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米蕾Zoran Koprivica, Dusica Djordjevic, Vuletic,弗拉基米尔•转而经营Nevena Barudzic,梅Andjelkovic,德拉甘Djuric, Violeta Iric-Cupic,伊莲娜Krkeljic,弗拉基米尔Jakovljevic, ”血管性血友病因子和氧化压力参数在急性冠状动脉综合征”,氧化医学和细胞寿命, 卷。2011年, 文章的ID918312年, 11 页面, 2011年。 https://doi.org/10.1155/2011/918312
血管性血友病因子和氧化压力参数在急性冠状动脉综合征
文摘
考虑角色的血管性血友病因子(vWf)止血,以及氧化应激的作用,内皮功能障碍和动脉粥样硬化疾病的发展,我们的研究的目的是调查vWf的关系,氧化应激的参数和不同类型的急性冠状动脉综合征(ACS)。水平的vWf活动(vWfAct)、vWf抗原(vWfAg),一氧化氮(估计通过nitrites-NO2−),超氧化物阴离子自由基(O2−)、过氧化氢(H2O2),脂质过氧化反应指数(通过硫代巴比土酸活性substances-TBARS估计),超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性与40名健康对照组115例进行比较。ACS患者明显高于vWfAct和vWfAg水平,以及TBARS水平,而他们没有2−H2O2SOD和CAT活动低于控制”。vWfAg显示高特异性和敏感性测试,揭示健康或患病的科目。多元逻辑回归标志只有vWfAg和TBARS作为参数,在独立的ACS类型的影响。我们的研究结果支持临床rutine vWf的实现和治疗靶点,并表明ACS患者需要补充抗氧化剂改善受损的抗氧化防御。
1。介绍
在生理条件下,血管内皮产生很多重要的是有助于止血的物质,纤维蛋白溶解,船舶和监管的语气和渗透率1]。就是这样一个物质糖蛋白血管性血友病因子(vWf),几乎完全内皮产生的,因此是一个标记的内皮激活或功能障碍2- - - - - -4]。vWf调节血小板粘附在血管壁,血小板聚集并作为等离子体载体因子八世,稳定的循环(5]。因为几乎所有的急性冠状动脉综合征(ACSs)结果从先前存在的动脉粥样硬化血栓形成(1,鉴于vWf的关键作用在动脉血栓形成,这个生物吸引了相当大的兴趣作为预测心血管疾病(CVD) (1,5]。先前发表的研究表明,有一个弱关联vWf等离子体的风险水平和冠心病(CHD)在一般人群中,但其预测价值显著提高患者先前存在的血管疾病,糖尿病,和老人6- - - - - -9]。这是发现vWf上升过程中ACSs [4,10,11),它认为vWf不仅是一个标志,也是中介在心肌梗死(MI)的发病机制1]。虽然许多研究指出vWf[的预后价值12- - - - - -14),还有很长的路要走血浆vWf水平可以作为预测心血管疾病的临床实践(5]。
血管性血友病因子可以通过内皮细胞产生和释放由多种刺激体外和体内5,15,16]。许多物质调节内皮释放vWf。在其他分泌受体激动剂和拮抗剂,如大量的炎症介质和/或血栓形成,活性氧(ROS)发挥重要作用。例如,超氧化物阴离子自由基()被认为是激活内皮细胞胞外分泌的17),而过氧化氢(H2O2)已被证明能够抑制thrombin-induced vWf分泌剂量依赖性的方式(18]。另一方面,H2O2诱导分泌反应[疲软19]。因此,H的影响2O2还有待调查。一氧化氮(NO)是另一个展览的活性物质对vWf分泌抑制的影响,但其影响还有待阐明,因为大多数的研究是进行培养的内皮细胞,这可能不是一种理想的工具来研究一氧化氮(NO)的影响(5]。
新兴的数据表明,急性冠状动脉疾病的陈述可能涉及到一个复杂的血管壁之间的相互作用,炎症细胞,凝血级联。考虑在止血vWf的作用和氧化应激的作用内皮功能障碍和动脉粥样硬化疾病的发展20.- - - - - -23),我们的研究的目的是探讨血管性血友病因子和氧化应激的参数之间的关系一方和不同类型的急性冠状动脉综合征。
2。结果
人口数据调查组织如表所示1。
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结果的比较调查患者的生化参数和控制数据所示1,2,3,4,5,6,7,8,9。
uni -和多元逻辑回归结果ACSs存在变化的影响,研究了生化参数如表所示2。单变的逻辑回归的结果标志着vWfAg vWfAct,H2O2,TBARS、SOD和猫一样重大。单变的逻辑回归显示调查参数差异的存在在所有其他因素的存在,而多元逻辑回归标志参数变化下独立ACSs存在的影响。多元逻辑回归没有任何参数标记为重要。
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高浓度的频率vWfAct(高于163,威望值范围48.8% - -163%)和vWfAg(高于158,reerent值范围:61.3% - -158%)ACSs患者和控制如表所示3。χ2试验表明,ACSs患者组和控制在高浓度的频率显著不同vWfAct和vWfAg (两个)。
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基于表中提供的数据3的敏感性和特异性测试(测量vWfAct和vWfAg水平)计算。敏感性,作为测试的能力的指标揭示疾病患者(ACSs) vWfAg vWfAct为53.91%和86.0%,特异性,作为测试的指标陶醉健康受试者的能力,是vWfAg vWfAct为97.5%和100.00%。接受者操作特征(ROC)曲线(图9)显示歧视的能力测试。
表4显示水平的研究参数组患者不同类型的ACSs。uni -和多元逻辑回归结果的影响不同类型的ACSs存在检查生化参数的变化如表所示5。单变的逻辑回归标志vWfAg vWfAct,H2O2、TBARS和SOD显著,而多元分析显示,只有vWfAg和TBARS受到独立ACSs类型的影响。
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表6显示数据调查生化参数ACSs患者幸存了下来,谁死去。没有显著差异在任何调查这些团体之间的生化参数。
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单变的逻辑回归结果关于水平的生化参数对结果的影响(生存或致命事件)ACSs患者显示没有发现是重要的生化参数,所以多元逻辑回归不是(表执行7)。
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3所示。讨论
生物标记物发挥关键作用在患者的诊断和治疗心血管疾病(24]。的进步我们理解的病理生理学ACSs导致显著增加开发生物标志物的诊断、危险分层、治疗决策、和临床结果评估25- - - - - -27]。很多新的标记测量各种组件的急性atherothrombotic事件被描述,和新颖的生物标志物内皮激活炎症、凝血和血小板激活集中调查(28- - - - - -31日]。在其他角度预后的生物标记物尚未纳入常规临床使用,血管性血友病因子增加相当大的关注。
许多不同的vWf-dependent实验室化验了正确诊断和分类血管性血友病(32]。然而,当调查vWf作为心血管疾病的危险因素,分析等离子体vWf抗原和等离子vWf活动在大多数情况下使用(1]。ACSs病人在我们的研究水平显著升高vWfAct和vWfAg与健康对照组相比。vWfAct水平没有显著差异在不同类型的患者ACSs;vWfAct升高只是在STEMI (ST段MI)和NSTEMI (non-ST海拔MI) ACSs患者,在不稳定性心绞痛患者vWfAct水平与对照组相似。关于vWfAg,水平有显著差异在不同类型的患者ACSs之间以及控制和STEMI和NSTEMI患者。只有vWfAg UA患者的水平没有不同于控制。我们的研究结果与之前报道同意数据。高谈阔论et al。1)和Paulinska et al。16)报道,发表vWf数据(10,11,33- - - - - -37]表明,急性心肌梗死(AMI)患者明显增加了vWf值与不稳定性心绞痛(UA)和冠状动脉疾病(CAD)患者与健康对照组相比。vWf是生化参数,区分好健康和人民之间ACSs我们的研究证明了不仅通过评估其水平差异ACSs病人和控制,而且还通过比较的频率vWf水平升高在这两个群体的存在,以及通过计算其特异性和敏感性。vWfAg的敏感性,作为能力的指标揭示疾病,患者为86%,而其特异性,作为其揭示健康受试者的能力的指标,为100%。vWfAct的敏感性明显降低,但其特异性也很高(97.5%)。它还可以看到从图9显示了vWfAct ROC曲线和vWfAg vWfAg的力量作为ACSs存在的指标非常高。逻辑回归结果也强调这个参数significant-univariant逻辑回归表明类型的ACSs影响vWfAct和vWfAg级别,但多元回归只vWfAg作为一个独立的影响下的变化是ACSs类型不是因为其他代数余子式的存在。
先前的研究结果对于心血管疾病预后的vWf值是模棱两可的。许多研究发现增加了相对风险水平最高的vWf [6,38,39),但在大多数的研究中,vWf和冠心病风险之间的联系消失了对传统的风险因素调整后(8,9]。然而,在对比研究的结果表现在普通人群中,先前存在的血管疾病,患者vWf透露作为不良心血管事件的显著预测参数,包括死亡(13,14,40- - - - - -42]。我们的研究没有预期,但由于4个病人在入院几天死亡,我们比较他们的入学水平的调查生化参数与水平的病人活了下来。无统计差异被发现,无论是在vWfAct和vWfAg水平,还是在氧化还原水平参数。
第二部分的调查与评估受试者的氧化还原状态。氧化应激已经建议发挥重要作用的发展超过二百人类急性和慢性疾病以及衰老(21- - - - - -23,43- - - - - -46]。我们的研究结果表明,ACSs患者更有效的抗氧化防御系统与控制(SOD和CAT活性显著降低水平)导致显著增加的脂质过氧化水平。此外,ACSs患者一氧化氮的含量明显低于(亚硝酸盐),内皮功能障碍的指标。令人惊奇的是,H2O2ACSs患者水平明显低于控制”。ACSs病人没有降低和H2O2水平可能带入与vWf的水平,由于活性氧和没有参与vWf发布的规定。之前建议的封锁一氧化氮提高刺激释放vWf在人类47,48),也就是说,没有产生抑制性影响vWf释放(5]。所以,被认为是H2O2(5]。ACSs患者缺乏和H2O2与控制相比,所以没有和H2O2抑制vWf释放可能是较低的。当比较不同ACSs氧化状态的患者类型,只有SOD STEMI之间的不同和UA患者(UA患者SOD活性较低)。另一方面,每当差异4组(3 ACSs组和对照组;表4)被发现,它与每ACSs患者组和对照组之间的差异。这些结果表明,ACSs病人正在更高的氧化应激与对照组相比,无论哪种类型的ACSs。然而,尽管ACSs患者不同于控制在几个氧化压力参数,只有TBARS被发现的独立效应下ACSs类型。
我们研究的结果指出血管性血友病因子抗原强劲的指标存在的任何一种ACSs。这支持vWf的实现在临床常规治疗靶点。结果ACSs患者氧化应激的相关调查表明,抗氧化剂补充需要改善抗氧化防御,因为酶的抗氧化防御被破坏和脂质过氧化作用因此增加的病人。
4所示。患者和方法
4.1。主题
的研究是在一组115名病人连续承认大学医院的重症监护室中心“Kragujevac”,塞尔维亚。所有患者符合ACSs诊断的标准(其中两三个标准的存在足以诊断ACSs):(1)胸部疼痛,(2)心电图变化(ST段或抑郁≥1毫米,或T波倒置),和(3)血清心脏标志物的变化(肌酸激酶(CK)、肌酸激酶MB(水平)和肌钙蛋白T (TnT)) (49]。STEMI的诊断的实现被定义为长期持久的st段抬高的胸部疼痛或不适大于1毫米在2个或更多的连续的线索或假定新左束支阻滞心肌酶(总肌酸激酶和肌酸激酶MB分数)高于正常上限的两倍(50]。NSTEMI的诊断包括静止的存在典型的心绞痛与急性和瞬态st段或让改变心肌酶正常上限的两倍以上,提高了肌钙蛋白I水平至少“高风险”值(> 0.6 ng / mL),或两者兼而有之(50]。患者的临床和心电图(ECG)特性non-STEMI但与正常心脏酶+正常肌钙蛋白水平分为UA [50]。
这项研究是大学医院中心伦理委员会批准“Kragujevac”,塞尔维亚。
4.2。协议
入院后患者血液样本取自血管性血友病因子活动(vWfAct)、血管性血友病抗原(vWfAg)、一氧化氮(NO)、超氧化物阴离子自由基()、过氧化氢(H2O2),脂质过氧化反应指数(TBARS)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和过氧化氢酶(CAT)活性测定。
4.3。生化检测
从肘前的静脉血液样本被到真空采血管含有柠檬酸钠抗凝的试管。血液离心分离血浆和红细胞(红血球)。
4.4。血管性血友病因子活性和血管性血友病因子抗原的决心
vWfAct的确定和执行vWfAg使用商业分析工具(HemosIL 0020004700和0020002300)ACL精英专业仪器仪表生产的实验室,贝德福德,质量,美国。vWfAct和vWfAg结果报道在%的常态。
4.5。一氧化氮测定
一氧化氮(NO)分解迅速形成稳定的代谢产物亚硝酸盐/硝酸盐产品。亚硝酸盐()被确定为一个索引的一氧化氮与格里斯试剂生产51]。0.1毫升3 n PCA(高氯化物酸),0.4毫升20毫米EDTA(乙二胺四乙酸)和0.2毫升血浆搁置了15分钟然后在6000 rpm离心机15分钟。浇注后上层清液,220μL K2有限公司3是补充道。亚硝酸盐测定550海里。蒸馏水作为一个空白的调查。
4.6。超氧化物阴离子自由基测定
超氧化物阴离子自由基水平()是衡量使用电视台(硝基蓝四唑)反应三羟甲基氨基甲烷缓冲液结合血浆样品和阅读在530纳米52]。
4.7。过氧化氢的决心
过氧化氢的测量协议(H2O2)是基于氧化酚红的辣根过氧化物酶(53]。二百年μL与800年样本μL PRS(酚红溶液)和10μL POD(辣根过氧化物酶)结合(1:20)。H的水平2O2测量在610海里。
4.8。脂质过氧化反应指数(硫代巴比土酸活性物质,TBARS)
血浆中脂质过氧化的程度估计通过测量硫代巴比土酸的活性物质(TBARS)使用1%稍后通知(硫代巴比土酸)0.05氢氧化钠,孵化与等离子体在100°C 15分钟在530 nm和阅读。蒸馏水作为一个空白的调查。稍后通知提取得到结合0.8毫升血浆和0.4毫升柠檬酸(trichloro醋酸),然后样本搁置10分钟和离心机15分钟在6000 rpm。这个方法是前面描述的54]。
4.9。测定抗氧化酶
孤立的红细胞表面清洗三次冰冷的0.9的3卷更易与L氯化钠,和hemolysates包含大约50 g Hb / L(准备根据麦考德和Fridovich [55)被用于测定过氧化氢酶(CAT)活性。根据布鲁斯(猫活动确定了56]。溶菌产物用蒸馏水稀释(1:7 v / v)和处理chloroform-ethanol (0.6: 1 v / v)去除血红蛋白(57]。然后,50μL过氧化氢酶缓冲,100年μH L样本,1毫升10毫米2O2被添加到样本。检测了360海里。蒸馏水作为一个空白的调查。超氧化物歧化酶(SOD)的活动是由肾上腺素的方法Misra和Fridovich58]。一百年μL溶解产物和1毫升碳酸盐缓冲涨跌互现,然后,100μL肾上腺素的补充道。检测了470海里。
4.10。统计数据
与SPSS 10.0统计分析窗口。结果表示为意味着±标准差(中位数)。数据在数据平均值+标准偏差。检查数据分布后,使用适当的参数或非参数检验。两组之间的差异进行评估以及或Mann-Whitney测试,而以上三组之间的差异进行评估使用单向方差分析或克鲁斯卡尔-沃利斯检验。使用方差分析posthoc分析Bonferroni测试。ACSs定义主要的参数变化,使用单变的逻辑回归。标记为重要的参数单变的逻辑回归进入多元逻辑回归。多元逻辑回归显著独立ACSs作用下的参数。χ2测试是用来评估的频率的差异水平升高vWfAct vWfAg。基于这个频率数据,测试的敏感性和特异性(vWfAct和vWfAg测试)计算。基于数据测试的敏感性和特异性,接受者操作特征(ROC)曲线确定。
缩写
| ACSs: | 急性冠脉综合征 |
| STEMI: | st段抬高心肌梗死 |
| NSTEMI: | 以上非st段抬高心肌梗死 |
| UA: | 不稳定性心绞痛 |
| vWfAct: | 血管性血友病因子活动 |
| vWfAg: | 血管性血友病因子抗原 |
| SOD: | 超氧化物歧化酶 |
| 猫: | 过氧化氢酶 |
| ROS: | 活性氧 |
| 心血管疾病: | 心血管疾病 |
| 冠心病: | 冠心病 |
| 中华民国: | 接受者操作特征。 |
承认
这项工作是支持的批准号175043年的科学和技术发展的塞尔维亚共和国。
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