拮抗肽专门绑定到第一和第二CCR5和Anti-IL-23p19抗体减少气道炎症的细胞外循环通过抑制IL-23 / Th17信号通路

文摘

哮喘是一种异构的气道慢性炎症性疾病病因复杂,涉及多种细胞和细胞组件。因此,这项研究的目的是探讨拮抗肽的效果和机制,特别是结合CCR5的第一和第二细胞外循环(分别GH和HY肽)和anti-interleukin-23亚基p19 (anti-IL-23p19)气道炎症,从而调解和IL-23 /辅助T 17 (Th17)在哮喘小鼠细胞通路。实验使用BALB / c小鼠哮喘模型是由卵清蛋白(OVA)和处理肽对抗与anti-IL-23p19 CCR5或。哮喘炎症的区段和粘液生产进行评估。此外,支气管肺泡灌洗液(BALF)收集、细胞计数和il - 4水平被ELISA检测。IL-23 / Th17 pathway-related肺组织中的蛋白质和mRNA水平测定,并积极的生产速度Th17细胞在胸腺,脾脏,外周血检测到。治疗组的两个肽和/或anti-IL-23p19显示过敏性炎症和粘液分泌显著减少;IL-23p19表达水平降低、IL-23R IL-17A和乳铁蛋白(LTF);和减少的比例Th17细胞在胸腺,脾脏,和外周血。具体地说,在四个治疗组,anti-IL-23p19 HY肽组表现出积极Th17细胞产量最低。 Our data also showed a significant and positive correlation between CCR5 and IL-23p19 protein expression. These findings suggest that the administration of peptides antagonistic to CCR5 and/or anti-IL-23p19 can reduce airway inflammation in asthmatic mice, most likely through inhibition of the IL-23/Th17 signaling pathway, and the HY peptide can alleviate inflammation not only through the IL-23/Th17 pathway but also through other mechanisms that result in the regulation of inflammation.

1。介绍

哮喘是一种慢性炎症性疾病,其特征是气道炎症,粘液分泌,(AHR)气道高反应和气道重塑1,2]。10年多中心最近的一项研究结果显示,严重或难治性哮喘的发病率不断增加,伴随着不良预后尽管经过多年的标准化治疗(3]。因此,治疗目标的识别与更大的有效性将是重要的临床意义。

先前的研究已经表明,Th1 / Th2平衡是哮喘的发展密切相关4]。干扰素γ(IFN -γ)由Th1细胞能够分泌抑制嗜酸性粒细胞浸润,粘液分泌等病理特征是由抗原Th2细胞及其细胞因子(5]。然而,增加的中性粒细胞数量严重或难治性哮喘气道中观察到(6]。Th1 / Th2平衡理论并不占所有哮喘的机制。因此,IL-23 / Th17信号通路的发现哮喘的免疫调节机制的补充知识,显示相关与吸入糖皮质激素反应很差。IL-23主要是由树突细胞(dc),巨噬细胞,淋巴细胞,内皮细胞;微生物接触至关重要;和参与各种炎性疾病的监管7]。重要的是,不仅IL-23诱导的分泌IL-17 Th17细胞和中性粒细胞的航空公司的招聘也增强了Th2细胞反应和调节炎症反应的嗜酸性粒细胞的参与哮喘(8]。临床研究表明,哮喘病人的血清水平的IL-23气流限制的程度密切相关。此外,实验的结果使用transbronchial严重哮喘患者的活检样本显示,Th17细胞细胞因子,如IL-17A IL-17F IL-21,表达在气道,更高水平的观察中性粒细胞(9]。特别是IL-23由p40亚基的il - 12和p19特定亚基IL-23 [10]。使用小鼠哮喘模型的一项研究显示,IL-23p19-deficient (IL-23p19^{- / -})的小鼠表现出降低气道阻力和减少数量的相关炎症因子IL-23 / Th17轴和IL-23生产降低了DCs (11]。这些发现表明的重要性IL-23 / Th17轴在哮喘的发展。

处理炎症细胞因子是一个关键的目标治疗炎症疾病,和抑制炎症细胞因子分泌是一个潜在的策略来实现这一目标。CCR5是一个重要的趋化因子受体在先天和适应性免疫,主要是表达了DCs,巨噬细胞,淋巴细胞(12]。多项研究表明,CCR5结合其配体引起的刺激,这种受体也扮演着重要的角色在免疫细胞炎症的招聘网站和诱发细胞的分泌介质(13]。目前,CCR5拮抗剂被用来治疗获得性免疫缺陷综合症(艾滋病)、类风湿性关节炎、炎症性肠病和动脉粥样硬化14]。CCR5 OVA-induced哮喘模型的研究^{- / -}老鼠的减少伴随着气道高反应降低il - 4和IL-13水平和BALF中白细胞的数量(15]。因此,CCR5被认为是参与气道炎症反应的调节。

本研究中使用的拮抗肽从噬菌体展示库选择特别是对抗细胞外循环1和循环2 CCR5的16]。以前,我们发现,敌对的肽,特别是结合CCR5的第二个细胞外循环抑制炎性细胞浸润在哮喘小鼠的肺表达下调的TNF -α/ NF -κB通路(17]。然而,潜在的肽对抗CCR5治疗炎性疾病研究很少。因此,探索之间的关系CCR5和IL-23 / Th17通路在哮喘具有十分重要的现实意义的靶向治疗哮喘。

2。材料和方法

2.1。动物

六到八周大的雌性BALB / c小鼠(20 g)从中山大学实验动物中心购买特定的无菌条件下和安置。所有实验动物研究伦理委员会批准的中山大学,中国(iacuc - 2019 - 000097)。

2.2。准备CCR5的拮抗肽

蛋白质的氨基酸序列数据库搜索CCR5的第一和第二细胞外循环,和这些序列是化学合成。3 - 4轮筛选后博士™7噬菌体展示肽库,特定的噬菌体被ELISA主要收集和确认。肽的序列上显示选中的噬菌体GHWKVWL HYIDFRW,和这两个产生积极的结果在一个噬菌体ELISA (16]。拮抗肽专门绑定到第一和第二细胞外循环的CCR5 (GH和HY肽)被GL合成物化学有限公司有限公司(中国上海)95%的纯度。

2.3。哮喘模型和药理干预

哮喘模型制备中描述的一项研究[17]。总之,小鼠致敏与50腹腔内μ卵子的g (V,年级Sigma-Aldrich化学,圣路易斯,密苏里州,美国),乳化在5毫克的氢氧化铝(Al (OH)₃)的总量100μL在0和5,然后与100年的挑战μ12 g卵子的天,13、14、15、16。24小时过去后卵子挑战,老鼠受到进一步的测试。在这项研究中,老鼠被随机分为7组( 老鼠)如下:(1)控制group-mice敏化和挑战磷酸盐(PBS);(2)致敏group-mice与PBS敏化与卵子和挑战;(3)模型group-mice敏化,与卵子的挑战;(4)anti-IL-23p19 group-mice管理100 ng anti-IL-23p19抗体(没有叠氮化钠)(美国eBioscience,圣地亚哥,CA)通过7天连续静脉注射后哮喘模型建立;(5)GH肽治疗组(GH组)小鼠进行管理35毫克/公斤GH通过7天连续静脉注射后哮喘模型建立;(6)HY肽治疗组(HY集团)小鼠进行管理25毫克/公斤HY通过7天连续静脉注射后哮喘模型建立;(7)anti-IL-23p19抗体和HY肽治疗组(anti-IL-23p19 HY集团)小鼠进行管理100 ng anti-IL-23p19通过连续静脉注射7天然后25毫克/公斤重另一个建立哮喘模型后7天。anti-IL-23p19的剂量,GH和HY用于这项研究结果的基础上确定初步实验,涉及的评估行为变化,染色分析气道炎症,炎性细胞的计数BALF的老鼠。

2.4。BALF中细胞的数量

最后治疗后24小时管理,老鼠牺牲,BALF收集通过冲洗三次肺部0.5毫升的PBS通过静脉导管。BALF中细胞总数和自动细胞计数统计。此外,淋巴细胞的数量,嗜酸性粒细胞,中性粒细胞被流式细胞术数。具体来说,细胞表面标记物的表达是评估使用以下荧光dye-conjugated鼠抗体:PE-Cy7-CD45 (eBioscience、圣地亚哥、钙、美国),Alexa 647 - f4/80 (BD生物科学,火花,医学博士,美国),PE-siglecF (BD生物科学、火花、MD)和FITC-Ly6G (eBioscience、圣地亚哥、钙、美国)。数据收集使用FACSCalibur流式细胞分析仪(BD生物科学,火花,医学博士,美国)。

2.5。BALF中il - 4

BALF的上层清液收集,由ELISA检测il - 4水平(研发系统、美国)根据制造商的协议。

2.6。评价炎症和粘液分泌的苏木精和伊红(他)和周期性Acid-Schiff (PAS)染色

24小时与卵子最终挑战后,老鼠都牺牲了,和降低肺放置在4%多聚甲醛,嵌入在石蜡,切成5μ米的部分。沾染了他的部分或不是,80年日食我显微镜下观察(尼康、日本)。此外,炎症评分决定根据支气管周围炎性细胞浸润的程度(18]。粘液分泌过多分数决定根据整个支气管mucus-positive面积的百分比。标准如下(19):0点,整个支气管mucus-positive面积的百分比小于5%;1点- 5 - 25%;3点- 50 - 75%;4点- > 75%。所有幻灯片都检查随机盲法的方式由2个独立的调查。

2.7。实时PCR确定IL-23p19的信使rna表达水平,IL-23R, IL-17A LTF, CCR5

从左上肺组织总RNA提取使用试剂盒试剂(豆类生物有限公司,首先,日本)根据标准协议。互补脱氧核糖核酸样本得到PrimeScript RT主混合(豆类生物公司,首先,日本)和PCR准备使用结核病绿色预混料交货Taq II(豆类生物有限公司,首先,日本)。随后,在LC480存在分析仪器(罗氏、巴塞尔、瑞士)使用以下引物:β-actin-forward GATCAAGATCATTGCTCCTCCTG和反向AGGGTGTAAAA CGCAGCTCA;IL-23p19-forward CAGCAGCTCTCTCGGAATCTC和反向TGG ATACGGGGCACATTATTTTT;IL-23R-forward AGAGACACTGATTTGTGGGA亚美大陆煤层气有限公司和反向GTTCCAGGTGCATGTCATGTT;IL-17A-forward TCAGCGTGT CCAAACACTGAG和反向CGCCAAGGGAGTTAAAGACTT;LTF-forward TGATGCCATGACTCTTGATGGT和反向TCTTTGGTCCCGTAGACTTCAG;和CCR5-forward TTTTCAAGGGTCAGTTCCGAC和反向GGAAGACCATCAT GTTACCCAC。β肌动蛋白是用作内部控制,反应过程如下:在95°C predenaturation 10年代;40个周期95°C的5 s和60°C 32 s;1分钟95°C;为15秒和60°C融化曲线分析。在实验中,2^{- - - - - -ΔΔCt}方法被用来分析mRNA转录的相对水平。

2.8。西方墨点法确定IL-23p19的蛋白表达水平,IL-23R, IL-17A LTF, CCR5

总蛋白提取从右上肺组织里帕,和蛋白质浓度检测使用标准的BCA协议。被热变性的蛋白质电泳,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds - page)。分离蛋白被转移到聚偏二氟乙烯(PVDF)膜。膜被5%的脱脂牛奶在室温下干燥1.5小时和孵化与主抗体(1:1000稀释)一夜之间在4°C。第二天,二次抗体(1:5000稀释)补充道,和膜在室温下培养1小时和洗TBST缓冲区。发射极耦合逻辑图像被获得和使用Hyperfilm G结果分析:盒子XT4系统(Syngene,剑桥,英国)。GAPDH是用作参考蛋白质。IL-23p19, IL-17A, CCR5抗体购自圣克鲁斯生物技术(美国达拉斯,TA)。IL-23R抗体购自热费希尔科学(美国沃尔瑟姆,MA)和LTF抗体购自Abcam(美国Cambridge, MA)。

2.9。积极的生产速度Th17细胞在胸腺,脾脏,外周血由流式细胞术

淋巴细胞在胸腺,脾脏和提取外周血淋巴细胞分离介质和PBS洗。获得的单核细胞( ⁶/毫升)与2孵化μL刺激鸡尾酒(美国eBioscience,圣地亚哥,CA)在RPMI 1640 10%胎牛血清的5%股份有限公司₂并为5小时37°C。与PBS离心法和resuspending后,这些细胞被沾surface-specific Abs (anti-CD3e-APC anti-CD4-FITC,所有从eBioscience购买(美国圣地亚哥,CA))在4°C在黑暗中30分钟。离心法和resuspending PBS后,暂停孵化与固定/透化作用的解决方案(美国BD生物科学、火花、MD)和彩色anti-IL-17A-PE(美国eBioscience,圣地亚哥,CA)在4°C在黑暗中30分钟。收购是FACSCalibur流式细胞分析仪(BD生物科学,火花,医学博士,美国),和FlowJo软件被用于分析。

2.10。CCR5和IL-23p19之间的相关性分析

结果从CCR5的PCR和免疫印迹分析和IL-23p19获得,和皮尔逊相关分析是用来评估CCR5和IL-23p19之间的关系。

2.11。统计分析

SPSS 22.0和GraphPad棱镜6软件被用于分析。测量数据表示为 平均误差(SEM)。单向方差分析(方差分析)应用正态分布的数据集。如果方差分析是很有意义的,至少显著差异(LSD)方法被用来比较组。皮尔森相关测试被用来分析的关系。值小于0.05被认为是具有统计学意义。

3所示。结果

3.1。影响肽CCR5和Anti-IL-23p19马伯小鼠肺组织的病理学和炎症评分

空白的微观观察控制老鼠显示没有或很少在气道炎症细胞,没有气道壁增厚,没有粘液沉积(图1(一))。然而,OVA-sensitized老鼠表现出稍微增加炎症细胞数量和轻微损伤支气管上皮细胞相比控制老鼠(图1 (b))。属于模型组小鼠的观测显示大量的炎症细胞在支气管旁区,粘液分泌过多,增厚的支气管(图1 (c))。管理anti-IL-23p19马伯,GH肽,HY肽或IL-23p19 mAb的HY肽过敏小鼠显著降低肺组织中炎症细胞的浸润而渗透到细胞的数量属于模型组小鼠(数字1 (d)- - - - - -1 (g))。气道炎症的程度明显增加哮喘组与对照组相比(图1 (h))。其他的炎症评分治疗组明显低于模型组(图1)。

3.2。影响肽的CCR5和Anti-IL-23p19马伯粘液分泌的老鼠

如图2(一个),没有或少观察粘液分泌。然而,程度的粘液分泌和杯状细胞增生略增加OVA-sensitized老鼠与控制的老鼠相比(图2 (b))。属于模型组小鼠显示粘液分泌过多,增厚的支气管(图2 (c))。相比之下,奥巴马政府anti-IL-23p19马伯,GH肽,肽,为什么或IL-23p19马伯HY肽对小鼠缓解过敏程度的粘液分泌过多和杯状细胞增生(数字2 (d)- - - - - -2 (g))。粘液分泌过多的分数获得其他治疗组明显低于模型组(图2)。

3.3。肽的CCR5和Anti-IL-23p19马伯微分细胞计数和BALF中il - 4水平

GH肽、肽为什么和anti-IL-23p19马伯可以减少各种炎症细胞和BALF中il - 4的水平。增加总炎症细胞,即淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、BALF中il - 4的模型组BALF中与对照组(图3)。淋巴细胞和嗜酸性粒细胞占主要比例的BALF细胞从敏化和模型组(数字3 (b)和3 (c))。总炎症细胞,细胞的分类,而il - 4水平都降低了GH肽,肽,为什么和anti-IL-23p19组与模型组相比(图3)。

3.4。肽的CCR5的表达和Anti-IL-23p19马伯IL-23p19, IL-23R IL-17A, LTF

IL-23R, IL-23p19 IL-17A, LTF mRNA和蛋白表达水平增加了约115.15倍,13.24倍、71.81倍、14.63倍和1.89倍,1.43倍,2.97倍和4.33倍,分别与对照组相比,模型组(图4)。管理anti-IL-23p19马伯,GH, HY,或anti-IL-23p19马伯HY大大减少IL-23p19的表达,IL-23R, IL-17A, LTF药物干预组与模型组相比(图4),IL-23p19、IL-17A LTF anti-IL-23p19 mRNA表达水平与HY肽组相比明显降低水平在其他三个治疗组(图中找到4(一))。HY肽对模型的管理组诱导IL-23p19最明显的减少,IL-23R, LTF蛋白质表达水平在四个治疗组(图4 (b))。

3.5。影响肽的CCR5和Anti-IL-23p19马伯的数量Th17细胞在哮喘小鼠产生的积极

的数量IL-17-expressing Th17细胞在胸腺,脾脏,外周血中增加过敏组比对照组(图5)。此外,政府anti-IL-23p19马伯,GH, HY,或anti-IL-23p19 HY明显下调的积极产量Th17细胞在胸腺,脾脏,外周血的老鼠与模型组相比。引人注目的是,治疗与anti-IL-23p19 HY肽导致最积极的产量大幅减少Th17细胞在四个治疗组(图5)。

3.6。影响肽CCR5和Anti-IL-23p19马伯CCR5和IL-23p19哮喘小鼠之间的关系

CCR5的mRNA和蛋白水平增加卵子接触后的肺组织。CCR5的表达减少anti-IL-23p19马伯管理后,GH, HY,或anti-IL-23p19马伯HY(数据6(一)和6 (b))。然而,在四个治疗组差异不明显。CCR5蛋白质表达水平和IL-23p19明显和GH组呈正相关,HY集团和anti-IL-23p19 HY集团而不是anti-IL-23p19集团和GH的相关系数,从而透视,和IL-23p19 HY集团是0.790,0.747,和0.799,分别(表1)。

4所示。讨论

免疫网络调节哮喘是非常复杂的。研究表明,IL-23 / Th17信号通路是至关重要的免疫反应在哮喘的发生和发展20.]。这个途径主要是由IL-23激活,也就是产品如DCs和巨噬细胞的抗原呈递细胞。释放IL-23伴随着转化生长因子的释放β(TGF -β),il - 1β、IL-21和il - 6促进天真的CD4细胞的激活⁺T细胞。这些促炎细胞因子主要刺激retinoid-related孤儿核受体γt (RORγt)和信号传感器和转录激活3 (STAT3),导致Th17细胞的分化。随后,Th17细胞分泌IL-17A IL-17F, il - 22生成时,和其他炎性细胞因子,参与免疫反应(21]。

严重哮喘患者的主要病理特征增加IL-17气道炎症细胞因子和嗜中性粒细胞浸润,和Th17-mediated中性粒细胞哮喘患者往往对皮质类固醇治疗(22]。体内实验证实IL-23和Th17细胞不仅参与气道的招募中性粒细胞也在增强Th2-mediated嗜酸性粒细胞的炎症反应(11]。此外,IL-23扮演着重要角色的upregulation过敏反应在哮喘小鼠模型和水平的变化IL-17 Tc17的数量和Th17细胞治疗引起的小鼠anti-IL-23马伯[23]。

在这项研究中,结果表明,敏化和挑战的卵子导致高水平的炎症细胞浸润,包括淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、粘液分泌过多,高表达的小鼠肺组织中il - 4和BALF。一些研究表明,卵巢诱发炎症细胞招聘、粘液分泌过多,在小鼠气道高反应24]。此外,我们的研究结果表明,管理anti-IL-23p19马伯IL-23p19和IL-17A气道的水平下降和降低BALF中炎症细胞的招募,这些研究与上述的研究结果是一致的。因此,卵巢引起的急性哮喘模型在这项研究中,使用和anti-IL-23p19组作为阳性对照组对评估的影响肽对抗CCR5在小鼠哮喘模型气道炎症。

CCR5是一种CC趋化因子受体属于G protein-coupled受体家族,由三个细胞外循环和细胞内循环(25]。报道,骨骨髓来源功能CD4淋巴细胞分化成成熟⁺胸腺中T细胞,然后迁移到二级淋巴器官,如脾和淋巴结。抗原递呈细胞,炎症期间,如DCs、巨噬细胞和单核细胞,表达大量的趋化因子受体,随后迁移到脾脏。细胞因子分泌的抗原递呈细胞功能分化的幼稚T细胞,它可以通过血管壁达到发炎组织(26]。CCR5的迁移起着重要的作用,细胞因子分泌的抗原递呈细胞(27,28]。减少和降低气道高反应可以观察到CCR5炎性细胞浸润^{- / -}老鼠(29日]。此外,它已被证明,DAPTA(一种CCR5拮抗肽)可以有效地表达下调免疫反应通过减少CCR5的表达,IL-17A和其他细胞因子(30.]。此外,在以前的研究中,我们发现政府专门的拮抗肽结合第二个细胞外循环的CCR5减轻哮喘小鼠的肺部炎症反应减少促炎因子TNF的表达α(17]。因此,抑制促炎细胞因子根据绑定的CCR5拮抗剂可能是一个有吸引力的策略治疗哮喘和其他潜在的炎性疾病。

在目前的研究中,治疗与GH或重显著降低小鼠哮喘模型中炎症细胞的数量,减少了损伤气道上皮细胞和粘液的分泌,和淋巴细胞的数量减少,嗜酸性粒细胞,中性粒细胞在BALF中。此外,GH,管理的衔接,或anti-IL-23p19 mAb的水平减少IL-23 / Th17 pathway-related细胞因子(IL-23p19、IL-23R IL-17A)和LTF,它主要由中性粒细胞在肺组织,这一发现表明,GH、衔接和anti-IL-23p19马伯IL-23 / Th17通路起到抑制作用。进一步分析GH的效果和机制或途径,为什么我们转移我们的注意力Th17的分布。结果表明,积极的Th17生产速度明显降低不仅在脾脏和胸腺,而且在治疗后哮喘小鼠的外周血GH, HY,或anti-IL-23p19马伯,这一发现表明,拮抗肽治疗和/或anti-IL-23p19马伯的水平降低肺部IL-17A减少Th17细胞在淋巴循环的数量。然而,CCR5的确切机制通过拮抗肽减少Th17细胞群还有待探索。结果表明,生产的CCR5哮喘反应是减少与GH治疗后,HY, anti-IL-23p19马伯,表明拮抗肽和anti-IL-23p19马伯直接或间接抑制CCR5的表达。此外,皮尔森相关分析的CCR5和IL-23p19蛋白质表达水平GH,表现出极显著正相关,为什么和anti-IL-23p19 HY集团但不是anti-IL-23p19组,这表明CCR5参与IL-23 / Th17通路的调控。此外,一些研究已经表明,DCs在哮喘的发病机制中发挥重要作用,因为IL-23 Th17-induction因素,通常是由DCs和巨噬细胞,在天真的CD4足以诱发IL-17A生产⁺T细胞(31日]。因此,CCR5抑制DC函数的调制,包括IL-23生产,可能的机制,通过多数Th17由GH抑制或HY肽。我们的研究也表明,政府的GH或者HY肽可能减少哮喘小鼠的炎症反应通过抑制CCR5的能力调节IL-23 / Th17通路。

本研究发现显著差异水平的IL-23 / Th17 pathway-related蛋白质(IL-23p19、IL-23R LTF) GH管理或HY肽后,这表明HY肽发挥更强的downregulatory影响炎症与GH肽的影响相比,但没有发现显著差异在mRNA水平。先前的研究表明,CCR5的天然配体,如咆哮,MIP-1a, MIP-1β施加特定的生物效应,绑定的N末端或CCR5的第二个细胞外循环32,33]。事实上,更大的样本量是需要取得具体成果。此外,HY肽的差别表现出更大的影响对这些炎症反应的影响与anti-IL-23p19 pathway-related水平的蛋白质,这一发现表明,CCR5施加强大的抗炎效果的拮抗肽对气道炎症性疾病。目前,一个好的治疗效果已经观察到在治疗牛皮癣和克罗恩病的情况下针对IL-23 [34,35]。这项研究还提供了实验依据使用CCR5的拮抗肽靶向治疗哮喘。具体来说,GH和衔接是廉价的,短肽化合物表现出高特异性、高亲和力、高安全,使他们伟大的临床应用前景16]。

此外,我们的研究发现积极的产量减少Th17细胞在脾脏和哮喘小鼠的外周血和anti-IL-23p19马伯的影响大于为什么可以同其他的治疗方法。值得注意的是,anti-IL-23p19马伯干预导致的封锁IL-23 / Th17通路,和政府的anti-IL-23p19 HY诱导更明显降低Th17响应与治疗相比anti-IL-23p19马伯独自一人。因此,HY肽不仅可以减轻炎症通过上述IL-23 / Th17通路还其他的监管机制,可能导致炎症。一项研究由歌曲等。36]表明,GH和HY肽能抑制炎症细胞的浸润与结肠炎大鼠通过调节NF -κB /肿瘤坏死因子-α信号通路。此外,政府对哮喘小鼠HY肽的调节autophagy-related基因的表达水平,抑制炎症反应37]。这些研究进一步支持解释HY肽可能通过多种机制调节免疫反应。

5。结论

总之,拮抗肽专门绑定到第一和第二细胞外循环的CCR5抑制哮喘小鼠气道炎症的发展,可能通过抑制CCR5-mediated IL-23 / Th17信号通路,和各种各样的机制可能是负责HY peptide-mediated抑制气道炎症。这项研究还强调,CCR5的抑制支气管哮喘可能是一个有前途的研究方向和治疗策略。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

作者的贡献

英利张Rongrong梁,Wenqian史进行了实验。在统计分析Aicen谢了。华融黄和Yingqiang钟设计项目和写这手稿。英利张和Rongrong梁的贡献同样这项工作。

确认

本研究在广东省自然科学基金的支持下,中国(2016年2015 a030313027 a030313343)和广州科技计划重点项目(201803010004)。

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