文摘
的根源甘草glabra、Withania somnifera、芦笋racemosus,吊兰borivilianum和种子的胡麻属indicum在印度阿育吠陀药用植物用于治疗一些疾病。我们以前的研究表明,这些植物具有降血脂药和抗氧化剂的潜力。本研究旨在调查hypercholesterolemic老鼠这些植物的复合效应。三种不同的组合(5通用%,给出四个星期)用于本研究有效减少血浆和肝脂质概要文件和粪便排泄胆固醇增加,中性甾醇,胆汁酸和增加肝β-还原酶活性和胆汁酸含量hypercholesterolemic老鼠。此外,所有三个组合也提高了肝脏抗氧化状态(过氧化氢酶、SOD和抗坏血酸水平)和血浆总抗氧化能力与降低肝脂质过氧化作用。整体,结合我的最大影响hypercholesterolemic老鼠之后,由于不同浓度的组合II和III phytocomponents的不同的类。
1。介绍
高胆固醇血症的主要危险因素之一,沉淀冠心病(CHD)和动脉粥样硬化(1]。除了药物治疗外,饮食的组成也扮演着重要的角色在血液中脂质和脂蛋白浓度的管理。植物性治疗是公认的治疗应用程序,因为它们很小或没有副作用(1,2]。在过去的20年左右,对传统药物的兴趣大大增加了在世界上许多地方。世界各地的传统药物被广泛研究的评估在不同植物种类对他们的治疗原则和潜力。尽管传统的化学和药理学的进展产生有效的药物,植物王国可能还提供有用的新药物的来源。植物产生惊人的各种代谢物如异黄酮、植物甾醇、皂苷、纤维、多酚、类黄酮,抗坏血,这些引起了对他们的角色在脂质代谢和抗氧化剂3- - - - - -7]。
一些草药组合测试实验对于他们的潜能在改善各种疾病,例如糖尿病、过敏性鼻炎,动脉粥样硬化,风湿性关节炎,和抗菌活性7- - - - - -12]。(例如,一个实验组合ashwagandha的根,根状茎的生姜,年轻的桑叶)治疗给使人类被试显示显著降低血糖、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇和VLDL胆固醇(13]。
许多polyherbal配方治疗各种疾病也被市场由几个著名的阿育吠陀药物制造商在印度包括Chyawanprash、活跃的血液净化器(44岁和7草药、职责。Dabur印度有限公司)、d - 400、52岁的丽芙·OST-6 Cystone(32、7、5、7草药,分别地;喜马拉雅制药有限公司),Livergen(6草本植物;标准药品),Livokin(17草本植物;Herbo-Med)、Stimuliv(4草本植物;Franco-Indian制药分公司),Tefroliv(9草本植物;TTK制药分公司),Pankajakasthuri(14草本植物;草本植物印度经纪有限公司)和Dihar(8草本植物;Rajsha药品)。
本调查旨在发现不同比例的某些药用植物的有效组合可以补充作为hyperlipidaemia治疗剂。在目前使用的植物调查,也就是说,甘草glabra(豆科),Withania somnifera(f .茄科),芦笋racemosus(f .百合科),吊兰borivilianum(f .百合科)胡麻属indicum(f .胡麻科),有民族植物学的历史和广泛应用在印度阿育吠陀医学系统的各种疾病。我们之前的工作g . glabra,c . borivilianum,w . somnifera,美国indicum,答:racemosus显示存在剂量依赖的相关性(5和10通用%的根/种子粉)有利影响hypercholesterolemic老鼠(14- - - - - -18]。我们发现g . glabra是最有效的植物研究,参照hypolipidaemic / hypocholesterolemic和抗氧化效果紧随其后的是吗w . somnifera,答:racemosus,c . borivilianum,美国indicum。在这项研究中,我们调查了这些植物的不同组合对血脂水平的影响,fecal-cholesterol,中性甾醇,胆汁酸排泄模式和随之而来的对肝的影响胆固醇和胆汁酸生产hypercholesterolemic老鼠。也尝试研究肝脂质过氧化作用的状态,antioxidants-catalase的概要,超氧化物歧化酶,抗坏血酸以及等离子体的铁减少能力(收紧)hypercholesterolemic老鼠。
2。结果
2.1。植物成份和收紧的价值在不同的组合
所有三个组合的定量植物化学的分析(我、C-II C-III)表示,这些组合包含纤维、植物甾醇、皂素、多酚、类黄酮,抗坏血酸。收紧的值作为总抗氧化剂浓度组合,II, III表示我的最高价值C-II和C-III紧随其后(表2)。
2.2。体重、食物摄取和肝脏重量
没有明显差异在进食或身体重量在任何团体(数控、HC,我、C-II和C-III)。然而,肝脏重量显著降低(P< 0.002)在我(15%)、C-II(14%),和C-III(12%)组相比,HC动物(数据没有提交)。
2.3。血浆和肝脂质概要文件
血浆脂质显著下降(P< 0.002)与所有三个组合。所有三组(我、C-II C-III)注册等离子TL大幅下降(我:30%;C-II: 32%;C-III: 20%), TC (40%;43%;29%)、TG (28%;15%;14%)和低密度脂蛋白(53%;57%;37%)的水平,增加高密度脂蛋白胆固醇(35%; 37%; 21%,P< 0.002)指出在这些群体相比,HC组(图1)。极低密度脂蛋白(VLDL)水平在测试组(我:7.8±0.2;C-II: 9.2±0.2;C-III: 9.3±0.2 mg / dL,P< 0.002)显著低于HC组(10.8±0.2 mg / dL)。因此,结合饮食VLDL浓度降低了28%,15%,和14%,分别。同样,粥样硬化指数(AI)也减少combination-diet-treated组(我:3.3±0.1;C-II: 3.1±0.1;C-III: 4.4±0.1,P< 0.002)相比,HC组(7.6±0.3)。肝脂质显著下降(P< 0.002)在测试组:TL(28%, 34%, 20%,我C-II,和C-III resp)和TC(31%, 35%, 20%,我C-II,和C-III resp。)但不显著TG(17%, 9%, 8%,我C-II,和C-III职责。P< 0.002)相比,HC组(表3)。
2.4。肝β-还原酶和胆汁酸水平
政府的不同组合hypercholesterolemic老鼠导致显著增加(P< 0.002)肝β-还原酶活动(我、C-II C-III组:16%,19%,和13%,分别地)相比,HC组。肝脏胆汁酸内容也增加了(P< 0.002,27%;33%;16%)相比,这些团体hypercholesterolemic对照组(表3)。
2.5。粪便胆固醇、中性固醇和胆汁酸的内容
有增量(P< 0.002)粪便中胆固醇(15%;19%;11%)、中性甾醇(19%;23%;12%)和胆汁酸(29%;34%;我18%)排泄,C-II, C-III组相比,HC组(表4)。
2.6。肝脂质过氧化和抗氧化配置文件
肝脂质过氧化作用显著降低(P< 0.002)在所有三个组(我:33%,C-II: 26%, C-III: 17%)相比,HC组。过氧化氢酶(P< 0.002,我:36%,C-II: 32%,和C-III: 14%)和SOD (P< 0.002,我:27%,C-II: 20%,和C-III: 19%)活动也增加了在这些组相比明显在HC组(图2)。我,C-II, C-III注册组大鼠肝脏抗坏血酸含量增加(132.7±3.8;114.3±3.1;110.3±3.2μg / g,P< 0.002)相比hypercholesterolemic (95.5±2.8μ老鼠g / g)。收紧所有组中值增加,我,人民和C-III (P< 0.002,35%;29%;21%,职责),而HC组(图1)。
3所示。讨论
目前的调查表明,在这项研究中使用的植物组合是有效的降低胆固醇水平hypercholesterolemic老鼠。植物代谢产物、甾醇类、大豆蛋白质,和纤维通过降低胆固醇降低冠心病的风险特性,独立和组合(8]。在这项研究中,观察到的降胆固醇的影响不同植物组合管理hypercholesterolemic老鼠可能与胆固醇的排泄增加,中性植物固醇,胆汁酸。的植物化学的分析组合(我、C-II C-III)显示纤维的存在,皂甙、植物甾醇、多酚、类黄酮、植物甾醇和抗坏血酸,纤维以及皂苷可能是重要的在消除胆固醇hypercholesterolemic老鼠与不同的组合管理。这些组件为等离子体降低胆固醇的影响[受到相当大的关注3,19- - - - - -21]。众所周知,植物甾醇有一个更大的亲和力比胆固醇微粒,因为他们更大的疏水性。因此,他们可以很容易地取代从胶束肠内胆固醇,减少肠内胆固醇的吸收,从而降低肝脏和血浆胆固醇浓度(21,22]。膳食纤维似乎干扰胆固醇吸收和肝脏胆固醇的胆汁肝肠循环导致损耗池和脂蛋白代谢的改变。此外,纤维的降低胆固醇的效果被认为是主要是由于胆固醇和胆汁酸的排泄增加(19,23]。皂苷也能诱发胆固醇从胶束和干扰的胆汁酸肝肠循环使其不可用肠道吸收,从而降低血浆胆固醇水平(20.,24]。值得注意的是胆固醇的排泄,中性甾醇,胆汁酸显著高于政府的不同植物组合相比hypercholesterolemic老鼠。这些损失的粪便胆固醇和胆汁酸可以减少肝脏胆固醇水平,因此,一个补偿增加肝cholesterogenesis和胆汁酸合成指出与明显高于肝β-还原酶活性和胆汁酸的生产在不同的组合组相比hypercholesterolemic控制老鼠。显著下降,血浆低密度脂蛋白胆固醇和胆汁酸增产在不同组合组也可能是由于纤维和皂素含量的组合作为纤维和皂苷通过中断血浆低密度脂蛋白胆固醇水平较低的胆固醇和胆汁酸的吸收和增加ldl受体活性;的低密度脂蛋白胆固醇可以随后异化胆汁酸(23,25]。
不同组合喂养的大鼠肝脏和血浆TG浓度较低比胆固醇喂养的老鼠。TG损耗的能力可能与纤维抑制脂类的吸收肠道流明(23]。此外,据报道,皂苷抑制胰脂肪酶活性和降低TG浓度(26)导致后续减少VLDL-C浓度在等离子体22]。目前实验三个组(我C-II和C-III)显示,同时等离子体TG和VLDL-C水平下降可能与实验的纤维和皂素含量饮食。几项研究证明,低水平的脂蛋白胆固醇表明冠心病的高危和高密度脂蛋白胆固醇水平的增加被认为是有益的1]。流行病学研究也表明,高脂蛋白胆固醇水平可能有助于antiatherogenecity,抑制参与和保护内皮细胞的细胞毒性影响氧化低密度脂蛋白(27]。目前指出高水平的血浆脂蛋白胆固醇hypercholesterolemic动物管理与不同的组合相比,HC动物显示这些组合的生理作用提高脂蛋白胆固醇水平。而饮食皂甙和纤维不知道提升脂蛋白胆固醇水平(20.,23),抗坏血酸盐和类黄酮增加脂蛋白胆固醇浓度(28]。组合含有抗坏血酸和类黄酮,增加脂蛋白胆固醇水平hypercholesterolemic动物管理结合饮食可以归因于这些植物代谢物。
最近的研究表明直接高胆固醇血症与冠心病之间的关系(1]。膳食胆固醇代谢中交付的肝细胞产生大量的活性氧(29日]。这个过程被认为是产生剧毒产品,包括脂质过氧化物醛、环氧化合物和金属羰基合物,导致快速食用抗氧化剂如维生素E和维生素C (29日]。此外,高胆固醇饮食增加血清低密度脂蛋白的水平,,由于氧化应激,低密度脂蛋白氧化越来越从而促进动脉粥样硬化斑块的形成(30.]。许多研究表明膳食多酚、类黄酮、类胡萝卜素、维生素C、木酚素能有效地清除自由基,降低脂质过氧化水平和低密度脂蛋白氧化,防止动脉粥样硬化的进展(3,28,30.- - - - - -32]。多酚的抗氧化活性,主要是由于其氧化还原性质,作为降低代理、氢捐助者,单线态氧饮料用金属螯合潜力(3,32]。多酚和黄酮类化合物清除自由基,包括羟基和超氧化物阴离子,刺激超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶基因表达降低丙二醛含量,提高实验动物的血脂水平(10,32,33]。抗坏血酸是一个主要的连锁中断抗氧化剂对自由基和轭合物与细胞毒性、基因毒性、脂质过氧化产物,消除他们(34]。的根中提取g . glabra抗氧化活性报道由于存在多种酚类化合物包括类黄酮、isoflavonoids,化合物,bibenzyls [35]。抗氧化剂和antiperoxidative芝麻木脂素类相关的性质,如sesamol sesamolinol, pinoresinol, sesaminol [31日]。的sitoindosides VII-X Withaferin (Glycowithanolides)w . somnifera已经涉及增加刺激老鼠大脑的抗氧化活性和过氧化氢酶和SOD活动(36]。在目前的研究中,高胆固醇(HC)美联储的老鼠显示抗氧化状态显著下降,同时增加脂质过氧化反应比正常老鼠控制(NC)。然而,所有三个组合治疗hypercholesterolemic老鼠显示相当大的减少脂质过氧化和抗氧化状态的改善。此外,水提物和等离子FRAP-values以及肝过氧化氢酶、SOD和抗坏血酸水平最高的我相比C-II和C-III组。我组的丙二醛水平也显示C-II和C-III组相比明显下降。组合的植物化学的分析已经表明多酚,类黄酮,抗坏血酸。因此,这些combinations-treated老鼠的肝抗氧化剂水平升高可能是由于多酚和类黄酮在实验的饮食。在这种背景下,我们最近的水和ethanolic提取物的体外研究g . glabra a . racemosus c . borivilianum和美国indicum表明这些植物具有相当大的对超氧化物自由基清除能力,一氧化氮,由于酚羟基自由基含量的植物(37- - - - - -40]。此外,这些植物明显抑制了金属催化脂质过氧化作用在分离大鼠肝线粒体分数以及有利影响动脉粥样硬化风险状态通过减少人类血清和低密度脂蛋白氧化引起的铜离子(37- - - - - -40]。综上所述,目前观察到的高抗氧化状态combinations-treated hypercholesterolemic老鼠可能是由于自由基清除行动所组合的饮食。此外,抗坏血酸的组合可能是一个有效的来源,因为它传播的抑制脂质过氧化,减少丙二醛的含量。不像我们之前报道这些个体植物(14- - - - - -18),目前的调查中使用的组合(我、C-II C-III)是增加个人的水平低得多的植物(包括在0.625和1.5之间通用,对5和10通用%)的饮食(表1)。然而,这些组合显著降低血脂水平,改善身体hypercholesterolemic大鼠的抗氧化能力。因此,草药combinations-C-I、C-II C-III,表现出微分hypocholesterolemic和抗氧化活动当美联储hypercholesterolemic老鼠。这可能是由于在不同浓度的不同类别的phytocomponents组合,如纤维、植物甾醇、皂苷、多酚、黄酮和维生素C(表2)。总之,尽管所有的三个测试组合植物有效hypocholesterolemic和抗氧化药物,我似乎更有效减少体内脂质和脂质过氧化作用和提高hypercholesterolemic大鼠的抗氧化状态。
4所示。材料和方法
4.1。制备的植物和植物化学的分析组合
的根源甘草glabra(GG)和种子胡麻属indicum(SI)从当地购买商品的根源Withania somnifera(WS)、芦笋racemosus(AR)和吊兰borivilianum(CB)从大学植物园收集和验证我们的教师分类学者a s Reddy博士。根和种子完全风干,磨成粉,用于制备不同组合(即。,combinations I, II, and III). All combinations were prepared using a 5 gm% mixture of roots/seed powder of the plants (Table1)。
我的植物成份,C-II, C-III量化标准的方法。总纤维、多酚和类黄酮估计根据Thimmaiah [41]。植物甾醇和皂素含量的组合估计使用铁chloride-sulphuric酸和vanillin-sulphuric酸方法,分别β谷甾醇和皂苷为标准(42,43]。总抗坏血酸含量估计使用2,4-dinitrophenyl肼试剂(44]。组合的ferric-reducing能力(收紧)测定总抗氧化剂的浓度使用TPTZ (2、4、6-tripyridyl -年代三嗪)HCl-FeCl3试剂在593海里。使用校准曲线的硫酸亚铁(45]。
4.2。动物
男性白化大鼠(查尔斯·福斯特,部门的动物繁殖,体重150 - 200通用)分别被安置随意水和美联储商业饲料(Pranav农业州的有限公司,浦那(印度)在通风良好的动物单元(26±2°C,湿度56%,12 hour-light /黑暗周期)。保健和程序采用目前调查CPCSEA按照规则和规定,以及实验动物伦理委员会批准的机构(IAEC)。
4.3。实验设计
为期10天的适应期后,30个老鼠被分成5组,每组6老鼠:NC:正常控制老鼠只接收商业饲料/基底饮食、HC:高胆固醇饮食控制老鼠接收基底饮食0.5通用% 1.0胆固醇和通用%钠牛磺胆酸盐,我:老鼠接受高胆固醇饮食+我,C-II:老鼠接受高胆固醇饮食+组合II, C-III:老鼠接受高胆固醇饮食+组合三世。基底饮食包含55.67通用%碳水化合物22.12通用%蛋白质,4.06通用%脂肪,3.76通用%纤维,5.64通用%矿物混合物,含水率8.75%。
结束的时候四周治疗,24小时收集粪便样本从单独的笼子里。动物禁食过夜,牺牲在轻度麻醉(乙醚)。血液通过心脏穿刺收集,等离子体被离心分离。肝脏切除,血浆和肝脏都保持冷冻,直到分析。
4.4。血浆和肝脂质概要文件
血浆总脂质(TL)内容被sulpho-phosphovanillin估计方法46]。血浆胆固醇(TC)、脂蛋白胆固醇(hdl - c)、甘油三酯(TG)和化验使用商业诊断包(夏娃的客栈诊断、瓦尔道拉、印度)。低密度脂蛋白胆固醇(低密度脂蛋白)、极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C)和粥样硬化指数(AI)计算根据Friedewald方程(47]。提取肝脏TL在氯仿:甲醇(2:1)(48)和估计的重量分析地。提取肝TC和TG (48)和估计使用标准工具(夏娃的客栈诊断、瓦尔道拉、印度)。
4.5。肝β-还原酶和胆汁酸的概要文件
肝β-还原酶(EC 1.1.1.34)活动的比率来计算的β-使用hydroxylamine-FeCl甲羟戊酸3试剂(49]。简而言之,肝β-是由其与羟胺反应在碱性pH试剂,紧随其后的是比色测量产生的异羟肟酸的复合物的形成与铁盐在540海里。肝甲羟戊酸是由相同的反应试剂,但估计pH值2.1。在这个pH值,甲羟戊酸内酯的形式容易与羟胺反应生成hydroxamate。因此,肝组织匀浆中β-和甲羟戊酸浓度估计的吸光度,和两者之间的比率是作为一个索引的β-还原酶酶活性的催化转化3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme甲羟戊酸。酶活性的比值成反比,也就是说,比对应的增加酶活性下降。alkaline-ethanol提取肝脏胆汁酸的酸化和估计使用vanillin-phosphoric酸试剂(50]。
4.6。粪便胆固醇、中性甾醇和胆汁酸的内容
粪便胆固醇、中性甾醇和胆汁酸提取使用碱性甲醇介质(51],粪便胆固醇和中性甾醇内容估计(52)使用标准工具(夏娃的客栈诊断、瓦尔道拉、印度)。部分提取的酸化和用于胆汁酸估计(50]。
4.7。肝脂质过氧化和抗氧化
肝脂质过氧化产物的浓度TBARS(硫代巴比土酸活性物质)是衡量TBA-TCA-HCl试剂(稍后通知0.37%,柠檬酸15%,0.25 N HCl)在532 nm使用摩尔吸光系数为1.56×105米−1厘米−1(53]。过氧化氢酶(EC 1.11.1.6)活性测定spectrophotometrically H的分解2O2在240纳米54]。超氧化物歧化酶(SOD);EC 1.15.1.1)化验用NADPH和经前综合症(吩嗪methosulfate)试剂nonacidic条件下,它可以降低电视台(氮蓝四唑盐),形成一个蓝色的彩色formazon可以以560海里(55]。总抗坏血酸测定使用2,4-dinitro苯肼(DNPH) H2所以4试剂(44]。等离子体的收紧价值是衡量Benzie和应变的方法45]。
4.8。统计评估
结果表示为±SEM手段。组之间的显著差异由单向方差分析使用SPSS 10日版和邓肯的事后分析测试。如果认为重要差异P< 0.002。
利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
确认
金融援助的形式研究资助(a . v . r . l . Narasimhacharya)和项目的从U.G.C. (n . p . Visavadiya),新德里,印度。作者特别感谢卢小姐瓦,研究员,在论文准备她的帮助。