,没那么强烈的手术伤害引起免疫功能紊乱被发现后腹腔镜(51]。

5。结论

我们的研究表明,开放和腹腔镜根治性肾切除术都没有影响术后脂质过氧化水平的产品和在血液中抗氧化酶的活性,碾压混凝土的病人,和这两种技术可能只会温和oxidant-antioxidant平衡的变化。因此,我们相信腹腔镜可以用于根除性肾脏切除手术有效开放手术不产生氧化应激。此外,我们已经观察到的反应α₁抗胰蛋白酶比腹腔镜后更严重的开放手术后研究碾压混凝土的病人。急性期反应的衰减可能解释患者的康复,减少腹腔镜检查。

利益冲突

作者声明他们haveno冲突的利益。