文摘
背景。目前的药物用于失眠的管理相关的副作用。使用草药治疗失眠最近建议。客观的。本研究旨在确定催眠hydroalcoholic提取的活动艾苦艾(。苦艾)在老鼠身上。方法。的毒性一个。苦艾提取是评估他们的致命剂量50% (LD50)和细胞毒性评价也用MTT检测PC12细胞系。一个。苦艾提取(25、50、100和200毫克/公斤)和3分数(n丁醇分数(NBF),乙酸乙酯部分(电弧炉),和水比例(AQF))管理intraperitoneally30分钟前30毫克/公斤戊巴比妥腹腔内注射;在那之后,睡眠时间和睡眠延迟记录。结果。LD50值为2.4 g / kg。提取测试显示对PC12细胞的增殖没有负面影响。一个。苦艾提取pentobarbital-induced睡眠的持续时间增加剂量的100和200毫克/公斤( - - - - - - )。同样,AQF、电弧炉和NBF 200毫克/公斤可以增加睡眠时间( )。睡眠延迟是下降了一个。苦艾提取剂100和200毫克/公斤( - - - - - - ),AQF ( ),和电弧炉(P< 0.05)。此外,flumazenil逆转的催眠效果一个。苦艾提取( )。结论。一个。苦艾提取可能促进睡眠效果通过调节gaba ergic演示系统。
1。介绍
失眠对生活质量有负面影响导致记忆障碍、情绪障碍,和更长的反应(1- - - - - -3]。控释褪黑激素、多虑平、z-drugs(唑吡坦,eszopiclone, zaleplon)和促食素受体拮抗剂suvorexant主要用于治疗失眠药物类。虽然这些催眠药物可以改善睡眠质量,他们与不受欢迎的副作用4]。草药产品的使用,作为补充和替代医学的一个元素,是增加全球5]。艾苦艾(答:苦艾)(苦恼)是一个重要的多年生灌木的药用植物,全球分布在欧洲,亚洲,中东和北非(6]。答:苦艾由许多常见的名字命名。命名为苦恼,绿色的姜,苦艾酒,苦艾,英文;Genepi拉丁语;苦艾酒,Wermut在德国;Damseeh和Afsanteen阿拉伯语6]。答:苦艾采用在民间医学退热药,杀菌,抗痉挛,驱虫剂,心脏兴奋剂,修复心理功能和记忆改善恶化[7,8]。最近,它展示了各种药理作用包括神经保护(9,抗糖尿病的10),和王亚南11]属性。其他艾物种如答:persica显示抗焦虑(8)的影响。答:苦艾含有萜类等化合物(例如,芳樟醇),类黄酮(如quercetrin),这些成分已报告有催眠的作用[12]。的barbiturate pentobarbital binds to gamma-aminobutyric acid type A (GABA(A)) receptors to potentiate the effects of GABA [13]。Pentobarbital-induced催眠在老鼠身上是很受欢迎的动物模型筛选化合物的疑似镇静/催眠性质[14]。因此,目前的研究目的是估计的sleep-prolonging效果答:苦艾和它的分数。此外,可能的神经毒性的植物被评估使用大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞系。
2。材料和方法
2.1。试剂和化学物质
戊巴比妥钠flumazenil 3 - (4, 5-dimethyl thiazole-2yl) 2, 5-diphenyl溴化四唑(MTT)和penicillin-streptomycin从σ(美国)。杜尔贝科的修改鹰介质(DMEM),胎牛血清(的边后卫),和其他细胞培养材料都是从Gibco买生命科技(美国)。安定是来自Chemidarou公司(伊朗)。渐变80年从默克公司购买(德国)。
2.2。植物和提取
天线的部分答:苦艾收集从真主阿克巴山(Khorasan哈省伊朗)。植物的标本被发现Khorasan哈农业和自然资源研究中心。凭证标本(11856号)存入这个研究所。的天线部分的粉一个。苦艾72年是扩散与乙醇70%人力资源。经过提炼后的溶剂被移除(15]。干的一部分一个。苦艾进一步受到solvent-solvent提取三个分数,也就是说,n丁醇分数(NBF),乙酸乙酯部分(电弧炉),和水比例(AQF)。NBF AQF的收益率,电弧炉是55%,18%,和27%,分别。一个。苦艾分数是干水浴。的一个。苦艾提取及其分数在生理盐水溶解渐变80年由1% (16]。
2.3。动物
男性白化小鼠体重25 - 35 g维持在22±1°C 12人力资源的光和12人力资源的黑暗,有免费的水和食物。实验进行了按照道德准则批准的动物保健使用马什哈德大学医学科学委员会(981134)。
2.4。分组和治疗
共有66名成年男性白化小鼠被分为6组:组1:控制(生理盐水)组2:积极控制或安定(3毫克/公斤)3 - 6组:治疗组或不同剂量的答:苦艾提取(25、50、100和200毫克/公斤)与AQF组7 - 9:治疗组,电弧炉,NBF(200毫克/公斤)集团10:安定(3毫克/公斤)+ flumazenil(2毫克/公斤)集团11:答:苦艾提取的剂量200毫克/公斤+ flumazenil(2毫克/公斤)
2.5。所有代理都是腹腔内进行管理
三十分钟后腹腔内管理代理、戊巴比妥(30毫克/公斤IP)是诱导睡眠的管理。戊巴比妥的政府之间的时间,直到扶正反射和静止的损失被认为是睡眠延迟,而损失的时间经济复苏被认为是睡眠时间。老鼠给flumazenil(2毫克/公斤)安定或前30分钟一个。苦艾提取管理(17]。
2.6。毒性评估
可能的神经毒性一个。苦艾提取及其对PC12细胞的分数进行了测试。细胞被播种在96 -孔板在DMEM培养基补充青霉素链霉素的边后卫10%和1%。24小时后,培养基改为新鲜有车辆渐变80年(1%)或一个。苦艾提取(200、400和800μg / mL)及其分数(800μg / mL)。24小时后,MTT(0.5毫克/毫升最终卷)被添加到培养基的孵化2小时。之后,中都被丢弃而DMSO溶液添加到每个解散任何甲瓒晶体形成。染料的吸收为570 nm (15]。LD50测定,一系列的剂量一个。苦艾提取小鼠腹腔接种。在24小时内死亡的数量每组中被记录。最大剂量并没有导致死亡和最低剂量致人死亡的一种动物。这两个剂量的平均值被定义为半数致死量(18]。
2.7。数据分析
所有结果都意味着±SEM。统计分析是用单向方差分析(方差分析)其次是Tamhane T2因果检验。值和 被视为具有统计学意义。
3所示。结果
3.1。毒性的评估
最高剂量的一个。苦艾提取并没有导致任何鼠标和死亡的最低剂量导致死亡在一个老鼠分别为1.6和3.2克/公斤,分别。的LD50价值一个。苦艾提取是2.4克/公斤。结果显示无显著减少在PC12细胞的扩散浓度的100,200,400,800μg / ml的提取和800μ分数(表的g / ml1)。
3.2。的影响一个。苦艾提取小鼠Pentobarbital-Induced睡眠行为
结果表明,安定(3毫克/公斤)一个。苦艾提取(100和200毫克/公斤)与对照组相比显著增加睡眠时间( , ,和 ,职责)。Flumazenil(2毫克/公斤)一个。苦艾提取(200毫克/公斤)显著逆转的影响安定(3毫克/公斤)( )(表2)。
如表中所示3安定(3毫克/公斤)一个。苦艾提取(100和200毫克/公斤)显著减少睡眠潜伏期与对照组相比 , ,和 ,职责)。Flumazenil(2毫克/公斤)一个。苦艾提取(200毫克/公斤)显著逆转安定的增强效应(3毫克/公斤)在pentobarbital-treated老鼠( 和 ,)(表3)。
的影响答:苦艾提取小鼠分数pentobarbital-induced睡眠行为如下:
结果表明,所有分数(200毫克/公斤)与对照组相比显著增加睡眠时间( )(表4)。电弧炉和AQF(200毫克/公斤)显著减少睡眠潜伏期与对照组相比 )(表5)。
4所示。讨论
基于实验结果,一个。苦艾提取减少睡眠潜伏期和增强睡觉总睡在pentobarbital-induced老鼠。之前的研究表明,多种草药成分包括生物碱、黄酮类化合物(例如,quercetrin和木樨草素),萜类化合物(例如,芳樟醇)和类固醇催眠属性(12]。答:苦艾包含许多植物化学的成分,即内酯、萜类化合物(例如,γ4-terpeniol萜品烯,1日,反式侧柏酮,杜松烯莰烯、乙酸龙脑酯反式chamazulene -sabinyl乙酸月桂烯,愈创蓝油烃,樟脑,和芳樟醇),精油,丹宁酸、有机酸、树脂和酚类。植物也有黄酮类化合物(例如,槲皮素),类黄酮苷quercitin-3-O-D-glucoside等isorhamnetin-3-O-rhamnose葡萄糖苷,quercetin-3-O-rhamnoglucoside,异槲皮苷,isorhamnetin-3-O-glucoside,酚酸(香豆、绿原syringic,水杨酸、和香荚兰酸)(6,19,20.]。苯二氮卓类,如安定增强的影响神经递质γ-氨基丁酸(GABA)在对GABAA受体,从而增加pentobarbital-induced睡眠时间(21]。事实上,GABA打开Cl−通道伴随着膜超极化导致中枢神经系统抑郁和镇静、催眠作用[22,23]。因此,药物影响这些系统可以被认为是治疗失眠。因此,我们观察到的预处理小鼠flumazenil (GABAA苯二氮受体的拮抗剂)减少了长期安定的睡眠效果。此外,我们发现flumazenil逆转的催眠效果答:苦艾提取。我们准备了三个分数答:苦艾提取:AQF,其中包含增溶的极地代理和水溶性植物成分(例如,苷、丹宁酸和第四纪生物碱);电弧炉,其中包含与中间极性成分;NBF,含有非极性代理像固醇,烷烃,一些萜类化合物(14]。在我们的研究中,所有分数增强睡眠时间,这表明可能有生物活性成分提取及其各种分数与催眠性质。评估的催眠效应与神经元上没有负面影响,我们利用PC12细胞。没有细胞毒性效应一个。苦艾提取被发现在PC12细胞的24小时周期。急性毒性研究展示了致死剂量(LD (50))一个。苦艾提取是2.4克/公斤。基于这些结果,答:苦艾具有催眠的活动在一个相对安全的剂量范围。
5。结论
综上所述,本文提供的所有数据证明一个。苦艾提取增加了pentobarbital-treated老鼠的催眠效果。gaba ergic系统可能参与了这些影响的机制。还需要进一步的研究来支持这一证据。
数据可用性
一些数据可以从相应的作者在合理的请求。
信息披露
本文中描述的结果从一个医科学生论文的建议。
的利益冲突
作者宣称他们没有利益冲突有关的出版。
确认
这项工作是支持格兰特(研究项目。981134)副校长的研究和技术,马什哈德大学医学科学(妈妈)、马什哈德、伊朗。