文摘

肥厚性疤痕引起严重的功能和美容问题,但没有治疗方法取得满意的治疗效果。然而,间充质干细胞显示出可能的治疗前景。在这里,我们调查的影响interleukin-10-modified脂肪间充质干细胞(IL-10-ADMSC)肥厚性疤痕的形成。体外,IL-10-ADMSC可以高度表达il - 10和表现出更强的抑制肥厚性瘢痕成纤维细胞(hsf)增殖、迁移,细胞外基质合成(胶原蛋白的表达我,胶原蛋白三世,FN,和αsma比ADMSC蛋白质)。体内,我们发现IL-10-ADMSC加速伤口愈合时间,减少疤痕面积和杰出的高度。体外一样,IL-10-ADMSC也表现出了更强的抑制细胞外基质合成胶原蛋白(胶原蛋白的表达我三世蛋白质)在比ADMSC伤口。此外,我们还发现,IL-10-ADMSC也对炎症的抑制作用更强的伤口比ADMSC和IL-10-ADMSC抑制TGF -β/ Smads和NF -κB通路。总之,IL-10-ADMSC证明预防肥厚性疤痕形成的能力。及其可能的分子机制可能与IL-10-ADMSC抑制增殖和迁移hsf的细胞外基质的合成,在伤口愈合和IL-10-ADMSC抑制了炎症。

1。介绍

疤痕是正常皮肤组织的外观和组织病理学变化,伤口愈合后出现。伤口愈合后疤痕是不可避免的产品,但它会导致各种并发症后增长超过一定的限制,如瘙痒、疼痛、溃疡,甚至严重的功能障碍或缺陷(1,2]。肥厚性疤痕,疤痕的一种红色和在伤口愈合的原始位置,突出的特点是肝纤维化、细胞外基质(ECM)过度沉积(3,4]。尽管肥厚性疤痕形成的确切机制尚未阐明,成纤维细胞的异常迁移,细胞外基质的过度积累,和过度的炎症被认为是与肥厚性疤痕的形成(5,6),特别是过度的炎症(7,8]。因此,这些已知的机制,是有关肥厚性疤痕的形成是当前发展的目标肥厚性疤痕的预防和治疗。

最近,间充质干细胞已进入公众视线由于其潜在的治疗和预防肥厚性疤痕形成。许多临床试验和临床试验的结果表明,许多间充质干细胞有能力促进无疤治疗和抑制组织纤维化在皮肤伤口,如骨髓间充质干细胞(bmsc) [9),脐带间充质干细胞(10],绒毛膜间充质干细胞(11,脂肪间充质干细胞(ADMSC) [12]。在目前的研究中,我们的研究课题是ADMSC,不仅因为它是一个成人干细胞自我更新能力和多向分化潜能,还因为ADMSC有广泛的来源和简单的制备(13,14]。重要的是,转基因ADMSC已经发现用于治疗某些疾病,如骨缺损的修复15),前交叉韧带重建16,改善勃起功能障碍在糖尿病大鼠(17]。这些研究表明,转基因ADMSC疾病治疗是可行的。

白介素10 (il - 10)是一个multicell-derived、多功能调节细胞生长和分化的细胞因子,参与炎症和免疫反应,是公认的炎症和免疫抑制因子(18,19]。据报道,炎症和免疫反应中扮演重要的角色疤痕的愈合的伤口,伤口愈合中过度的炎症反应和抑制可能帮助预防肥厚性疤痕的形成20.,21]。此外,IL-10-modified骨髓间充质干细胞可以减弱的严重性实验同种异体干细胞移植后急性移植物抗宿主病(22],IL-10-modified人类羊膜间充质干细胞促进伤口愈合通过施加多个协同效应(23]。然而,并没有研究报告的影响IL-10-modified ADMSCs预防肥厚性疤痕。在这项研究中,我们创建一个新的治疗方法来预防肥厚性疤痕形成,即局部注射IL-10-modified ADMSC (IL-10-ADMSC)伤口。和我们的研究结果表明,IL-10-ADMSC预防肥厚性疤痕形成,比ADMSC及其预防效果。

2。材料和方法

2.1。隔离、文化和ADMSC的识别

所有的动物实验是按照动物伦理委员会的整形外科医院,中国医学科学院、北京协和医学院(伦理批准文号2021 - 23),满足美国国立卫生研究院实验室动物保健和使用指南(24]。新西兰白人女性兔子(12周大,2800 - 3000克)是由肌肉麻醉管理5% pelltobarbitalum钠(25毫克/公斤)和Sumianxin(0.1毫升/公斤),紧随其后的是安乐死的耳静脉空气栓塞。我们首先分离兔脂肪组织的腹股沟在无菌条件下,清理它,把它切成糊状,加入0.1%的I型胶原蛋白(美国17018029,英杰公司)和孵化45分钟37°C,然后,通过离心收集细胞。最后,细胞在DMEM培养基培养(美国Gibco 21885108) 5%二氧化碳和37°C。我们用流式细胞仪和免疫荧光检测CD11b, CD34, CD29, CD90评估ADMSC的纯洁性。

2.2。建立IL-10-Modified ADMSC

我们将合成兔子il - 10基因(美国NCBI C_13684.1)到pDc316质粒(VT1805,优宝研究,中国),然后转移重组质粒为HEK293细胞病毒做准备。最后,准备病毒用于感染ADMSC细胞准备IL-10-modified ADMSC,即IL-10-ADMSC。

2.3。细胞增殖实验

在一个独立的细胞培养系统中,我们播种 细胞24-well文化菜肴。coculture系统ADMSC / IL-10-ADMSC hsf,我们播种 ADMSC或参议院的IL-10-ADMSC Transwell室(美国热费希尔140620)和播种 众议院的hsf Transwell室。不同时期的细胞培养后,我们把细胞培养基和增加了100μL /细胞培养基和10μL / CCK-8摄政。1小时之后,我们决定每个好和计算的OD450价值相对细胞生存所生产指令。

2.4。细胞迁移试验

hsf单独培养,或增加1μg / L il - 10在中或cocultured ADMSC / IL-10-ADMSC 3天。然后,Transwell室(美国热费希尔140652)是用来评估在不同的hsf迁移的能力。简而言之, hsf培养基接种到参议院。中含有20%的边后卫(美国萨克拉门托Gibco)添加到低室24小时在37°C。最后,我们把中、洗细胞与PBS的3倍。接下来,我们添加甲醇固定后修复细胞和干30分钟。与结晶紫染色后20分钟,我们计算迁移细胞。

2.5。实时定量聚合酶链反应

实时定量PCR (RT-qPCR)进行评估IL-10-ADMSC对基因表达的影响在伤口组织(25]。简而言之,我们使用一个总RNA提取工具(DP431,田代,中国)从组织中提取总RNA,准备cDNA使用逆转录工具包(美国Promega A3500)。如上所述的制造指令GoTaq qPCR混合工具包(美国Promega A6006A),我们准备200μL RT-qPCR反应系统和检测基因表达使用RT-qPCR仪器(美国BIO-RAD CFX384)。基因的相对表达计算方法。β肌动蛋白是加载控制mRNA, U6 microrna的加载控制。引物被显示为:MCP-1-F: 5 - - - - - -GCATCAACCTGACCCCTCAA-3 ,MCP-1-F: 5 - - - - - -ATCACACACGCATCTGAGCA-3 ;MIP-1β- f: 5 - - - - - -TGCTCGCTTCTCCGAACAAT-3 ,MIP-1β- r: 5 - - - - - -CCCTTCCATGCGGTTAGGTT-3 ;il - 1β- f: 5 - - - - - -CGCATGTTCCTGGGGAGATT-3 ,il - 1β- r: 5 - - - - - -ATCTTTTGGGGTCCGTCAACT-3 ;IL-6-F: 5 - - - - - -CCTGAACCTTCCAAAGATGGC-3 ,IL-6-R: 5 - - - - - -TTCACCAGGCAAGTCTCCTCA-3 。

2.6。免疫印迹

总蛋白提取自组织和细胞使用组织蛋白质提取试剂(美国热费希尔78510)和里帕裂解缓冲(美国热费希尔89900),分别。热费希尔和BCA试剂盒(23227年,美国)用于确定蛋白浓度。接下来,40μ使用10% sds - page g总蛋白进行了分析。转让后,PVDF膜(美国热费希尔LC2002)是第一次阻止了5%脱脂奶粉,然后探讨了初级抗体collagen-I (ab34710) collagen-III (ab184993), FN (ab2413,),αsma (ab5694), TGF -β1 (ab215715), Smad2 (ab40855) p-Smad2 (ab188334) Smad7 (ab216428)》κBα(ab133462),我κBα(ab32518) p-p65 (ab86299), p65 (ab16502)一夜之间在4°C。PVDF膜与PBS-Tween 20缓冲溶液洗3次,和二次抗体加入孵化1小时在室温下。蛋白质乐队与ECL可视化解决方案,其次是微密度分析使用图像3.0 J (IBM、美国),和β肌动蛋白是加载控制。和所有抗体用于免疫印迹检测从Abcam购买。

2.7。免疫荧光

细胞免疫荧光,1 X 105 ADMSC细胞被播种到Lab-Tek室(热科学、美国)文化24小时37°C和5%二氧化碳。第二天,我们把细胞培养基和固定细胞用4%多聚甲醛在室温下10分钟。然后,细胞被封锁5% BSA在室温下一个小时。组织免疫荧光,我们首先准备冰冻组织部分:组织首次在4%多聚甲醛溶液孵化6 - 8小时,然后,组织被调到20%的蔗糖溶液直到组织下沉至底部,我们准备了冰冻组织切片的8 - 10微米。修复和阻塞后,细胞被孵化与主要抗体CD11b, CD34, CD29,一夜之间,CD90在4°C,然后,用二次抗体细胞被孵化。同样,组织部分是孵化主要抗体CD45(13917年,细胞信号技术)和CD3(85061年,细胞信号技术)在一夜之间在4°C,然后与二次抗体细胞孵化:山羊anti-rabbit免疫球蛋白g h和l (Alexa萤石®594)(ab150080 ABCAM)。接下来,应该复染色细胞核细胞/组织部分5μg / mL DAPI在室温下5分钟。最后,所有样本分析TCS SP5徕卡显微镜(徕卡微系统)与拉斯维加斯AF Lite 4.0图像浏览软件。

2.8。兔耳肥厚性瘢痕模型和治疗

根据前面的描述(25),我们准备了兔耳使用新西兰白兔肥厚性瘢痕模型。总之,被麻醉后,我们使用4毫米皮肤活检穿孔(美国PELCO 15110 - 40)构建4每只耳朵腹侧的伤口(我们这一次定义为0),伤口被随机分为3组,每组5只兔子:对照组,ADMSC集团和IL-10-ADMSC组。在100年建立了伤口μL(包含任何或磷酸缓冲盐(PBS) ADMSC或 IL-10-ADMSC皮内注射在对照组中的每个伤口,ADMSC组,分别或IL-10-ADMSC组。

2.9。免疫化学

我们首先准备冰冻组织部分:组织首次在4%多聚甲醛溶液孵化6 - 8小时,然后,组织被调到20%的蔗糖溶液直到组织下沉至底部。最后,我们准备好的冰冻组织切片的8 - 10微米。接下来,我们封锁了组织部分5% BSA 1小时在室温下,然后,组织部分主要抗体孵育collagen-I(英国Abcam ab34710)和collagen-III(英国Abcam ab184993)一夜之间在4°C。孵化后主要抗体,组织部分与HRP-labeled孵化二级抗体室温1小时。最后,所有样本分析TCS SP5徕卡显微镜(徕卡微系统)与拉斯维加斯AF Lite 4.0图像浏览软件。

2.10。统计分析

GraphPad棱镜8(美国GraphPad软件)是用来分析数据和数据在这个研究。Kolmogorov-Smirnov测试用于检查定量数据是否符合正态分布,提出了符合正态分布的数据( ),分析了两组学生之间的不同测试和使用单向方差分析比较组倍数之间的区别。值小于0.05表示明显不同。

3所示。结果

3.1。IL-10-Modified ADMSC抑制hsf体外的增殖

我们分离和培养的兔ADMSC在显微镜下观察:ADMSC主要显示长轴形状(图1(一))。然后,我们使用CCK8工具包来确定第三(P3)和10 (P10)一代生长曲线(图1 (b))。接下来,我们使用流式细胞仪检测细胞表面标记评估ADMSC的纯度,如CD11b、CD34、CD29, CD90、发现(数字1 (c)和1 (d))CD11b和CD34呈阴性(< 1%)和CD29 CD90是积极的(> 98%)。与此同时,我们也发现了细胞表面标记使用细胞免疫荧光(图1 (e)):CD11b和CD34也大多是负面的,和CD29 CD90也大部分是积极的。

探讨il - 10在ADMSC修改的影响,我们首先测试的影响il - 10修改在ADMSC il - 10的表达,发现il - 10的表达mRNA在IL-10-modified ADMSC (IL-10-ADMSC)显著高于野生型ADMSC(图2(一个))。与此同时,我们还发现,il - 10细胞中蛋白质的浓度的培养基IL-10-ADMSC显著高于ADMSC细胞培养基中(图2 (b))。此外,我们比较ADMSC的扩散能力和IL-10-ADMSC发现IL-10-ADMSC扩散减少,而且显著降低的第六天与ADMSC相比(图2 (c))。重要的是,我们使用一个Transwell室建立coculture ADMSC系统/ IL-10-ADMSC和肥厚性瘢痕成纤维细胞(hsf)评估的影响il - 10修改hsf的扩散。有趣的是,我们发现ADMSC可以显著减少hsf的扩散,扩散的hsf IL-10-ADMSC coculture系统中最低,hsf(图2 (d)),建议IL-10-modified ADMSC抑制hsf体外的增殖。

3.2。IL-10-Modified ADMSC抑制hsf体外的迁移

调查的影响il - 10修改迁移的hsf coculture系统ADMSC / IL-10-ADMSC hsf,如图3,迁移的hsf coculture ADMSC hsf制度明显低于单独迁移hsf的文化系统。同样的,当我们增加了1μg / L il - 10重组蛋白单独hsf文化系统,迁移hsf明显抑制,表明il - 10抑制hsf体外的迁移。在上面的发现中,我们发现,il - 10细胞中蛋白质的浓度的培养基IL-10-ADMSC显著高于ADMSC的细胞培养基,所以我们认为IL-10-ADMSC也会抑制hsf的迁移,及其可能的影响比ADMSC和il - 10。幸运的是,细胞迁移试验的结果表明,hsf的迁移是最低IL-10-ADMSC和hsf coculture系统。

3.3。IL-10-Modified ADMSC hsf抑制细胞外基质的合成

的过度合成和分泌细胞外基质在皮肤伤口愈合疤痕形成的主要原因之一(26]。因此,抑制细胞外基质的合成和分泌可能有助于抑制瘢痕形成。调查的影响il - 10在细胞外基质的合成改性hsf coculture ADMSC系统/ IL-10-ADMSC hsf。我们培养hsf孤独,或增加1μg / L il - 10在中,或与ADMSC cocultured / IL-10-ADMSC 3天,然后,我们收获hsf检测collagen-I的表达,collagen-III,αsma, FN蛋白质免疫印迹(图4(一)),发现胶原蛋白的表达我,胶原蛋白三世,FN,αsma蛋白质在hsf coculture ADMSC hsf制度明显低于这些仅在hsf文化系统。同样的,当我们增加了1μg / L il - 10重组蛋白单独hsf文化系统,胶原蛋白的表达(图4 (b)),胶原蛋白3(图4 (c)),FN(图4 (d)),αsma(图4 (e))蛋白在hsf显著下降,这表明,il - 10的表达抑制胶原蛋白,胶原蛋白三世,FN,αsma在hsf体外蛋白质。在上面的发现中,我们发现,il - 10细胞中蛋白质的浓度的培养基IL-10-ADMSC显著高于ADMSC的细胞培养基,所以我们也认为IL-10-ADMSC会减少胶原蛋白的表达我,胶原蛋白三世,FN,αhsf sma蛋白质,其效果可能比ADMSC和il - 10。幸运的是,免疫印迹结果表明,胶原蛋白的表达我,胶原蛋白三世,FN,αsma蛋白质在hsf coculture IL-10-ADMSC系统和hsf最低。此外,我们还发现,4-hydroxyproline的浓度的培养基中最低coculture IL-10-ADMSC和hsf(图的系统4 (f))。

3.4。IL-10-Modified ADMSC预防肥厚性疤痕形成兔耳模型

结果显示体外,我们怀疑IL-10-ADMSC体内抑制疤痕形成,及其可能的影响比ADMSC更好。来验证这个假设,我们首先建立了一个兔耳朵伤口IL-10-ADMSC模型,然后研究了合适的治疗条件。由于il - 10重组质粒携带绿色荧光蛋白标签,我们可以观察到绿色荧光评估中的IL-10-ADMSC伤口。荧光分析的结果表明,绿色荧光逐渐减少的扩展的局部注射时间IL-10-ADMSC(图5(一个))。局部注射3天后伤口,伤口只是IL-10-ADMSC的数量( )%(图0.5天5 (b))。与此同时,我们也分析了il - 10的蛋白质的动态变化的伤口在9天内局部注射IL-10-ADMSC用免疫印迹(图5 (c));结果表明,il - 10的表达蛋白在伤口没有注入IL-10-ADMSC很低;当地注入IL-10-ADMSC伤口后,il - 10进行了快速upregulation和特征的顶峰阶段达成的第一个1天接受。然而,il - 10在伤口的生产表现出逐渐下降,直到第七天,仍然保持在一个较高的水平(图第三和第五天5 (d))。

总之,制定IL-10-ADMSC治疗伤口的局部注射IL-10-ADMSC每3天,直到伤口愈合。在第三次治疗开始的,我们观察到皮肤病理损害最低的伤口IL-10-ADMSC组(图S1)。我们每天观察伤口的愈合和记录每组的愈合时间的伤口,伤口的愈合时间在对照组(没有任何治疗)( )天,伤口的愈合时间ADMSC组(与当地注入ADMSC) ( )天,伤口的愈合时间IL-10-ADMSC组(与当地注入ADMSC)仅仅是( )天(图6(一))。28日天治疗后,我们分析了疤痕面积和疤痕突出高度和发现的区域(图6 (b)(图)和疤痕突出高度6 (c)IL-10-ADMSC组)是最小的。注意,疤痕面积和疤痕突出高度ADMSC组也显著低于对照组,表明ADMSC预防肥厚性疤痕形成的兔耳模型,及其抑制il - 10修改后效果更好。

3.5。IL-10-Modified ADMSC减少细胞外基质和伤口的炎症

同样,我们也调查了在伤口IL-10-ADMSC对细胞外基质的影响。治疗后7天内以不同的方式,我们发现胶原蛋白I / III的表达蛋白在伤口使用免疫化学(图7(一))和免疫印迹(数字7 (b)和7 (c)),结果表明,胶原蛋白I / III的表达蛋白在伤口ADMSC组和IL-10-ADMSC组都显著低于对照组。重要的是,胶原蛋白I / III蛋白的表达在伤口IL-10-ADMSC组显著低于ADMSC组,表明ADMSC阻止了细胞外基质在伤口的兔耳模型,及其抑制il - 10修改后效果更好。

此外,先前的研究已经表明,il - 10是一个多向调节细胞因子,如免疫抑制和炎症抑制(27,28]。据报道,炎症和免疫反应中扮演重要的角色疤痕的愈合的伤口,伤口愈合中过度的炎症反应和抑制可能帮助预防肥厚性疤痕的形成20.,21]。因此,我们假设IL-10-ADMSC也可以发挥抑制炎症的作用,il - 10。为了验证这个假设,我们发现炎性细胞因子的表达在伤口,发现MIP(图的表达8(一个)),MIP-1β(图8 (b)),il - 1β(图8 (c)),il - 6(图8 (d))在伤口ADMSC组和IL-10-ADMSC组都显著低于对照组。重要的是,MIP-1 MIP的表达β,il - 1β,il - 6在伤口IL-10-ADMSC组明显低于ADMSC组,这表明ADMSC防止伤口发炎的兔耳模型,及其抑制il - 10修改后效果更好。此外,免疫细胞浸润,如T细胞、白细胞、巨噬细胞、炎症的初始阶段,我们发现CD45和CD3阳性细胞在伤口ADMSC组和IL-10-ADMSC组都显著低于对照组,和IL-10-ADMSC是最(数据8 (e)和8 (f))。总之,这些结果表明IL-10-ADMSC抑制伤口的炎症。

3.6。IL-10-Modified ADMSC抑制TGF -β/ Smads和NF -κB通路在伤口

探索分子机制,我们发现一些信号通路的表达,比如TGF -β/ Smads通路与细胞增殖和迁移密切相关,在成纤维细胞和细胞外基质合成29日,30.),和NF -κB通路密切相关的炎症(31日,32]。结果表明(图9TGF -)表达式β1,p-Smad 2 / Smad 2, Smad 7日》κBα/我κBα在伤口,p-p65 / p65 ADMSC组和IL-10-ADMSC组都显著低于对照组。重要的是,MIP-1 MIP的表达β,il - 1β,il - 6在伤口IL-10-ADMSC组显著低于ADMSC组。

4所示。讨论

肥厚性疤痕是一种病理组织结构,比周围的皮肤,红的颜色,质地硬,在人体的外部皮肤的完整性遭到破坏,并伴随有不舒服症状如挛缩、瘙痒,疼痛,不仅影响外观,而且病人[带来了巨大的痛苦3,4]。在伤口表面过度增生的成纤维细胞和细胞外基质过度沉积肥厚性疤痕形成的主要原因,也是主要特点肥厚性疤痕的5,6]。在这项研究中,我们发现ADMSC可以抑制增殖,迁移,hsf体外和细胞外基质的合成和抑制细胞外基质的合成在伤口体内。重要的是,IL-10-ADMSC比ADMSC更好的抑制作用。相比之下,我们发现IL-10-ADMSC可以产生和分泌il - 10比ADMSC;这可能是为什么比ADMSC IL-10-ADMSC具有更好的抑制作用。

il - 10首次发现由小鼠CD4 + Th2细胞合成和分泌,抑制干扰素的合成——的功能γth1 t细胞(33]。随着研究的深入,il - 10已被确定为一个候选人疤痕改善治疗临床前研究的基础上,由于il - 10的纤维化和炎症调节功能被认为是相关的疤痕形成(34]。il - 10发现调节人类皮肤成纤维细胞的生物学特性,如il - 10抑制增殖和细胞外基质的重塑培养的人皮肤成纤维细胞(35,36]。及其分子机制可能与调节转化生长因子的表达il - 10 -β和单核细胞化学引诱物蛋白1 (37),il - 10也调节下游信号通路的传导(STAT3-AKT-mTOR通路)通过与受体的相互作用,从而调节肥厚性瘢痕成纤维细胞的生物学特性38]。此外,CD206分子人类真皮纤维细胞增殖密切相关,迁移,细胞凋亡,细胞周期,细胞外基质合成,被发现il - 10的下游基因,由il - 10 (39]。在一起,这些先前的研究表明il - 10是潜在的药物预防肥厚性疤痕形成通过调节成纤维细胞的增殖和迁移,细胞外基质的合成。我们研究IL-10-ADMSC也可以发挥监管作用的il - 10对成纤维细胞合成和分泌il - 10。

疤痕形成的炎症是非常重要的。组织的完整性遭到破坏后,身体会接受一系列的复杂的病理生理过程来促进组织的修复完整。这个过程主要包括炎症反应期、肉芽增生期,和矩阵改造期间,和各种类型的细胞,细胞因子和细胞外基质组件参与调节伤口修复的不同阶段(40]。肥厚性疤痕形成过度伤口修复和密切相关的联合效应的结果增强局部炎症、细胞因子分泌异常,纤维母细胞异常增殖及凋亡的探讨,和过度沉积的细胞外基质(41),和炎症中起着主要的作用42]。在疤痕形成的过程中,炎症因子促进免疫细胞的活化,诱导免疫细胞迁移到伤口,合成和分泌细胞因子,细胞因子进一步加剧伤口的炎症反应。这样,炎症和免疫反应之间的交互促进疤痕形成的发展(42]。因此,抑制过度炎症伤口可以帮助抑制疤痕的形成。

在这项研究中,我们发现IL-10-ADMSC加速伤口愈合时间,减少疤痕面积和杰出的高度。此外,我们还发现,IL-10-ADMSC / ADMSC减少促炎因子的表达和伤口炎症细胞的浸润,和IL-10-ADMSC具有更好的治疗效果。这表明IL-10-ADMSC预防肥厚性疤痕的形成,可能与IL-10-ADMSC ADMSC的联合作用,il - 10。炎症的抑制ADMSC已被广泛证实[43,44]。同样,il - 10也被发现有抑制炎症和免疫抑制效应(33]。il - 10有能力防止抗原T细胞的增殖,抑制抗原递呈细胞的能力,抑制合成和炎性细胞因子和炎症介质的表达33]。此外,基兰等。45]发现il - 10可以促进伤口愈合,减少瘢痕形成通过抑制炎症反应通过比较皮肤软组织缺损的il - 10基因敲除小鼠和野生型小鼠。和王等。46)发现,il - 10可能防止疤痕形成通过抑制il - 6的合成,引发,TGF -β。炎症的抑制il - 10的主要原因是用于防止疤痕形成,但其半衰期短、定位不明确导致穷人的有效性il - 10在预防和治疗疤痕形成45,46]。根据我们的实验结果在这项研究中,局部注射IL-10-ADMSC能保持高水平的il - 10 3 - 5天在伤口,解决了这个问题的il - 10在体内的半衰期短,IL-10-ADMSC在伤口炎症的抑制作用和预防肥厚性疤痕形成也证明了这是可行的。

探索分子机制,我们发现一些信号通路的表达,比如TGF -β/ Smads通路与细胞增殖和迁移密切相关,并在成纤维细胞合成细胞外基质(29日,30.),和NF -κB通路密切相关的炎症(31日,32]。幸运的是,我们发现IL-10-ADMSC抑制TGF -β/ Smads和NF -κB通路在伤口。

5。结论

总之,我们的数据表明,IL-10-ADMSC证明预防肥厚性疤痕形成的能力通过抑制增殖和迁移的细胞外基质的合成hsf伤口愈合期间,通过抑制炎症。然而,由于实验条件的限制,更多的纤维化病理检测尚未开展。尽管如此,我们的研究也表明,IL-10-modified ADMSCs有可能防止疤痕。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

补充材料

图S1:他在7天的染色结果伤口皮肤治疗。(补充材料)