文摘

目前的研究调查的降脂和抗氧化活动罗勒属圣所l . (OS)叶提取物在大鼠肝脏和心脏再辅以高胆固醇饮食(HC) 7周。结果表明,操作系统抑制高水平的血清血脂和肝脂质含量没有显著影响粪脂类排泄。在HC老鼠粪便胆汁酸排泄增加处理操作系统。TBARS的高血清AST、ALT,美联社,LDH水平显著降低HC老鼠处理操作系统。操作系统抑制塔巴的高水平,提高了低GPx活动和猫没有任何肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)的影响。至于心脏组织,操作系统降低了高水平的塔巴,提高GPx的活动,猫和草皮。组织病理学结果显示操作系统保存肝脏和心肌组织。可以得出结论,OS叶提取物降低肝脏和血清血脂和保护肝脏和心脏组织提供了高胆固醇血症。降脂效应可能是由于胆汁酸合成利用胆固醇前体的崛起,从高胆固醇血症和抗氧化活动来保护肝脏。

1。介绍

心血管疾病,尤其是冠心病(CAD),已经成为一个日益严重的问题,尤其是在发展中国家。高胆固醇血症被广泛称为主要心血管疾病风险因素的发展(1,2]。据报道,氧化应激诱导的活性氧,扮演着一个重要的角色在一些疾病包括动脉粥样硬化和冠心病的病因(3]。高脂血症也发现诱导氧化应激在各器官如肝脏、心脏和肾脏(4,5]。降低血液胆固醇高,改变生活方式的建议,包括戒烟、限制饮酒,增加体力活动和饮食控制。然而,大多数人不能成功地控制他们的血胆固醇,因为现代生活风格。因此,药物被认为是他们最后的选择。虽然有几种合成药物,他们已报告有严重副作用,尤其是肝损伤(6]。此外,他们缺乏一些可取的属性如长期使用疗效和安全性,成本,和简单的管理。这些因素为患者依从性不满足条件。因此,人们正在注意药品的草药与hypolipidaemic活动起源。有几种药用植物含有抗氧化和降脂效果。其中,罗勒属圣所l . (OS)非常有前途的,因为它是经常用作烹饪的蔬菜,和一些疾病的治疗由当地人民在不同的国家。此外,它已被证明,OS叶子减少血清血脂在糖尿病大鼠和正常的白化兔子7,8]。此外,OS树叶提供肝抵御致癌物质和阻止isoproterenol-induced心肌损伤大鼠(9,10]。虽然OS叶子器官保护作用对不同应力条件下,研究提供的证据lipidemic和抗氧化作用的保护主要风险高胆固醇血症仍然缺乏的器官。据报道,水提取物的OS叶子都表达了强烈的抗氧化活性在活的有机体内和在体外研究[11,12]。因此,本研究探讨肝脏和心脏的降脂和抗氧化活动OS叶水提取物的大鼠喂富含胆固醇的饮食。

2。材料和方法

2.1。提取罗勒属圣所l .叶子

OS新鲜树叶从泰国传统医药研究所获得泰国公共卫生部。新鲜的叶子OS在自来水清洗,然后切成小块。伤口在室温下被清洗和烘干。干叶子OS被磨成细粉和提取的水。水提取物被冷冻和干,深棕色粉末。提取过程后,操作系统提取的百分比收益率从100克干OS 13.25 g叶粉。水提取物被收集并存储在4°C测定酚类的内容。

2.2。总酚含量测定罗勒属圣所l .叶提取物

OS叶提取物的总酚含量是决定使用Folin-Ciocalteu方法。0.1毫升10毫克/毫升(w / v)的操作系统提取加入1毫升7% Na₂有限公司₃解决方案和混合彻底;0.1毫升Folin-Ciocalteu试剂被添加到混合物中。添加蒸馏水是为了达到2.5毫升,90分钟的混合物被允许站间歇震动。750纳米的吸光度测量基准+微型板块分光光度计(Bio-Rad实验室(英国)有限公司)。总酚含量测定的标准没食子酸校准曲线,并表示为毫克的没食子酸当量/ g的干重操作系统提取。

2.3。动物的准备

雄性Wistar鼠体重90 - 120克之间从动物中心,购买Salaya校园,泰国Mahidol大学。老鼠照顾按照制度的原则和指导方针兰实大学动物伦理委员会,这是泰国的全国委员会下实验动物保健。老鼠被安置在12小时光暗周期房间温度控制°C和美联储与标准老鼠食物和自来水随意。根据我们的初步研究,严重的肝脏和心脏损伤显然是观察到的大鼠血清胆固醇至少三次高于正常水平。获得如此高的血清胆固醇水平,2.5 g % (w / w)胆固醇粉添加到食品(HC饮食)。食品成分表所示1。

七大鼠建立了包括三组,组我:正常喂养控制老鼠七周的正常饮食;第二组:大鼠喂食了HC七周的饮食;第三组:大鼠喂食了HC饮食七周,和水提取物的插管操作系统是由胃内的日常管理在过去的三个星期。

从我们以前的研究中,2%的补充(w / w)干OS叶粉在老鼠的饮食三个星期显示降脂效应和部分保护肝脏在糖尿病大鼠(7]。百分比收益率OS的叶子中提取的水是13.25克% OS叶粉、干和干的平均数量OS叶粉被每个老鼠大约是4.45克/公斤体重/天。因此,每日剂量的水提物在本研究计算基于这些价值观和大约是590毫克/公斤体重/天。在过去的三周的实验,水是每日喂组I和II,而第三组每日喂了水提取的操作系统。改善吸收,食物被扣留了两小时前操作系统提取或水管理。体重和食品消费是七周每周记录。

在上周的实验中,老鼠的粪便收集连续3天确定粪脂质和胆汁酸排泄。一夜之间,老鼠被禁食和腹腔内注射麻醉的zolitil(40毫克/ kgbw) +甲苯噻嗪(3毫克/ kgbw)。从腹部静脉血液收集确定血清血脂包括总胆固醇(TC)、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇(低密度脂蛋白)和高密度脂蛋白胆固醇(hdl - c)。粥样硬化指数(AI)后来计算的比率[TC -(高密度脂蛋白胆固醇)]/(高密度脂蛋白胆固醇)。肝脏和心脏也被孤立,清洁,和体重。肝脏和粪脂类被修改的方法提取Folch et al。13]。粪便胆汁酸包括胆酸和脱氧胆酸,主要在老鼠粪便胆汁酸,被修改的方法提取并化验所描述的Mosbach et al。14)和Rizvi et al。15]。

2.4。生化评价肝脏和心脏损伤

肝功能评估是评估血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(美联社)水平。心脏损伤也是评估通过测量血清乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶MB亚基(水平)的水平。

2.5。测定血清过氧化脂质

在实验的最后,老鼠麻醉;他们的血液被收集从腹部静脉血清测定硫代巴比土酸活性物质(TBARS)以前描述的方法(16,17]。血清TBARS表示为μ摩尔的丙二醛(MDA) / L。

2.6。测定脂质过氧化和抗氧化酶活性的肝脏和心脏

在研究结束时,老鼠被麻醉,颈静脉插管灌注冰冷的生理盐水去除红细胞。灌注后,肝脏和心脏都是孤立的,清洗和衡量。器官都保持在−80°C,直到做了进一步分析。

2.6.1。测定组织脂质过氧化物含量

脂质过氧化物在肝脏和心脏评估与硫代巴比土酸活性物质(TBARS)如前所述16]。TBARS nmole表达的丙二醛(MDA) /毫克蛋白使用1,1,3,3-tetraethoxy丙烷作为标准。与洛瑞组织蛋白质含量测定的方法(18]。

2.6.2。确定组织中抗氧化酶的活性

等抗氧化酶谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)测定在肝脏和心脏。肝脏和心脏组织匀浆是由均质化的组织在一个0.1米磷酸缓冲pH值7.4。匀浆然后离心机在3000 rpm, 4°C 10分钟。上层清液的收集和离心机在7800克,为30分钟4°C。浮在表面的分数是进一步收集和离心机重136000克,4°C 60分钟。最后的上层清液GPx然后分析估计,猫和SOD活动使用Tapple[描述的过程19,运气20.],Winterbourn et al。21),分别。

2.7。评价肝脏、心脏和主动脉组织形态学

肝脏、心脏和胸主动脉是孤立的,清洁,干燥,然后固定在缓冲溶液10%中性缓冲福尔马林。至于组织病理学观察,纵向部分心肌组织和宏观损伤胸主动脉被削减。至于肝脏,部分通过宏观损伤包括胶囊被削减。部分是进一步降低到5μ米厚度,并与苏木精和伊红染色(圆))22]。

2.8。生化试验

总血清总胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇被使用酶化验设备(法理社会皮毛加压和Diagnostica GmbH,德国)。低密度计算通过使用方程:低密度= [TC -(高密度脂蛋白胆固醇)]-(甘油三酸酯/ 5)。血清AST、ALT、LDH、以及测量使用酶工具包(英国草毒死实验室)。总胆固醇和甘油三酯含量在肝脏和粪便测定使用酶工具包。

2.9。统计分析

所有值都意味着±SEM。方差分析的结果进行了分析。邓肯执行多个等级测试来确定统计学意义组间通过使用SPSS软件11.5版本。接受了显著差异。

3所示。结果

OS叶的水提物中的总酚含量毫克干的没食子酸当量/ g OS叶提取物。图1显示变化的身体在七周体重增加和食物摄入量。无显著差异的两个身体体重增加和食品消费组大鼠中被发现。七周的HC饮食喂养了肝脏重量没有显著影响心脏重量(表1)。血清TC水平、甘油三酯、低密度脂蛋白和AI显著增加,而高密度脂蛋白胆固醇明显降低HC的老鼠(表2)。OS减毒血清TC水平高,低密度,AI和规范化的甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇水平。HC饮食显著提高肝脏胆固醇和甘油三酯含量(表3)。粪便胆固醇,甘油三酸酯、胆酸和脱氧胆酸排泄在HC显著增加大鼠与正常大鼠相比。高水平的降低肝脏脂质,而无显著变化的粪脂类排泄了HC老鼠处理操作系统(表3)。高水平的粪胆酸和脱氧胆酸显著降低HC老鼠处理操作系统(表3)。

HC饮食显著提高血清ALT, AST,美联社,LDH,以及(表4)。至于HC老鼠处理操作系统,高血清ALT, AST,美联社和缓解而水平和LDH水平恢复正常水平。TBARS所呈现的高血清过氧化脂质显著减少HC老鼠处理操作系统(表5)。肝脏TBARS显著增加,而GPx,猫,老鼠和SOD活动降低HC(表5)。OS明显抑郁治疗肝脏TBARS HC老鼠的高水平。此外,操作系统增加了低水平的猫GPx活动正常水平而不影响SOD活性。的心脏组织,GPx TBARS显著增加,而活动的老鼠和猫是降低HC。老鼠处理操作系统显示一个巨大的减少心脏TBARS和规范化GPx和猫的活动。HC大鼠的心肌SOD活性处理操作系统显著增加。

从组织病理学分析,正常的肝细胞有中央圆形细胞核和细胞质均匀(图2(一个))。中央静脉周围有扁平的内皮细胞和正弦信号。HC鼠的肝细胞严重变性漫空泡的变性和坏死(图2 (b))。中央静脉的内皮细胞表现出更多的细胞损伤增加积累的脂肪在肝细胞液泡。HC老鼠的肝细胞治疗系统是改善内皮损伤更少和更少的脂肪空泡(图2 (c))。正常老鼠的Myocardiocyte oval-elongated集中细胞核和细胞质均匀(图3(一个))。HC的老鼠表现出适度的扩张和右心室壁变薄,轻微的心脏左心室肥大。多病灶的空泡的变性和坏死的心肌细胞(图3 (b))。细胞凋亡的myocardiocytes也观察到。相比之下,HC大鼠的心肌细胞处理操作系统揭示正常一般外观(图3 (c))。正常的胶原纤维和结缔组织中展出的主动脉外膜组织正常的老鼠(图4(一))。最内侧的平滑肌细胞的膜面向媒体的横向主动脉运河。相比之下,多病灶的变性、坏死和定向障碍所示主动脉平滑肌细胞的组织的HC老鼠(图4 (b))。没有显著的病变所示主动脉组织的HC老鼠处理操作系统提取(图4 (c))。

4所示。讨论

众所周知,海拔血清胆固醇会导致动脉粥样硬化;器官的血液供应逐渐减少直至器官功能受损。了多方面的证据表明,改善动脉粥样硬化的发病率和CAD与降低血清胆固醇水平(1,23]。尽管一些干预措施建议治疗高胆固醇血症,人不可能成功,因为现代生活方式。因此,药品的草药起源感兴趣调查人员因为它们丰富的具有生物活性的植物化学物质,可能是有效的疗法,安全,便宜。罗勒属圣所l . (OS),通常用作烹饪的蔬菜,已经显示出其潜在的治疗药草。目前的研究表明,七周的HC饮食喂养提高了血清血脂和人工智能。操作系统治疗减毒血清血脂高,人工智能。这意味着操作系统可以有效缓解动脉粥样硬化,最终使CAD的发生。这是改善主动脉组织支持的HC老鼠处理操作系统(图2 (c))。

肝脏负责维护的主要器官是胆固醇体内平衡。了多方面的证据表明,HC饮食提高肝脏胆固醇含量导致甘油三酯合成的增加(24,25]。肝脂质含量和粪脂类排泄粪便胆汁酸排泄在本研究调查评估肝降脂的基本机制活动的操作系统。高程的降低肝脏脂质含量和粪便胆汁酸排泄粪脂类排泄的无需更改HC老鼠处理操作系统表明,肝降脂效应相关的操作系统可能是一个较低的肠道吸收胆汁酸,导致增加了肝脏胆汁酸使用胆固醇生物合成的前体,最后导致肝脏胆固醇和甘油三酯积累的减少。肝脂质积累的减少是由更少的脂肪空泡HC老鼠的肝细胞治疗的操作系统。虽然OS HC大鼠肝脏脂质含量减少,肝脏重量没有减少。相同的研究结果显示姚明et al。(26]。其他研究表明肝脏重量略减少(12 - 20%),而肝脏胆固醇和甘油三酯含量降低26 - 50%和31 - 37%,分别为(27,28]。如表所示2,HC的老鼠的肝脏重量增加超过两倍,正常的老鼠,而肝脏胆固醇和甘油三酯含量增加了1139%和150%,分别。操作系统降低肝脏胆固醇和甘油三酯含量25%和16%,分别,可能不会影响肝脏的重量。从组织病理学检查(图4),改善肝细胞的数量在HC老鼠用操作系统增加了治疗和可能改变肝脏重量的另一个原因。

免费radical-induced脂质过氧化作用或氧化应激参与一些疾病的发病机理(29日,30.]。不仅高胆固醇血症诱发动脉粥样硬化,也会产生大量的自由基在血液和组织30.,31日]。脂质过氧化的TBARS水平是一个很好的指标。目前的结果表明,血清TBARS显著升高了HC饮食管理,这是减毒增加操作系统治疗,表明操作系统在HC降低氧化应激大鼠。众所周知,肝脏和心脏都主要器官的危险高胆固醇血症。保留肝脂质可以诱发脂肪变性,并最终损害肝脏功能。我们的结果表明,HC饮食明显抑制肝和心脏功能表达的增加血清AST、ALT,美联社,LDH,以及(表4)。肝和心脏脂质过氧化,TBARS如图所示的两个器官,在HC老鼠也增加。此外,抗氧化酶活动器官都情绪低落。这些结果反映了七周的HC饮食喂养诱导氧化应激损害肝脏和心脏组织。最近的研究表明,一些医学草药都降脂能力和抗氧化活动抑制过氧化脂质生产,最终可能导致它们的有效性在预防动脉粥样硬化和保护各种器官的危险高脂血症(3,5,30.]。操作系统不仅能够降低血清和肝脏脂质也抑制血清AST水平高,ALT, LDH,以及。此外,脂质过氧化作用是明显抑制,而抗氧化酶的活动增加了大鼠的肝脏和心脏组织处理操作系统。我们的结果表明,操作系统有一个自由基清除活性可能与高胆固醇血症提供器官的保护。这是支持的组织病理学检查老鼠的肝细胞和myocardiocytes处理操作系统。减少血清TBARS和肝脏,并增加在大鼠肝脏抗氧化酶活动处理操作系统可能与降低肝脂质积累。目前的研究清楚地表明,操作系统可能是治疗的重要性,不仅作为降脂剂在血清和肝脏也是cytoprotective代理从血胆脂醇过多保护肝脏和心脏损伤。

有趣的是,操作系统似乎正常心脏组织,而肝组织也有所改善,但不是正常的外观。从结果可以看出,血清AST、ALT,美联社在HC老鼠大约2 - 4倍的正常老鼠,而血清LDH水平以及增加(表1.3 - -1.5倍4)。这反映肝损伤的严重程度超过心脏的,这可能解释操作系统有所改善,但不能正常化HC的老鼠的肝脏组织。另一个有趣的问题是操作系统规范化的活动GPx和猫在肝脏和心脏组织。然而,肝脏SOD活性依然很低,而心肌SOD活性显著高于正常水平的增加HC老鼠处理操作系统。从结果可以看出,HC的饮食喂养显著降低肝SOD活性(61%),而肝脏GPx和猫的活动略有下降(23 - 25%),表明肝SOD是如此高度容易脂肪变性,肝组织,这可能是为什么在HC有所改善,但不能恢复大鼠治疗的操作系统。虽然OS降低肝脏脂质含量但水平可能不会太大,提高肝脏SOD活性。相比之下,在未经处理的HC老鼠心脏SOD的活性略下降水平并没有统计上显著不同于正常的老鼠,因此它可以恢复操作系统。真正的机制为什么心肌SOD活性在HC老鼠处理操作系统显著高于正常大鼠由目前的研究还不能解释。众所周知,SOD过氧化氢催化作用超氧化物阴离子,由猫GPx分解,然后进一步防止自由基的生成。几项研究表明,HC饮食提高心脏超氧化物阴离子没有重大改变心肌SOD活性(31日,32]。如表所示5,HC的饮食喂养显著提高TBARS水平(83%),而稍微GPx的活动减少,心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)猫,(16 - 35%)。这意味着HC诱发大量的自由基在心脏组织生产。操作系统应该心脏SOD活性明显增强,以促进生产过剩的自由基HC老鼠的心脏组织。

了多方面的证据表明,植物与酚类化合物antilipidemic和抗氧化活动对高脂血症(保护肝脏和心脏33,34]。目前的研究显示,大量的水提取物与酚类化合物集团OS叶子可能负责降脂和抗氧化行为从血胆脂醇过多保护肝脏和心脏。然而,它尚未知道的酚类化合物参与的行为;因此,他们应该进一步确认。

总之,OS叶子的水提取物能够降低高血清血脂和人工智能水平与HC饮食喂养的老鼠七周。OS降低肝脏脂质含量而增加粪便胆汁酸排泄没有粪脂类排泄的重要变化。它也抑制了高水平的血清脂质过氧化反应,肝脏和心脏组织。操作系统显著提高抗氧化酶的活动在肝脏和心脏组织。我们的数据表明,治疗水提取物的OS叶子在过去的三个星期是强大的减弱血清和肝血脂和提供高胆固醇血症的肝脏和心脏保护。血清和肝降脂效果的基本机制可能是由于使用胆固醇和胆汁酸的合成抗氧化活动保护肝脏免受高胆固醇血症。酚类化合物包含水提取物的OS叶子可能会负责降脂和抗氧化行为从血胆脂醇过多保护肝脏和心脏。

缩写

HC:	高胆固醇
操作系统:	罗勒属圣所l
人工智能:	粥样硬化指数
ALT:	丙氨酸转氨酶
AST:	天冬氨酸转氨酶
记者:	碱性phosphatise
LDH:	乳酸脱氢酶
水平:	肌酸激酶MB亚基
TBARS:	硫代巴比土酸活性物质
GPx:	谷胱甘肽peroxidise
猫:	过氧化氢酶
SOD:	超氧化物歧化酶。

承认

这个项目是由泰国研究基金的资助,泰国。