动态监测sTREM-1和其他生物标志物在急性胆管炎

文摘

背景。脓毒症是一种常见的急性胆管炎的并发症(AC),这是与高死亡率相关。我们的研究旨在探索的意义白细胞(WBC)、c反应蛋白(CRP),原降钙素(PCT)、可溶性触发受体表达在髓细胞1 (sTREM-1)和温度(T)单独或结合在早期识别和疗效监测AC有或没有脓毒症。方法。AC - 76控制连续65例病例登记。他们被分为三组:A组与脓毒症(AC), B组(AC没有败血症),C组(住院病人没有交流或其他感染)。白细胞的水平,CRP、PCT sTREM-1,动态温度测量。进行了研究和报告根据2015年标准报告指南。结果。CRP AUC确定最高交流从个人没有交流或其他感染(AUC 1.000,敏感性100.0%,特异性100.0%,阳性预测值100.0%,和阴性预测值100.0%)。在各种单一索引,PCT表现最佳(AUC 0.785,敏感性75.8%,特异性72.2%,阳性预测值68.7%,和阴性预测值78.8%)与AC区分脓毒症,虽然不同的组合索引没有表现的更好。从第一天到第五天的住院治疗,sTREM-1在A组的水平最高,其次是B和C组( );8天,A和B组拒绝sTREM-1水平恢复正常。然而,其他指数水平三组在10天仍有显著差异。两组A和B, sTREM-1水平下降速度在第一天和第二天( )。结论。CRP是最好的生物标志物显示感染。PCT单独是充分足够的诊断败血症AC. sTREM-1是最好的生物标志物监测病人的反应抗菌治疗和胆道引流。

1。介绍

胆道感染(发言),包括胆管炎、胆囊炎、胆道狭窄时就会发生由于各种良性原因(通常是胆管结石)和恶性原因(1,2]。急性胆管炎(AC),尤其是急性化脓性胆管炎(ASC),很容易发展到临床严重的状况,如败血症。革兰氏阴性菌是最常见的生物在急性胆管炎病例,约占76.6%3上述的情况。当显著增殖的细菌胆管胆管压力的增加,微生物或类毒素刷新进入体循环,引发系统性炎症反应(2,4]。脓毒症引起的急性胆管炎被描述为一个兼容的临床综合症和血培养分离符合提升胆管炎(5]。当交流与脓毒症出现,除非适当的胆道引流及抗生素迅速,系统性的条件会突然恶化,这常常导致死亡率(4]。30天死亡率交流引起的脓毒症患者被报道∼10%6,7]。在东京指南,经验抗菌剂的选择依赖于胆管炎的严重程度(8]。因此,评估的严重性AC和诊断败血症引起的交流尽可能早地将指导从业人员立即采取适当的治疗。血培养被认为是一个重要的方法来诊断败血症,但它仍然是负在超过一半的情况下(5,9]。胆汁文化可能有更高的积极性率(10),但文化必须使用后内镜逆行胰胆管造影(ERCP),这是一种侵入性操作。有不可避免的负面率胆汁文化、胆汁和积极的文化可能不显示AC (9- - - - - -11]。更重要的是,使用血液或胆汁文化花费太多的时间。

白细胞(WBC)、c反应蛋白(CRP)和温度(T)在系统性炎症是必要的参数。TG18(东京指南2018)也包含在AC的诊断标准。近年来,PCT,可以提前发现CRP,已经逐渐成为一个专门的血液标记的细菌,寄生虫和真菌感染(4]。越来越多的证据表明,PCT的血液水平可以预测系统的存在和严重性传染病(12,13]。然而,白细胞的水平,PCT、CRP和T升高许多非传染性的疾病,如自身免疫性和风湿性疾病、大手术、严重烧伤(14]。仍然存在假阳性和假阴性诊断的AC和败血症的白细胞,c反应蛋白和PCT测试(7]。在最近的研究中,有不同意见的特异性和敏感性参数上面提到的AC患者和患者脓毒症引起的交流:Beliaev等人发现淋巴细胞计数,neutrophil-to-lymphocyte比率(NLR)和c反应蛋白有识别力的最高权力诊断患者交流,而白细胞和白蛋白有最穷15];秦等人发现异常白细胞ASC和CRP是两个独立的风险,和一个高水平的c反应蛋白的存在显示严重脓毒症(1]。因此,应该进行更多的研究来找出如何快捷、准确地诊断AC和败血症。

髓细胞触发受体表达(托马斯)1是一个天生的炎症跨膜受体主要表达在单核细胞/巨噬细胞和中性粒细胞(16]。绑定后适配器DNAX激活蛋白质——(DAP) 12日TREM-1放大信号的toll样受体(通常)TLR4或TLR2可识别组件的各种微生物,包括细菌和真菌(17]。TREM-1会增加感染后的表达(18),和一些膜TREM-1流到体循环通过金属蛋白酶的激活(19]。sTREM-1(可溶性TREM-1)是一种潜在的标记诊断传染病,以及评估疾病严重程度和临床疗效20.,21]。然而,有限的影响研究sTREM-1水平在交流的早期诊断和严重程度的判断。

仍然有缺乏准确的指标预测和及时诊断败血症。因此,我们开展前瞻性研究监控一些生物标记(WBC、CRP、PCT、sTREM-1)和体温(T)在交流或没有脓毒症患者和控制个体。因此,我们会找出这些生物标记的重要性和温度单独或组合在一起交流和脓毒症早期诊断,以及治疗效果的预测。我们将估计的价值sTREM-1和其他指标单独或结合在早期识别和疗效监测AC有或没有脓毒症。

2。方法

2.1。病人的人口

在这个前瞻性研究中,我们选取连续病人急性胆管炎(AC)附属杭州第一人民医院、浙江大学医学院,2018年12月到2019年6月。病人符合纳入成人(≥18年)和交流,根据东京指南2018急性胆管炎的诊断标准2]。我们排除病人接受抗生素治疗时,如果怀孕了,如果他们在重症监护室或血液学的病房里,或者如果后续不可行。脓毒症定义为威胁生命的器官功能障碍引起的宿主对感染特异表达(22]。脓毒症患者有微生物(culture-proven)或临床诊断败血症。微生物从积极的血液和胆汁文化应该是相同的。危重病医学的社会提出的标准和欧洲社会的重症监护医学(22)被用来诊断败血症临床。基线顺序器官衰竭评估(沙发)分数可以假定为零的病人不知道先前存在的器官功能障碍(22]。一个 点被认为是脓毒症。2临床医生所有情况进行评估,对诊断协议实现在所有情况下。所有患者诊断AC给出经验性抗生素疗法根据2018年东京指南(8在入院]。微生物文化是抗生素治疗之前收集的血液。在48 h,所有患者胆汁引流胆汁微生物文化是ERCP后收集。一旦微生物敏感性试验,选择了适当的抗生素。研究过程是杭州第一人民医院伦理委员会批准(批准号2018-020-01)放弃了知情同意的必要性,因为生物标志物测定完成后残余血常规随访。建议,患者或家人口头通知的样本收集和本研究的目的。

包含的所有病例分为两组:A组与脓毒症(AC)和B组(AC没有脓毒症)。患者脓毒症引起的因素无关的交流被排除在外。我们招收了高血压和糖尿病住院患者没有交流或其他感染对照组(C组)。

临床、实验室和影像学数据记录,包括(1)年龄和性别,(2)过去的病史和临床表现,(3)使用抗生素,(4)胆汁细菌培养和血液,和(5)天的体温1,2,3,5,8,10的住院治疗。在1、2、3、5、8和10的住院治疗,静脉血液与EDTA实际上被卷入两管。立即一管检测白细胞和c反应蛋白;另一个是离心机等离子体和储存在-80°C到分析。

2.2。实验室测试

2.2.1。白细胞测定

两毫升的外周血样本与EDTA实际上是在每周的特定天里获得上面提到的。全血细胞计数和白细胞计数(WBC)是衡量迈瑞bc - 6900(迈瑞、深圳、中国)。每个样品测量3次,平均价值。

2.2.2。c反应蛋白测定

两毫升的外周血样本与EDTA实际上是在每周的特定天里获得上面提到的。使用c反应蛋白c反应蛋白水平测定工具包(迈瑞、深圳、中国)和被bc - 5390(迈瑞、深圳、中国)。每个样品测量3次,平均价值。CRP测量参考范围为0.2 -320 mg / L。

2.2.3。PCT测定

每个等离子体冻结之前再到室温。PCT测定使用原降钙素的水平试验装备和衡量UPT-3A分析仪(Hotgen生物技术,北京)根据制造商的指示。每个样品测量3次,平均价值。参考范围的测定是0.02 -50 ng / mL。

2.2.4。sTREM-1化验

每个等离子体冷冻前再到室温。测量了等离子体sTREM-1商业酶联免疫吸附测定(人类触发受体表达髓细胞1 (TREM-1)酶联免疫试剂盒;CUSABIO,武汉,中国)根据制造商的指示。每个样品测量3次,平均价值。参考范围的测定是31.25 -2000 pg / mL。

2.3。统计分析

值作为中位数(四分位范围)。使用非参数检验组间比较。接受者操作特征(ROC)曲线建立了评价区分上述三组的诊断价值。曲线下的面积(auc)与相应的95%可信区间(CI)和最优截止值的敏感性和特异性进行了计算。的诊断价值不同的索引和索引组合比较两个示例测试。 ( )被认为是具有统计学意义。斯皮尔曼等级相关分析被用来探索sTREM-1和白细胞在三组之间的相关性。使用SPSS统计数据和图表都准备为Windows(社会科学统计软件包,IBM SPSS统计20)。

研究方案设计根据标准的建议报告的诊断准确性的研究(标准2015)[23]。

3所示。结果

3.1。研究对象的特性

共有87名患者交流在本研究首次资格评估。10(11.5%)的患者被排除在外,不完整的数据,5例(5.7%)患者转移到加护病房由于不断恶化的状况,和7例(8.0%)患者为开发其它传染病(图被排除在外1)。在这项研究中,分析了65名符合条件的患者,分为两组:A组(AC与脓毒症, )和B组(AC没有脓毒症, )。没有交流或其他传染病登记的76名住院患者作为对照组(C组)。详细的人口数据和并发症研究的人口是总结表1。

3.2。比较三组血液生物标志物水平和温度

实验室的白细胞值、CRP、PCT, T, sTREM-1三组每天都列在表中2。从第一天到第五天的住院治疗,sTREM-1在A组的水平最高,其次是B组和C组( )(图2(一个))。在第八天,sTREM-1水平组A和B拒绝恢复正常。更重要的是,在A组和B组,有显著区别的水平sTREM-1第一天和第二天( )。与C组相比,A组和B组有更高水平的白细胞从第一天到第五天;第八天,A组的白细胞水平仍明显不同于C组( )。然而,WBC水平A组和B组之间没有显著差异对于任何天(图2 (b))。c反应蛋白的水平在所有天三组有显著性差异( ),除了c反应蛋白水平,A组与B组没有区别在第一天(图2 (c))。至于PCT水平,A组水平要明显高于B组和C组天( );B组的PCT水平高于C组从第一天到第五天( )(图2 (d))。第一天和第三天,患者组的温度高于B组和C组( );第二天,病人在A组和B组的温度高于C组,而A组和B组没有区别(图2 (e))。所有的统计信息如图2。

3.3。血液生物标志物和温度诊断AC第一天和败血症

提高诊断的准确性和可靠性,是治疗前最好使用生物标记的值。因此,我们进行ROC曲线分析来评估这些血液生物标志物的潜在价值水平和温度对AC和脓毒症诊断的第一天。诊断交流没有败血症,CRP显示最高的AUC (测试中, ),其次是PCT、sTREM-1, WBC(图3)。截断值为9.45 mg / L,敏感性,特异性,阳性预测值(PPV)以及阴性预测值(NPV)的c反应蛋白(表都是100.0%3)。CRP和PCT AC患者脓毒症诊断中发挥了重要作用的健康控制(图4和表4)。与脓毒症诊断AC, PCT的力量最高(0.758 AUC,敏感性75.9%,特异性72.2%,阳性预测值68.7%,阴性预测值78.8%,阳性似然比2.73,和消极的似然比0.33),T和sTREM-1紧随其后。此外,我们分析了生物标志物的不同组合来获得最佳的性能。我们发现,不同的组合索引没有提高诊断能力(测试中, ),如表所示5。此外,白细胞和CRP单独或组合在一起显示最低的诊断能力。

3.4。白细胞之间的相关性和sTREM-1三组

sTREM-1以来所表达的主要是单核细胞/巨噬细胞和中性粒细胞,我们进一步探讨白细胞之间的相关性和sTREM-1每组中。在C组之间没有相关性的白细胞和sTREM-1 ( )。在A组中,相关系数( )白细胞和sTREM-1从第一天到第8天在0.4和0.8之间( ),这些彼此相关系数没有显著差异( )。在B组,白细胞和sTREM-1从第一天到第三天在0.4和0.7之间( ),这些彼此相关系数没有显著差异( )。所有的统计信息如表所示6。

4所示。讨论

延误诊断和治疗急性胆管炎(AC)将加剧感染和脓毒症的发展,从而导致器官衰竭和威胁着许多人的生命。然而,过度使用抗生素会导致细菌耐药性的出现。因此,准确和及时的交流有或没有脓毒症的识别是至关重要的优化管理患者,进一步限制发病率和改善患者的预后。

WBC、CRP和PCT广泛用作生物标记物在几乎所有的研究感染,但是这些生物标志物还有假阳性和阴性在感染和脓毒症的诊断7]。TREM-1是髓细胞的细胞表面受体表达。当暴露于细菌和真菌,TREM-1的表达和释放sTREM-1将增加18]。最近,越来越多的研究调查了等离子体在区分sTREM-1传染病的作用[17,24,25]。

据报道,急性化脓性胆管炎(ASC),急性胆管炎的严重形式,与异常相关的白细胞和高c反应蛋白水平1]。这项研究的结果表明,c反应蛋白是最好的生物标志物胆道炎症或感染(AUC 1.000,敏感性100.0%,特异性为100.0%,阳性预测值100.0%,阴性预测值100.0%),其次是PCT、sTREM-1和白细胞,而T是最不准确的指数(AUC 0.574,敏感性41.7%,特异性为86.8%,阳性预测值60.0%,阴性预测值75.9%)。Beliaev等人有相同的观点,在常见的炎症标记物诊断AC,淋巴细胞计数,neutrophil-to-lymphocyte比率(NLR)和CRP有识别力的最高权力15]。通常,肝脏合成c反应蛋白开始4 ~ 6小时,到达峰值在36-50 h后炎症发作(14]。我们认为CRP的伟大价值交流有或没有脓毒症鉴别诊断的研究中可能这样一个事实有关,大多数患者不及时就医,延迟2 - 3天当他们有临床症状如发烧。因此,CRP的水平可能会在高峰阶段的第一天住院治疗。然而,PCT是一个敏感的和特定的生物标志物的系统性细菌或真菌感染13),不得显著增加局部细菌感染如AC。老年患者或严重感染患者偶尔有正常体温和白细胞低26]。因此,这些索引显示不同的值在诊断的交流学习。

脓毒症的诊断由于交流,我们的数据表明,PCT独自似乎是最好的指数(0.758 AUC,敏感性75.9%,特异性72.2%,阳性预测值68.7%,和阴性预测值78.8%)。sTREM-1 (AUC 0.737,敏感性58.6%,特异性为86.1%,阳性预测值77.3%,阴性预测值72.1%)与PCT几乎类似的脓毒症诊断价值。相比之下,白细胞和CRP单独或组合在一起不表现出任何优势在脓毒症的诊断,AUC的0.5和0.6之间。Loonen等人的研究表明,PCT显著不同患者的阳性血培养和消极的血培养,而两组CRP水平保持类似的(27]。一些最近的研究还发现,PCT浓度表示关联与交流严重程度和初始医院血培养积极性,也可以用作一个指标恶化患者交流(4,28,29日]。Kargaltseva等人发现,当革兰氏阴性菌血症发生,PCT水平的增加,而PCT水平保持正常的coagulase-negative葡萄球菌菌血症(30.]。从革兰氏阴性细菌,尤其是大肠杆菌最常见的感染生物交流,PCT水平是一个有用的标记。即便如此,因为脓毒症由于交流也将由革兰氏阳性微生物引起,sTREM-1应该考虑,将调节通过toll样受体配体如lipoteichoic酸(LTA)革兰氏阳性细菌和脂多糖(LPS)的革兰氏阴性细菌(31日]。在廖等的研究中,TREM-1的敏感性在脓毒症患者外周血单核细胞AC高于c反应蛋白和肿瘤坏死因子-α,类似于我们的结论,但他们没有测试PCT和白细胞进行比较32]。尽管小脓毒症的诊断价值的第一天,我们发现高c反应蛋白水平的延续与脓毒症的存在:A组的CRP水平与脓毒症(AC)高于其他组从第二天到第十天( )。我们假设c反应蛋白合成的肝脏可能存在,因为较长的治疗时间比局部感染的败血症。此外,c反应蛋白诱导的时间进程和间隙比PCT(慢33]。所以,高c反应蛋白水平保持更长时间在这项研究脓毒症患者。

给予抗生素治疗和胆汁引流后,sTREM-1下降的水平比其他索引:sTREM-1和白细胞下降到正常水平分别在8天,第十天,PCT和CRP没有恢复正常,直到最后一天;之间有显著差异的水平sTREM-1第一天和第二天( )。换句话说,sTREM-1的浓度可以作为治疗效果的监测指标。然而,李等人,Prkno等人发现,抗生素的策略指导下PCT缩短抗生素治疗的持续时间(29日,34];有快速反应的PCT和白细胞治疗Magrini等的研究(35];Rhee迅速发现PCT水平下降炎症的决议(36]。我们怀疑当操作内镜逆行胰胆管造影时,它将创建一个压力,推动向上胆汁,使内的细菌或木糖醇回流血液流动,导致不太明显的白细胞下降,c反应蛋白和PCT。一些研究也报道,瞬态败血症报道在内镜逆行胰胆管造影(后3 ~ 27%的病人13,37]。针对这一点,有意见,预防性抗生素减少败血症和防止出现胆管炎及败血症患者内镜逆行胰胆管造影(38]。自AC患者在我们医院没有接受抗生素治疗时接受ERCP,白细胞水平,CRP, PCT保持高水平。瞬态败血症可能增加TREM-1的基因表达,但循环sTREM-1水平没有影响。一些研究也报道TREM-1表达水平之间的矛盾和主干一水平(39,40]。

在我们的研究中,我们发现,sTREM-1没有符合的白细胞在诊断败血症,观察疗效。在脓毒症,upregulation TREM-1的细菌脂多糖(LPS)放大炎症反应(32),导致诊断炎症的灵敏度提高。在C组(住院病人没有交流或其他感染),之间没有相关的白细胞和sTREM-1 ( )。这可能是由于几乎没有TREM-1基因表达和释放sTREM-1健康人。在A组和B组,白细胞和sTREM-1之间的关系并不是特别强,与相关系数( )0.4 ~ 0.8 ( )。我们推测,脱粒和氧化破裂后,中性粒细胞交流自由TREM-1人数可能会增加。因此,衡量sTREM-1可能增加在某种程度上,导致白细胞减少的相关性和sTREM-1。另一方面,Dimopoulou等人,Marioli等人发现,血清sTREM-1动力学不遵循TREM-1的表达的变化(19,40]。在急性胆管炎患者,它已经发现,在疾病的进展,TREM-1基因的转录减少(32]。因此,sTREM-1水平是由更复杂的机制。我们还发现白细胞的相关性和sTREM-1持久在A组比b组,它可能与炎症介质在脓毒症的持久存在。然后,代sTREM-1保持在一个相当高的水平。

本研究具有一定的局限性。首先,病人登记的数量是有限的。第二,A组患者都积极的血液和胆汁文化,和患者的B组只有积极的胆汁的血液。进一步的研究需要基于大样本调查包括患者阴性血培养和积极胆汁文化。第三,我们已经排除了AC患者转移到重症监护室(ICU)由于条件恶化,导致本研究的0.0%的死亡率。进一步的研究需要覆盖病人在ICU和探索死亡率之间的相关性和生物测量。第四,这是一个单中心研究。我们有必要采取前瞻性研究包括大量的病人从医院在不同的设置来验证这些生物标志物的预测AC有或没有脓毒症的诊断。第五,我们没有测试TREM-1的基因表达和相关炎症介质释放sTREM-1。所以,我们不能探索sTREM-1的合成和释放机制,以及它的动力学。

5。结论

我们建议c反应蛋白被认为是一个有用的诊断工具的炎症或感染,但不准确预测脓毒症。PCT仅用于交流与脓毒症诊断;与此同时,sTREM-1和温度应该考虑。sTREM-1监控病人的价值主要应对抗菌治疗和胆道引流。此外,白细胞之间的相关性和sTREM-1不是很强的在这个研究。由于我们的数据是十分有前途的但不够结实,更多的研究是必要的。

缩写

交流:	急性胆管炎
发言:	胆道感染
白细胞:	白血细胞
c反应蛋白:	c反应蛋白
PCT:	原降钙素
sTREM-1:	髓细胞1可溶性触发受体表达
师:	温度
内镜逆行胰胆管造影:	内镜逆行胰胆管造影
中华民国:	接受者操作特性
AUC:	曲线下的面积
置信区间:	置信区间
PPV:	阳性预测值
净现值:	消极的预测价值
LR (+):	阳性似然比
LR (-):	阴性似然比。

数据可用性

生物标记的数据用于支持本研究的发现可以从相应的作者。

伦理批准

本研究通过伦理审查委员会杭州第一人民医院,中国(批准号2018-020-01)。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

作者的贡献

共晶的概念化和项目管理;共晶,X.W., and J.J. prepared the methodology; J.J., X.W., and H.W. took part in the formal analysis; J.J., X.W., T.C., M.H., X.W., and D.Y. handled the investigation; J.J. and D.Y. participated in the writing (original draft); H.W. and D.Y. worked on the writing (review and editing); and X.W., H.W., and D.Y. acquired the funding. All authors have read and approved the final manuscript. Jiahui Jiang and Xiaolei Wang contributed equally to this work.

确认

这项工作得到了浙江省自然科学基金(批准号LY17H190001),中国国家自然科学基金(批准号81930111),健康与医学科技项目杭州市级卫生委员会(批准号2018 zd001),杭州市级科技项目(批准号20191203 b91),和健康和浙江省医药卫生科技项目委员会(批准号2020 ky206)。

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