文摘

遗传病的疾病(BD)是一种autoinflammatory的疾病,会导致生活——和sight-threating并发症。树突状细胞(dc)是最有效的抗原递呈细胞,可以调节多个炎症通路。本研究的目的是调查协会的DC刺激分子与BD CD83。频率costimulatory分子表达DCs在外周血白细胞(PBL)是衡量流式细胞术(流式细胞仪)。症状的严重性HSV-1-induced BD小鼠症状也得到了评估。CD83-positive细胞频率显著增加小鼠表现出双相障碍的症状,而无症状的老鼠。Abatacept CD80/86拦截器,大大减少CD83-positive细胞的频率以时间和剂量依赖性的方式。双相障碍症状的老鼠接受Abatacept显示逐渐减少症状的严重程度评分。腹腔内注射的CD83 siRNA显著降低CD83-positive细胞的频率在PBL和腹膜巨噬细胞。CD83 siRNA注射后,双相障碍小鼠的症状改善,疾病严重程度下降。中止CD83 siRNA恶化症状虽然readministration CD83 siRNA再次改进的双相障碍小鼠的症状。 These results clearly indicate the involvement of CD83-expressing cells in the inflammatory symptoms of BD. Therefore, CD83 might be useful as a therapeutic target for BD.

1。介绍

遗传病的疾病(BD)是一种多系统autoinflammatory疾病与炎症病变的主要临床特征会影响皮肤,关节,眼睛,肠道,生殖器区域,和神经系统。双相障碍的确切病因目前不清楚。然而,几个因素包括环境、遗传、感染和/或免疫失调有被认为是可能的触发因素。单纯疱疹病毒(HSV)被认为是在BD的触发因素之一。HSV病毒DNA粒子已确定在眼部液体1),外周血白细胞(2],唾液[3),和皮肤损伤4),双相障碍患者。血清anti-HSV-1抗体(2双相障碍患者的)也被确认。HSV-1-induced模型小鼠显示相似的临床表现,包括生殖器溃疡、口腔溃疡、皮肤病变、眼部病变,关节炎、肠道溃疡(5]。在免疫调节实验,评估HSV-1-induced小鼠模型非常类似于人类的双相障碍疾病模式(6]。

树突状细胞(dc)是最强大的抗原递呈细胞(apc)可以有效地连接先天和适应性免疫系统。由于其独特的能力,诱导T淋巴细胞的活化和分化,许多研究者关注DC-mediated免疫反应。DCs参与一些自身免疫性疾病,如炎症性肠病(IBD) (7),类风湿性关节炎(RA) (8),葡萄膜炎(9),克罗恩病(CD) [10]。在抗原捕获、DCs进行一个成熟的过程。成熟的DCs然后获得分化幼稚T细胞的能力,B细胞和NK细胞。他们也表达细胞因子(11]。成熟期间,DCs积累肽和上调表达水平的主要组织相容性复合体(MHC)和costimulatory分子CD40、CD80、CD83、CD86 [12]。costimulatory分子、CD83免疫反应中起着重要的作用除了它的功能作为一个激活标记(13]。HSV-1-infected DCs会导致退化CD83感染后6到8小时内(14]。他们也导致抑制CD83 mRNA的运输,从而显著抑制DC-mediated T淋巴细胞激活(15]。CD83 upregulation和选择性表达,加上CD80和CD86建议CD83在免疫反应的一个重要的角色16]。CD83是膜整合蛋白(17),而可溶性CD83 (sCD83)是由细胞表面的释放CD83分子(18]。在等离子体和发现了高浓度的sCD83滑膜液的RA患者(19,20.)和血液恶性肿瘤患者(21]。虽然CD83配体的功能(CD83L)仍有争议,相信当他们刺激与CD3和CD28、激活T细胞可以表达CD83L表明CD83L可能在免疫反应函数T细胞被激活时的存在costimulatory CD83 apc[提供的信号22]。CD83特定角色的免疫反应的规定还不是众所周知的。然而,操纵CD83途径提出了发展疗法治疗炎症和自身免疫性疾病(18]。阻塞CD83函数或其配体在BD尚未证实。因此,本研究的目的是确定是否阻塞CD83函数可能会影响双相障碍症状小鼠模型。

2。材料和方法

2.1。动物实验

癌症研究协会(ICR) (CD1)在4到5周大鼠感染HSV 1型( 点状单元(pfu) /毫升,F株)生长在维洛细胞如前所述5]。病毒接种10天进行两次间隔16周的观察。老鼠繁殖温度和光控传统房间(20 - 22°C, 12 h光/暗周期)。这些老鼠随意获得食物和水。在实验期间,动物被密切观察和拍照。动物是依照协议批准的亚州大学动物保健和使用委员会制度(批准文号:amc - 2018 - 0017)。

2.2。BD鼠标1型单纯疱疹病毒引起的症状

执行病毒接种使用公布的过程(5]。简而言之,耳垂的老鼠挠针和接种20μL ( 1型单纯疱疹病毒(F株),生长在维洛细胞。病毒接种两次进行为期10天的间隔。对病毒接种小鼠肌内注射安乐死的后腿与氯胺酮和甲苯噻嗪鸡尾酒(15毫克/公斤氯胺酮和10毫克/公斤甲苯噻嗪)。几个症状观察HSV接种后在小鼠体内。HSV-inoculated老鼠的双相障碍的发生率为15%,包括口腔溃疡、生殖器溃疡、红斑、皮肤脓疱、皮肤溃疡、关节炎、腹泻,红眼,失去平衡,面部肿胀。口腔、生殖器、皮肤溃疡和眼部症状归类为主要症状,而关节炎、肠道溃疡,和神经系统的参与被认为是轻微的症状。老鼠与一个或多个主要症状和一个或多个次要症状被划分BD。每个症状评分。的和不同症状的评分是用来确定BD使用双相障碍的严重程度当前活动从2006年由国际社会为遗传病的疾病(http://medhealth.leeds.ac.uk/download/910/behcetsdiseaseactivityform)。丧失的症状或减少病灶大小超过20%的双相障碍改善的指标。对照组与HSV接种。无症状的健康小鼠作为BD正常(BDN)如前所述5]。

2.3。药物的老鼠

正常小鼠,1或2毫克Abatacept每天管理通过腹腔内注射连续3天。BD老鼠,2毫克Abatacept /鼠标应用3次,为期3天的间隔。作为对照组,PBS是正常或BD老鼠。CD83 siRNA混合了jetPEI转染试剂(Polyplus-transfection,伊利柯克奇,法国)和用途在活的有机体内转染。核应用的老鼠,0.5或1.0μ摩尔的CD83 siRNA于200年解散μL 5%的葡萄糖溶液,与转染试剂jetPEI混合,腹腔内注入正常或双相障碍小鼠4次,为期3天的间隔。控制,争夺核应用于正常和BD CD83 siRNA注入老鼠遵循同样的步骤。在2 h最后注射后,老鼠牺牲。从外周血白细胞分离(PBL)和腹腔巨噬细胞被孤立的进行进一步分析。

2.4。制备的核

CD83核与下面的感觉和反义寡核苷酸序列被集成的DNA合成技术(美国IA珊瑚镇)。合成CD83 siRNA序列如下:5 - - - - - -GUGCUUUUCAGUCAUCUACAAGCTA-3和3 - - - - - -CUCACGAAAAGUCAGUAGAUGUUCGAU-5 。注入老鼠,CD83 siRNA混合转染试剂(23]。

2.5。代的鼠标来源于DCs的骨头

骨骨髓来源树突状细胞(BMDCs)获得了股骨的老鼠,和红细胞(RBC)红细胞裂解的ACK处理解决方案。这些细胞培养在RPMI媒体(美国纽约Gibco,大岛)补充10%胎牛血清,2 ng / mL重组小鼠il - 4(美国新泽西州ProSpec)和20 ng / mL重组小鼠gm - csf(美国新泽西州ProSpec)。培养基是改变了3和6天后文化。新媒介和细胞因子(rmIL-4和rmGM-CSF)被添加后冲洗细胞。细胞收获实验9天。

2.6。核转染

骨骨髓来源的细胞( )被播种到6-well盘子2毫升的培养基和细胞因子(rmIL-4和rmGM-CSF)处理。进行使用jetPEI核转染试剂根据制造商的指示。细胞转染的100 ng / CD83核(DNA技术集成、钙、美国)和小干扰rna (Bioneer、大田、韩国)争夺细胞播种后第三天。核治疗三次为期3天的间隔。最终的治疗后,2小时后,细胞收获进行进一步分析。

2.7。流仪结果

PBL和腹腔巨噬细胞的老鼠用磷酸盐(PBS)和沾PerCP-eFluor-labeled anti-mouse CD40, eFluor 660 -标记anti-mouse CD83、PE-Cyanine7-labeled anti-mouse CD80、和FITC-labeled anti-mouse CD86(美国eBioscience,圣地亚哥,CA)在4°C在黑暗中30分钟。识别的调节性T细胞(Treg细胞),孤立的PBL是沾PE-Cyanine7-labeled anti-mouse CD4和PE-labeled anti-mouse CD25 30分钟在黑暗中在4°C。anti-mouse Foxp3在细胞核内的发现Foxp3的染色工具(eBioscience、圣地亚哥、钙、美国),根据制造商的指示。简单,细胞被固定使用修复/烫缓冲,洗后1 x透化作用缓冲区,孵化了PE-Cyanine5-labeled anti-mouse Foxp3 Ab 30分钟在黑暗中在4°C。染色细胞的流式细胞仪分析咏叹调三世流式细胞分析仪(美国加利福尼亚州圣何塞,正欲)≥10000的细胞。

2.8。测量细胞因子的酶联免疫吸附试验(ELISA)

每个鼠标牺牲后,血液从心脏和收集血清进行了分析使用一个商业酶联免疫试剂盒IL-17水平(研发系统,明尼阿波利斯,美国)。ELISA进行根据制造商的指示。吸光度值的样本在波长450 nm使用Bio-Rad模型170 - 6850标仪(美国大力神,CA)。ELISA是重复三次重复的井。

2.9。形态学观察下透射电子显微镜(TEM)

细胞形态学改变透射电子显微镜下观察。培养DCs与Karnovsky固定的固定剂解决方案2 h在室温和后缀与四氧化锇了30分钟。固定细胞被洗甲次砷酸盐缓冲,在分级乙醇脱水,嵌入在环氧树脂混合物,孵化60°C 48 h。Epon集团与一个超微切片机(Reichert-Jung,拜罗伊特,德国),醋酸铀和柠檬酸铅染色,然后在电子显微镜下观察(蔡司、从、德国)。

2.10。统计分析

所有数据被表示为 。统计实验组之间的差异取决于学生的 - - - - - -测试和Bonferroni调整。统计分析进行了使用MedCalc 9.3.0.0®版本。(MedCalc,奥斯坦德,比利时)。统计显著性被认为是当值小于0.05。

3所示。结果

3.1。频率的CD40、CD83、CD80、和CD86-Expressing细胞在正常,HSV-Infected, BD正常(BDN)和BD老鼠

频率的DC-expressing costimulatory分子CD40 + CD83 +, CD80 +和CD86 +细胞流式细胞仪分析了PBL的老鼠。频率BD CD83 +细胞的小鼠( )在BDN相比显著升高( )老鼠( vs。 , ),HSV-infected老鼠( )( , ),和控制老鼠( )( , )(图1 (b))。然而,频率CD86 PBL的BD +细胞小鼠显著下调相比健康控制老鼠( vs。 , )(图1 (d))。频率HSV-infected CD86 +细胞也表达下调的老鼠( vs。 , )和BDN老鼠( vs。 , )相比之下,控制老鼠。频率BDN CD80 +细胞的小鼠表达下调相比在控制老鼠( vs。 , )(图1 (c))。然而,没有统计上的显著差异的频率CD40 +细胞组间(图1(一))。图1 (e)直方图显示代表CD83 +细胞和CD86 +细胞在正常健康的控制,HSV, BDN和BD老鼠(表明老鼠的数量用于分析)。了解人口PBL细胞更相关的表达CD83,人口是封闭的,CD83 +细胞进行了分析。在粒细胞,CD83 +细胞的频率是在双相障碍小鼠与正常相比明显不同( vs。 , )和BDN老鼠( vs。 , )。在淋巴细胞和单核细胞,CD83 +细胞的频率没有显著不同BD和对照组(无花果。S1补充的数据)。

3.2。管理Abatacept抑制CD83 +细胞频率在正常小鼠剂量和时间的方式,提高双相障碍的症状

Abatacept融合蛋白的细胞外CTLA-4域和免疫球蛋白Fc部分称为CD80/86拦截器24]。Abatacept治疗2毫克/鼠标,一天一次连续3天,正常小鼠显著降低频率的CD40 +细胞( vs。 , ),CD83 +细胞( vs。 , ),CD80 +细胞( vs。 , ),和CD86 +细胞( vs。 , )(数据2(一个)- - - - - -2 (d)在PBL的正常小鼠相比,控制。CD83 +细胞频率也减少Abatacept治疗后时间的方式从第一天到第三天( vs。 , )(图2 (e))。GC7 (N1-guanyl-1 7-diaminoheptane) hypusine形成的抑制剂,也称为抑制剂CD83 [15),是用于治疗正常小鼠是否GC7可以减少CD83 +细胞频率。结果表明,没有显著差异在CD83 +细胞频率之间前后GC7治疗(图。S2补充的数据)。CD40 +细胞的频率( vs。 , )和CD83 +细胞( vs。 , )BD明显减少小鼠接受Abatacept参与相比,双相障碍小鼠(数据吗2 (f)和2 (g))。然而,CD86 +细胞的频率( vs。 , )增加与Abatacept BD治疗后小鼠相比在摘要控制双相障碍小鼠(图2(我))。频率的CD80 +细胞( vs。 , )治疗后没有显著改变Abatacept(图2 (h))。

3.3。频率Abatacept-Treated BD调节性T细胞的老鼠

CD4 + CD25 + Foxp3 +调节性T细胞(Treg)分析流式细胞术分析。频率的CD4 + T细胞在BD老鼠相比显著下调BDN老鼠( vs。 , )。他们Abatacept治疗后略有升高(之前和之后的治疗: vs。 , )(图2(米))。Foxp3 +细胞的频率更比BDN BD老鼠老鼠表达下调( vs。 , )。他们被Abatacept治疗轻微但不显著增加(之前和之后的治疗: vs。 , )(图2 (o))。频率的BD CD4 + Foxp3 +细胞明显减少小鼠相比BDN老鼠( vs。 , )(图2 (p))。CD4 + CD25 +细胞的频率也低比BDN BD老鼠老鼠( vs。 , )(图2(右))。频率的CD4 + CD25 + Foxp3 + Treg细胞中表达下调BD老鼠相比BDN老鼠。然而,这样的差异没有统计学意义(图2(年代))。

3.4。Abatacept治疗降低了疾病严重程度评分和改善小鼠双相障碍症状

确定Abatacept可以管理双相障碍症状,2毫克Abatacept是双相障碍小鼠腹腔注射3次为期两天的间隔和双相障碍症状跟踪了一个星期。只有PBS注入BD老鼠控制。Abatacept-treated BD老鼠的严重程度评分明显下降,治疗后一周接受pbs BD的老鼠相比( vs。 , )(图2 (j))。图2 (k)显示双相障碍症状的变化Abatacept治疗后1周。图2(左)直方图显示代表CD83 +和CD86 +细胞在正常,BD, Abatacept-treated BD老鼠。

3.5。小干扰rna抑制CD83 CD83 +细胞频率在正常小鼠

CD83 siRNA是用于治疗正常小鼠压制CD83的表面表达。频率CD83 +细胞用流式细胞仪分析。小干扰rna正常小鼠腹腔内治疗CD83 CD83 +细胞频率减少腹膜巨噬细胞( vs。 , )在PBL ( vs。 , )(图3 (b)小干扰rna治疗组)与争夺。小干扰rna治疗也减少CD80 CD83 +细胞频率PBL ( vs。 , )相比之下,小干扰rna治疗组(图的争夺3 (c))。没有明显差异中CD40 +和CD86在PBL +细胞和腹膜巨噬细胞。

3.6。CD83 siRNA治疗影响双相障碍症状和降低小鼠的疾病严重程度评分

CD83 +细胞的频率在BD老鼠CD83对待核测量通过流式细胞仪分析。腹腔内注射的CD83 siRNA 0.5μ摩尔/鼠标( vs。 , )和1μ摩尔/鼠标( vs。 , )BD老鼠明显减少腹膜巨噬细胞CD83 +细胞的频率,而注入小干扰rna(图与争夺3 (f))。在PBL, 0.5μ摩尔( vs。 , )和1μmol-treated组( vs。 , )显示较低的频率相比CD83 +细胞争夺siRNA-treated组(图3 (f))。频率的CD40在腹膜巨噬细胞中表达下调0.5 +细胞μ摩尔( vs , )和1μ摩尔( vs , )CD83 siRNA-treated BD老鼠相比争夺siRNA-treated对照组(图3 (e))。他们还减少了PBL的1μ摩尔CD83 siRNA-treated组相比争夺siRNA-treated控制( vs。 , )(图3 (e))。频率CD86 +腹膜巨噬细胞细胞的1μ摩尔CD83 siRNA-treated BD老鼠的相比也减少了争夺siRNA-treated对照组( vs。 , ),尽管PBL(图中没有发现显著差异3 (h))。频率的CD80 PBL在0.5 +细胞μ摩尔( vs。 , )和1μ摩尔( vs。 , )CD83 siRNA-treated组相比差别也显示对这些基因在争夺siRNA-treated对照组(图3 (g))。在腹膜巨噬细胞,1μmol-treated组表现出较低的CD80 +细胞频率比0.5μmol-treated集团( vs。 , )(图3 (g))。CD83 siRNA-treated双相障碍症状的老鼠表现出改善的症状(图3(我))。疾病严重程度评分也显著降低了2周后( vs。 , )(图3 (j))。停药的治疗增加了疾病严重程度评分和恶化的症状。再处理再次改进,减少了疾病的严重程度评分(图3 (j))。图3 (k)显示变化的BD CD83 siRNA治疗后症状小鼠和时间间隔。图3(左)直方图显示代表CD83 +细胞BD老鼠CD83 siRNA处理。

3.7。调节性T细胞的频率CD83 siRNA-Treated BD老鼠

频率的CD4 + Foxp3 + CD25 + Foxp3 +, CD4 + CD25 +, CD4 + CD25 + Foxp3 + Treg细胞流式细胞仪进行了分析。频率的CD4 + T细胞在BDN BD老鼠相比下调小鼠( vs。 , )(图3(米))。频率的CD4 + Foxp3 + CD25 + Foxp3 +细胞在BD老鼠相比略有下降BDN老鼠(CD4 + Foxp3 +: vs。 , ;CD25 + Foxp3 +: vs。 , )(数据3 (p)和3(问))。频率的CD4 + CD25 + Foxp3 + Treg细胞1之间是相似的μ摩尔CD83 siRNA-treated BD老鼠和BD控制( vs。 , )(图3(年代))。

3.8。小干扰rna治疗会使CD83 IL-17 BD小鼠的血浆水平

BD的几项研究已经表明,显著增加血清IL-17活性感染或复发的指标(25,26]。确定CD83 siRNA可提高双相障碍的症状表达下调IL-17,等离子体IL-17水平测量CD83 siRNA-treated BD老鼠ELISA。IL-17水平下调在CD83 siRNA-treated BD小鼠症状( )老鼠相比,在参与BD ( )( )(图4)。这一结果表明,抑制CD83对BD具有保护作用。

3.9。小干扰rna抑制CD83 CD83 +细胞频率和调节树突的形态在培养的树突细胞

CD83 siRNA被用于治疗骨骨髓来源树突状细胞阐明CD83 siRNA能否抑制CD83在体外树突状细胞的文化。频率CD83 +细胞用流式细胞仪分析。CD83 siRNA显著下降的频率CD83 +细胞与争夺siRNA相比治疗组( vs。 , )(图5 (b))。没有明显差异观察组中其他costimulatory分子(数字5(一个),5 (c),5 (d))。通过透射电子显微镜,树突培养树突状细胞的质膜被证明是减少CD83 siRNA-treated组相比,那些参与BD或争夺siRNA-treated BD(图组5 (e))。胞质细胞器的形态是不不同CD83 siRNA -争夺siRNA-treated组,除了液泡;CD83 siRNA-treated树突细胞液泡显示低于争夺siRNA-treated细胞。

4所示。讨论

DCs是主要发起人和前线的细胞免疫应答。它们参与先天免疫和适应性免疫之间的接口。DCs为中央免疫力和外围免疫(27]。costimulatory的信号分子如CD40、CD80 CD83、CD86可以调节dc的成熟28]。增殖蛋白激酶(29日)、信号传感器和催化剂的转录30.)也参与了DCs的成熟。Costimulatory分子受体和配体,可以调节炎症(31日]。其中costimulatory分子对DC成熟,CD83功能分子在DCs和淋巴细胞之间的相互作用。CD83表示为膜结合和可溶性形式(sCD83) [32]。表达的细胞表面CD83调节直流激活。它主要是用来确定dc的成熟或激活(33]。大量CD83-expressing DCs曾被观察到在克罗恩病的患者34]。可溶性CD83治疗可以抑制实验性自身免疫性脑脊髓炎的病理症状(运算单元)35实验性自身免疫性葡萄膜炎(淡)[]和36]。在目前的研究中,频率CD83-expressing PBL表面细胞调节的双相障碍症状的老鼠。这表明,高水平的CD83扮演一个在双相障碍致病作用。

CD80和CD86,也称为DC活化分子,通过CD28刺激T细胞表面。他们提供T细胞激活信号(37,38]。Upregulation CD80和CD86的本构特性损失已被人类疾病和炎症的严重程度相关(31日]。Costimulatory交互CD80和CD86 T细胞所需autoreactive T细胞的激活和诱导关节炎(39]。我们的调查表明,在双相障碍症状的老鼠,CD80的比例略有增加,而CD86的比例减少症状BD老鼠。据报道,直流costimulatory分子CD40可以绑定到它的配体CD40L短暂地表达于T细胞在炎症条件下,表示显著更大的溃疡性结肠炎和克罗恩病(40]。我们发现,在双相障碍症状的老鼠,CD40表达细胞的频率没有显著升高。

GC7 (N1-guanyl-1 7-diaminoheptane)的抑制剂CD83干扰CD83表面表达和抑制DC-mediated T细胞活化的影响的核胞质易位CD83 mRNA (15]。然而,在我们的研究中,在正常小鼠GC7治疗没有任何明显差异CD83抑制。

Abatacept,重组融合蛋白的细胞外CTLA-4域和Fc人类IgG1的地区,可以选择性地调节costimulatory信号CD80 / CD86-CD28 T细胞激活(41,42]。Abatacept显著降低CD83 +细胞剂量和时间的方式在目前的研究。它还表达下调比例的CD40、CD80和CD86在正常小鼠。Abatacept已被批准用于高度活跃的类风湿性关节炎(RA)患者。它可以改善类风湿性关节炎的症状,减少疾病活动和结构损伤的进展41,42]。Abatacept治疗系统性硬皮病小鼠模型是有效预防纤维化(43]。在我们的研究中,治疗有症状的双相障碍小鼠Abatacept显著降低的频率CD83 +和CD40 +细胞。我们还发现Abatacept治疗双相障碍小鼠症状减少了疾病的严重程度和改善症状。Treg细胞发挥重要作用在抑制自身免疫性疾病的炎症。类风湿性关节炎患者治疗Abatacept显示il - 10增加了生产CD4 + CD25-LAG3 + Treg细胞(44]。Abatacept可以降低T细胞凋亡和移植Treg细胞在RA患者的比例45]。增加CD4 + CD25 + Treg细胞与炎性症状改善BD老鼠(46]。在目前的研究中,Abatacept治疗双相障碍小鼠CD4 + T细胞的频率增加和CD25 + Foxp3 +细胞相比,参与控制。这表明,直流costimulatory分子与双相障碍相关症状。

有人建议,CD83 mRNA的抑制传输可以应用于开发治疗自身免疫性疾病(16,47]。防止细胞表面表达CD83可以显著抑制DC-mediated T细胞激活(15]。核被认为是一种有效的药物分子,可以沉默基因与发病有关,特别是在治疗炎症性疾病(48,49]。RNA-induced沉默的siRNA结合复杂(RISC);然后小干扰RNA链乘客离开发起RNA干扰过程的过程中,导致mRNA碎片和退化50,51]。注入CD83 siRNA到正常小鼠显著降低CD83-expressing PBL和腹膜巨噬细胞细胞的比例。此外,CD83 +细胞的频率在腹膜巨噬细胞和PBL的双相障碍症状的老鼠接受CD83 siRNA显著降低。我们还发现双相障碍小鼠接受CD83 siRNA显示频率降低CD40 +腹膜巨噬细胞培养和细胞频率降低CD80 +和CD86 +腹膜巨噬细胞细胞。CD4 + CD25 + Treg细胞能保持自我耐受性和抑制自身免疫反应和upregulation BD CD4 + CD25 + Treg细胞的小鼠与疾病相关改善(46]。BD小鼠接受CD83 siRNA显示明显减少了疾病的严重程度评分,改善症状。然而,中止CD83 siRNA治疗后再次出现恶化的症状改善CD83 siRNA治疗。这清楚地表明,CD83是一个潜在的分子调节双相障碍症状。DCs激活后,在淋巴结未成熟dc可以迁移到,成为成熟的抗原递呈细胞(52]。在成熟期间,DCs可以改变表面costimulatory分子和形态的表达,包括树突的扩张,增加溶酶体的53]。在我们的在体外研究,培养骨骨髓来源DCs在正常显示增强的树突,BDN和BD老鼠而治疗CD83 siRNA显示少树突相比,参与BD和siRNA-treated DCs的争夺。这提供了证据表明CD83成熟dc发挥着强有力的作用。

Th17细胞自身免疫中发挥着重要的作用。细胞因子的表达IL-17 Th17细胞是一种特殊的特征。增加生产IL-17与几个有关炎症性疾病,如类风湿性关节炎(RA),强直性脊柱炎(as),遗传病的疾病(BD) [54- - - - - -56]。更高水平的IL-17一直在观察活跃的BD患者(57,58]。Downregulation IL-17与减少症状的双相障碍小鼠miRNA21处理时,il - 6核,重组il - 4, N-acetyl-d-galactosamine 4-sulfate [49]。在我们的研究中,双相障碍症状的老鼠接受CD83 siRNA IL-17的差别显示双相障碍症状和改善对这些血清。

5。结论

总之,CD83 +细胞的比例非常高,在BD老鼠与双相障碍的症状。抑制的CD83 CD83 siRNA BD老鼠治疗可以显著降低的比例CD83 +,这是与疾病相关的改进。停药和再CD83 siRNA带来改变的症状。根据这些数据,很明显,CD83扮演着一个重要的角色在调制双相障碍的症状。我们的研究结果表明,针对CD83分子可以作为战略发展治疗双相障碍的管理。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。

的利益冲突

没有利益冲突的任何作者的出版工作。

作者的贡献

本文作者作出了重要贡献。轮导致研究的构思和设计,以及数据的分析和解释。S.M.S.I.,H.O.B.,B.C. participated in the data acquisition, analysis, and interpretation. S.S. and S.M.S.I. wrote the manuscript.

确认

这项研究受到了资助(2017 r1d1a1b03032168)的基础科学研究项目通过韩国国家研究基金会(NRF)由教育部、科学和技术。它也支持格兰特(HI15C2483)韩国卫生技术研发项目通过韩国健康产业发展研究所(KHIDI)资助的卫生和福利部,韩国。

补充材料

补充图S1: (a - c)的频率CD83 +细胞粒细胞、淋巴细胞和单核细胞的正常( ),1型单纯疱疹病毒( ),BDN ( ),和双相障碍小鼠( )通过流式细胞仪分析进行评估(a - c)。(D)代表CD83 +细胞粒细胞的柱状图。表示用于每组的老鼠数量。的价值是由学生的决定 - - - - - -测试。补充图S2:(模拟)GC7 (N1-guanyl-1 7-diaminoheptane)是用于治疗正常小鼠,CD40和频率,CD83、CD80和CD86表达细胞培养表面进行评估通过流式细胞仪分析( 在每组)。(补充材料)