文摘
背景。过敏性鼻炎(AR)是一种高度异质性疾病,并有浓度过敏原特异性免疫疗法(AIT)是一种有效的治疗方法。本研究旨在评估循环mas-related G protein-coupled receptor-X2 (MRGPRX2)和矩阵metalloproteinase-12 (MMP-12)水平在评估疾病严重程度和预测缝AR患者的效果。方法。我们招收了110名moderate-severe坚持AR患者(AR组)和40名健康对照组(HC组)。MRGPRX2的循环水平MMP-12测定,及其对疾病严重程度进行评估。所有AR患者被分配接受舌下免疫治疗(狭缝),和疗效评估,收集血清样本在治疗后1年和3年。血清MRGPRX2和MMP-12之间的相关性及临床疗效评估。结果。MRGPRX2的血清浓度和MMP-12 AR组明显高于HC组和MMP-12水平升高与血管和评分,和血清MRGPRX2水平与血管有关。最后,100年和80年完成1年和3年随访,患者被分为有效和无效的组。血清MRGPRX2有效组和MMP-12水平低于无效组。虽然血清MRGPRX2和MMP-12水平没有显著变化1年狭缝后,血清MMP-12水平下降3年post-SLIT比基线和1年post-SLIT水平。接受者操作特征(ROC)表明,血清MMP-12的潜在生物标志物预测缝的功效。结论。血清MRGPRX2和MMP-12似乎是有前途的生物指标反映AR患者的疾病严重程度。此外,循环MMP-12可能作为一个可靠的预测缝的临床反应。
1。介绍
变应性鼻炎(AR)是一种慢性炎性疾病引起的鼻粘膜免疫球蛋白E (IgE)介导的超敏反应后暴露吸入过敏原(1,2]。最近,基于“增大化现实”技术的患病率持续增加,带来了沉重的社会经济和健康的负担3,4]。之前出版物表明,基于“增大化现实”技术是一个异构与广泛的临床疾病严重程度,和有限的指标或生物标记已经提出了监测疾病进展和疾病严重程度5]。评估疾病严重程度利用生物标志物有助于理解底层机制的基于“增大化现实”技术和监测治疗效果6,7]。因此,探索一个准确和可靠的生物标志物来评估基于“增大化现实”技术的严重程度是至关重要的。目前,药物和有浓度过敏原特异性免疫疗法(AIT)是基于“增大化现实”技术的主流疗法,和河中的小岛是唯一的治疗可以调节的自然过程(8]。河中的小岛可以由皮下免疫疗法(SCIT)或舌下免疫治疗(狭缝),但大多数AR患者更倾向于选择缝隙由于其功效,安全,方便(9]。然而,并不是所有的AR患者受益于狭缝,其有效性率一直波动在50.0%和80.0%之间疗效的不一致的定义(10]。因此,临床上重要的探索客观指标或策略来早期预测前SCIT发作的疗效。
Mas-related G protein-coupled receptor-X2 (MRGPRX2),肥大细胞的生物标志物表达,是一种内源性受体与IgE-independent激活肥大细胞有关。是证明MRGPRX2表现出特异性诱导肥大细胞脱粒和调节炎症反应参与了过敏和炎症性疾病(11,12]。此外,最近的研究发现,哮喘患者血清MRGPRX2水平显著升高,这可以作为生物标志物预测治疗结果(13]。矩阵metalloproteinase-12 (MMP-12) 54-kDa preproenzyme, M2巨噬细胞能诱导,它有助于促进Th2细胞的增殖和分泌il - 4和IL-13,这是参与免疫反应(14,15]。之前的出版物表明MMP-12是一个关键的监管机构一些慢性炎性疾病的病理生理学,包括哮喘(16],关节炎[17),和多发性硬化症18]。Lygeros et al。19]提出MMP-12 mRNA和蛋白水平的提高组织样本的慢性鼻窦炎鼻息肉患者与健康对照组比较。这些证据表明MRGPRX2 MMP-12可能影响T细胞增殖和分化,参与免疫反应的调节。因此,我们假设MRGPRX2 MMP-12可能扮演重要的角色在AR的病理机制和治疗效果的河中的小岛。在这项研究中,我们的目标是评估血清MRGPRX2的潜力和MMP-12作为新型生物标志物来评估疾病严重程度和预测缝在AR患者的临床疗效。
2。方法
2.1。研究设计和参与者
一百一十moderate-severe屋尘螨(HDM)全身的基于“增大化现实”技术的成年患者访问我们部门2018年10月和2019年1月之间连续招募了在这个研究。四十的年龄和健康志愿者sex-matched没有任何过敏疾病被登记为健康对照组(HC)。所有AR患者遇到了过敏性鼻炎所提供的诊断标准及其对哮喘的影响(咏叹调)指导方针积极皮肤测试的结果和/或serum-specific IgE [20.]。这些基于“增大化现实”技术的患者被排除在外的原因如下:伴随着其他免疫炎性疾病或严重的肾,肝,或心脏功能障碍;年龄< 18岁;怀孕或可能怀孕;和免疫疗法的历史或全身性类固醇或antiallergy毒品消费前4周内登记。高碳钢被排除在本研究之外,如果他们在免疫疗法和全身性类固醇或antiallergy治疗严重的心脏和肾脏功能障碍。临床和人口数据收集从所有参与者,包括年龄、性别、身体质量指数(BMI)、视觉模拟量表(血管),全部鼻症状评分(评分)。目前的研究是医学伦理委员会批准的附属长沙中心医院,衡阳南华大学的医学院。所有参与者提供知情同意在他们入学。
2.2。血清样本收集和MRGPRX2 MMP-12测量
收集血液样本从每个主题使用5毫升真空采血试管。在AR患者接受狭缝,标本收集基线,分别缝后1年和3年。所有收获样本凝固在室温下60分钟分离血液细胞,然后在3500转离心20分钟在4°C,和血清收集和储存在-80°C进行后续测试。血清MRGPRX2和MMP-12水平检测到酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒商业(Multisciences、杭州、中国)根据制造商的指示,和运营商失明患者的详细数据。
2.3。免疫疗法
所有包括AR患者自愿接受HDM缝3年获得之前推荐的长期疗效[21]。提供的标准化Der f滴Wolwo医药生物科技公司(浙江、中国)是由患者自行遵循制造商的建议的时间表。第一个政府是医生的指导和监督下进行的。在治疗计划,合规教育和专业指导进行减少退学率,提高有效。所有不良反应记录整个治疗期间,医生。
2.4。临床疗效评价
所有患者在日常活动和睡眠障碍得分基于症状的严重程度和频率(22]。药物得分计算如前所述[6]。合并后的症状药物得分(SMS)被定义为症状评分和药物得分之和(23]。效果评价进行了如前所述,“有效”的定义当病人获得至少减少30%的短信比基线水平;否则,被认为“无效的”。
2.5。统计分析
正态分布数据表示为 (SD)和非正态的分布式数据被表示为中位数和四分位范围。单向方差分析(方差分析)或Mann-Whitney测试是用于三组之间比较,和Student-Newman-Keuls (SNK)方法被用于后续的比较来确定意义的来源;学生 - - - - - -测试或克鲁斯卡尔-沃利斯测试是用于比较两组。分类数据被表示为数字(%)和比较采用卡方检验。斯皮尔曼的测试进行调查的相关性。多元逻辑回归分析是用来确定临床疗效的狭缝的独立预测指标。接受者操作特征(ROC)曲线,创建和曲线下的面积(AUC)、敏感性,特异性,关键值进行评估。在所有的测试中, 被认为是具有统计学意义。所有统计分析和ROC分析SPSS统计为Windows(25.0版本,IBM公司,阿蒙克,纽约,美国),和其他图形由GraphPad棱镜(8.3.0版本,软件公司拉霍亚,CA,美国)。
3所示。结果
3.1。参与者的基本人口统计数据和特点
所有参与者的人口和临床数据如表所示1。血管和评分分数AR组比HC组高,但无统计学差异被发现在性别、年龄、体重指数、吸烟、饮酒之间HC组和AR组( )。
3.2。血清MRGPRX2和MMP-12高架AR患者与疾病严重程度有关
提出了图1、血清MRGPRX2 MMP-12 AR组水平显著高于HC组。斯皮尔曼相关分析结果表明,血清MMP-12水平呈正相关评分和血管,和血清MRGPRX2水平与脉管呈正相关(图2)。详细的参数显示在表中2。
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3.3。血清MMP-12水平与临床疗效相关的狭缝
后1年随访中,100名患者提供完整的数据,和55例患者分为有效集团和45例包括无效的集团和人口统计学和临床数据如表所示3。血清MRGPRX2有效组和MMP-12水平低于无效组,但他们并没有统计上的水平改变基线和1年post-SLIT(图之间的关系3)。ROC曲线在图4表明血清MMP-12表现出潜在的能力预测一狭缝的功效,和详细的数据如表所示S1。后3年随访中,80名患者提供了完整的数据,和60例分为有效组,20例包括无效的集团,人口和临床数据展示在表4。提出了图5、血清MRGPRX2和MMP-12水平下降的有效组比无效组,和MMP-12水平显著降低比1年3年post-SLIT post-SLIT和基线水平。尽管血清MRGPRX2 post-SLIT水平也降低了3年,无统计差异观察3年和1年post-SLIT之间。ROC曲线在图6证明血清MMP-12是一个有前途的生物标志物在预测三狭缝的功效,但MRGPRX2显示可怜的预测能力。详细的数据显示在表中S2。
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4所示。讨论
在最近的研究中,结果表明,血清MRGPRX2和MMP-12增加AR组和评分和脉管分数呈正相关,分别。此外,我们表明,血清MRGPRX2和MMP-12水平狭缝的功效,和MRGPRX2 MMP-12水平显著下降的有效组比无效组,和狭缝可以显著减少他们经过三年的治疗浓度。ROC曲线呈现MMP-12表现出良好的准确性预测缝AR患者的临床疗效。综上所述,这些观察结果表明,血清MRGPRX2和MMP-12可能有用的评估疾病严重程度,和MMP-12可能作为一种可靠的生物标志物预测缝AR患者的临床疗效。
肥大细胞是多功能免疫细胞,以他们的角色在过敏和炎症性疾病,包括过敏反应、过敏性皮肤炎,哮喘11,23]。此外,它是证明肥大细胞脱粒是基于“增大化现实”技术的病理过程的关键部分(24,25]。MRGPRX2主要表达在肥大细胞被广泛的阳离子配体激活,包括P物质和hemokinin-1,随后参与变应性疾病的发展(26,27]。此外,一项研究表明,MRGPRX2-mediated激活肥大细胞可能导致哮喘的发病机制28]。在这项研究中,我们的研究结果表明,AR患者的血清MRGPRX2水平增强水平与血管和评分分数呈正相关。因此,我们推测,增强肥大细胞脱颗粒,释放组胺的高水平MRGPRX2导致加重AR患者的过敏症状。同样,MMP12,促炎因子主要由巨噬细胞,证明是参与变应性疾病的发展(14,29日]。之前的出版物发现MMP的表达异常与各种慢性炎症性疾病,包括哮喘(30.),慢性鼻窦炎和鼻息肉(31日),炎症性肠病(32]。最近的研究发现MMP12主要由M2-type巨噬细胞分泌,和增强MMP-12水平证明促进th2型炎症反应和过敏性气道炎症加剧气道炎性疾病(14,33]。有趣的是,目前的研究发现,MMP12水平增加AR患者并与血管和评分分数呈正相关,这是按照之前的结论。鉴于此,我们有理由相信MRGPRX2 MMP12参与基于“增大化现实”技术的发展和与疾病严重程度相关,但潜在的机制值得进一步调查。
越来越多的证据证明,狭缝是一个有效且安全的治疗方案,已被广泛应用于moderate-severe AR患者(34,35]。虽然在AR患者缝隙明显缓解过敏症状,长期随访结果显示,有相当比例的患者并没有受益于这种疗法(10,36]。因此,探索客观生物标志物预测SCIT尤其重要的功效。在目前的研究中,我们首先发现有效组血清MMP-12水平低于无效组和MMP-12水平随着治疗时间的增加逐渐减少了。此外,ROC曲线分析表明,血清MMP-12是可信和准确的预测生物标志物缝功效post-SLIT post-SLIT 1年和3年。众所周知,树突状细胞作为主要抗原递呈细胞行为的关键角色基于“增大化现实”技术通过促进Th2细胞分化和调控Th1 / Th2平衡,炎症和树突细胞宽容被认为是一个关键的指标反映了河中的小岛的成功(37- - - - - -39]。MMP12表达在树突细胞和中扮演着重要的角色和免疫反应的激活40,41]。在狭缝时间表,反复刺激特定抗原可能影响树突细胞的功能并阻止免疫反应的起始,然后减少了循环的数量有浓度过敏原特异性Th2细胞(23,38]。结合我们的研究结果,我们可以假设MMP-12可能潜在生物标志物反映树突细胞的活性和有助于缝AR患者的治疗效果,这表明血清MMP-12可以作为一个客观指标来预测缝的临床疗效。然而,基于“增大化现实”技术的患者其临床价值和潜在机制需要进一步探索。
目前的研究也有一些局限性。首先,样本容量相对较小,验证队列研究加强发现缺席。第二,所有参与者HDM-induced,包含在单一医疗中心,这可能限制泛化。有大量的样本进一步多中心研究需要支持和扩展我们当前的结果。
5。结论
我们表明,血清MMP-12 MRGPRX2水平升高在AR患者与疾病严重程度呈正相关。我们还发现血清MMP-12歧视患者表现出潜在的能力应对狭缝。这些结果表明,血清MMP-12是一个有用的和客观的生物标志物来评估基于“增大化现实”技术的严重程度和预测裂缝的临床疗效。
数据可用性
用于支持本研究的观测数据可从相应的作者。
伦理批准
本研究是依法进行的《赫尔辛基宣言》的建议。人类的附属长沙中心医院的伦理委员会,衡阳南华大学医学院批准了这项研究。
同意
所有参与者提供知情同意。
的利益冲突
作者声明,这项研究是在没有进行任何商业或财务关系可能被视为一个潜在的利益冲突。
作者的贡献
YZ写了初稿。MX, WG和XK收集样本和数据。RG和JW进行实验。DZ统计提供支持。MW和DS分析数据。QJ监督学习和回顾了草案。
确认
这项工作得到了湖南省自然科学基金(2021 jj30754和2020 jj5005),湖南省科技计划(2020 sk53301),长沙市自然科学基金(kq2007050),湖南省卫生委员会科学研究项目(202107010164),研究项目的长沙中心医院(YNKY202003)和ay眼科医院集团的科研基金(AF2001D13)。
补充材料
辅料表S1: ROC曲线的详细数据提出血清MMP-12和MRGPRX2预测1年狭缝的效果。表S2: ROC曲线的详细参数显示血清MMP-12和MRGPRX2预测3年狭缝的效果。(补充材料)