的甲醇提取物的抗炎和抗氧化活性Cyrtocarpa procera树皮减少溃疡性结肠炎的严重程度在化学诱导结肠炎模型

摘要

Cyrtocarpa procera在墨西哥传统医学用来治疗不同的肠胃问题的植物。在这里，我们调查了的效果c . procera甲醇提取物在dss诱导的结肠炎小鼠中的作用。用4% DSS灌胃给雌性BALB/c小鼠，诱导溃疡性结肠炎(UC)。相比于用UC未治疗的小鼠，治疗组接收c . procera提取物呈现腹泻，出血，体重减轻不太严重UC的症状。另外，结肠缩短被显著降低，并且在微观水平，仅观察到轻微的损害。促炎细胞因子如TNF-α水平α,il - 1β,干扰素γ在血清中，以及在结肠中的MPO活性在被显著降低c . proceramethanolic extract-treated组。此外，提取c . procera降低UC期间的氧化应激，防止SOD、CAT、GPx等抗氧化酶活性的恶化。此外，提取物降低了脂质过氧化损伤及其最终产物丙二醛(MDA)。与此一致的是，体外与试验c . procera提取物表现出良好的抗氧化能力，这可能是由于多酚化合物的存在下，特别是鉴定出，如白杨素，柚皮素，山奈酚，和儿茶素，已被报道具有抗炎和抗氧化活性的黄酮类化合物。因此，UC的提高由c . procera甲醇提取物可能与这些化合物的作用机理有关。

1.介绍

溃疡性结肠炎（UC）是炎性疾病局限于结肠粘膜[1，2]其特征在于多种症状，包括腹部疼痛和痉挛，血性腹泻，直肠出血，体重减轻，发热，和疲劳，这可以逐渐开始或开始一次全部[3，4]。目前，UC的发病机制仍不清楚，但它已经与涉及遗传和免疫因素和环境因素之间的相互作用机制，多因素[五]。尽管如此，没有证据表明这些因素是UC的直接原因，这意味着UC的病因仍不清楚[6]。

由于发病率高，这种疾病被认为是现代社会的一个问题，自过去十年以来发病率一直在上升[1，7]。事实上，炎性肠道疾病的发生和流行，其中UC是主要的疾病与克罗恩病一起，在北欧，英国和美国[正在增加8]，甚至在其发病率已经算低的区域，包括拉丁美洲[7]。

其中最常用的药物用于UC的是5-氨基水杨酸（5-ASA）。它已经证明，5-ASA具有对UC一个良好的安全性和高效性。然而，5-ASA没有副作用，如头痛，恶心，胀气，腹泻免除。其他罕见但严重的副作用包括胸膜炎性心包炎，心肌炎，胰腺炎和淤胆型肝炎[9]。因此，有必要寻找能有效且副作用较少新的治疗选择。因此，天然产物和它们的化学化合物已被提出作为用于新药开发的候选物，因为它们广泛的治疗谱，毒性低，副作用的出现较低，并且低成本[10]。

Cyrtocarpa proceraKunth，俗称“chupandilla”，是墨西哥特有的植物，主要分布在哈利斯科州，米却肯州，纳亚里特州，格雷罗州，墨西哥，莫雷洛斯，普埃布拉和瓦哈卡州。它的树皮被用于墨西哥的传统药物[11治疗不同疾病，包括痢疾和腹泻[12，13]。已经证明c . procera减轻乙醇引起的胃炎的严重程度[14]。此外，值得一提的是树皮c . procera是用作掺假的树皮Amphipterygium adstringens（cuachalalate），因为它们看起来非常相似[15]。

答:adstringens也用在墨西哥的传统医学治疗不同胃肠道疾病，如胃炎，胃溃疡，和胃肠道癌[4，13]。此外，我们最近的工作表明，树皮的甲醇提取物答:adstringens通过减少炎症和氧化应激降低UC的严重程度[4]，两个在UC建立和发展[最重要的因素16]。

因此，我们决定评价甲酚提取物的抗氧化和抗炎作用c . procera在葡聚糖硫酸钠（DSS）中，除了UC的严重程度和的甲醇提取物的化学特性的宏观和微观评价进行抗氧化酶和促炎细胞因子的测定诱导的结肠炎的小鼠模型中c . procera。

2。材料和方法

2.1。试剂

DSS (MW: 35000 - 50000;(MP Biomedicals, Solon, OH, USA)用于诱导结肠炎。SOD、CAT、GPx、TBARS试剂盒由开曼化学公司(美国密歇根州安娜堡市)提供。Cell Biolabs公司(美国加州圣地亚哥)提供了OxySelect髓过氧化物酶活性测定试剂盒，用于测定结肠抗氧化酶活性。细胞因子水平的测定采用Bio-Plex Pro小鼠细胞因子8- Plex面板(Bio-Rad, Hercules, CA, USA)。2,2-二苯-1苦基肼溶液(DPPH) (Sigma-Aldrich, cat)D913-2)使用。总酚类定量使用福林- ciocalteu试剂(Hycel, HYC-2790-250)。用氯化铝(Fermont, PQ-24011)测定其总黄酮含量。

2.2。植物材料

c . procera树皮于2017年6月在位于瓦哈卡州和普埃布拉州之间的特瓦卡坎-库卡特兰生物圈保护区采集。在这个地区，两者都有药用价值c . procera和答:adstringens如上文所述，有报道称犬吠可以治疗胃肠疾病[13，14]。c . procera标本经许可的场收集从“Secretaria德梅迪奥Ambiente的ýRECURSOS Naturales”（SGPA / DGVS / 1266）和由M.C玛利亚伊迪丝洛佩兹Villafranco（所述IZTA植物图鉴的馆长）植物学识别。甲凭证标本在所述Facultad德埃斯图迪奥斯Superiores Iztacala，墨西哥国立自治大学（凭单号码IZTA-2412）沉积在IZTA植物图鉴。

2.3。老鼠

雌性BALB / c小鼠6-7周龄（ 体重）被使用。它们维持在无病原体的环境中，在FES Iztacala，墨西哥国立自治大学动物护理设施，根据学院动物护理和使用委员会和政府指导方针（墨西哥正式NOM-062-ZOO-1999），严格按照推荐该指南为美国国立卫生研究院的实验动物护理和使用（美国）英寸动物实验前适应环境一周。他们坚持在刨花和床上用品在动物屋子笼（ 环境温度和12小时的明暗循环)。在整个实验过程中，它们可以随意获得食物和水。在所有的实验中，动物被随机分配到每个实验组，通过给它们数字，并使用Excel软件挑选出随机的结果。在每次测试中，实验单位都是一只单独的老鼠。

实验小鼠方案的实施遵循了Iztacala UNAM下属机构Estudios Superiores的动物和伦理审查委员会，该委员会批准了方案编号为CE/FESI/092017/1206和CE/FESI/012020/1345。

2.4。c . procera甲醇提取物

提取物c . procera从脱水树皮(973 g)经甲醇(2.0 L)在室温下浸渍得到。过滤后，溶剂在减压下蒸发，生成甲醇提液。树皮产量为29% (282.26 g)。

2.5。的急性毒性c . procera甲醇提取物

为了评价提取物的毒性，如通过OECD [在协议423所述进行急性毒性试验17]。In summary, six female BALB/c mice weighing 25 g were used. Before the administration of the extract, the mice were fasted for four hours. The extract was administered through an orogastric tube at a dose of 2,000 mg/kg body weight, and food was withheld for an additional 2 hours.

After dosing, mice were individually observed during the first 30 min and for the next four hours. Subsequently, observations were made daily for 14 days. Observation and registering of toxicity signs included changes in weight, skin, fur, eyes, mucosal membranes, respiratory system, nervous system, motor activity, and behavior. Signs such as shaking, convulsion, salivation, diarrhea, diuresis, lethargy, sleep, coma, anesthesia, piloerection, and irritability were monitored during the experiment [17]。

直到研究结束的第14天，动物们每周都要称两次体重。在小鼠被处死后，进行大尸检，观察其大脑、心脏、肺、肾脏、肾上腺、胃和脾脏是否有损伤或任何毒性迹象。

2.6。实验性结肠炎

结肠炎是通过4％DSS的饮水给药引起。简单地说，适应一周后，小鼠随机分配（ ）以下实验组：对照（未处理的;无DSS），DSS（饮用4％DSS加100 μ的盐溶液，每日插管）和DSS +提取物L（饮用4％DSS加100 μL的甲烷萃取物c . procera每日空心）。Doses of the extract were 200 mg/kg mouse body weight.

在重量，大便稠度和血液损失每天进行测定。这些参数进行评分，以确定疾病活动指数（DAI）。根据其严重程度的评分被分配如下：重量变化（0：<1％，1：1-5％，2：5-10％，3：10-15％，或4：> 15％），血（0：阴性，2：阳性，或4：总出血），和粪便稠度（0：正常，2：软便，或4：腹泻）。当DAI得分为最大（12），在第10天，对小鼠实施安乐死以不可思议地，使用CO₂室。血液通过心脏穿刺（≈700收集 μ每只小鼠L）并离心以分离血清。紧接着，血清保持在-20℃直至使用。

2.7。组织学和组织病理学分析

安乐死和血液样品的收集后，将小鼠的腹侧被曝光，并做出了切口以进入腹腔。精确的切割是在盲肠的基极与在肛门的底部制成。肠轻轻用冷PBS清洗，然后用电子游标卡尺测量。

组织学分析采用10%福尔马林固定结肠组织，石蜡包埋。组织样本(5μ米厚）中制备，并通过苏木精和伊红（的常规方法染色的H＆E）。

组织病理学分析由和检查者在事先不了解实验程序的情况下进行。根据分析参数的严重程度评分:白细胞浸润(0:无;1:轻微;2:温和;3:严重)，地穴损坏(0:无;1:基底三分损伤;2:基底三分之二受损;3:全隐窝及上皮细胞丢失，损伤程度(0:无;1:粘膜层;2:黏膜下层层; 3: muscle layer).

2.8。炎性细胞因子的测定

血清IL-1水平β，TNF-α,干扰素γ使用Bio-Plex Pro小鼠细胞因子8-Plex面板根据制造商的方案进行测定。

2.9。测定抗氧化酶活性

超氧化物歧化酶（SOD），过氧化氢酶（CAT），和谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）活性的酶活性的结肠组织样品中进行测定。After colon tissues were washed with saline solution, a sample from the distant colon (2 cm in length) was taken and homogenized in phosphate buffer using a Bullet Blender (Next Advance, NY, USA). Homogenates were centrifuged (10,000 × g, 15 min, 4°C), and the supernatants were collected for the tests.

使用由测定试剂盒（Cayman Chemical公司公司）如先前所描述所提供的方法测定SOD，CAT，，GPx的酶活性。

2.10。髓过氧化物酶活性的测定

使用OxySelect™髓过氧化物酶活性测定试剂盒(Cell Biolabs, Inc.)测定肠组织匀浆中的MPO活性。(美国加州圣地亚哥)。组织样本在匀浆前用冷无菌的1X PBS洗涤，以从血液中去除MPO。大约,100毫克的组织1 - 2毫升的冷1 x PBS, pH值6.0包含0.5% HTAB(5%溴化hexadecyltrimethylammonium PBS)均质使用子弹搅拌机均质器(下推进,纽约,美国),和匀浆离心机在10000 g×15分钟在4°C。收集上清液测定MPO活性。

2.11。脂质过氧化测定tbar

Colon tissue samples (~100 mg each) were homogenized in 250 μL的RIPA缓冲液(25 mM Tris-HCl pH 7.6, 150 mM NaCl, 1% NP-40, 1%脱氧胆酸，0.1%十二烷基硫酸钠)冰上。匀浆于4℃，10000×g离心10 min，上清检测。

2.12。的甲醇提取物的抗氧化活性c . procera

的甲醇提取物的抗氧化活性c . procera如Okusa等人所述，采用DPPH法测定。[18]。提取物的供电子量由溶解在甲醇中的紫色DPPH溶液的漂白计算。九十六个孔ELISA板填充有提取物浓度范围从1至100 μ克/毫升和100年μ中号DPPH溶液[4]。以槲皮素为对照，以相同浓度的提取物作为对照。37℃暗室孵育30分钟后，ELISA SLT光谱在517 nm处测定吸光度。

抗氧化活性值由下式确定:

浓度导致50%的抑制(SC₅₀)是用图形确定的。

2.13。总酚类和黄酮类含量

使用福林 - 乔卡梯奥氏试剂总酚含量的提取物中的浓度进行评价，如通过Das等人提及。[19]。

使用氯化铝比色法通过Ramamoorthy [先前所描述的，测定提取物中的总黄酮含量的浓度20.]。

2.14。用HPLC-MS进行化学成分分析

该chromatographic separation was accomplished using a HPLC (Infinity Series 1200, Agilent Technologies, Germany) equipped with a Kinetex 2.6 u, C18 100 Å column ( ）（PHENOMENEX，USA）。该柱温度保持在25℃。该following gradient program was used, along with a mobile phase consisting of water : aceto-nitrile (90 : 10) with 0.1% formic acid (solvent A) and methanol : acetonitrile (9 : 10) with 0.1% formic acid (solvent B). This initial term for 3 min in an isocratic elution is composed of 100% solvent A followed by 3–11 min: 65% A-35% B; 11–20 min: 55% A-45% B; 20–35 min: 100% B; and 25 min: 100% B, 。该flow rate was 0.2 mL/min, and the injection volume of thec . procera甲醇提取物为20μL(3毫克/毫升)。

使用耦合到的Agilent 6230 TOF有Agilent双ESI源（ESI SG14289023）和质谱亨特Wokstation软件，版本B.05.01，生成5.01.5125.3操作在负电离模式的Agilent 1200 Infinity液相色谱进行HPLC-MS分析。Capillary voltage was 4000 V; dry gas temperature was 250°C; nitrogen was used as the dry gas at a flow rate 6 L/min; nebulizer pressure was 60 psi; fragmentor was 200 V; MS range was 50–1300/; MS acquisition rate was 1 spectrum/s.

所使用的标准是香兰素，黄芩素，杨梅素，染料木素，刺槐素，木犀草素，柚皮素，山奈酚，白杨素，松属素，儿茶素，儿茶酚，柚皮苷，槲皮素，咖啡因和芹菜素。

3.结果

3.1。的甲醇提取物C。procera没有表现出急性经口毒性

首先，我们测定了我们的甲烷提取液的可能毒性c . procera在年轻的成年老鼠身上。在急性毒性研究中，甲醇提取物c . proceraat a dose of 2000 mg/kg, which is the highest dose recommended by the OECD in a standard study, did not produce any mortality or signs of toxicity over the observation period. Mice receiving the methanolic extract ofc . procera14天没有显示出毒性（例如，在总重量或行为变化）的任何迹象，也没有小鼠安乐死后剖检过程中器官观察到的任何病理学发现（数据未显示）。因此，口服LD₅₀of the extract in female BALB/c mice is higher than 2000 mg/kg b.w., and according to this protocol, the extract can be classified in the less severe or “unclassified” category.

3.2。的甲醇提取物c . proceraDSS诱导的结肠炎时提高成活率

正如所料，DSS组显示体重减轻超过15％，腹泻和由于结肠炎的严重性出血;暴露后DSS的14天，100％的动物死于结肠炎。与此相反，DSS +提取物组显示更少的重量损失和提高到50％，直到DSS曝光后的实验（25天）结束时的存活率（图1）。

3.3。给药的甲醇提取物c . procera减少DSS诱导的结肠炎的严重性

重量损失为存在于与DSS给药两组。然而，开始第5天，此损失显著的DSS组中增加，并且一直持续到试验结束，而DSS +提取物组中，体重损失是较不严重（图图2（a））。除了减肥，对DSS +提取物组表现出轻微的直肠出血和大便性状一些损失，而DSS组提出大量出血和腹泻开始在第7天后。的DAI，其为包括体重减轻，腹泻或大便稠度和出血的得分计算，是每天测定。DSS（4％）给药已经显著临床改变，包括体重减轻，直肠出血和腹泻的存在相关联，在小鼠21]。而用甲烷提取液处理的小鼠c . procera显示该疾病的严重程度降低，条件是被显着降低的那些相比的DSS组的DAI得分（图图2（b））。

在实验模型中被描述为结肠炎严重程度标志的另一个特征是结肠缩短[22]。所述DSS +提取物组（ ）防止缩短存在于DSS组（ ）;有趣的是，DSS +提取物组不与对照组显著不同（ ）(数据图2（c）和图2（d）），表明的甲醇提取物的保护作用c . procera结肠炎的发展。

3.4。的甲醇提取物的急性管理c . procera降低了组织病理学得分

相比，其正常形态，当它是众所周知的DSS诱发的小鼠结肠炎的引线到隐窝结构的破坏，上皮细胞层的改变，而在结肠组织的炎症细胞大量浸润[21]。如预期的，对照组不存在损坏或炎性细胞浸润的任何迹象，而DSS组有严重的损坏隐窝和结构的损失。大量炎性细胞存在于粘膜和粘膜下层的层。与所获得的宏观结果是一致的，则DSS +提取物组显示出对架构的丢失保护和炎性细胞在粘膜和粘膜下层的层较不丰富（图3）。

3.5。的甲醇提取物c . procera减少促炎细胞因子水平在溃疡性结肠炎

TNF-α水平升高α,il - 1β,干扰素γ由于免疫细胞的活化是结肠炎的特点，在人类和小鼠。即使暴露在DSS两组小鼠中增加了这三个细胞因子的水平，结果发现，该集团的甲醇提取物处理c . procera与DSS组比较，显示在统计上较低水平( ）这意味着该c . procera提取物对加重炎性细胞因子的产生有预防作用(图)4）。

3.6。该c . procera提取物在降低结肠组织MPO活性水平

MPO是一种酶存在几乎只在嗜中性粒细胞;因此，MPO活性可能是成比例的募集至发炎的结肠嗜中性粒细胞的数量。相应地，管理c . procera甲醇提取物显著DSS诱导的结肠炎，这表明较少的嗜中性粒细胞浸润的粘膜和粘膜下层与DSS组相比时（还原的MPO活性水平图五）。

3.7。该c . procera提取减少氧化应激DSS诱导的结肠炎

如前所述，氧化应激被认为是结肠炎进展和严重程度的关键因素[16]。我们发现，c . procera甲醇提取物含有多酚类化合物，其中黄酮类化合物具有较高的抗氧化活性[23]。与这些结果一致，该提取物具有良好的抗氧化能力（表1）在DPPH还原测定，呈现抗氧化能力（AC₅₀)34.44μ克/毫升，而槲皮素，作为标准，显示出AC₅₀16.34 μ克/毫升(表1）。

暴露于DSS已被证明会导致大量自由基的产生，从而导致氧化应激。SOD、CAT、GPx等抗氧化酶在生物系统对抗自由基攻击的抗氧化保护能力中发挥着基础性和不可缺少的作用[24]。重要的是，c . procera甲醇提取物反转相比，DSS组SOD，CAT，和GPX酶活性的损失（图6）。

此外，c . procera提取物降低了脂质过氧化的最终产物MDA的水平，脂质过氧化被认为是氧化应激导致细胞损伤的标志[25]。综上所述，这些结果表明，给予c . procera提高抗氧化防御系统，以防止氧化损伤，脂质过氧化，并且由该方法产生的随后的损坏，如损坏的膜和细胞蛋白质和核酸的损伤（图6）。

3.8。化学成分分析c . procera根据HPLC甲醇提取物

在甲醇提取物中的化合物，通过比较的类黄酮标准的保留时间和吸收光谱鉴定。这是可能的，以确定白杨素，柚皮素，山柰酚，儿茶素，槲皮素为一体的组合物的一部分C. procer一个甲醇提取物。这些化合物的抗炎或抗氧化活性的书目研究示于表2。

4.讨论

UC是一种慢性炎症性肠病，近年来全球发病率呈上升趋势[33]。目前，传统的UC治疗包括氨基水杨酸盐​​（柳氮磺吡啶或美沙拉秦）和免疫抑制剂（糖皮质激素，硫唑嘌呤和甲氨蝶呤），在长期使用时，其可以产生不利的影响[23]。天然产物及其衍生物因其广泛的治疗作用和较轻的副作用而被推荐为新药研究和开发的来源[10，34]。

在这里,我们测试c . procera，一种药用植物在墨西哥的传统医学胃肠疾病使用的，在DSS诱发的小鼠结肠炎模型，该模型是筛选抗炎和抗氧化作用的有用模型由于在促炎细胞因子的高相似性与人类UC和活性氧物质（ROS）[35]。

首先，我们发现用高剂量的c . procera甲醇提取物并没有表现出任何毒性症状;因此，这c . procera提取物是在第5类或未分类（最低毒性类别）根据OECD程序[17]。这一结果证实了c . procerabark extracts since in previous studies that administered doses of 5000 mg/kg, it was reported that the different extracts ofc . procera在这个剂量下没有毒性[36]，确认它的使用是安全的。

接下来，在这次调查中获得我们的结果显示，有管理c . procera甲醇提取物减少了DSS诱导的结肠炎的严重程度;这种说法是在用显著减少疾病的一些症状，如腹泻，出血，体重减轻程度，这反映在较低的DAI得分值相关联的存活率显着增加的支持。另外，大肠缩短的抑制是低时c . procera给药给大肠癌小鼠。

根据这些结果，显微分析表明c . procera与DSS组比较提取物处理减少至结肠的结构和在肠粘膜炎性浸润和粘膜下层的层的损伤。

这一改善在结肠小鼠接受c . procera甲烷提取液显著抑制了全身促炎细胞因子的水平，包括TNF-α，其在UC，因为它的信令产生不同的促炎效应，如NF-的激活中心作用κB，增强血管生成，和巨噬细胞的活化和效应T细胞[37]，这导致严重的肠组织的损伤。

UC严重性另一个众所周知的标记是MPO活性，这直接关系到中性粒细胞浸润在结肠黏膜和黏膜下层[38]。在这里，我们发现的早期管理c . procera提取显著降低MPO活性，支持的想法，c . procera提取物具有抗炎特性。

结肠组织炎症的增加导致ROS的过量产生和氧化应激的产生，而氧化应激又会对肠细胞造成更多的损伤，促进更多的炎症反应[39]。重要的是，在UC期间，ROS也会造成DNA损伤，并最终导致肿瘤发生。

SOD，CAT及GPX反对ROS破坏酶抗氧化防御的一部分。它们的功能，如抗氧化防御的第一线，是关系到自由基ROS或形成的快速抑制或预防。已经描述的是UC，SOD，CAT的酶活性，和GPX期间被减少[24]。在这项研究中，我们证明了体内管理c . procera与DSS组相比，结肠组织甲醇提取物提高了SOD，CAT和GPx活性，有助于在DSS诱导的结肠炎的严重程度的整体下降。此外，提取物对DPPH的良好的抗氧化能力体外检测。

提取物c . procera显示出富含酚类化合物的化学成分。越来越多的证据证实，酚类化合物，特别是类黄酮，具有很强的抗炎和抗氧化活性体外和体内[40]。此外，据报道，与不同的类黄酮或它们的糖苷治疗显著减少TNBS- UC在结肠黏膜损伤，乙酸 - 和DSS诱导的结肠炎的实验模型。这可以通过不同的机制来解释，包括在肠道菌群的减少和防止氧化应激，上皮屏障功能，降低的免疫细胞应答的保存，并校正了生态失调的[40]。

为了更好地理解的甲醇提取物的化学成分c . procera，采用高效液相色谱法测定黄酮类化合物。大黄素、柚皮素、山奈酚、儿茶素和槲皮素是可以鉴别的化合物。如前所述(表)2），已经表明，所有这些化合物表现出，在其他中，抗氧化剂或抗炎活性[27]。白杨素也能够减少炎性标志物例如MPO活性，TNF-αα水平和NF -κ如果之前给药给dss诱导的结肠炎小鼠，B的激活和转位到细胞核[26]。在一个体外试验中，Caco-2细胞暴露于促炎细胞因子IL-1β有利于生产PGE2的，但是当细胞用白杨素共刺激，炎症的介体等被抑制，并且这种作用归因于减少前列腺素从COX-2活性衍生[41]。在醋酸诱导的结肠炎中，naringenin，我们在提取物中发现的另一种类黄酮，能够通过防止粘液消耗，降低炎性细胞因子如TNF-的水平来减少结肠炎症α，IL-6，和IL-1β以及下调COX-2和iNOS等基因的表达。柚皮苷也表现出抗氧化活性，通过防止UC期间SOD和CAT的活性受损。柚皮苷还能降低脂多糖特异性最终产物，如MDA [28]。

儿茶素和槲皮素是两个重要的黄酮类化合物存在于当前提取物。两个已经被证明通过减少T细胞浸润到肠和促炎细胞因子的产生表达，除了它们的抗氧化活性，以减轻结肠炎症。所有这些数据表明的有利影响c . procera甲醇提取物对dss诱导的结肠炎的作用，至少部分可以解释为树皮中存在的一些多酚类化合物，特别是类黄酮。

因为答:adstringens和c . procera是同一科的成员，黄貂鱼科，由于它们的商业外观，这些植物，像市场上出售的许多其他植物一样，容易掺假[14]。在这项工作中，我们证明了其生物医学和治疗特性c . procera在这个DSS诱发结肠炎模型施加甲醇提取物是非常相似的答:adstringens，我们的工作小组已经研究过了[4]。都C。procera和答:adstringens提取物具有显着的抗氧化和抗炎作用，并大大减少UC严重程度。即使是在它们的化学组成，他们是非常相似的关于酚类及黄酮类化合物目前，虽然其他类型的化学化合物已在其他研究中已经确定，已经出现了这些物种[之间的差异14]。所有上述原因可以解释为什么c . procera树皮在市场上被用来掺假答:adstringens树皮，为什么人们消费不加区分他们的混合物。

5.结论

在最近的研究中，已经表明，抗氧化剂的管理，用另外的抗炎作用，可能是UC的治疗有益。我们证明了c . procera，一种药用植物在墨西哥的传统医学中使用，诱导对DSS诱导的结肠炎的不同有益效果，如UC严重性的改善和抗氧化防御系统的炎症增强的抑制，并且通过这样，氧化损伤和脂质过氧化损伤的减少。因此，植物提取物的无毒性实用，与这里示出的药理学性质一起，鼓励植物的进一步研究;虽然，有必要继续与更多的安全性研究，以验证其临床使用。

数据可用性

用来支持这项研究的结果的数据是可用的，请相应的作者。

的利益冲突

作者声明他们没有利益冲突。

致谢

Mario Rodriguez Canales是国立理工大学(IPN)高等生物学博士项目的博士生，他获得CONACYT (no. 1)的奖学金。575219)。这项工作部分得到了dgpa - papiit - unam [IN210918, 212317，和226519]和国立理工学院的Posgrado调查秘书[SIP-IPN项目编号20196198]的支持。

补充材料

报告在体内实验中，我们指出了点，我们的研究与NC3Rs主动改进设计，分析和发布在动物研究符合。提取物的毒性评估的摄影记录。如通过OECD在协议423的描述进行这种毒性测定法。不被在机关小鼠安乐死后的尸检中观察到的病理表现。提取物的给药前，将小鼠禁食四小时。该extract was administered through an orogastric tube at a dose of 2,000 mg/kg body weight, and food was withheld for an additional 2 hours. Mice receiving the methanolic extract of C. procera for 14 days did not show any signs of toxicity, nor were any pathological findings observed in the organs during the necropsy of mice after euthanasia.（补充材料）

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