电针刺激改善慢性脑Hypoperfusion-Induced焦虑行为和记忆障碍在自发性高血压大鼠表达下调ACE / Angⅱ/ AT1R轴和移植ACE2 / Ang - (1 - 7) / MasR轴

文摘

电针刺激(EA)可以有效地减轻焦虑障碍和记忆障碍引起的各种神经退行性疾病;然而,其神经保护作用的分子机制尚不清楚。先前的研究已经表明,肾素-血管紧张素系统(RAS)包括两个轴相互对立:经典的血管紧张素转换酶、血管紧张素ⅱ、血管紧张素ⅱ1型受体(ACE / Angⅱ/ AT1R)轴和保护血管紧张素转换酶2 /血管紧张素- (1 - 7)/ Mas受体(ACE2 / Ang - (1 - 7) / MasR)轴。在这项研究中,我们观察到,慢性脑灌注不足(CCH)介导的焦虑行为和记忆障碍(月)通过upregulation自发性高血压大鼠的海马的古典轴(ACE / Angⅱ/ AT1R)和部分海马保护轴(ACE2 / Ang - (1 - 7)。然而,Angⅱ水平远高于那些Ang -(1 - 7),表明ACE / Angⅱ/ AT1R轴的疾病中起着主导作用和高血压。此外,坎地沙坦cilexetil (Canc)和培(危险)作为阳性对照药物。我们发现EA、Canc和危险减毒CCH-induced焦虑行为和记忆障碍在萎缩,海马的差别可能通过对这些古典轴(ACE / Angⅱ/ AT1R)和整个海马的upregulation保护轴(ACE2 / Ang - (1 - 7) / MasR)。这些结果表明,EA与高血压治疗CCH可能由两个海马RAS轴。

1。介绍

慢性脑灌注不足(CCH)是一种常见的中枢神经系统的病理生理状态(1,2]。长期CCH可以触发神经退化,最终导致进行性认知障碍(3- - - - - -5]。临床研究表明,CCH阿尔茨海默病的共同病理基础,血管性痴呆、血管性认知障碍等神经退行性疾病(6- - - - - -8]。因此,理解机制CCH的发展将促进预防和治疗的治疗策略CCH-induced神经退化(6]。

的病理和神经保护机制是复杂的。大脑的功能和结构完整性取决于血液供应符合其能源需求的变化;因此,足够的脑血流量是一个关键因素在维持正常的大脑功能9]。在人类中,CCH不是一个孤立的病理生理现象,而是与其他血管危险因素发生,包括高血压(10]。因此,为了更好的复制人类疾病的病理生理学,CCH应该研究与其他血管风险因素,比如高血压。此外,越来越多的证据表明,脑灌注不足和高血压有相互依存的关系,促进发展的记忆障碍(10- - - - - -13]。CCH [14,15)和高血压(16焦虑的风险因素,但是他们的共病焦虑的影响尚不清楚。因此,角色的高血压发展的焦虑和记忆障碍需要说明。

两个轴的肾素-血管紧张素系统(RAS)由相互对立:经典的血管紧张素转换酶、血管紧张素ⅱ、血管紧张素ⅱ1型受体(ACE / Angⅱ/ AT1R)轴和另一种血管紧张素转换酶2 /血管紧张素- (1 - 7)/ Mas受体(ACE2 / Ang - (1 - 7) / MasR)轴。研究已经证实,这两个轴在大脑组织可以发挥神经损伤和神经保护,分别。研究已经证实,大脑RAS在发病机制中发挥着重要作用的(17]。RAS也是一个关键的系统在调节血压18和血管老化的过程中19]。此外,RAS的over-activation保护轴可以减少焦虑行为(20.]。越来越多的证据表明,大脑RAS相关记忆障碍在许多神经退行性疾病(21]。然而,目前尚不清楚大脑如何RAS,特别是两个轴的相互作用,参与CCH与高血压和情感和记忆相关的规定的行为。

我们之前的研究已经表明,电针刺激(EA)可以减轻认知障碍大鼠慢性脑缺血(22)和老年大鼠(23]。此外,越来越多的证据表明,EA可以有效地缓解焦虑症(24和阿尔茨海默氏症引起的记忆障碍25,26)和血管性痴呆(27]。然而,是否EA调节与高血压和CCH RAS尚不清楚这是否相关。在这项研究中,我们调查了镇静药和memory-ameliorating EA的影响在自发性高血压大鼠(月)和CCH大脑的潜在作用RAS在EA的神经保护作用。

2。材料和方法

2.1。动物和组

男性月(12周大,体重250−300 g)是购买的重要河流实验动物科技有限公司有限公司,北京,中国。老鼠被安置在四组与柔软的床上用品塑料笼子大学动物保健设施在一个人工12/12 h光暗周期。动物获得食物和水随意,恒定室温23 40−−25°C和相对湿度70%是维护。所有动物过程中执行这项工作是按照规定管理事务有关实验动物和动物保健和福利委员会批准的中国浙江医科大学,浙江,中国。

月被随机分为假(伪),CCH模型(模型),CCH +坎地沙坦cilexetil (Canc), CCH +培(危险),和+电针刺激(EA)组。

2.2。CCH模型

修改后的two-vessel闭塞(2 vo)方法Cechetti等人被用来准备CCH模型(28]。短暂,吸入异氟烷麻醉,后一个1厘米的切口是中间的老鼠的脖子,和迷走神经解剖暴露颈总动脉。5的右颈总动脉的结扎手术缝合。伤口缝合层的层。左侧颈总动脉结扎以同样的方式一个星期后。虚假的小组接受手术解剖迷走神经没有颈总动脉结扎。严格的无菌条件下维护期间和手术后预防感染。

2.3。EA和药物治疗

EA的老鼠在穴位上执行Baihui(问20)和Dazhui(问14)每天在实验过程中。不锈钢消毒一次性针灸针(Huatuo、苏州医疗有限公司、江苏、中国)有一个直径0.35毫米插入深达5毫米。问20以上穴位位于顶端auriculate中线的头。全球14个穴位位于后中线和抑郁低于7的棘状突起^th颈椎在卧姿。针的末端连接到一对电极的电刺激器(HANS 200 e华为有限公司,北京,中国)。EA参数设置如下:一个常数方波电流输出(15赫兹),与剩余强度1 mA(造成轻微的振动穴位周围的肌肉)30分钟从术后第一天开始每天一次。在整个过程中,所有老鼠依然平静没有任何挣扎或鸣唱。药物组大鼠接受药物溶解在通过胃内的政府在一个剂量的生理盐水1毫克/公斤/天4周。

2.4。区域脑血流量(rCBF)监测

使用激光多普勒flowmetry rCBF监控(探针403连接到PeriFlux 5000;瑞典Perimed AB)法卡斯的方法等。29日]。使用5%异氟烷麻醉诱导后,老鼠给呼吸面罩和2%异氟烷麻醉维持到最后的建模。操作表被加热来维持体温37°C。碘消毒酒精deiodination紧随其后,后一个1厘米之间的横向切口是右眼鼠和外部听觉运河。皮下组织是直言不讳地揭露颞骨,分离和表面组织被用3%过氧化氢。颞骨的表面干燥时,探测器基础固定在光滑的表面上颞骨即时使用乐泰4161胶(美国乐泰,哈特福德,CT)。rCBF监控将探针插入基座。监控完成后,使用5手术缝合皮肤缝合,和碘和青霉素钠用于消毒局部皮肤。觉醒后的笼子里的老鼠。

2.5。开放田地试验(OFT)

公平贸易局焦虑行为被广泛用于评估在啮齿动物30.]。正方形黑盒(100厘米宽,50厘米高)拿着相机在中心被用来执行该测试。盒子的底部几乎是分为16平方( ),和中间的四个方块被称为中心区域。老鼠轻轻放置在中心区域的实验。在5分钟内每个老鼠的活动之后,使用一个自动记录和分析图像跟踪系统(SMART3.0、Panlab、西班牙语)。记录的参数包括时间在中心区域,条目到中心区域,数量和总距离。每次老鼠测试后,盒子的底部和侧面与70%的酒精彻底擦洗去除粪便和其他气味,阻止这些影响其他老鼠的行为。

2.6。新奇物体识别测试(NORT)

NORT是测试基于原理的学习和记忆,动物天生就探索新的对象。一般是一个方法用来评估hippocampal-dependent记忆实验动物(31日]。NORT,老鼠可以进行学习和记忆测试中自由活动状态,更紧密地模拟人类学习和记忆的行为。一个平方PVC塑料盒没有盖子( )和三个对象被用来执行该测试。这三个对象由两个相同的长方体,长8厘米,宽8厘米,6厘米高度(对象),和一个圆柱体直径7厘米,高10厘米(对象B)。不能打动了老鼠的对象。这个试验包括三个阶段,即适应、熟悉,和检测阶段(32,33]。老鼠每天抚摸在开始测试之前,以避免在测试期间应激反应。在适应阶段,老鼠轻轻放进这个盒子,允许自由移动10分钟。在熟悉阶段,两个相同的对象被放置在同一个角落的盒子,10厘米的一面。旁边的老鼠就轻轻把盒子内壁远离自由移动的对象,并允许5分钟。24小时后检测阶段进行。在检测阶段,一个对象被这部小说取代对象B,和相机记录了探索大鼠的5分钟。这个测试是20^th天2签证官。一只老鼠被认为是探索一个对象时,它的头是2厘米内的对象。对象被称为熟悉的对象和对象B小说被称为对象。分析了使用SMART3.0 (Panlab、西班牙语)。歧视指数( )和歧视的比例 )计算,在那里是老鼠花费的时间探索对象和小说是老鼠的时间探索熟悉的对象。每次老鼠测试后,盒子和对象与70%的酒精彻底擦洗去除粪便和其他气味,阻止这些影响其他老鼠的行为。

2.7。莫里斯水迷宫测试(微波加工)

微波加工是一个测试hippocampal-dependent空间学习和记忆在啮齿动物34]。测试是在23日发起的^{理查德·道金斯}天2 vo和连续持续了6天。第一阶段是5天连续导航测试,评估大鼠的学习能力。老鼠需要找到一个平台(直径10厘米)隐藏在水下2厘米在1分钟之内。老鼠爬上平台后,他们需要保持在至少10年代的平台。老鼠如果1分钟内没有发现隐藏的平台,实验者会引导大鼠30年代的平台和维护它。越狱延迟所花费的时间是一个老鼠找到平台。老鼠接受了5天,每天四个试验被排除在外,如果他们没有找到这个平台在5^th的一天。第二阶段,命名空间探测试验,6^th天,执行测试大鼠的记忆能力通过观察象限中所花费的时间之前包含了平台。老鼠的活动记录和分析使用SMART3.0软件(Panlab、西班牙语)。

2.8。酶联免疫吸附试验(ELISA)

老鼠在氨基甲酸乙酯麻醉后牺牲i.p(1.2克/公斤。Sigma-Aldrich)。与4°C盐水灌注动物,海马组织很快被删除并放置在冷冻储存在−70°C。解冻海马样本中均质裂解缓冲含有蛋白酶抑制剂鸡尾酒(Applygen,北京)。ACE2 ACE的水平,和我,和二世和Ang -(1 - 7)是使用一个参数测量在上层清液™ACE(南京建成生物工程研究所,中国),ACE2(美国Anaspec)和我(美国研发系统)和II(美国研发系统),或Ang -(1 - 7)(研发系统、美国)免疫测定设备,分别根据制造商的指示。吸光度在405 nm阅读使用SpectraMax M4标(分子器件、美国),和浓度是由拟合曲线使用SoftMax Pro软件(版本5.0、分子器件、美国)。每组五大鼠随机选择了ELISA。

2.9。西方墨点法

解冻海马样本均质与裂解缓冲包含一个鸡尾酒磷酸酶、蛋白酶抑制剂和PMSF (Beyotime、上海、中国)。变性后,溶解产物10% sds - page凝胶分离和转移到聚乙二烯二氟化物薄膜(PVDF)(美国Bio-Rad)。膜被封锁的脱脂奶粉5% TBST渐变20(包含0.1%)1 h在25°C和孵化15−18 h在4°C单克隆兔子anti-MasR(1: 2000年,Proteintech组),anti-AT1R(1: 500年,Proteintech组),或anti-GAPDH(1: 5000年,Proteintech组)主要抗体。TBST清洗后,细胞膜被孵化1 h与辣根过氧化物酶- 25°C(合)共轭山羊anti-rabbit抗体(1:5000年,杰克逊ImmunoResearch实验室、美国)和蛋白质乐队使用ECL可视化系统(Immun-Star™合化学发光设备,Bio-Rad)。乐队图片记录使用ImageQuant拉斯维加斯4000系统(通用电气医疗集团、日本),和乐队强度量化使用ImageQuant TL软件(版本7.0,通用电气医疗集团,日本)。每组五大鼠为西方墨点法是随机挑选的。

2.10。免疫荧光

牺牲动物灌注后4°C盐水和4°C多聚甲醛(PFA),大脑被放置在4°C多聚甲醛24 h。15%和30%蔗糖梯度脱水后,脑组织被储存在-70°C,直到他们完全沉入底部。低温恒温器切片机(Microm HM 550年热费希尔科学公司,德国)被用来减少20μ米厚的冠状切片免疫荧光。片包含海马CA1, CA3, DG区(−−2.3毫米4.16毫米前囱)被实验者选择。大脑切片被封锁10%正常山羊血清溶液在37°C 2 h,然后孵化18−20 h在4°C的anti-MasR抗体(Alomone兔多克隆,1:500年,以色列)或一个anti-AT1R抗体(Alomone兔多克隆,1:500年,以色列)。洗后用PBS,片孵化一个Alexa萤石647 -共轭山羊anti-rabbit二级抗体(1:1000年,杰克逊ImmunoResearch实验室、美国)在37°C 1.5 h。最后,片使用尼康Eclipse可视化Ti共焦显微镜(尼康、日本)和图像在海马CA1, CA3, DG地区被抓获使用NIS-Elements软件(尼康、日本)。

2.11。统计分析

所有数据都表示为 ( )。rCBF数据监控和分析了微波加工定位导航测试使用重复测量方差分析(RM方差分析)。剩下的数据使用一个单向方差分析进行了分析。如果方差是制服,Bonferroni测试使用。如果方差不统一,Dunnett T3测试使用。 被认为是具有统计学意义。

3所示。结果

如图1后,每组1周月的习惯,2 vo模型归纳发起。7天,右侧颈总动脉(2 vo-r)闭塞;1星期后,左侧颈总动脉(2 vo-l)闭塞使用相同的方法。这个准备CCH模型后,启动了EA Canc,危机干预28天(4周)。

前每组测量2中的rCBF vo-r(基线),后2 vo-l, 1, 2, 4周后2 vo-l。公平贸易局执行19天,NORT进行天20−22日和微波加工测试进行23−28天。微波加工测试结束后28天,老鼠是麻醉和牺牲,ELISA、免疫荧光和免疫印迹。

3.1。EA增强CCH-Induced低rCBF萎缩

在这个实验中,我们使用激光多普勒flowmetry监控rCBF在老鼠2 vo-r 2 vo-l后立即和1,2,4周后2 vo-l。Pre-2VO rCBF(基线)显示两组之间无显著差异( ,单向方差分析)。

球形检验的结果表明,rCBF与干预后两组和时间。因此,这个实验的数据统计处理使用双向重复测量方差分析。结果表明,假组相比,模型组的rCBF显著降低在每个时间点后2 vo (RM单向方差分析;所有 ,Bonferroni测试;图2)。此外,虚假的组相比,Canc,危险,EA组表现出显著降低后立即rCBF 2 vo (RM单向方差分析;所有 ,Bonferroni测试;图2),1周后2 vo (RM单向方差分析;所有 ,Bonferroni测试;图2),2周后2 vo (RM单向方差分析; 或 ,Bonferroni测试;图2)。然而,Canc、危险和EA组没有表现出明显不同rCBF比虚假的组4周后2 vo (RM单向方差分析; ,Bonferroni测试;图2)。

与模型组相比,的rCBF Canc后立即危险组没有明显不同,1周或2周后2 vo (RM单向方差分析;所有 ,Bonferroni测试;图2)。然而,这些群体表现出明显高于rCBF相比,模型组4周后2 vo (RM单向方差分析; ,Bonferroni测试;图2)。与模型组相比,rCBF EA组没有明显不同的后立即或1周2 vo (RM单向方差分析;这两个 ,Bonferroni测试;图2),但明显高于2和4周后2 vo (RM单向方差分析; 或 ,Bonferroni测试;图2)。之间没有明显差异,rCBF Canc,危险,EA组的任何记录时间点(RM单向方差分析;所有 ,Bonferroni测试;图2)。

3.2。EA减毒CCH-Induced焦虑行为在萎缩

公平贸易局的结果表明,假组相比,所花费的时间在中央区域(图3(一))和数量的条目到中心区域(图3(b))模型组显著降低(单向方差分析;所有 ,Bonferroni测试)。与模型组相比,所花费的时间在中央区域(图3(一))和条目的数量到中心区域(图3(b))显著降低Canc,危险和EA组(单向方差分析; 或 ,Bonferroni测试)。没有明显差异之间的总距离五组( ,单向方差分析;图3(c))。

3.3。EA在月减毒CCH-Induced物体识别记忆障碍

NORT,虚假的组相比,歧视指数(d1,图4(一))和歧视比率(d2,图4(b))模型组显著降低(单向方差分析;这两个 ,Bonferroni测试;数据4(一)和4(b))。与模型组相比,Canc的d1和d2,危险,EA组显著提高(单向方差分析; 或 ,Bonferroni测试;图4(一)和4(b))。没有在d1或d2 Canc之间的显著差异,危险和EA组(单向方差分析;这两个 ,Bonferroni测试)。

3.4。EA减毒CCH-Induced空间学习和记忆障碍在萎缩

观察大鼠的空间学习表现在5天的微波加工训练。没有显著差异的游泳速度萎缩治疗不同的干预措施( ,RM双向方差分析;图5(a))。这消除了可能的影响2 vo老鼠模型本身的自由流动。虚假的组相比,逃避延迟模型的汽车(天),危险(第25 - 27天)和EA(24天,天26 - 27日)组明显高于(RM单向方差分析; 或 ,Bonferroni测试;图5(b))。与模型组相比,越狱的延迟Canc 26 - 27日(天),危险(26天),EA(天26 - 27日)组显著降低(RM单向方差分析; 或 ,Bonferroni测试;图5(b))。

经过5天的培训,在28天,平台被测试大鼠的空间记忆能力。相对于虚假的集团,象限的时间之前包含平台模型组显著减少(单向方差分析; ,Bonferroni测试;图5(c))。相对于模型组,所花费的时间在前面的象限平台Canc显著增加,危险和EA组(单向方差分析; 或 ,Bonferroni测试;图5(c))。

3.5。EA减毒CCH-Induced海马ACE活性增加,ACE2活动,和我在月水平

相对于虚假的集团,海马ACE活性明显高于模型组(单向方差分析; ,Bonferroni测试;图6(一))。相对于模型组海马Canc ACE活性显著降低,危险和EA组(单向方差分析;所有 ,Bonferroni测试;图6(一))。没有显著差异的王牌Canc之间的活动,危险和EA组(单向方差分析; ,Bonferroni测试)。

相对于虚假的集团,海马ACE2活动模型,显著的高于Canc,危险,EA组(单向方差分析;所有 ,Bonferroni测试;图6 (b))。相对于模型组海马Canc ACE2活性显著降低,危险和EA组(单向方差分析; 或 ,Bonferroni测试;图6 (b))。之间没有显著差异在海马ACE2活动Canc,危险和EA组(单向方差分析; ,Bonferroni测试)。

相对于虚假的集团,海马和我水平明显高于模型组(单向方差分析; ,Bonferroni测试;图6 (c))。相对于模型组、海马和Canc我水平显著降低,危险和EA组(单向方差分析; 或 ,Bonferroni测试;图6 (c))。没有显著差异在海马和我Canc之间的水平,危险和EA组(单向方差分析; ,Bonferroni测试)。

3.6。EA减毒CCH-Induced增加海马Angⅱ水平和Angⅱ/ Ang -(1 - 7)比例萎缩

相对于虚假的集团,海马Angⅱ水平明显高于模型中,Canc,危险,EA组(单向方差分析;所有 ,Bonferroni测试;图7(一))。相对于模型组,海马Canc Angⅱ水平显著降低,危险和EA组(单向方差分析;所有 ,Bonferroni测试;图7(一))。没有显著差异之间的海马Angⅱ级Canc,危险和EA组(单向方差分析;所有 ,Bonferroni测试)。

相对于虚假的集团,Ang -(1 - 7)水平明显高于模型中,Canc,危险,EA组(单向方差分析;所有 ,Bonferroni测试;图7 (b))。没有显著差异在海马Ang - (1 - 7) Canc之间的水平,危险和EA组(单向方差分析;所有 ,Bonferroni测试)。

此外,相对于虚假的集团和II / Ang -(1 - 7)比值明显高于模型组(单向方差分析; ,Bonferroni测试;图7 (c)Canc)和显著降低,危险和EA组(单向方差分析; 或 ,Bonferroni测试;图7 (c))。相对于模型组,Angⅱ/ Ang -(1 - 7)比率显著低于Canc,危险和EA组(单向方差分析;所有 ,Bonferroni测试;图7 (c))。没有显著差异在海马和II / Ang - (1 - 7) Canc之间的比例,危险和EA组(单向方差分析;所有 ,Bonferroni测试)。

3.7。EA减毒CCH-Induced增加海马AT1R表达和加强CCH-Induced减少海马MasR表达式在萎缩

AT1R免疫荧光(图的结果8(一个))表明,AT1R(红色)表达在CA1, CA3,海马体和DG区,AT1R-positive细胞与核costained DAPI染色(蓝色)。

当AT1R表达量化相对的GAPDH蛋白质(内部参考)(图8 (b)),相对于虚假的集团,AT1R的表达明显高于模型组(单向方差分析; ,Bonferroni测试;图8 (b))。相对于模型组,AT1R的表达显著低于Canc,危险和EA组(单向方差分析; 或 ,Bonferroni测试;图8 (b))。没有显著差异AT1R表达Canc之间,危险和EA组(单向方差分析;所有 ,Bonferroni测试)。

MasR免疫荧光(图的结果8 (c))表明,MasR(红色)表达在CA1, CA3, DG的海马区域和MasR-positive细胞与核costained DAPI染色(蓝色)。

MasR是量化的表达相对GAPDH用免疫印迹(图8 (d))。相对于虚假的集团MasR蛋白表达显著低于模型组(单向方差分析; ,Bonferroni测试;图8 (d))。相对于模型组,MasR的表达明显高于Canc,危险和EA组(单向方差分析; 或 ,Bonferroni测试;图8 (d))。没有显著差异MasR Canc之间的表达式,危险和EA组(单向方差分析;所有 ,Bonferroni测试)。

4所示。讨论

在这项研究中,公平贸易局、NORT和微波加工测试被用来观察的对焦虑的影响,识别记忆,和空间学习和记忆在月和调查这些是如何影响EA。之前的研究表明,CCH可以导致焦虑35和记忆障碍36),但目前还不清楚是否结合高血压也有类似的不利影响。我们的结果表明,CCH引起记忆障碍和焦虑在月和EA可以有效地缓解CCH-induced焦虑和记忆障碍在萎缩。

越来越多的证据证明,血管紧张肽原(AGT)是唯一的前体蛋白,港口和我在n端,由肾素(特别是裂解37]。Ang II是通过一个强大的血管收缩剂(ACE)裂开和我38]。和二世和AT1R的结合可以诱导血管重建,促进血管炎症和氧化应激损伤,随后引起脑损伤(39,40]。公认的观点是,Angⅱ在大脑行为通过一个复杂的神经网络来调节高血压(41,42]。Angⅱ注入在慢性高血压诱发学习和空间记忆障碍,以及焦虑(43]。此外,激活ACE / Angⅱ/ AT1R轴还没有造成高血压疾病,如脑灌注不足和缺血性损伤(44- - - - - -46]。这些障碍诱发焦虑行为和记忆丧失14,47]。在我们的研究中,相对于月,CCH月诱导显著激活的ACE / Angⅱ/ AT1R轴和加剧了焦虑行为和内存赤字。这些表明,ACE / Angⅱ/ AT1R轴是参与的叠加效应,导致更严重的功能损害。

除了绑定,AT1R的一部分和II是水解ACE2 Ang -(1 - 7),通过作用于MasR起神经保护作用,发挥抗焦虑效果(48和改善记忆障碍49]。研究表明,高血压可能诱发ACE2水平降低和减少代Ang - (1 - 7)50]。过度的ACE2可以减少高血压的萎缩(51]。新出现的证据表明,激活ACE2-Ang - (1 - 7) masr轴可以减弱高血压和动脉粥样硬化的病理进程的发展52]。然而,在缺血性脑血管疾病,缺血性中风可能诱发upregulation ACE2, Ang -(1 - 7),大脑MasR [53,54]。在我们的研究中,相对于月,CCH月诱导激活海马ACE2, Ang -(1 - 7),但Angⅱ水平远远高于Ang -(1 - 7),即Angⅱ/ Ang -(1 - 7)比率依然很高。这些表明CCH-induced增加ACE2和Ang -(1 - 7)可能导致部分和有限的自我保护的反应,不减轻记忆障碍和焦虑行为在萎缩。

在这项研究中,Canc和危险作为阳性对照药物。Canc是AT1R拮抗剂通常用于治疗高血压。研究表明,Canc抑制Angⅱ的行为通过具体绑定AT1R在中枢神经系统,减少氧化应激,增加脑血流量,防止CCH-induced记忆损害(1,55- - - - - -57]。也记录的抗焦虑效果Canc可观测到的上升加上迷宫(58]。此外,危险,一个经典的血管紧张素转化酶抑制剂,用于治疗高血压通过阻断和我的转换和二世和减少Angⅱ的表达。危险可能是有用的防止CCH-induced并发症,如内存赤字和吞咽困难(59,60),但危险的影响在CCH-induced焦虑行为还不清楚。

在我们的研究中,EA和两个正控制药物(Canc和危险)生成类似的缓解效应在月CCH-induced记忆丧失和焦虑。EA之后,王牌活动,和我水平,Angⅱ级,AT1R表达,和Angⅱ比Ang -(1 - 7)下降,和ACE2活动,Ang -(1 - 7)级别,MasR表达所有增加。我们推测,尽管EA是不如这两个目标积极控制药物,EA可能多目标的影响。EA可能使ACE / Angⅱ/ AT1R轴和ACE2 / Ang - (1 - 7) / MasR轴达到一个新的平衡表达下调ACE / Angⅱ/ AT1R加压的轴和移植ACE2 / Ang - (1 - 7) / MasR保护轴。

5。结论

总之,EA可以改善CCH-induced焦虑行为和记忆障碍在萎缩。EA与高血压治疗CCH的差别可能是介导通过对这些海马ACE / Angⅱ/ AT1R的轴和upregulation海马ACE2 / Ang - (1 - 7) / MasR轴。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。

的利益冲突

作者没有利益冲突的声明。

作者的贡献

沛沛丰和江泽民主席吴同样co-first作家这个工作。

确认

这项研究得到了浙江省自然科学发现(Y16H270024),中国国家自然科学基金(81804183)、特殊金融格兰特中国博士后科学基金会(2019 t120532),类通用金融的格兰特中国博士后科学基金会(2018 m642492)和浙江博士后基金项目(zj20180152)优惠。

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