文摘
去甲二氢愈创木酸(NDGA)是一种天然的木酚素与公认的抗氧化剂和有益的属性,是孤立的Larrea tridentata。在这项研究中,我们评估的效果的差别上NDGA对这些氧化剂应激CD33的人类单核细胞(MNs)。氧化应激诱导了碘乙酸(IAA)和过氧化氢(H2O2),并评估使用活性氧(ROS)生产,和细胞生存能力。NDGA变弱毒性、活性氧产生和氧化应激减少CD33表达二级IAA或H2O2在人类的MNs。它也表明,NDGA (20μ米)变弱的THP-1细胞系细胞死亡是由于治疗与IAA或H2O2。这些结果表明,NDGA对CD33表达有保护作用,这是人类MNs与其抗氧化活性有关。
1。介绍
去甲二氢愈创木酸(NDGA)是一种天然的木酚素主要是孤立的和商业的沙漠布什杂酚油,Larrea tridentata,一直被用于传统医学用于治疗一些疾病包括糖尿病和炎症(1]。据估计,NDGA包括大约5%到10%的干重的叶子,这对应于80%的酚类化合物的树脂(2]。细胞培养和动物模型研究表明NDGA生物属性,包括抗癌的抗糖尿病的,抗病毒,抗氧化,抗炎活动(3]。
的有利影响NDGA实质上归因于它的抗氧化性。NDGA是一种有效的在体外过氧亚硝基的清道夫,单线态氧,氢氧自由基(•哦),和次氯酸4,5]。它已经表明,NDGA能够保护暴露于氧化应激诱导的大鼠臭氧、重铬酸钾,顺铂(4,6,7]。此外NDGA还保护主要鼠神经元文化对损害所产生的过氧化氢(H2O2碘乙酸)和(IAA) (8- - - - - -10]。
此外,人们已经发现,NDGA诱导转录因子Nrf2和表达的血红素oxygenase-1 (HO-1)在不同类型的细胞(9,11]。事实上,Nrf2因素控制了超过100个基因的表达cytoprotective蛋白质包括HO-1等抗氧化酶(11]。
另一方面,这是证实氧化应激是涉及疾病如癌症、糖尿病和炎症。氧化应激是氧化还原状态的失衡,加剧了ROS生成的生产或降低防护系统,如酶或清道夫分子(12]。事实上,产量的增加活性氧(ROS)甚至导致细胞损伤和细胞死亡,和抗氧化剂有助于预防或减轻疾病涉及氧化应激。
谷胱甘肽是最丰富的非蛋白巯基化合物的主要细胞内氧化还原缓冲和几乎所有细胞。这个分子构成的第一行细胞防御机制与氧化损伤(13]。有证据,细胞内氧化还原状态调节细胞功能的各个方面,谷胱甘肽(GSH)是重要的免疫调制(14,15]。最近,它被描述在老鼠的预处理NDGA治疗前肿瘤促进剂12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA)减轻皮肤的脂质过氧化作用和抑制H2O2生产。NDGA还能够还原谷胱甘肽水平和抗氧化酶的活动甚至减弱炎症(16]。
H2O2IAA和有毒化合物,利用常见的导致细胞氧化应激模型(8- - - - - -10]。国际宇航科学院是一个不可逆转的烷化剂可以抑制糖酵解酶glyceraldehyde-3-phosphate脱氢酶(GAPDH) [17]。IAA减少三磷酸腺苷(ATP)含量和细胞生存方式存在剂量依赖的相关性(18]。已经表明,IAA-induced毒性与ROS生产,至少在老鼠的海马和小脑颗粒神经元19]。
作为一个ROS, H2O2是更少的活性;然而,它可以很容易地穿透细胞膜,与过渡金属离子反应产生•哦。这中间代谢物反应迅速,不加选择地生物分子的类,包括核酸、核苷酸,蛋白质,脂类和碳水化合物。活性氧诱导氧化损伤,这可能会导致DNA突变,蛋白质失活,和细胞死亡12]。
相比之下,单核细胞(MNs)发挥核心作用在炎症和宿主防御微生物。然而,在氧化应激相关疾病,如糖尿病和动脉粥样硬化,MNs永久激活,产生高水平的ROS和促炎细胞因子il - 6、il - 1和肿瘤坏死因子-α(TNF -α)。增加活性氧的生产可能会导致严重的疾病,如慢性炎症,甚至细胞死亡(20.]。
在这种背景下,有人建议,谷胱甘肽氧化还原状态变化,即平衡细胞内减少(谷胱甘肽)和氧化谷胱甘肽(GSSG),在抗原呈递细胞(apc)调节辅助t细胞类型1 (Th1 / Th2平衡由于小鼠il - 12的生产(21]。
此外,氧化后的挑战,巨噬细胞、系膜细胞和单核细胞增加可用花生四烯酸的量,通过激活磷脂酶A (PLA)和C (PLC) (22- - - - - -24]。花生四烯酸是衬底类花生酸的合成:前列腺素(PG),白细胞三烯,参与炎症反应和血栓素通过引发的生产和TNF -α。花生四烯酸的代谢转换到其副产品需要环氧合酶(COX)或脂肪氧合酶的催化活性(LOX),众所周知,氧化剂分子可以诱导合成的考克斯通过转录调控的机制,包括我κBα退化和NFκB核易位。因此,氧化应激有双重角色类二十烷酸生产;一方面它是信号增加底物可用性,另一方面它激活生物合成途径25]。
此外,糖尿病患者高血糖出现氧化应激和持续的炎症。这是由于不同的机制与过量的活性氧相关生产,如不可逆生产先进的糖化终端产品(年龄)。年龄刺激单核细胞和巨噬细胞炎性细胞因子的生产(26]。此外,高血糖可能刺激炎性细胞因子的生产,如il - 6、il - 1和肿瘤坏死因子-α(TNF -α),通过增加水平的过氧化物和自由基,诱导炎症27]。最近,CD33表达降低被描述在糖尿病患者高血糖的巨噬细胞。这种疾病导致的自发分泌TNF -α,这个变更可能促进额外的炎症在糖尿病的早期阶段II型(28]。
CD33骨髓特异性I型跨膜糖蛋白,由表达的表面观察髓系祖细胞和单核细胞成熟。这个分子是一种受体,属于唾液结合免疫球蛋白家族Ig-like凝集素(SIGLECS) [29日]。
在这项研究中,我们评估的潜在保护作用NDGA对IAA和H2O2全身毒性THP-1细胞系和人类的MNs。我们也证明NDGA人类MNs差别变弱氧化剂应激CD33表达对这些。
2。材料和方法
2.1。MNs THP-1细胞
外周血单核细胞被梯度离心法从肝素化静脉全血在Ficoll-sodium diatrizoate解决方案(Lymphoprep,奈科明制药公司,奥斯陆,挪威)使用标准程序(30.]。层包含外周血单核细胞(PBMCs)收获和充实了MNs塑料坚持1 h在37°C。人类外周血样本来自西班牙的血库de心血管Respiratorias(内心)认可机构伦理审查委员会的内心。
人类MNs RPMI 1640培养基培养(Cambrex Walkersville,医学博士,美国)补充了50μ2.0 g / mL硫酸庆大霉素,更易与L谷酰胺,和10% heat-inactivated汇集人类血清在37°C公司5%2大气(MN介质)。
人类急性单核细胞的白血病细胞株,THP-1,从美国购买类型文化集合(写明ATCC TIB202,罗克维尔市,医学博士,美国)。THP-1细胞生长在RPMI 1640补充10%胎牛血清(Lonza Walkersville,医学博士,美国),0.05μ米β巯基乙醇、谷酰胺4毫米100 U /毫升青霉素,100μg / mL链霉素(THP介质)。
2.2。NDGA对细胞活力的影响
MNs和THP-1细胞被播种在3×105细胞在培养基/在48-well板块。NDGA (5-50μ米)被添加到细胞和孵化120 h。孵化后,通过MTT还原细胞生存能力量化。
2.3。碘乙酸的影响或H2O2对细胞生存能力
人类MNs和THP-1细胞(3×105细胞/)培养48-well盘子。首先,与0 - 100细胞治疗μM IAA或0-20 mM H2O22 h诱导氧化应激。先后氧化剂取而代之的是新鲜的培养基,孵化是一直持续到24小时。细胞生存能力监控通过MTT还原或台盼蓝排斥。此外细胞形态学观察在明视场显微图40 x相衬显微镜(尼康有限公司)。
2.4。保护作用的NDGA Cytotoxicity-Induced IAA或H2O2MN和THP-1细胞生存能力
MNs THP-1细胞(3×105细胞/)在48-well培养板(锰或THP介质、职责)。这些细胞被使用或没有20μM NDGA 12 h,然后细胞暴露在(0 - 100μ米)IAA或(0-20毫米)H2O22 h后诱导氧化应激和刷新的有毒化合物。MTT还原或台盼蓝排斥决心后24 h IAA或h2O2曝光。
2.5。MTT细胞生存能力检测
细胞生存能力是决定使用3 - (4 5-dimethylthiazol-2-yl) 2, 5-diphenyltetrazolium溴化(MTT);σ,圣路易斯,密苏里州)还原试验31日]。简而言之,MNs (3×105细胞/)被播种到48-well板块;暗示治疗和时间段后,50μL MTT储备溶液(5.0毫克/毫升)被添加到细胞和孵化2 h在37°C公司5%2的气氛。盘子被离心机在1500 g在室温下15分钟(RT)和介质被愿望仔细删除。随后,一个酸异丙醇溶液(800μL)被添加到井,80 rpm的盘子都摇动了5分钟。最后,吸光度测量在570 nm标(Labsystems Multiskan)。可行的细胞的数量是用MTT还原指数表示。控制细胞(不处理)分配一个最大值1,和细胞培养的指数获得的不同治疗方法对控制细胞。
2.6。细胞毒性试验通过台盼蓝排斥
细胞生存能力也被台盼蓝-监控细胞。简洁,一个整除细胞悬液稀释1:1 (v / v)以0.4%台盼蓝和血细胞计数器的细胞数32]。结果代表的比例对控制台盼蓝-细胞(不处理)。这个实验做了三次独立实验。
2.7。测定活性氧(ROS)生产通过流式细胞术
2.7.1。IAA处理
MNs (5×105细胞/)培养24-well盘子。首先,细胞被使用或没有20μM NDGA 12 h,立刻暴露在非杀伤性的IAA浓度(2.5、5.0和7.5μ由48 h M)。然后,ROS生产决定。
2.7.2。H2O2治疗
MNs (5×105细胞/ 20)被使用或没有μM NDGA 12 h,然后暴露于h2O2(0.5、1.0和2.0毫米)12 h。然后,ROS生产决定。
活性氧与荧光标记检测测量5 - (6)-carboxy-2′, 7′二乙酸-dichlorodihydrofluorescein (carboxy-DCFDA;表达载体,卡尔斯巴德,CA),这是一个荧光素乙酰化的形式,并被用作ROS指标(33]。
治疗后,MNs被洗两次与磷酸盐生理盐水(PBS)和立即装满10μM carboxy-H2DCFDA为30分钟37°C在黑暗中活性氧的生产。这个孵化后,细胞在600 g离心5分钟。PBS的细胞被洗了两次然后用1%多聚甲醛固定,储存在4°C到收购FACSCalibur流式细胞分析仪(美国BD,圣何塞,CA)。事件是10000年收购的数量。
2.8。通过流式细胞仪测定CD33表达
2.8.1发布。IAA处理
MNs (5×105细胞/)培养24-well盘子。首先,细胞被使用或没有20μM NDGA 12 h,立刻暴露在没有IAA的致死浓度(2.5、5.0和7.5μ由72 h M)。然后,CD33表达决心。
2.8.2。H2O2治疗
MNs (5×105细胞/)使用汽车或20μM NDGA 12 h, h2O2(0.5、1.0和2.0毫米)24小时。然后,CD33表达决心。
测量CD33的MNs的细胞表面,细胞被洗PBS和立即含有饱和量的藻红蛋白——(PE)标记马伯CD33和孵化15分钟在RT在黑暗中。这些细胞被固定为1%多聚甲醛和储存在4°C到收购。事件是10000年收购的数量。
ROS水平和CD33表达的结果进行了分析与CellQuest软件(BD生物科学),表示为指数平均荧光强度(MFI)相比,控制没有治疗。
2.9。谷胱甘肽/二硫化谷胱甘肽比检测
THP-1细胞(3×106细胞/)培养6-well盘子。首先,细胞使用车辆或20μM NDGA 12 h,立刻暴露在IAA(2.5、5.0和7.5μ米)或H2O2(0.5、1.0和2.0毫米),额外的24小时。然后,谷胱甘肽测定。
谷胱甘肽和GSSG水平测定在细胞提取使用谷胱甘肽还原酶酶方法(34]。这个分析是基于谷胱甘肽的反应与5、5′-dithio-bis(2对硝基苯甲酸)(DNTB)形成5-thio-2-nitrobenzoic酸(TNB),可检测nm。测试是特定于谷胱甘肽的基础上谷胱甘肽还原酶的特异性酶,谷胱甘肽:TNB积累的速率正比于样品中谷胱甘肽的浓度。测定,细胞提取物稀释1:1与KPE缓冲区之前刚做好的DTNB和谷胱甘肽还原酶解决方案。后添加βnadph,立即吸光度测定,在30年代间隔为1.5分钟。吸光度的变化率比谷胱甘肽标准。GSSG在每个样本的测量是相同的,用于测定谷胱甘肽,但与之前的治疗与2-VP每个样本,这反应了谷胱甘肽。
2.10。统计数据
数据分析了棱镜5软件(GraphPad,圣地亚哥,CA)使用双向方差分析(方差分析)其次是Bonferroni多重比较测试或单向方差分析其次是Dunnett的测试,是适当的。的值被认为是显著的。
3所示。结果
3.1。NDGA、IAA和H2O2在人类单核细胞在细胞的可行性
首先,我们评估了NDGA对细胞生存能力的影响,确定NDGA MNs的细胞生存能力没有降低浓度范围从5到30μM(图1(一));然而,THP-1细胞的生存能力略下降25和30的NDGA浓度μM 120 h后孵化。因此,20的浓度μ米被选为评估NDGA对损伤的潜在的抗氧化作用引起的IAA和H2O2MNs和THP-1细胞。
(一)
(b)
(c)
我们也评估不同浓度的IAA和H的影响2O2在细胞的可行性。这些细胞被孵化与这些氧化剂通过2 h;然后20的化合物被移除和新鲜培养基μM NDGA补充道。这些细胞被孵化,直到24 h和生存能力量化。正如所料,IAA导致剂量依赖性降低MNs和THP-1细胞的生存能力。MN生存能力逐渐下降,显著的浓度为10μM IAA。THP-1细胞生存能力显著降低在50到100μM(图1 (b))。在相同的方式,H2O2-20毫米(2.5)浓度的方式引起细胞死亡。MN细胞死亡逐渐从5.0增加到20毫米H2O2。THP-1细胞死亡是实质性的和显著增加从2.5到20毫米H2O2(图1 (c))。
我们也验证了THP-1细胞形态学在明视场显微图。这些细胞是美满的整个领域,当处理车辆或20μM NDGA(图3)。然而,IAA (25 - 100μ米)和H2O2(5 - 20毫米)诱导形态改变,如形状圆的损失。氧化剂都能够产生损害的细胞浓度依赖(数字3(一个)和3 (b)左侧)。
然后,我们评估了防护NDGA对MNs的影响和THP-1细胞培养在IAA和H的存在2O2(图2)。我们的结果表明,细胞死亡是下降的MNs IAA浓度(图2(一个)),NDGA避免THP-1细胞的死亡在50 31%和41%μ米和100μ分别为M IAA(图2 (c))。此外,与NDGA预处理细胞损伤降低了H2O2,细胞死亡显著降低一系列的5 - 20毫米H2O2(图2 (b))。THP-1细胞的保护作用在10毫米H NDGA是重要的2O2(图2 (d))。这些结果也比得上台盼蓝-细胞的百分比(数字2 (e)和2 (f))。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(一)
(b)
同样这些结果证实观察细胞形态在明视场显微图(图3)。细胞培养与20μM NDGA大大减少损伤细胞形态,细胞治疗与IAA (25 - 50μ米)或H2O2(5和10毫米)。但细胞用NDGA预处理和IAA(100的浓度最高μ米)或H2O2(15和20毫米)仍然显示细胞损伤(数字3(一个)和3 (b)和右侧)。
3.2。活性氧测定生产IAA和H2O2在人类单核细胞
在这项研究中,我们表明,低IAA浓度显著增加活性氧引起的在48小时孵化(数字4(一)和4 (c))。相对活性氧产量增加的IAA浓度测试(2.5至7.5μ米)。同样,H2O2诱导活性氧产量显著增加(数据4 (b)和4 (d))浓度的1.0和2.0毫米后在12 h孵化。
(一)
(b)
(c)
(d)
3.3。谷胱甘肽水平THP-1细胞由NDGA诱导,IAA, H2O2
NDGA和有毒化合物的影响(IAA或H2O2)对谷胱甘肽水平被THP-1细胞氧化还原状态监控(图5)。首先,它是发现,IAA或H2O2诱导减少[谷胱甘肽]+ [GSSG]和[谷胱甘肽]浓度浓度的方式(数字5(一个)和5 (b))表明毒物引起的细胞的氧化应激。相比之下,预处理细胞与20μM NDGA (5μH M IAA / NDGA或1毫米2O2/ NDGA)废除了减少[谷胱甘肽]+ [GSSG]和[谷胱甘肽]浓度诱导氧化剂。此外,我们还注意到,NDGA仅造成轻微的增加(谷胱甘肽)+ (GSSG)和(谷胱甘肽)水平(数字5 (c)和5 (d))。
(一)
(b)
(c)
(d)
3.4。IAA和H CD33表达2O2在人类单核细胞
我们表明,治疗与IAA或H2O2显著降低MNs CD33表达水平。在IAA-treated细胞(2.5、5.0和7.5μ米)、CD33表达水平显著降低相比,控制;这种减少CD33表达在细胞表面发生浓度的方式(数字6(一)和6 (c))。与1和2毫米H MNs孵化2O2观察,显著减少CD33表达(数字6 (b)和6 (d))。
(一)
(b)
(c)
(d)
3.5。NDGA对活性氧的影响生产和CD33表达在人类单核细胞
NDGA的保护作用是评估对于H2O2——或者IAA-induced ROS生产和在MNs CD33表达(图7)。NDGA之前添加到文化氧化剂接触(5μH M IAA和1毫米2O2),它是维护在孵化期间的培养基。ROS和CD33表达水平然后用流式细胞术。
(一)
(b)
(c)
(d)
NDGA防止氧化应激,因为MNs培养NDGA / IAA(图7(一))或NDGA / H2O2(图7 (b)显示更少的ROS生产。此外,CD33表达的减少是NDGA减毒的细胞暴露于IAA(图7 (c))和H2O2(图7 (d))。值得注意的是,这些细胞暴露于NDGA CD33的相似比未经处理的控制细胞蛋白表达水平。
4所示。讨论
它是NDGA良好的生物属性,如抗癌的(35- - - - - -38),抗糖尿病的,抗病毒,抗氧化,抗炎活动在人类细胞培养和动物模型3,39]。此外,NDGA有益健康的属性,包括人类癌症的生长抑制在活的有机体内(40,41),预成型的阿尔茨海默氏症贝塔淀粉样原纤维的降解在体外(42),和保护培养的大鼠海马神经元的毒性淀粉样贝塔-肽(43]。
本研究的目的是评估的潜在保护作用NDGA对人类MNs氧化应激条件下培养。MNs是必不可少的宿主防御微生物。MNs使用机制,包括摄入细菌物质通过吞噬作用和杀死病原体通过产生活性氧保护主机(44]。此外,ROS生产执行其他重要的生理功能。例如,ROS参与信号转导和基因表达45,46]。MNs维持细胞内氧化还原内稳态平衡生产活性氧的清除通过细胞抗氧化防御系统。
然而,过量的活性氧产量可以致命的MNs因为ROS可以攻击生物分子,导致这些分子的结构和功能的变化。MNs是众所周知的,在ROS-induced病态的发展起到至关重要的作用,因为他们可以产生不可忽视的大量的活性氧。因为消极的长期由单核细胞活性氧产生的副作用,调制ROS生成和维持细胞的氧化还原状态所需的生理水平被认为是一个主要的治疗目标25,47]。NDGA由于其抗氧化能力有保护性作用得到了越来越大的兴趣,因为据报道为氧化应激损伤的预防或延迟4]。在这项研究中,人类MNs NDGA毒性首次评估。我们的研究结果表明,在浓度NDGA从5到25μ米,NDGA不是THP-1细胞或细胞毒性治疗人类MNs 120 h。这些发现与动物细胞,这表明NDGA是无毒低剂量(4,9,10]。
NDGA当时评估的潜在的保护作用在两个毒性模型使用IAA和H2O2诱导毒性。在这些条件下,氧化剂浓度的方式引起细胞死亡的THP-1细胞和人类的MNs。以前曾有报道称,这些氧化剂造成损害在鼠神经元的主要文化9,10]。
IAA受伤一直与活性氧产量的主要文化鼠神经元(8,19]。也一直在证明培养海马神经元,IAA减少ATP水平和细胞生存18]。我们的研究结果表明,IAA毒性加剧了ROS有关生产和随后的细胞死亡的MNs(数字1 (b)和3(一个))。
相比之下,H2O2是一个来源的•在过渡金属离子的存在哦。这个氧代谢物与所有生物分子反应迅速而广泛的传播。正如所料,H2O2ROS增加生产和造成细胞死亡(12]。此外,它是最近描述,H2O2促进线粒体渗透性转换孔开放,导致膜去极化,解偶联氧化磷酸化,潜在的细胞死亡猪LLC-PK1细胞(11]。
此外,我们表明,NDGA保护MNs THP-1细胞对H2O2。我们观察到治疗前NDGA诱导的有毒挑战IAA和H2O2大大减少了这些化合物的毒性。在这种情况下,它已经表明,NDGA的保护作用主要是由于它的抗氧化能力。事实上,直接活性氧清除能力和诱导抗氧化酶通过Nrf2途径可能参与的机制NDGA对其保护作用[4,9- - - - - -11]。最近,是描述NDGA可以防止氧化应激诱导的线粒体损伤的肾上皮LLC-PK1细胞培养(11和肾损害的动物模型48]。
我们也探讨了以上的差别NDGA对氧化剂应激的影响对这些人类MNs CD33表达。我们的研究结果表明,NDGA具有很强的抗氧化功能,可以防止低水平的氧化应激,也可以防止减少CD33表达细胞接受IAA和H2O2。
CD33的表达所涉及的机制尚未完全阐明。但描述了两种机制的控制高压(49,50]。首先,减少SOCS3 CD33的活动,抑制细胞因子信号的一员(soc)的蛋白质家族。绑定SOCS3的磷酸化immunoreceptor tyrosine-based抑制图案(ITIM) CD33诱发两分子的变幻虫的退化和减少CD33表达单核细胞表面和封锁il - 1的分泌增加β、引发和TNF -α(49,51]。第二个机制引起的骨髓瘤细胞il - 6中描述。这些细胞因子的表达上调helix-loop-helix亮氨酸拉链转录因子(MYC)通过免疫应答的转录监管机构3 (STAT3)磷酸化。MYC直接结合的启动子区域CCAAT增强器结合蛋白α(C / EBPA基因),它会使C / EBPA因此CD33的基因表达下降[50]。最后,冈萨雷斯et al。(2012)表明,高血糖减少mRNA和CD33表达在细胞表面。但是,当人类单核细胞治疗α生育酚,这种消极的调制是预防。事实上,众所周知,SOCS3是高血糖(调制的氧化应激反应52,53)和肿瘤坏死因子-α生产是由H2O2通过氧化应激相关信号通路(54]。因为我们之前的研究发现,抗氧化α生育酚阻止肿瘤坏死因子-α生产,因此,差别CD33的对这些有可能是ROS感应可能参与这些过程。
此外,MYC砷酸钠所产生的氧化应激诱导的细胞系MCG-7 [55]。即使C / EBPA容易负监管通过氧化应激诱导H2O23 t3-l preadipocyte细胞(56HepG2细胞)和乙醇(57]。另外,我们观察到显著减少CD33的蛋白质表面细胞氧化条件引起的IAA和H2O2。这个结果支持这个想法,氧化应激可能改变CD33的转录调节转录因子等统计,MYC和C / EBPA。
初步研究在我们研究小组表明,氧化应激引起的高血糖减少CD33表达在人类单核细胞,但与抗氧化剂预处理α生育酚阻止活性氧的生产和改造CD33表达。NDGA和α生育酚防止活性氧生成。α生育酚能抑制超氧化物阴离子生产的障碍NADPH氧化酶组装和抑制p47phox易位膜(58]。此外,NDGA 12-lipoxygenase的选择性抑制剂(12-LOX),在花生四烯酸代谢产生活性氧。活性氧诱导的机制可能是通过诱导差别CD33的对这些炎症,因为IAA或H2O2诱发炎性细胞因子TNF -αNDGA是一种强大的抗氧化化合物,影响多种细胞过程包括TNF -α。在这工作,NDGA预防减少CD33表达的二次氧化应激诱导的H2O2或IAA。这些数据表明,改变CD33的二次氧化条件可能会抵消外源性抗氧化剂等不同结构α生育酚或NDGA。此外,低浓度的NDGA可能有助于减少氧化应激通过清除ROS (4)的诱导和/或Nrf2-dependent抗氧化酶(9,11),避免炎症抑制剂或cox - 2和液态氧(39]。
最后,本研究提出了新颖的发现支持改善NDGA对人类MNs的氧化剂条件的影响。NDGA严重氧化应激条件下可以防止细胞死亡。有轻微增加活性氧的产量由H2O2IAA和MN表面CD33表达明显降低。然而,NDGA避免这些负面影响。这些结果表明,氧化还原状态的变化引起的高血糖,IAA或H2O2生成一个重要的信号,表明导致负面CD33的调制方式,这可能导致锰激活状态。
确认
本研究支持部分由CONACYT赠款CB 2008 - 101948年和129838年,PAPIIT IN129838。