我一^低CD11b^高直流调节免疫反应的实验性自身免疫性葡萄膜炎的眼睛

文摘

监管树突细胞(DC =_注册)已报告负监管机构的免疫反应。这些细胞广泛分布于肝脏,脾脏,肺。然而,直流的地位和作用_注册的眼睛和疾病仍不是很清楚。在此,我们发现我的数量^低CD11b^高DC增加在经济复苏阶段的眼睛和脾脏的实验性自身免疫性葡萄膜炎(淡),这是一种自身免疫性葡萄膜炎小鼠模型。这些细胞表达低水平的CD80、CD86和比成熟的DCs和CD54表达白介素10 (il - 10),吲哚胺2,3-dioxygenase (IDO)和转化生长因子β(TGF -β)。此外,这些直流_注册可以调节淡通过促进CD4的发展吗⁺CD25⁺Foxp3⁺调节性T细胞。增加的移行(IFN -γ房水的淡参与诱导_注册淡的缓解症状。此外,直流_注册被发现存在于正常小鼠的眼睛。房水,含有一定浓度的il - 10, TGF -β、前列腺素E2 (PGE2)、被罩和一氧化氮(NO),诱导的耐受性_注册在正常的眼睛。它可以得出结论_注册存在于眼睛,红肿的眼睛具有保护作用。这些直流_注册诱导干扰素-γ可能被用作开发治疗水管理的策略。

1。介绍

树突状细胞(dc)被确认为非常有效的抗原呈递细胞(apc)显然独特的能力'和激活幼稚T淋巴细胞(1,2]。成熟的DCs通常表达高水平的“激活”标记(II主要组织相容性复合体(mhc II)、CD54 CD80、CD86)和拥有强大的t细胞激活的能力3]。此外,未成熟dc表达低水平的“激活”标记和有很高的内吞作用的能力,而监管DCs与监管职能已定义控制t细胞反应(3,4]。我一^低CD11b^高DCs都被定性为监管DCs的子集。他们可以抑制t细胞增殖诱导一氧化氮(NO) (5]或诱导CTLA-4-dependent(细胞毒性淋巴细胞抗原4-dependent)白介素10 (il - 10)分泌和吲哚胺2,3-dioxygenase (IDO)表达在肿瘤(6]。DCs的不同子集可能扮演不同的角色在不同的发展/功能阶段(7]。监管DCs可以平衡免疫反应和存在于多个器官(如肺、脾、肝)(5,8- - - - - -10]。最近,DCs也被发现存在于眼睛(11- - - - - -13),它被认为是一个immune-privileged组织。但是这个角色和DCs的子集的眼睛仍不清楚。

迄今为止,监管DC(直流_注册)是由培养DCs在免疫抑制细胞因子的存在,如il - 10和转化生长因子β(TGF -β)或免疫调节药物的存在4,5,8,14,15]。多项研究表明,在某些组织微环境的诱导能力直流发展,也会影响DC的功能(5,8- - - - - -10,16]。先前的研究表明,脾肺微环境或微环境可能使成熟的DCs或干细胞分化成直流_注册(5,16- - - - - -18]。几个因素参与DCs地位的规定,如il - 10、TGF -β干扰素(IFN -γ),和/或其他化合物,如维生素D受体配体——血管活性肠肽,胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP) [4,5,8,14,15,19]。的眼睛,水体液是由纤毛上皮细胞和不包含,被罩、前列腺素E2 (PGE2)和TGF -β(20.- - - - - -22],它扮演了一个重要的角色在促进抗炎和耐受性的活动。因此,水体液可能影响DCs的眼睛的状态,但没有实验证实了这一点。

葡萄膜炎是一种眼部疾病,它可以导致失明在人类23,24]。这种疾病与免疫相关疾病,包括增加CD4细胞⁺T细胞浸润的眼睛(25- - - - - -28]。Uveitogenic抗原CD4⁺T细胞被认为是至关重要的效应物渗透到网站的炎症眼睛开车炎症和组织损伤(25,27,29日]。DCs作为独特的抗原呈递细胞,激活幼稚T细胞,也参与葡萄膜炎的致病过程(11,12,30.,31日]。DCs存在于视网膜的利润率和juxtapapillary区域(12]。功能成熟的DCs在脉络膜[发现了30.),被认为导致抗原Th1或Th17细胞诱导实验性自身免疫性的发展uveoretinitis(淡)11]。损害dc的成熟与抗原特异的药物可以防止代Th1或Th17细胞减弱淡32]。监管骨骨髓来源树突状细胞,在体外诱导,抑制淡的发展(33]。然而,DCs的状态在葡萄膜炎和DCs的监管角色仍不是很清楚。

淡小鼠模型是一种行之有效的啮齿动物模型用于人类自身免疫性葡萄膜炎感应和包含特定的自我更新特征(34]。基于这个模型,我们研究的表型和子集DCs的眼睛和分析的角色监管DCs发展的淡。此外,我们探讨了影响分化的机制监管DCs的眼睛。

2。材料和方法

2.1。动物实验

无菌女性C57BL / 6 j (6 - 8-weeks-old)老鼠从北京购买重要河流实验动物科技有限公司有限公司(中国,北京)。C57Lan / J小鼠(B6 CD11c-DTR-GFP)和CD45.1-expressing老鼠从杰克逊实验室购买(美国我巴尔港)。这些老鼠被保持在特定的无菌条件下,所有实验程序被我们当地监管机构许可(山东医学科学院,济南,中国,SYXK 20180007)。老鼠笼子的随机分配 - - - - - -6每组根据各个实验组小鼠。C57BL / 6小鼠淡是350年引入的μg的人类interphotoreceptor retinoid-binding蛋白肽(IRBP)_{1 -}(中国肽有限公司,上海,中国)乳化与分枝杆菌完全弗氏佐剂(CFA Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州,美国)。500 ng百日咳毒素(PTX,恩佐生命科学、法明岱尔YN,美国)是腹腔内注射拦路贼,脖子,双方,尾巴在每个鼠标如前所述6分(35]。免疫后小鼠检查每四天Genesis-D相机(Kowa有限公司、日本)的评估临床评分(35]。牺牲每四天之后,获得的眼睛和苏木精和伊红染色(圆))进行评估的病理评分(35- - - - - -38]。

2.2。DCs的损耗

白喉毒素(DT, 5 ng /眼)被用来删除CD11c细胞CD11c-DTR-GFP老鼠的眼睛结膜下注射。这种方法导致了95%的损耗CD11c细胞和持续了72 h。DT治疗24小时后,抗原接种诱导淡。CD11c-DTR小鼠炎症的症状和严重程度进行评估的组织病理学评分每四天(11,39]。

2.3。孤立的细胞

眼部细胞收集,收集的眼睛从老鼠之前报道40]。简单地说,眼睛从天真,淡的老鼠。删除后的镜头和角膜的眼睛,眼睛的单细胞悬架被消化准备10分钟37°C和胶原酶(1毫克/毫升)和脱氧核糖核酸酶(DNAse 100μ在rpmi - 1640 g / ml)。eye-infiltrating细胞随后被获得。

脾细胞从天真和淡小鼠免疫接种后获得的。红细胞裂解缓冲(北京Solarbio科技有限公司,北京,中国)是用来溶解红细胞,和收集的细胞Ficoll-Hypaque密度梯度离心法。悬浮培养在37°C公司5%₂孵化器进行流式细胞术分析。

主要CD4的隔离⁺T细胞CD4消极的选择工具(Miltenyi研究,Bergisch格拉德巴赫,德国)是单独使用,和之前报道的细胞培养41,42]。我一^低CD11b^高DC(直流_注册)或CD11c⁺我一^高DC(直流_米),它被排除在巨噬细胞和单核细胞,被孤立的细胞分选仪(BD FACSAria™三世,BD生物科学、钙、美国)。

在房水的存在和/或缺乏刺激,孤立的眼部树突细胞培养在媒体,补充了rGM-CSF (20 ng / ml), rIL-4 (5 ng / ml),和rFLT3L (200 ng / ml,所有从研发系统,明尼阿波利斯,锰、美国)(43,44为3天。使用层可以解决的可行性染料染色,可行的细胞被流式细胞仪检测。

2.4。过继转移实验

我一^低CD11b^高直流_注册或者我^高CD11b^低直流_米被排除在巨噬细胞和单核细胞,分离(如前所述)(5,45]。孤立的细胞( )管理一个淡鼠标,接种8天的静脉注射。转移后8天,小鼠安乐死,眼睛和脾脏被收割)染色和流式细胞术分析。

2.5。干扰素-γ治疗或中和Anti-IFN -γ抗体治疗

干扰素-γ治疗,DCs被孤立于淡老鼠和使用干扰素-γ(100 U /毫升)48 - 72 h。这些DCs与磷酸盐缓冲盐水洗两次(PBS)和动物转移进行了分析使用FACSuite或收集( /鼠标)。

评估的影响干扰素-γ在DCs, 2μg / ml中和anti-IFN -γ抗体被添加在野生型直流培养基或直流培养基中和autosecreting IFN -房水的刺激γ。的小鼠腹腔注射anti-IFN -γ中和抗体(Abcam公司、剑桥、马、美国)或控制抗体老鼠免疫球蛋白g (250μg /鼠标)每隔一天免疫接种后总段8天。

2.6。抗体和流式细胞术

荧光抗体的共轭CD3 (PE-cy5)ε(克隆145 - 2 - c11), (FITC)共轭CD4(克隆GK1.5)、(PE)共轭CD25(克隆PC61.5), (BV711)共轭CD11b(克隆M1/70), (APC)共轭CD80(克隆16-10A), (APC)共轭CD86(克隆GL1), (APC)共轭CD54(克隆3 e2), (PE)共轭我(克隆M5/114.15.2), (APC-cy7)共轭CD11c(克隆N418), (APC)共轭树突细胞标记DCIR2单克隆抗体(33 d1), (percp)共轭CD45(克隆30-F-11), (Alexa萤石700)共轭CD45.1(克隆表达A20), (BV421)共轭CD64(克隆X54-5/7.1), (BV650)共轭F4/80(克隆BM8), (PE-cy5)共轭CD19(克隆eBio 1 d3), (PE-cy5)共轭NK1.1(克隆PK136), (FITC)共轭CD26(克隆h194 - 112), (PE-cy7)共轭CD69(克隆H1.2F3), (APC)共轭Ki67(克隆7 b11), (percp-cy5)共轭TGF -β(克隆TW7-20B9), (APC)共轭il - 10(克隆JES5-16E3), (APC)共轭Foxp3(克隆FJK-16S), (APC)共轭IL-17(克隆eBio64DEC17),以及(APC)共轭IFN -γ(克隆XMG1.2)与相应的共轭荧光染料买来eBioscience(美国圣地亚哥,CA)和BioLenged(美国圣地亚哥,CA)。单细胞悬浮体( 与不同的单克隆抗体细胞)染色,根据协议由制造商提供相应的抗体。随后,分析了每个样本使用FACSuite CellQuest数据采集和分析软件(BD生物科学、钙、美国)。评估细胞内细胞因子表达,细胞和白细胞激活prestimulated鸡尾酒,准备与BD GolgiPlug™(BD生物科学、钙、美国)5 h, 37°C的5%的股份有限公司₂环境,随后被孵化与荧光标记抗体,根据制造商的指示。Foxp3 Foxp3染色的染色根据协议套件(eBioscience Inc .)、圣地亚哥、钙、美国)。BD地平线上可以解决的可行性染色(eBioscience Inc .)、圣地亚哥、钙、美国)被用来排除不能存活的细胞。

2.7。血清中细胞因子水平、房水和上层清液的细胞

血液样本收集和孵化在室温和离心机在1000×g。水得到了幽默的眼睛淡小鼠和野生型小鼠的细针抱负。每组十老鼠被使用,和获得的房水混合在一起进行测试。干扰素-水平γ、il - 10和TGF -β在水体液量化利用ELISA试剂盒(Elabscience生物技术有限公司,武汉,中国)。没有生产测量使用格里斯的亚硝酸盐浓度测定(5]。PGE2(研发系统公司、MN、美国)我是由一个酶联免疫试剂盒检测(美国表达载体,MA)。

2.8。DC-T细胞Coculture

CD4⁺T细胞纯化IRBP脾的_{1 -}免疫B6小鼠后16天,与IRBP刺激_{1 -}(10μg / ml)的存在 辐照同源的脾细胞作为72 h的装甲运兵车,然后抗原T细胞是通过磁珠(CD4细胞⁺T细胞隔离包、Miltenyi研究,Bergisch格拉德巴赫,德国)。随后,CD4⁺与负载抗原的T细胞是cocultured成熟dc ( )48 h。直流_注册被孤立的细胞分选方法和被添加到coculturation DC-T ( )。T细胞的状态被流式细胞术分析。

中和Abs鼠标il - 10 (5μg / ml,克隆# JES052A5)和TGF -β(5μ# 1 g / ml,克隆d11r)购买从研发系统(锰、美国)。被罩抑制剂1-methyltryptophan(1毫米),PGE2抑制剂indomehacin (40μ米),诱导没有合酶抑制剂1(间接宾语),4 PBIT (S, S - - - - - -2-ethanediyl 4-phenylene-bis(1日)bis-isothiourea dihydrobromide 5μg / ml)被添加到实验文化,分别。

2.9。统计分析

数据分析使用GraphPad棱镜5软件(GraphPad,圣地亚哥,CA)。每个实验进行重复,重复三次。临床和组织学淡数据通常使用Mann-Whitney统计分析 - - - - - -测试了两组或克鲁斯卡尔-沃利斯检验两组以上。双尾学生的 - - - - - -测试或单向方差分析(方差分析)应用正态分布的数据集。数据被表示为 (SEM)。值< 0.05 ( ),0.01 ( ),和0.001 ( )被认为是显著差异。

3所示。结果

3.1。我的数量^低CD11b^高DCs淡的复苏阶段模型中增加

研究DCs在淡眼中的地位,淡小鼠模型建立,DCs的状态发现红肿的眼睛。眼部DCs的表型检测根据以前的报告(45]。巨噬细胞被CD64歧视从DCs和F4/80表达式。除了CD64⁺F4/80⁺巨噬细胞和monocyte-derived细胞、CD3⁺T细胞,CD19⁺B220⁺B细胞,NK1.1⁺自然杀伤(NK)细胞被排除在分析使用“血统混合,和其余的细胞被封闭的基于我一分子的表达(血统⁻我一⁺细胞)。CD11c⁺CD26⁺DCs进一步用于分析DCs在眼睛(图的百分比1(一))。CD11b和我是用来识别成熟的DCs (CD11c的子集⁺CD26⁺我一^高CD11b^低DCs特区_米)、未成熟dc (CD11c⁺CD26⁺我一^低CD11b^低DCs特区_即时通讯),监管DCs (CD11c⁺CD26⁺我一^低CD11b^高DCs特区_注册)(图1(一))。直流_注册表达了33 d1,眼部DCs的标志(12]。眼部DCs在红肿的眼睛的数量增加了8天,第一个高峰出现在16天(淡的起始阶段,图1 (b)比大多数早),发生严重病变的眼睛。这些变化从16 th-24th天免疫接种后出现。随后,DCs的第二高峰发生在28天(复苏阶段,图1 (b))。接下来,眼部的子集DCs在淡的过程进行了分析。从12到20天,增加DC DC的大部分_米。数量的增加_米高于直流_注册(图1 (c))。28天,增加眼部的数量_注册高于直流_米(图1 (c))。也发现类似的结果在淡小鼠的脾细胞(补充图1)。这些结果表明,直流_注册可能参与淡的复苏阶段。

直流_注册是来自动物的眼睛postimmunization第28天,这些细胞表达低水平的CD80、CD86, CD54,和更高水平的il - 10,我和TGF -β相比之下,那些在直流_米(数据1 (d)和1 (e))。此外,与10 ng / ml PTX IRBP和10 ng / ml的刺激,孤立的眼_注册不能成为成熟表达高水平的CD80、CD86,和CD54(图1 (f))。il - 10的表达水平,被罩,TGF -β在直流_注册没有显著改变在华盛顿吗_注册后IRBP和PTX刺激而直流_注册在缺乏抗原刺激(图1 (g))。此外,这些直流_注册不能促进CD4⁺T细胞表达高水平CD69和Ki67但直流_米可能(图1 (h))。这些数据表明,直流_注册不能激活,这些细胞可能在眼睛发挥监管作用。

3.2。我一^低CD11b^高DCs促进CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺淡的T细胞,缓解症状

分析眼部直流的作用_注册淡的发展_注册或直流_米被孤立的红肿的眼睛淡日postimmunization细胞排序工具和被转移到淡老鼠(图2(一个), /老鼠,老鼠三/每组都被转移)。淡的严重性,分析了直流后8天_注册转移。眼睛的视网膜损伤较轻微_注册转移的小鼠比其他组(图2 (b))。临床和组织病理学评分的眼睛_注册转移的小鼠相比下降的淡老鼠(图2 (c))。然而,直流_米淡(数据的转移加剧症状2 (b)和2 (c))。

CD4细胞的数量⁺干扰素-γ⁺T和CD4⁺IL-17⁺T细胞的眼睛或脾脏中提取出来的_注册转移的小鼠相比,减少细胞来自淡没有转移(图2 (d))。然而,CD4细胞的数量⁺CD25⁺Foxp3⁺眼睛的T细胞_注册这些细胞转移小鼠高于从淡而不转移。在脾脏的特区也发现类似的结果_注册转移小鼠(图2 (d))。然而,在直流_米转移小鼠CD4的数量⁺干扰素-γ⁺T细胞和CD4⁺IL-17⁺从眼睛或脾脏T细胞高于来自淡动物没有_米转移,但CD4的数量⁺CD25⁺Foxp3⁺T细胞的脾脏中提取出来的_米转移小鼠没有明显区别,没有转移(图2 (d))。上述数据表明,增加直流_注册在红肿的眼睛可以通过诱导CD4淡的缓解症状⁺CD25⁺Foxp3⁺T细胞。

3.3。我一^低CD11b^高DCs促进CD4细胞的分化⁺CD25⁺Foxp3⁺T细胞体外

进一步分析直流的机制_注册在调节水的症状_注册和直流_米被隔绝的眼睛淡动物和cocultured孤立的T细胞,分别。DCs与10 ng / ml的IRBP脉冲_{1 -}和10 ng / ml PTX 24 h,随后,CD4细胞⁺T细胞是隔绝淡动物和与这些DCs cocultured 48 h。分析了T细胞的激活和增殖与标记流式细胞术CD69 Ki67,另行规定。T细胞,cocultured直流_米表示,高水平的比T细胞CD69, Ki67 cocultured直流_注册(图3(一个))。此外,直流_注册减少CD69的表达和Ki67的T细胞,与直流cocultured_米和直流_注册(图3(一个))。T细胞cocultured直流_注册表达CD25和Foxp3水平高于T细胞cocultured直流_米(图3 (b))。直流的添加_注册可以增加CD4的百分比⁺CD25⁺Foxp3⁺coculture的T细胞_米和T细胞(图3 (b))。然而,直流_米cocultured T细胞促进了感应的CD4的表达水平更高⁺干扰素-γ⁺T细胞和CD4⁺IL-17⁺T细胞比这些cocultured直流_注册(图3 (b))。添加直流_注册可以减少CD4的百分比吗⁺干扰素-γ⁺T细胞和CD4⁺IL-17⁺coculture的T细胞_米和T细胞(图3 (b))。

阻塞的被罩,il - 10和TGF -β与相应的中和抗体或抑制剂,CD4细胞的百分比⁺CD25⁺Foxp3⁺coculture的T细胞_注册和T细胞减少(图3 (c))。然而,中和抗体和抑制剂的使用不会影响干扰素的表达水平γ或者在CD4 IL-17⁺T细胞(图3 (c))。可溶性因子的分泌_注册可能与CD4的感应⁺CD25⁺Foxp3⁺T细胞。

3.4。我一^低CD11b^高直流_注册来自淡的发炎脾抑制炎症

在免疫后第28天,直流的百分比_注册也增加了脾脏淡(补充图1)。数量的增加_注册可能参与到淡的进展。直流_注册孤立的从淡小鼠的脾脏,接种了28天。这些细胞被转移到淡小鼠静脉注射。淡的严重性,分析了直流后8天_注册转移。眼睛的视网膜损害并不是那么严肃的脾_注册转移的小鼠相比,那些没有转移(图4(一))。临床和组织病理学的脾的眼睛_注册转移小鼠减少与水的老鼠相比(图4 (b))。CD4细胞的百分比⁺干扰素-γ⁺T细胞和CD4⁺IL-17⁺的眼睛或脾脏T细胞脾_注册转移小鼠减少(图4 (c))。然而,CD4细胞的百分比⁺CD25⁺Foxp3⁺T细胞在眼睛增加脾_注册转移(图4 (c))。

脾转移直流_注册没有出现在眼睛组织,尽管这些细胞在脾脏和淋巴结(补充图吗2)。结果表明,直流_注册来自发炎脾可以减少水的严重程度和可以发挥监管作用外周淋巴器官。然而,当直流_注册被隔绝的眼睛CD45.1-expressing老鼠和被转移到淡。这些细胞可能达到红肿的眼睛(补充图3)。最重要的是,这些数据表明,DC的功能_注册淡的器官特异性。

3.5。干扰素-γ与CD11c的分化^低我一^低CD11b^高DCs

进一步分析哪些因素影响DCs在眼的状态,我们调查了改变成分在房水淡的过程。在房水发炎,干扰素-的浓度水平γ在经济复苏阶段增加(补充图4)。干扰素-γ据报道,引起生产的耐受性树突状细胞46- - - - - -48),显示在葡萄膜炎产生一种保护作用[49,50]。因此,增加干扰素-的水平γ在红肿的眼睛可能会影响DCs的状态。干扰素的作用γ在分析了DCs在体外。干扰素-的浓度最高γ与更高比例的直流_注册(图5(一个)),而干扰素-的浓度最高γ提升IDO的表达_注册(补充图5)。淡的水体液(免疫后的第21至28天)获得和添加到文化孤立的眼部DCs,和直流的百分比_注册相应地增加(图5 (b))。然而,与干扰素治疗后γ中和抗体,直流的百分比_注册低于那些动物没有治疗(图5 (b))。干扰素-γ中和抗体治疗,炎症症状的老鼠加剧(补充图6)。CD4细胞的百分比⁺IL-17⁺T细胞增加,而直流的比率_注册/直流_米和CD4的百分比⁺CD25⁺Foxp3⁺脾脏T细胞减少红肿的眼睛和发炎。这些研究结果相比,CD4细胞的百分比⁺干扰素-γ⁺(补充图T细胞没有明显变化6)。数据表明,干扰素-γ与DC的分化_注册。

此外,我们使用孤立的DCs与干扰素- 72 hγ(200 U /毫升)。这些DCs (10⁶/毫升)转移到淡小鼠免疫接种后8天。转移后8天,淡的严重程度进行评估。眼中的视网膜损害没有发现干扰素-γ对直流_注册转移小鼠(图5 (c))。临床和组织病理学评分的眼睛干扰素-γ对直流_注册转移小鼠相比下降与淡老鼠(图5 (d))。

干扰素-后γ对直流_注册在老鼠身上转移,淋巴细胞亚群的数量进行了分析。CD4细胞的百分比⁺干扰素-γ⁺T细胞和CD4⁺IL-17⁺的眼睛和脾脏T细胞_注册转移小鼠均减少,与小鼠相比没有治疗(图5 (e))。然而,CD4细胞的百分比⁺CD25⁺Foxp3⁺T细胞的眼睛后增加干扰素-γ对直流_注册转移。类似的结果在干扰素的脾——被发现γ对直流_注册把老鼠。

3.6。我一^低CD11b^高DCs存在于正常小鼠的眼睛和眼微环境保持宽容DCs的状态

进一步分析是否直流_注册存在于正常老鼠的眼睛,CD45⁺眼部细胞从正常的眼睛是封闭的和分析。在这些CD11c⁺CD26⁺DCs, 20.9%的DC直流_注册。62.1%的DCs是不成熟的DCs(图6(一))。此外,减少眼部居民CD11c + DCs与DT CD11c-DTR-GFP老鼠可以促进炎症的早期症状的出现淡(补充图7)。然而,直流_注册被隔绝的正常眼睛CD45.1-expressing老鼠和老鼠被转移到淡。的临床和组织病理学评分的眼睛_注册转移小鼠减少(补充图8)。这些数据表明,直流_注册存在于正常的眼睛,他们可能发挥监管作用。

据报道,房水维持免疫微环境的耐受性非常重要20.- - - - - -22,51]。不,被罩,前列腺素E2 (PGE2)、TGF -β据报道,il - 10在房水[52- - - - - -54),和所有这些标记的表达水平与DCs的状态(4,5,8,18,55]。分析房水的成分是否影响眼部DCs的状态,我们获得正常眼睛的房水和检测到的浓度水平提到的房水中可溶性因素来确定这些分子可能影响直流状态。炎症标记物的水平在正常眼睛的房水测量并显示如下:没有( μ米),我( ng / ml), PGE2 ( pg / ml), TGF -β( pg / ml)和il - 10 ( 在房水pg / ml)。随后,我们调查了机制DC的分化_注册引起房水。眼睛的房水样本获得正常小鼠和被添加到培养基成熟的DCs (100μl /毫升)。 成熟的DC分化成_注册的分化,表明水体液可能影响DCs(图6 (b))。

探讨在水体液因素影响DC分化,anti-IL-10 TGF -β中和抗体,PGE2,不,我抑制剂被用来阻止il - 10, TGF -β,PGE2,不,我表情单独或结合在一起。这些标记物的表达水平评估是表现在直流coculture水体液刺激。孵化后3天,直流的百分比_注册在成熟的DCs检测。直流的百分比_注册在文化的成熟DCs是降低(图6 (c))。此外,在中和抗体的存在或抑制剂,il - 10的表达水平,TGF -β,我在_注册减少(图6 (d)- - - - - -6 (f)),这表明水体液影响DCs的状态。

4所示。讨论

眼睛是一个免疫器官的特权,拥有与缺乏淋巴细胞表型21,56),但CD11c⁺DCs被发现存在于眼睛,可能扮演了一个重要的角色在组织内稳态和外国抗原的免疫反应11- - - - - -13,56,57]。然而,DCs的角色和地位的眼睛仍不清楚。在此,我们证明了大多数眼部CD11c DCs⁺CD26⁺DCs。我一^低CD11b^高DC(直流_注册)监管子集在正常小鼠的眼中。这些细胞可以表达33 d1和低水平的CD80、CD86及CD54。此外,这些细胞可以秘密il - 10, TGF -β,我可能会引起眼部免疫耐受。

葡萄膜炎是一种严重的炎性疾病,可导致视觉残疾和失明(24,58]。眼睛发炎,监管DCs的数量增加,达到峰值在复苏阶段。这些增加监管DCs可能迁移到淋巴结和脾脏t细胞激活或抑制引起CD4细胞⁺CD25⁺Foxp3⁺T细胞(11,56]。我们的数据表明,监管DC可能产生与组织特异性的抑制功能。过继转移脾直流_注册到老鼠淡可以抑制炎症诱导CD4的淡⁺CD25⁺Foxp3⁺T细胞。但这些脾直流_注册不能到达那红肿的眼睛。脾直流_注册可能发挥监管作用,外围由诱导CD4淋巴器官⁺CD25⁺Foxp3⁺T细胞。此外,眼直流_注册调节免疫反应影响当地和系统性免疫状态通过分泌il - 10, TGF -β我,看好她。

组织微环境和免疫抑制细胞因子可以调节并确定DCs的功能在活的有机体内(8,10,16,59]。水体液,含有一定浓度的蛋白质,提供重要的物质来维持眼睛的微环境和纤毛上皮细胞分泌的20.- - - - - -22]。特定水平的il - 10, TGF -β,不,我和PGE2房水中维持的状态监管DCs和驱动监管DCs成熟dc的分化。这些数据表明,房水可能影响dc的分化。il - 10和TGF -β可以进一步提升并维持在高水平经济复苏期间的淡(补充图吗9)。这些细胞因子可能会进一步诱发T细胞的宽容和DCs淡促进复苏。

另外,干扰素,提高水平γ的眼睛可能会进一步促进DC的分化_注册。干扰素的作用γ在自身免疫仍然是有争议的。干扰素-γ据报道,在淡(有保护作用50,60]。另一项研究表明,干扰素-γ可以促进炎症的淡61年]。干扰素的作用γ可能与它的浓度在DCs或有效时间,因为高浓度和/或长治疗效果的干扰素-γDCs可能引起直流耐受通过促进语言表达(46]。在淡老鼠红肿的眼睛,干扰素-的水平γ显示持续增加(62年]。干扰素水平的增加γ积极与DCs IDO的表达水平。我可能会进一步抑制t细胞增殖和抑制组织损伤(46- - - - - -48,63年]。因此,持续增加干扰素-γ可以考虑的一个主要监管因素的感应直流_注册在淡。葡萄膜炎复发可能与干扰素的监管的缺陷γ和/或IDO的表达。

的作用机制_注册不同组织之间的不同(8,10,16,59]。直流_注册派生PGE2负责监管功能在肝脏和肺组织(10,16]。然而,直流_注册派生没有负责监管功能在脾脏5]。我们的数据表明,直流_注册眼睛的秘密TGF -β、il - 10和被罩,这可能引起眼部免疫耐受。数量的增加_注册红肿的眼睛可能会导致他们迁移到淋巴结和脾脏抑制t细胞激活通过分泌抑制分子或调节信息接触。

数量有限的治疗方案已发现治疗葡萄膜炎(64年- - - - - -66年]。许多研究都集中在定制的和有针对性的免疫疗法的发展,包括细胞疗法(64年- - - - - -66年]。在目前的研究中,我们表明,DCs与IRBP脉冲_{1 -}PTX和刺激干扰素-γ可以减轻视网膜损伤的严重程度在淡,可以减少渗透CD3吗⁺T细胞、NK细胞和DCs在红肿的眼睛和脾脏。目前的研究表明,干扰素-γ对DCs发挥了T细胞炎症反应的抑制作用。干扰素-γ处理DCs促进Treg扩散和抑制淡的发展通过刺激语言表达和干扰素-γ对直流cell-Treg细胞相互作用。因此,干扰素-的转移γ对DCs是淡的有效治疗。它可能有助于我们寻求的一种很有潜力的治疗策略自身免疫性葡萄膜炎。

5。结论

当前的研究结论_注册存在于正常,红肿的眼睛,促进CD4细胞⁺CD25⁺Foxp3⁺T细胞通过分泌被罩、il - 10和TGF -β。直流的状态_注册主要是受房水,富含TGF -β,不,和PGE2。高水平的干扰素-γ在眼睛的房水的复苏阶段促进监管DCs的数量,淡的可以缓解症状。我们的研究结果表明,直流_注册在淡发挥保护作用,这些直流_注册诱导干扰素-γ可能被用作开发治疗水管理的策略。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。

的利益冲突

没有利益冲突的任何作者的出版工作。

作者的贡献

本文作者作出了重要贡献。朱柔设计研究;Y.Z.,J.W., Z.M., L.P., S.Q., and W.L. performed the research experiments; Z.M., S.Q., and L.M. analyzed the data. W.L. wrote the paper. Yu Zhao and Jingwen Wang are the co-first authors.

确认

我们承认这种实验的帮助云波魏博士和夫人婷婷汉(济南,山东省科学院,中国),亦未朱棣文教授(复旦大学上海医学院免疫学系,上海,中国),华唐教授(泰安医学院免疫学系,泰安,中国),和张Zhihong教授(华中科技大学、武汉、湖北,中国)。这项工作是支持由中国自然科学基金会(81500710号,81560668,81860719,31700808),山东省自然科学基金(ZR2016HP40),山东重点研发项目(2019 gsf108189),中国国家科技重大专项项目(2017 zx09301058002),医疗卫生技术发展计划的项目(2015号ws0194),山东省科技计划从山东医学科学院(2015 - 25),和创新项目的山东医学科学院。

补充材料

补充图S1:动态变化的百分比_注册和直流_米在CD45⁺细胞在脾脏淡。 三次/组,重复了同样的实验,提出了数据 (SEM),克鲁斯卡尔-沃利斯检验 , ,和 。补充图S2:转移_注册从发炎CD45.1-expressing小鼠的脾脏淡;这些细胞在淋巴结和脾脏的CD45.2-expressing淡小鼠模型,而不是眼睛。补充图S3:眼部_注册被过继转移到淡到达红肿的眼睛。直流_注册眼睛的CD45.1-positive老鼠过继转移到CD45.2-expressing淡老鼠。12天之后,眼部细胞被流式细胞术分析。代表图片所示。补充图S4:干扰素-的浓度γ淡的房水28天免疫小鼠后,相比之下,那些没有免疫。 /组,实验重复三次,和数据了 (SEM)。双尾学生的 - - - - - -测试和 。补充图S5:不同浓度的干扰素-γ治疗或anti-IFN -γ中和抗体治疗(2μg / ml),被罩的百分比+ DCs在孤立的眼部DCs。鼠标rIFN -γ被用作0 U /毫升(IFN -γ0),10 U /毫升(IFN -γ10),100 U /毫升(IFN -γ100年),和200 U /毫升(IFN -γ分别200)。 三次/组,重复了同样的实验,提出了数据 (SEM),方差分析测试和 。补充图S6:干扰素-γ中和抗体治疗加重淡的症状。得分(a)临床和组织病理学评分的眼睛从干扰素-γ中和antibody-treated老鼠进行了分析并与那些没有治疗。CD4细胞的百分比⁺干扰素-γ⁺T细胞CD4⁺IL-17⁺T细胞CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺和DCs的眼睛(b)或干扰素-脾(c)γ中和antibody-treated老鼠,相比之下,那些没有治疗( /组,实验重复三次,数据了 (SEM),双尾学生的 - - - - - -进行了测试 , ,和 )。补充图S7: CD11c损耗⁺细胞与白喉毒素(DT),淡下降的症状。(一)DT损耗,CD11c⁺细胞分析在CD11c-DTR-GFP眼中,相比之下,如果没有损耗。(b) CD11c⁺细胞被DT耗尽,然后IPBR PTX注入构造淡模型。分析了组织病理学评分红肿的眼睛每四天。数据了 (SEM),克鲁斯卡尔-沃利斯检验 。补充图S8:眼的作用_注册从正常的眼睛。淡的组织病理学评分及临床分数有或没有转移_注册从正常的眼睛CD45.1-expressing老鼠。数据了 (SEM),方差分析测试和 和 。补充图9:动态TGF -浓度的变化β和血清il - 10的淡ELISA测定。 /组,实验重复三次,和数据了 (SEM)。(补充材料)。(补充材料)

引用

1. r·m·斯坦曼“树突细胞:多功能控制器的免疫系统,”自然医学,13卷,不。10日,1155 - 1159年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. r·m·斯坦曼和j . Banchereau“医学到树突细胞,”自然,卷449,不。7161年,第426 - 419页,2007年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. r·m·斯坦曼、d . Hawiger和m . c .压力耐受性树突状细胞,”年度回顾的免疫学21卷,第711 - 685页,2003年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. a . e . Morelli和a·w·汤姆森耐受性树突状细胞和追求移植耐受,”自然评论。免疫学,7卷,不。8,610 - 621年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. 郭h . m . Zhang, z . et al .,“脾基质驱动器成熟树突状细胞分化成监管树突细胞,”自然免疫学,5卷,不。11日,第1133 - 1124页,2004年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. y y, z . Chen Yang et al .,“人CD14⁺CTLA-4⁺监管树突细胞抑制t细胞反应细胞毒性t淋巴球antigen-4-dependent il - 10和indoleamine-2 3-dioxygenase生产在肝细胞癌”肝脏病学卷,59号2、567 - 579年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. l .吴邦国委员长和y . j .刘“树突细胞谱系的发展,”免疫力,26卷,不。6,741 - 750年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. h·唐郭z, m . Zhang j . Wang g . Chen和曹x,“造血干细胞分化成内皮基质项目监管树突细胞通过il - 10,”血,卷108,不。4、1189 - 1197年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. m . Rimoldi m . Chieppa诉Salucci et al .,“肠道免疫内稳态是由上皮细胞和树突细胞之间的串扰,”自然免疫学》第六卷,没有。5,507 - 514年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. 夏,郭z、x, h .咦,问:Wang和曹x,“肝造血祖细胞分化微环境项目监管树突细胞,维持肝脏宽容,“血,卷112,不。8,3175 - 3185年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. n d处,莱曼,s·w·麦克弗森,c . c•诺布里和d s Gregerson“本地激活树突状细胞在视网膜上改变了自身免疫性疾病的发病机制,“免疫学杂志,卷188,不。3、1191 - 1200年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. h .徐r·道森j . v . Forrester和j .运营”的识别小说树突状细胞数量在正常小鼠视网膜,”调查眼科及视觉科学,48卷,不。4、1701 - 1710年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. w·林,t . Liu b . Wang和h Bi,“葡萄膜炎眼树突状细胞的作用”,免疫学的信卷。209年,4到10,2019页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. a . Wakkach n .福尼尔诉布朗,j . p . Breittmayer f·科特兹和h . Groux”表征的树突状细胞诱导和T监管1体内细胞分化,“免疫力,18卷,不。5,605 - 617年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. m . Svensson a . Maroof m . Ato, p . m .凯”基质细胞直接当地监管树突状细胞的分化,“免疫力,21卷,不。6,805 - 816年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. 问:李、郭z、x, s .夏和曹x,“肺基质细胞诱导生成的监管直流衰减T-cell-mediated肺部炎症,”欧洲免疫学杂志,38卷,不。10日,2751 - 2761年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. c .钱和x曹”,树突细胞免疫和炎症的规定,“研讨会在免疫学,35卷,3-11,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. j .刘曹x,“监管树突细胞自身免疫:一个全面的审查,”自身免疫杂志卷,63年,页1 - 12,2015。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. a·切尔尼,e . Gonzalez-Rey a . Fernandez-Martin d·博罗d . Ganea和m . Delgado”——血管活性肠肽诱导调控树突状细胞治疗自身免疫性疾病的影响,“美国国家科学院院刊》上,卷102,不。38岁,13562 - 13567年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. 公元麦克奈特,c·w·迈克劳林·d·皮尔特,r·d·Purves d·a·卡雷和m . m . Civan房水的形成,“临床与实验药理学和生理学,27卷,不。1 - 2、100 - 106年,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. 美国Masli和j·l·维加“眼部免疫特权网站”分子生物学方法卷,677年,第458 - 449页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. a·k·丹尼斯顿s . h . Kottoor即汗et al .,“内源性皮质醇和TGF-β在人类房水导致眼部免疫特权通过调节树突状细胞的功能,“免疫学杂志,卷186,不。1,第311 - 305页,2011。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. o·m·杜兰尼n . n .德黑兰的j·e·马尔·Moradi p . Stavrou和p i穆雷,”程度、持续时间和导致葡萄膜炎、视力丧失的原因”英国眼科学杂志》上,卷88,不。9日,第1162 - 1159页,2004年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. j .十Doesschate“导致失明的荷兰,”Ophthalmologica届卡塞尔文献展,52卷,不。2、279 - 285年,1982页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. m . Muhaya诉l·考尔德·h·m·托勒g .快活m . McLauchlan和s·莱特曼”特征的表型和细胞因子的T细胞系来源于玻璃幽默在眼部炎症的人,”临床和实验免疫学,卷116,不。3、410 - 414年,1999页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. f .İlhan t . Demir p . Turkcuoğlu作风,n . Demir和a . Godekmerdan”Th1极化免疫反应在遗传病的葡萄膜炎的疾病,”加拿大眼科杂志》,43卷,不。1,第108 - 105页,2008。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. a . Parnaby-Price m·r·斯坦福j .带给et al .,“实验性自身免疫性uveitisin体内白细胞贩卖。”《白细胞生物学,卷64,不。4、434 - 440年,1998页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. r·r·卡斯皮f . g . Roberge说道,c·麦卡利斯特et al .,”T细胞系调停实验性自身免疫性uveoretinitis(淡)老鼠,”《免疫学,卷136,不。3、928 - 933年,1986页。视图:谷歌学术搜索
29. s . Koarada y Haruta, y Tada et al .,“增加CD4的条目⁺T细胞的Th1细胞因子效应T细胞分裂期间通路在遗传病疾病的刺激之后,“风湿病学,43卷,不。7,843 - 851年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. a . Choudhury v . a . Pakalnis和w·e·鲍尔斯”特征和功能活动的树突细胞从老鼠脉络,“眼睛的实验研究卷,59号3、297 - 304年,1994页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. 和d s . k .哦,y s . Kim Lee“Maturation-resistant树突细胞改善实验性自身免疫性uveoretinitis,”免疫网络,11卷,不。6,399 - 405年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. 铃木j·t·Yoshimura m . Simeonova et al .,“Aminoimidazole酰胺核苷酸改善实验性自身免疫性葡萄膜炎,“调查眼科及视觉科学,53卷,不。7,4158 - 4169年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. 服部y臼井仪人,竹内m . t . et al .,“抑制实验性自身免疫性uveoretinitis监管树突细胞的老鼠,”眼科档案,卷127,不。4、514 - 519年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
34. i . p . Klaska j . v . Forrester,“自身免疫性葡萄膜炎小鼠模型”,当前的药物设计,21卷,不。18日,第2467 - 2453页,2015年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. d . Avichezer p . b .银,b . Wiggert c . c . Chan和r·r·卡斯皮”标识的新抗原决定基人类IRBP诱发自身免疫性uveoretinitis小鼠h - 2 b单体型,”调查眼科及视觉科学第41卷。。1,第131 - 127页,2000。视图:谷歌学术搜索
36. r·r·卡斯皮“实验性自身免疫性uveoretinitis老鼠和老鼠,”当前免疫学的协议,53卷,不。1,15.6.1-15.6.20,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
37. d . Avichezer g . i Liou c . c . Chan et al .,“Interphotoreceptor retinoid-binding蛋白质(IRBP)缺乏C57BL / 6小鼠有增强免疫和IRBP immunopathogenic反应和认知的改变IRBP抗原表位,”自身免疫杂志,21卷,不。3、185 - 194年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
38. c . c . Chan r·r·卡斯皮m .倪et al .,“病理学实验小鼠自身免疫性uveoretinitis。”自身免疫杂志,3卷,不。3、247 - 255年,1990页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
39. k . Hu d·l·哈里斯,t .山口,美国h·冯·Andrian和p . Hamrah”的双重角色在单纯疱疹性角膜炎角膜树突细胞:当地抑制角膜损伤和促进系统病毒传播,”《公共科学图书馆•综合》,10卷,不。9篇文章e0137123 2015。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
40. h .邵l . Van ka s . l .太阳h . j . Kaplana和d .太阳,“渗透眼睛发炎的NKT细胞实验性自身免疫性葡萄膜炎的鼠模型中,“自身免疫杂志,21卷,不。1,37-45,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
41. w·林,x的人,李p . et al .,“NK细胞是负面受sCD83在实验性自身免疫性葡萄膜炎,“科学报告,7卷,不。1,第12895条,2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
42. w·林,z粉丝,y锁et al .,“CD4 + t细胞之间形成的圆心突触和葡萄球菌肠毒素B-pulsed树突细胞是t细胞反应,抑制突触”免疫学和细胞生物学,卷93,不。1,第110 - 99页,2015。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
43. r . Iwabuchi s Ikeno m . Kobayashi-Ishihara et al .,“人类Flt3-L和gm - csf引入人性化老鼠提高重建髓系树突状细胞的成熟和Foxp3的发展⁺CD4⁺T细胞”,免疫学前沿第1042条,卷。9日,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
44. c .孟x, z徐et al .,”鼠Flt3 ligand-generated血浆和传统树突状细胞显示功能分化激活,炎症,和BCG抗原在体外感染,”体外细胞与发育生物学,动物,53卷,不。1,第76 - 67页,2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
45. m . Guilliams c . a . Dutertre c·l·斯科特et al .,“无人监督的高维分析对齐树突细胞在组织和物种中,“免疫力,45卷,不。3、669 - 684年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
46. 美国Svajger: Obermajer, m . Jeras“干扰素-γ丰富环境项目树突状细胞对细胞毒性免疫反应的沉默,“《白细胞生物学,卷95,不。1,33-46,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
47. b .更加与众不同,Hainz d·福克斯,t . Felzmann和a . Heitger干扰素-γ——吲哚胺2,3-dioxygenase能力在人类monocyte-derived同种异体T细胞,树突状细胞诱导的监管活动”血,卷114,不。15日,第3243 - 3235页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
48. 王x, z . j .龚z . w . et al .,”IDO-competent-DCs诱导干扰素-γ减弱对大鼠肝移植急性排斥。”临床免疫学杂志,32卷,不。4、837 - 847年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
49. p . Matthys k . Vermeire h . Heremans, a . Billiau”干扰素的保护作用γ在实验性自身免疫性疾病:分枝杆菌adjuvant-induced骨髓形成的核心作用。”《白细胞生物学,卷68,不。4、447 - 454年,2000页。视图:谷歌学术搜索
50. b·g·r·r·卡斯皮c . c . Chan Grubbs et al .,“内生系统性IFN-gamma对眼部自身免疫小鼠具有保护作用,”免疫学杂志,卷152,不。2、890 - 899年,1994页。视图:谷歌学术搜索
51. 江w·陈,赵,r . et al .,“细胞因子表达谱在房水和急性前葡萄膜炎患者的血清,”当前分子医学,15卷,不。6,543 - 549年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
52. h . Takase y Futagami, t .吉田et al .,“细胞因子在房水、感染性和非感染性葡萄膜炎患者血清”调查眼科及视觉科学卷,47号4、1557 - 1561年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
53. c . Skorpik m . Juchem p Paroussis, h . Vierhapper“消炎痛对兔眼房水中PGE2的影响虹膜掺钕钇铝石榴石激光器光剥离后,“Graefe眼科临床和实验的档案,卷226,不。5,479 - 481年,1988页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
54. j·l·Bellot m . Palmero c . Garcia-Cabanes r . Espi c . Hariton和a .差劲的“一氧化氮和prostaglandin-E2合成抑制剂的累加效应endotoxin-induced葡萄膜炎的兔子,“炎症反应的研究,45卷,不。4、203 - 208年,1996页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
55. h·h·史密特e·c·德容e·a·Wierenga和m . l . Kapsenberg”不同的监管面临DCs在体内平衡和免疫力,”免疫学的趋势,26卷,不。3、123 - 129年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
56. j . v . Forrester h .徐l . Kuffova公元迪克和p·g . McMenamin“树突细胞生理和功能的眼睛,“免疫学检查,卷234,不。1,第304 - 282页,2010。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
57. a . s . Postole a·b·诺尔g . Auffarth, f . Mackensen,“体内炎症细胞的共焦显微镜角膜基质浅神经丛不同亚型的前葡萄膜炎,患者”英国眼科学杂志》上,卷100,不。11日,第1556 - 1551页,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
58. a . Rothova m . s . Suttorp-van舒尔腾w .熔化Treffers,和a . Kijlstra”的原因和频率失明患者的眼内炎症疾病,”英国眼科学杂志》上,卷80,不。4、332 - 336年,1996页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
59. f . Ghiringhelli p e . Puig s Roux et al .,“肿瘤细胞不成熟的髓系树突状细胞转换成TGF -β分泌细胞诱导CD4⁺CD25⁺调节性T细胞增殖。”《实验医学杂志》上,卷202,不。7,919 - 929年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
60. l·s·琼斯,l . v . Rizzo r·k·阿加瓦尔et al .,“IFN-gamma-deficient小鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎发展上下文中的异常效应的回应,“免疫学杂志,卷158,不。12日,第6005 - 5997页,1997年。视图:谷歌学术搜索
61. c . e . Egwuagu j . Sztein r . m .马赫迪et al .,“干扰素-γ增加了严重程度和加速实验性自身免疫性葡萄膜炎的发病在转基因老鼠,”免疫学杂志,卷162,不。1,第517 - 510页,1999。视图:谷歌学术搜索
62. t . Yoshimura k h . Sonoda y宫崎骏et al .,“微分角色IFN-gamma在实验性自身免疫性uveoretinitis IL-17,”国际免疫学,20卷,不。2、209 - 214年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
63. f·t·谢·j·s .曹j .赵y, f . Qi和x c·戴”,语言表达树突细胞抑制小鼠小肠移植同种异体移植物排斥Foxp3的扩张⁺调节性T细胞,”移植免疫学,33卷,不。2、69 - 77年,2015页。视图:谷歌学术搜索
64. c, h . Sahawneh l .马b . Kubaisi A·施密特和培养,“审查和更新孤儿药物治疗非感染性葡萄膜炎,“临床眼科11卷,第265 - 257页,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
65. 赵c和m .张“免疫抑制治疗非感染性葡萄膜炎:历史和当前的选择,”中国医学科学杂志,32卷,不。1,48 - 61年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
66. j . v . Forrester r . j . Steptoe i . p . Klaska et al .,“细胞治疗眼部炎症,”在视网膜和眼睛的研究进展,35卷,第101 - 82页,2013年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

版权

版权©2020余赵等。这是一个开放分布式下文章知识共享归属许可,它允许无限制的使用、分配和复制在任何媒介,提供最初的工作是正确引用。