音乐电针在阿尔茨海默病小鼠模型中可能是比电针更好的选择

摘要

目标．比较音乐电针和电针在阿尔茨海默病小鼠模型中的作用。方法．本研究以7.5月龄雄性衰老加速易感小鼠8 (SAMP8)作为阿尔茨海默病动物模型。正常对照范式下，7.5月龄雄性SAMR1小鼠作为空白对照组(N组)。治疗15 d后，采用Morris水迷宫试验、微pet、免疫组化检测音乐电针组(MEA)、电针组(EA)、阿尔茨海默病组(AD)和正常组(N)的差异。结果．Morris水迷宫试验、micro-PET和免疫组化结果显示，MEA和EA治疗均能提高大鼠的空间学习记忆能力和脑内葡萄糖代谢水平β额叶淀粉样蛋白含量，与AD组相比()．此外，MEA治疗比EA治疗更好地在用广告中减少小鼠前叶中的淀粉样蛋白-β水平。结论．在治疗阿尔茨海默病方面，MEA疗法可能优于EA，这在SAMP8小鼠中得到证实。

1.介绍

阿尔茨海默病(Alzheimer 's disease, AD)是一种中枢神经退行性疾病，伴有记忆障碍、失语、失认和执行功能障碍，以及人格和行为改变[1］.AD的病理特征包括β淀粉样蛋白(β）沉积和神经纤维纤维缠结，导致逐渐神经元损伤，最终萎缩的皮层和皮质标度[2］.核磁共振成像(MRI)研究表明，海马体是AD患者早期受影响的区域[3.］.然而，评估AD患者大脑其他区域的变化的研究相对较少，特别是额叶。有趣的是，Harwood等通过对41例AD患者的评估发现，AD患者的洞察力、认知障碍以及功能缺陷与额叶皮层的葡萄糖代谢率相关[4］.

我们之前的研究证明，电针治疗可以有效改善AD动物的空间学习记忆能力和海马的葡萄糖代谢[5］.其他研究表明，音乐疗法可能有助于对AD的补充治疗[6］.在中国，一种将电针和音乐疗法相结合的创新疗法诞生了“音乐电针”一词。MEA已在临床上用于治疗一些神经和精神障碍。加入音乐疗法，帮助克服针灸不适;因此，MEA疗法在某种程度上优于传统电针[7］.

在目前的研究中，我们旨在解决两个问题:(1)在MEA期间额叶发生了什么?这些变化与在大脑其他区域观察到的变化不同吗?(2)两种治疗AD的方法是否有差异?为此，我们选择衰老加速小鼠易感8 (senaging - prone mouse 8, SAMP8)小鼠作为AD动物模型，并评估不同技术的差异。首先，采用Morris水迷宫试验评估模型动物的行为变化。然后对感兴趣区域(ROI)进行微pet评估，并对不同脑区进行糖代谢评估。最后采用免疫组化(IHC)方法检测淀粉样蛋白的变化β治疗后额叶沉积1-42。

2.材料和方法

2．1．动物

衰老加速小鼠易感8 (SAMP8)和同源正常衰老加速小鼠r1 (SAMR1)育种对由日本京都大学武田教授好心提供[8］.所有动物均为雄性，SPF级，称重g。它们被安置在北京中医药大学第一附属医院实验动物中心的隔离设施内，温度可控(°C）和12h / 12h深光循环，含有无菌饮用水和标准颗粒饮食随意．所有实验都是根据美国国立卫生研究院实验室动物护理和使用指南(NIH出版物编号80-23)进行的。30只7.5月龄雄性SAMP8小鼠被分为3组(每组)，包括SAMP8阿尔茨海默病控制(AD)、电针(EA)和音乐电针(MEA)组。10只7.5月龄雄性SAMR1小鼠组成正常对照组(N)。

2.2。针刺

电针、音乐电针治疗每天20分钟，每天1次，连续15天(第8天不治疗)。穴位处方为DU20Baihui，杜26.Shuigou，和前HN3Yintang(重要的加分);这些穴位的位置是根据国家针灸实验研究学会开发的“实验动物针灸图集”。Huatuo30号卡(0.5英寸)针用于治疗。du26采用针刺法测定ShuigouDU20的平刺法Baihui和EX-HN3Yintang．针深0.5 cm，用胶带捆扎。

EA组将针柄连接到HANS-LH202电针装置(北京大学神经科学研究所、北京华威实业发展公司)，稀疏波为2hz、2v、0.6 mA。

MEA组将针柄连接ZJ-12H音乐电针装置(中国针灸学会研制，哈尔滨智厚医疗器械有限公司制造)。节奏清晰，速度适中，音乐处方强度(治疗痴呆的处方)选择;调整音乐强度，使动物在治疗期间保持安静。

N组和AD组不进行治疗，为保证相同的治疗条件，将小鼠抓抓固定，每天1次，连续15天。

２．３．莫里斯水迷宫测试

Morris’ water maze consisted of a circular tank (diameter, 90 cm; height, 50 cm), filled with water to a depth of 29 cm, maintained at°C，用蓝色黑色墨水呈现不透明。可拆卸的圆形平台（直径为9.5厘米;高度，28厘米），水下的顶部表面1厘米位于游泳池内。泳池区在概念上分为四个象限（NE，NW，SW和SE）等大小。数据由摄像机（TOTA-450D，JAPA）收集，该数据被固定在天花板上，并通过自动化跟踪系统（中国大登集团，北京，中国）连接到视频录像机。

在行为测试中，老鼠被放置在水池中，水池中有一个平台，就在水面以下。他们一找到平台就逃出了迷宫。远端视觉线索排列在房间周围，通常，老鼠能够根据这些线索找到隐藏平台的位置。

2.3.1。隐藏的平台测试

这个测试评估小鼠在不能直接看到平台，但必须根据外部线索记住平台或进行搜索的条件下找到平台的能力。平台放置于水面以下1cm处;用一种深蓝色无毒蛋彩漆的悬浮液使水变得不透明。平台被放置在与可见平台测试中使用的不同的位置。每只老鼠从4个地点中的一个被释放，并有60秒的时间寻找隐藏的平台。在每次试验结束时，老鼠被放置在平台上或被允许在那里停留15秒。突出的空间线索排列在房间周围。研究人员还构成了一个强有力的空间线索，在每次试验中释放小鼠后，他们总是坐在同一个位置。在平台位置保持不变的情况下，每天进行6次试验，连续5天。老鼠寻找平台所花费的时间被记录下来，并表示逃逸延迟。

2.3.2。调查试验

隐藏平台测试完成后的第二天，平台被移除;每只老鼠在池中放置一次，持续60秒，从隐藏平台测试中使用的第一个开始位置开始。在包含平台的象限内游泳的时间被记录下来。这被认为是对空间记忆最具体的测试。记录在平台象限所花费的时间，并得出游泳花费在平台象限的总时间所占的百分比。

２.４.Micropositron发射断层扫描

每组随机抽取4只动物进行微pet检测。的¹⁸F-FDG PET示踪剂由中药研究所PET室提供;采用西门子INVEON PET/CT成像系统进行PET成像。实验前，对7.5月龄小鼠(28~32 g)进行血糖监测，血糖水平在正常范围(7.0~10.1 mmol/L)。因此，可以用微pet对其进行评价。小鼠在评估前6小时停止饮水。将动物置于吸力室，吸入混合1.5%异氟醚的氧气进行麻醉。完全麻醉后约14.8~16.5 MBq¹⁸F-FDG PET经尾静脉注射。后¹⁸F-FDG PET示踪剂摄取60分钟后，小鼠置于俯卧位，平行于扫描仪长轴，头部位于扫描仪视野内。然后，微正电子发射断层摄影术开始收集图像。小鼠吸入含1.5%异氟醚的氧气(1l /min)麻醉。

2.4.1。微正电子发射断层扫描图像重建

采用滤波反投影(FBP)和CT光子衰减校正进行图像重建。动态微pet图像帧以30 s/帧的速度拍摄。

2.4.2。兴趣区选择

在海马中，在横向，冠状和矢状平面中选择三维感兴趣区域。计算每个兴趣区域中每克的摄取率。

2．5．免疫组织化学

Morris水迷宫试验结束后，每组6只小鼠(4只采用微pet)腹腔注射10%水合氯醛0.35 mL/100 g体质量麻醉。三分钟后，胸腔被打开，心脏露出来;从左心室至升主动脉插管，快速注射100ml生理盐水。切除右心耳，注射4%多聚甲醛至肝变白，右心耳流出清澈液体。灌流后，取小鼠头，取全脑置于冰敷。然后将大脑放入4%多聚甲醛中进行石蜡包埋。

组织化学方面，石蜡包埋的脑组织切片用二甲苯脱链，用分级醇水合。然后用柠檬酸抗原修复缓冲液处理切片，PBS (pH 7.4)每5 min振荡3次。用3%过氧化氢在黑暗中孵育20分钟以熄灭内源性过氧化物酶后，用抗a孵育切片β1-42抗体(1:50,ab10148, Abcam)隔夜。然后在室温下加入二抗30 min, DAB检测。最后，将切片用分级酒精脱水并安装。取400倍放大的脑组织标本，用Image-Pro Plus 6.0软件计算积分光密度(IOD)值。

2.6。统计分析

数据为各组平均值±SD。Morris水迷宫试验采用Huynh-Feldt检验对隐藏平台试验的逃避潜伏期进行分析，探针试验、微pet试验、免疫组化数据进行单因素方差分析。组对比较采用LSD检验。统计显著性设为．所有统计分析都与SPSS软件V.17.0（SPSS，USA）进行。

3.结果

3.1。电针和音乐电机对莫里斯水迷宫试验中SAMP8鼠标空间学习和记忆能力的影响

电针和音乐电针在WMW试验中对SAMP8小鼠空间定位能力的影响如图所示1(一)．随着训练时间的延长，各组逃避潜伏期均呈下降趋势(图)1 (b))．与N组相比，AD组在逃避潜伏期方面表现出明显的迟缓(），可能是由于由于快速老化过程受损学习和记忆而导致的记忆缺陷。与广告组相比，ea中的逃生延迟（)及多边环境协定(）群体显着减少（)．如图所示1(一)和1 (b)， MEA组的表现优于EA组，但没有统计学上的显著差异()．

为了评估空间记忆能力的治疗效果，研究人员通过分析预期平台位置的游泳时间百分比来检测第6天的表现。花在平台象限上的时间比例越高，记忆保持的水平就越高[9］.在这个试验中，与AD组相比，EA ()及多边环境协定()组在平台象限停留的时间增加()．更重要的是，EA组和MEA组在平台象限上花费的时间百分比相似(， 数字2)．

除了逃跑时间，动物的平均游泳速度也与空间学习和记忆能力有关。在某些情况下，正常对照组的游泳速度较慢，逃离时间比阿尔茨海默病组更长。因此，逃避时间不能作为学习能力和记忆力的唯一指标。上平台前的平均游泳速度是衡量运动能力的重要指标，能反映实验动物个体差异。

与N组相比，AD组游泳速度显著降低()，表明SAMP8小鼠的运动能力较SAMR1小鼠低。与AD组相比，电针和音乐电针均能提高SAMP8小鼠的游泳速度(EA，音乐电针)。；意味着,)．而且，MEA组比EA组表现得更好(图3.)．

３．２．PET图像和¹⁸不同脑区F-FDG摄取率

微pet图像取自每只小鼠的海马、额叶和大脑皮层。从上到下采用相同的颜色标准和代码显示葡萄糖代谢率。电针和音乐电针治疗后，¹⁸在每个脑区评估的F-FDG水平高于非治疗组的值(图)4（a），4（b）， 和4（c）)．

为获得各组间糖代谢的急性差异，测定各组的摄取率¹⁸对每克大脑不同区域的F-FDG进行了评估。经电针和音乐电针治疗后，脑脊液的摄取率¹⁸每克海马体中的F-FDG (EA，；意味着,)、大脑皮层(EA，；意味着,）和额叶（EA，；意味着,）高于阿尔茨海默氏病组（图）5（a），5 (b)， 和5 (c))．在额叶，摄取率¹⁸MEA组的F-FDG值高于EA组，而其他两个区域的F-FDG值均高于EA组。

３．３．淀粉样蛋白的表达β额叶1-42

在行为测试和成像后，通过免疫组织化学分析脑组织样品，以评估两种治疗变体对淀粉样蛋白的影响β1-42由于神经元损坏和内存损伤而累积。与N组相比，淀粉样蛋白的IOD-βAD组的额叶1-42明显高于AD组(), EA ()及MEA ()组。同时，淀粉样蛋白的IODβAD组额叶样本1-42明显高于EA组()及多边环境协定()组。有趣的是，淀粉样蛋白的IODβ来自MEA组的前叶样品中的1-42显着低于EA组（） （数字6和7)．

4.讨论

4.1。衰老加速的小鼠Prone 8（SAMP8）是Alzheimer疾病的理想动物模型

衰老加速小鼠(aging -accelerated mouse, SAM)是一种从AKR/J小鼠品系共同基因库中通过表型选择建立的加速衰老模型[10］.这些动物在生命的早期就出现了学习和记忆缺陷[11］.研究表明，作为衰老模型的衰老加速小鼠(aging -accelerated mouse, SAMP8)表现出许多已知在AD早期出现的特征，如氧化应激增加、淀粉样蛋白水平改变和tau蛋白磷酸化[12］.此外，已发表的数据[13和我们之前的研究[5证明SAMP8可以通过针刺治疗提高学习记忆能力。因此本研究选择SAMP8小鼠作为理想的阿尔茨海默病动物模型。

4．2．阿尔茨海默病的创新疗法:音乐电针疗法

音乐疗法是对阿尔茨海默病的行为和心理症状的一种非药物治疗[14］.适当的音乐可以缓解AD患者的症状，并可能刺激认知活动，使易发生进行性退化的区域得以维持[15］.近十年来，越来越多的证据表明，适当的音乐配方可以改善AD症状[16- - - - - -21]，特别是轻症患者[22］.

此外，由于音乐疗法是非药理学的，常与其他疗法结合使用。有趣的是，一项关于脑瘫的针灸治疗与音乐治疗相结合的研究。有趣的是，与单一疗法相比，联合疗法的效果更好[23］.

因此，在本研究中，我们介绍了音乐电针治疗AD的方法。音乐电针结合了音乐治疗和电针治疗;在对症选择音乐时，声波可以转化为脉冲电流[24］.因此，我们分别评估了MEA对人体听觉器官和穴位的影响。具体而言，其基本特点和优势包括音乐治疗和不规则脉冲电流两个方面[7］.

电（EA）被广泛应用于临床实践和研究，并在实验调查针灸的机理[25］.该疗法已应用于AD的治疗，可改善认知功能[26和脑能量代谢[5，27］.因此，EA被认为是AD的有效治疗干预[28］.然而，概念EA宽容已经在30年前被证明[29］.的机制EA宽容是中枢神经系统释放镇痛物质(包括脑去甲肾上腺素和内源性抗阿片类物质)以及大量内源性单胺。其中，胆囊收缩素八肽(CCK-8)是目前公认的抗阿片类药物EA宽容［30.]，这是由于长期使用相同的频率在EA中引起的。由于AD治疗需要一个长期的疗程，它可能会导致EA宽容［31］.因此，我们在本研究中评估了MEA在AD治疗中的作用。MEA疗法充满了中国特色的音乐疗法。它将音乐节奏转化为不断变化的频率和波形，以克服人体对一般电针的耐受不足。同时，让患者听舒缓音乐，起到音乐治疗的作用[32］.MEA疗法在我国的临床和基础研究中并不新颖。研究表明，这种疗法在缓解疼痛方面比传统的电针疗法效果更好。33]，改善皮肤病(荨麻疹)的症状[34],黄褐斑[35])，缓解神经系统疾病，如抑郁症[36- - - - - -38]， 失眠 [39和焦虑[40，41］.然而，关于痴呆症的研究却很少。因此，引入这种治疗阿尔茨海默病的方法是一种创新。

4．3．SAMP8小鼠额叶MEA与EA的差异

目前评估AD发病机制的研究主要集中在颞叶、顶叶皮层和海马，很少分析额叶的变化[42］.最近的研究发现，具有阿尔茨海默病的转基因小鼠表现出与前萎缩相关的早期认知下降，甚至比海马更早发生的变化[43］.

如上所示，虽然MEA疗法在Morris水迷宫试验中的表现优于EA，但差异无统计学意义。在微pet中，EA治疗组海马和大脑皮质糖代谢改善明显高于MEA。仅在额叶，MEA治疗优于EA，但差异无统计学意义。这些发现提示了一个问题:MEA疗法是否更倾向于在额叶中发挥作用。

为了解决这个问题，我们在SAMP8小鼠的额叶中评估了淀粉样蛋白水平，结果证实了上述观点。比较不同疗法对额叶淀粉样蛋白IOD的治疗效果，MEA治疗明显优于EA ()．因此，MEA确实倾向于在额叶中发挥作用。

5.结论

使用行为测试,在活的有机体内在SAMP8小鼠中检测MEA和EA治疗AD的差异。有趣的是，EA和MEA均能提高空间学习记忆能力，改善大脑不同区域葡萄糖代谢和额叶淀粉样蛋白表达。此外，MEA治疗在降低额叶淀粉样蛋白含量方面优于EA。然而，需要进一步的研究来进一步解释这一现象。

相互竞争的利益

作者声明本文的发表不存在利益冲突。

致谢

这项研究是由国家自然科学基金项目(没有。81273825)。

参考文献

1. C. Ballard, S. Gauthier, A. Corbett, C. Brayne, D. Aarsland，和E. Jones，《阿尔茨海默病》，柳叶瓶号，第377卷9770, pp. 1019-1031, 2011。查看在：出版商的网站|谷歌学者
2. V. H. Finder，《阿尔茨海默病:一般介绍和发病机制》，阿尔茨海默病杂志第22卷第2期3, pp. S5-S19, 2010。查看在：出版商的网站|谷歌学者
3. A.Tarroun，M. Bonnefoy，J.Bouffard-Vercelli，C.Gedeon，B. Vallee和F.棉花，可以对海马的线性MRI测量分化来自阿尔茨海默病的老年人正常脑老化？“外科和放射解剖学，第29卷，第2期1，页77-81,2007。查看在：出版商的网站|谷歌学者
4. D. G. Harwood, D. L. Sultzer, D. Feil, L. Monserratt, E. Freedman, M. A. Mandelkern，《阿尔茨海默病中的额叶代谢低下和洞察力受损》，美国老年精神病学杂志，卷。13，不。11，PP。934-941,2005。查看在：出版商的网站|谷歌学者
5. J. Jiang, K. Gao, Y. Zhou, et .，“电针治疗改善阿尔茨海默病小鼠模型的学习记忆能力和脑葡萄糖代谢:Morris水迷宫和微pet，”循证补充和替代医学，卷。2015年，第142129条，7页，2015年。查看在：出版商的网站|谷歌学者
6. 学术界。李,C.-K。刘,中州。杨,M.-C。周,学术界。陈,C.-L。“音乐治疗对台湾老年痴呆症认知功能的辅助作用:初步研究”，神经精神疾病与治疗， vol. 11, pp. 291-296, 2015。查看在：出版商的网站|谷歌学者
7. 范伟，徐春兰，桂荣，洪生，“音乐针灸治疗研究现状与展望”，中国针灸杂志， vol. 12, pp. 1247 - 1250,2014。查看在：谷歌学者
8. J. E. Morley, H. J. Armbrecht, S. a . Farr, V. B. Kumar，“衰老加速小鼠(SAMP8)作为氧化应激和阿尔茨海默病的模型，”生物化学与生物物理学——疾病的分子基础(一九八二十二日卷)5, pp. 650-656, 2012。查看在：出版商的网站|谷歌学者
9. K. Bromley-Brits, Y. Deng，和W. Song，“阿尔茨海默病模型小鼠的莫里斯水迷宫学习和记忆缺陷试验”，可视化实验杂志,没有。53，文章ID e2920, 2011。查看在：出版商的网站|谷歌学者
10. D. A. Butterfield和H. F. Poon，“衰老加速的俯卧鼠（SAMP8）：与阿尔茨海默氏病的基因表达和蛋白质异常的改变相关的年龄相关的认知下降模型，”实验老年学，第40卷，第5期。10，页774-783,2005。查看在：出版商的网站|谷歌学者
11. J. F. Flood和J. E. Morley，《SAMP8老鼠的学习和记忆》，神经科学和生物行为评论第22卷第2期1，pp。1-20,1997。查看在：出版商的网站|谷歌学者
12. M. Pallas, A. Camins, M. A. Smith, G. Perry, H.-G。Lee，和G. Casadesus，“从衰老到阿尔茨海默病:用衰老加速小鼠模型(SAMP8)揭开‘开关’，”阿尔茨海默病杂志，第15卷，第5期。4，第615-624页，2008。查看在：谷歌学者
13. “针灸可改善中年SAMP8小鼠的认知缺陷并增加海马神经元密度，”针灸医学，第30卷，第2期4, pp. 339-345, 2012。查看在：出版商的网站|谷歌学者
14. N.J.Glynn，“阿尔茨海默氏症患者的音乐疗法评估工具”老年护理杂志第18卷第2期1，第3-9页，1992。查看在：谷歌学者
15. D.奥尔德里奇(D. Aldridge)，《阿尔茨海默病:节奏、时间和音乐的治疗》(Alzheimer's Disease: rhythm, timing and music as therapy)，生物医学和药物治疗，第48卷，第48期7，页275-281,1994。查看在：出版商的网站|谷歌学者
16. M. Satoh, T. Yuba, K. Tabei等，“使用唱歌训练的音乐疗法提高阿尔茨海默病患者的精神运动速度:神经心理学和功能磁共振成像研究，”痴呆症和老年人认知障碍额外，第5卷，第5期。3, pp. 296-308, 2015。查看在：出版商的网站|谷歌学者
17. G. E. Lancioni, M. F. O'Reilly, N. N. Singh等人，“评估自我调节的音乐刺激对阿尔茨海默病患者的影响和社会感知”，发展性残疾研究第34卷第3期1，第139-146页，2013。查看在：出版商的网站|谷歌学者
18. J. J. M. Garćia, R. iodiice, J. Carro, J. Sánchez, F. Palmero，和A. M. Mateos，“在阿尔茨海默氏症类型的痴呆症中，通过悲伤的音乐改善自传式记忆恢复”，衰老的临床与实验研究，第24卷，第2期3, pp. 227-232, 2012。查看在：出版商的网站|谷歌学者
19. H. Fukui，A.Ariai和K. Toyoshima，“音乐疗法在阿尔茨海默病患者治疗中的疗效”国际阿尔茨海默病杂志， 2012年第5期，文章编号531646,6页，2012年。查看在：出版商的网站|谷歌学者
20. J. Witzke, R. A. Rhone, D. Backhaus，和N. A. Shaver，“多么甜美的声音:使用音乐治疗阿尔茨海默氏痴呆的研究证据，”老年护理杂志第34卷第3期10，第45-52页，2008。查看在：出版商的网站|谷歌学者
21. H. B. Svansdottir和J. Snaedal，“阿尔茨海默氏症型中度和重度痴呆的音乐治疗:病例对照研究”，国际心理学学报第18卷第2期4，页613-621,2006。查看在：出版商的网站|谷歌学者
22. M. Irish, C. J. Cunningham, J. B. Walsh等人，“研究音乐对轻度阿尔茨海默病患者自传体记忆的增强作用”，老年痴呆症和老年认知障碍第22卷第2期1，页108-120,2006。查看在：出版商的网站|谷歌学者
23. H.-B。Yu Y.-F。刘,L.-X。吴，“针灸结合音乐疗法治疗脑瘫30例”中国中医杂志，第29卷，第2期4, pp. 243-248, 2009。查看在：出版商的网站|谷歌学者
24. 金振、颜博，《音乐电针研究》，中国Acu-Mox，第8卷，585-588页，2005。查看在：谷歌学者
25. D. Mayor，“电针文献的探索性综述:临床应用和内啡肽机制”，针灸医学，卷。31，不。4，pp。409-415,2013。查看在：出版商的网站|谷歌学者
26. 董伟，郭伟，郑昕，等，“电针可改善SAMP8小鼠与AMPK激活相关的认知缺陷，”大脑代谢疾病，第30卷，第2期3, pp. 77 - 784, 2015。查看在：出版商的网站|谷歌学者
27. 董伟，郭伟，王飞等，“电针上调sirt1依赖的PGC-1α在SAMP8小鼠中的表达医学科学监控，卷。21，pp。3356-3362,2015。查看在：出版商的网站|谷歌学者
28. Wang F.， Zhong H.， Li X. et al.，“电针可减轻APP/PS1转基因小鼠与星形细胞NDRG2抑制相关的参考记忆损害”，分子神经生物学，第50卷，第5期。2, pp. 305 - 313,2014。查看在：出版商的网站|谷歌学者
29. 韩俊生，丁祥志，樊胜国，“胆囊收缩素八肽(CCK-8)对电针镇痛的拮抗作用及其在电针耐受中的作用”，疼痛第27卷第2期1，页101-115,1986。查看在：出版商的网站|谷歌学者
30. J.-t.Bian，M.-Z.太阳和J.-S.汉族，“CCK-8抗血清的电针耐受性逆转：大鼠核心痛苦中疼痛相关神经元的电生理学研究”国际神经科学杂志第72卷第2期1-2，第15-29页，1993。查看在：出版商的网站|谷歌学者
31. 梅玲，蒲淑芬，韩剑生，“不同频率的电针耐受对大鼠脊髓内心血管活动阿片类物质抑制的影响”，神经肽第26卷第2期4，页221-224,1994。查看在：出版商的网站|谷歌学者
32. 陈华，盛昭，杨明，文文，《嵌入式音乐电针器械设计及疗效评价处方》中药与材料医学现代化,没有。10, pp. 2278-2281, 2014。查看在：谷歌学者
33. 洪生，郝平，桂荣，“音乐电针与脉搏电针镇痛效果的比较研究”，针灸研究， 2005年第2卷，第83-87页。查看在：谷歌学者
34. 荆竹，杨太鹏，丛颖，梅薇，闫燕，“音乐电针治疗慢性荨麻疹35例临床观察”，医学的哈尔滨，第2卷，第48-49页，2010。查看在：谷歌学者
35. 程明，岳昕，郑振坤，“音乐电针治疗黄褐斑120例临床观察”，中国初级卫生保健， 2007, vol. 7, pp. 81-82。查看在：谷歌学者
36. 银山，钱军，金超等，“音乐电针和脉搏电针对慢性应激抑郁症大鼠不同脑区单胺类神经递质表达的影响”，临床针灸杂志， vol. 03, pp. 52-55, 2014。查看在：谷歌学者
37. 范福珍，李金英，“脉电法与音乐电法对脑卒中后抑郁患者胃肠道症状的疗效比较”，南京中医药大学学报， vol. 03, pp. 225-228, 2014。查看在：谷歌学者
38. J. Qian，M.徐汇，T. yinshan，D. xiaofeng和L. Zhigang，“音乐EA和Pulse EA反对慢性应激抑郁大鼠和海马星形织物影响的行为”，CJTCMP， vol. 03, pp. 648-651, 2013。查看在：谷歌学者
39. x,临床研究音乐电控治疗失眠[M.S.论文]，黑龙江中医药大学，2013。
40. 洪志，郑志，洪东，“音乐电针治疗焦虑症157例”，上海针灸杂志，第1卷，第22-23页，2002。查看在：谷歌学者
41. H. Shuxia，L.Guizhen和L. Mingxia，“加上心理咨询治疗焦虑音乐ea的疗效”，“康复与健康杂志，第4卷，160-162页，1994。查看在：谷歌学者
42. I. D. Ionov，“刺激易患阿尔茨海默病损害的大脑区域血液流入的特定机制”，国际神经科学杂志，第117卷，第117号10，第1425-1442页，2007。查看在：出版商的网站|谷歌学者
43. A. Herrero-San Martin, A. Villarejo-Galende, A. Rábano-Gutiérrez, C. Guerrero-Márquez, J. Porta-Etessam，和F. Bermejo-Pareja，“阿尔茨海默氏病的额部变异。两例病理确诊病例和一篇文献综述，”航空杂志上Neurologia(第57卷)12, pp. 542-548, 2013。查看在：谷歌学者

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