SOCS2在调节免疫反应中的作用和发展的实验性自身免疫性脑脊髓炎

文摘

多发性硬化(MS)是一种炎症性疾病的中枢神经系统(CNS)。实验性自身免疫性脑脊髓炎(运算单元)是最广泛使用的动物模型研究女士的抑制细胞因子信号(soc) 2蛋白质起着至关重要的作用在调节免疫反应。的作用尚未探索SOCS2在实验性自身免疫性脑脊髓炎。运算单元在WT和SOCS2诱导^{- / -}老鼠使用髓少突细胞糖蛋白(撤走_{- 55})肽。大脑和脊髓检查在峰值(14天)和恢复阶段(28天)的疾病。SOCS2是调节在WT老鼠的大脑运算单元的峰值和恢复阶段。急性期的发展是缓慢在SOCS2发作^{- / -}老鼠和Th1 (CD3减少⁺CD4⁺干扰素-γ⁺)在脊髓和大脑细胞。然而,尽管在WT老鼠,最大比分是紧随其后的是一个进步的复苏;临床实验性自身免疫性脑脊髓炎的SOCS2^{- / -}老鼠无法恢复运动损伤发生在急性期。有一个长期的炎症反应(增加Th1、Th2下降和T调节细胞)在后期阶段的实验性自身免疫性脑脊髓炎SOCS2的中枢神经系统^{- / -}老鼠。从SOCS2移植的骨髓细胞^{- / -}到老鼠辐照WT导致更高的杀伤力。早期的实验性自身免疫性脑脊髓炎总之,这些结果表明,SOCS2在免疫应答中起着双重作用。在实验性自身免疫性脑脊髓炎有必要损伤急性期期间损伤但起着有益的作用在经济复苏阶段的疾病。

1。介绍

多发性硬化(MS)是最常见的中枢神经系统脱髓鞘疾病(中枢神经系统)。病人可有运动赤字和感觉和括约肌的问题,其他症状(1]。女士仍然是神经损伤的主要原因在创伤后年轻人(2]。

在众多策略调查女士的神经炎症过程,常用的研究方法在活的有机体内实验性自身免疫性脑脊髓炎的感应(运算单元)的老鼠。现在动物实验性自身免疫性脑脊髓炎对髓鞘抗原的自身免疫反应,这一过程也被认为是[女士的特点之一3]。诱发的小鼠模型小鼠的实验性自身免疫性脑脊髓炎髓少突细胞糖蛋白(撤走_{- 55})与髓鞘抗原肽的特点是早期阶段表示和反应性T细胞扩张,和晚期疾病有缓解的迹象。神经炎症过程涉及在实验性自身免疫性脑脊髓炎激活小胶质细胞和巨噬细胞,淋巴细胞浸润在中枢神经系统,和生产辅助(Th)的细胞因子1和Th17细胞[4]。这会导致脱髓鞘、神经胶质过多症和神经退化,导致临床症状。最初,Th1反应概况、典型干扰素等细胞因子-γ,被认为是唯一的效应在这个疾病。然而,进一步的研究表明,IL-17-secreting T细胞也有助于疾病发病机理(5]。

抑制细胞因子信号(soc)家族蛋白是必不可少的细胞反应的细胞因子调节和最初被认为仅下调特定细胞因子信号,从而减少促炎信号(6]。soc蛋白质快速诱导增强细胞因子水平,从而创建一个机制来规范“不良”长期细胞因子反应(7]。迄今为止,八个soc家族基因(独联体和soc 1 - 7)已报告(8]。soc蛋白质家族调节Janus激酶/信号传感器和转录激活蛋白(JAK / STAT)信号,这是细胞因子信号通路的主要监管机构。本条例可以通过直接发生相互作用或通过细胞因子受体的目标/木菠萝复杂和其它信号蛋白对蛋白酶体降解[9,10]。

SOCS2蛋白质被公认的调节先天和适应性免疫反应在不同实验感染模型,包括模型刚地弓形虫,鲁兹锥体,鼠体内安卡感染。在这些模型中,参与SOCS2很复杂,包括代/分化Th1、Th2, Th17,监管(Treg)和T细胞(11- - - - - -14]。此外,SOCS2平衡大脑的生理功能是至关重要的,心,和肝脏通过控制生产的神经营养因子,钙处理和prooxidative机制(11,12,15]。没有SOCS2增强Th2分化,导致了一代的2型过敏反应(15,16]。

SOCS2已知结合磷酸化酪氨酸残基上激活细胞因子受体和竞争力或sterically阻碍结合位点;这是建议统计招聘的抑制和激活的机制。因此,SOCS2以及SOCS1 SOCS3,可以影响细胞因子的反应T细胞通过属性子集pathway-mediated分化和功能(17,18]。因此,soc蛋白不仅可以调节消极诱导的细胞因子表达还Th1反应。

在这里,我们表明,SOCS2爆发是重要的控制/峰值和缓解阶段发展通过监管的实验性自身免疫性脑脊髓炎的监管(Treg)效应和T T细胞浸润在中枢神经系统。我们的工作提供了新的见解的信号机制参与MS-induced中枢神经系统损伤,为可能的新的治疗靶点铺平了道路重要的临床问题。

2。材料和方法

2.1。动物

动物保健和处理程序都按照当地动物伦理委员会的指导方针。8 - 12个女C57BL / 6 (WT)从大学的主要动物设施获得联邦德·米纳斯吉拉斯(UFMG、巴西)。SOCS2^{- / -}沃伦博士提供的老鼠请美国亚历山大(沃尔特和伊莱扎霍尔医学研究所的研究,澳大利亚)。动物在动物实验室的设施维护免疫调节,生物化学和免疫学(UFMG、巴西),过滤水,食物随意,在一个受控环境(温度和湿度)。

一代的骨髓嵌合体,四到八周大雌性老鼠被辐照9 Gy全身辐射(源⁶⁰每隔2 h有限公司)在两个剂量以减少胃肠道毒性,然后给予静脉输液注入 从C57BL / 6或SOCS2 BM细胞^{- / -}老鼠(如前所述)(19]。分割照射屈服于辐照的动物数量减少到3%以下。三到五个老鼠每组单独保存在通风笼(IVC)和随意进入食物和水。实验进行了移植后4 - 5个星期。UFMG动物伦理委员会批准使用的所有试验程序(编号152/2012和253/2016)。

2.2。运算单元的感应和日常评估疾病的老鼠

运算单元使用乳剂含有诱导髓少突细胞糖蛋白(撤走_{- 55})肽(MEVGWYRSPFSRVVHLYRNGK;NeoMPS),完全弗氏佐剂(CFA)和4毫克/毫升减毒结核分枝杆菌H37 RA (Difco实验室、火花、医学博士,美国)所描述的(20.]。简单地说,每只动物收到100μ包含100 L的乳液μ克撤走_{- 55}。百日咳毒素(西格玛化工有限公司,圣路易斯,密苏里州,美国)300 ng /动物,腹腔内注射(i.p)免疫日,48 h后。动物是日常使用临床评分量表评估。疾病严重程度评估如下:0:没有疾病;0.5:部分尾巴瘫痪;1:尾巴瘫痪或鸭步态;1.5:部分尾巴瘫痪和鸭步态;2:尾巴瘫痪和鸭步态;2.5:部分肢体瘫痪;3:一个四肢瘫痪; 3.5: paralysis of one limb and partial paralysis of another; 4: complete hind limb paralysis; 4.5: complete hind limb paralysis and front limb weakness; and 5: death. Animals were also weighed at days 0, 3, 7, and daily after this.

2.3。组织学

14岁和28天感应篇实验性自身免疫性脑脊髓炎(dpi),小鼠安乐死与氯胺酮和甲苯噻嗪和大脑和脊髓。立即组织是缓冲福尔马林固定在4%,和碎片嵌入石蜡。组织部分(4μ米厚)与苏木精和伊红染色())和光学显微镜下检查。部分都被数码相机(dei - 470;达光电、Goleta CA)连接到一个显微镜(IX70;奥林巴斯,中心山谷,PA)×200的放大。脊髓病理(炎症)评分从0到4,考虑损伤的严重程度(= 0,没有一个最小= 1,轻度= 2,温和= 3,和标志= 4)。

2.4。免疫印迹

完整的细胞提取得到的均质控制和免疫小鼠的大脑通过裂解缓冲(Triton X 100 1%, 100毫米三羟甲基氨基甲烷/盐酸,液pH值8.0,10%的甘油,5毫米EDTA, 200毫米氯化钠,德勤1毫米,1毫米PMSF, 25毫米氟化钠,2.5毫克/毫升亮抑酶肽,5毫克/毫升抑肽酶,和1毫米原钒酸钠)。溶解产物在13000 xg离心10分钟在4°C和量化使用Bio-Rad的布拉德福德测定试剂(大力神,CA)。蛋白质提取(80μg)通过polyacrylamide-SDS 12%变性凝胶电泳分离和转移到硝化纤维膜。膜在一夜之间被封锁在4°C PBS含有5% ( )脱脂牛奶和0.1% Tween-20与PBS含有0.1% Tween-20洗了三次,然后用anti-SOCS2孵化(1:1000年,细胞信号)。洗后,膜被孵化与适当的辣根peroxidase-conjugated二级抗体。免疫反应性的乐队是可视化通过使用增强化学发光检测系统(Amersham™ECL™,通用电气医疗集团),所述的制造商。SOCS2被量化的水平使用光密度分析软件(在Java ImageJ、图像处理和分析;NIH,马里兰州贝塞斯达),值规范化本构β肌动蛋白水平在同一样本。蛋白质含量的变化估计,结果被表示为一个SOCS2 /β肌动蛋白比例任意单位。

2.5。流式细胞术

安乐死后,大脑、脊髓和脾脏移除老鼠,白细胞被均质化孤立成RPMI媒体。这种细胞悬液分馏使用步骤组成的梯度30% percoll(σ,圣路易斯,密苏里州)稀释在RPMI RPMI分层percoll稀释75%以上。离心后(8000 xg),髓鞘是吸气的顶部30% percoll层。白细胞被从75%和30%之间的界面层percoll。之后,白细胞被离心机(600 xg)和resuspended 1毫升的一个解决方案中含有0.5%牛血清白蛋白(BSA)、叠氮化2毫米,磷酸盐(pH值7.4)。白细胞从大脑和脊髓的获得是沾的组合CD3 (APC-Cy7), CD4 (PE-Cy7), il - 10 (APC), CD25 (PerCP-Cy5)和FoxP3 (PE);APC-Cy7 CD3, CD4 (PE-Cy7)和干扰素-γ(APC);和IL-17A (PE)。数据是使用BD FACSCanto II(美国加利福尼亚州圣何塞,正欲),和原始数据的流式细胞仪分析处理使用FlowJo软件(美国或树明星,亚什兰)。

2.6。统计分析

结果显示为 。组之间的差异是评估通过方差分析(方差分析)其次是Student-Newman-Keuls事后测试或双向方差分析其次是Bonferroni调整,根据需要,为多个比较参数假设得到满足。否则,Mann-Whitney测试应用。GraphPad棱镜软件(美国圣地亚哥,CA)是用于构建图形。被设置为水平的意义 或者,在一些数据, 。

3所示。结果

3.1。SOCS2调节运算单元的发展

的参与SOCS2在开发和/或保护运算单元是未知的。初步实验显示有海拔SOCS2蛋白质的表达,发现在急性期的实验性自身免疫性脑脊髓炎SOCS2表达水平增加小鼠的大脑在14和感应后28天实验性自身免疫性脑脊髓炎(数据1(一)和1 (b))。

接下来,我们在WT和SOCS2。临床症状特征的实验性自身免疫性脑脊髓炎^{- / -}老鼠。重量和临床分数评估天0,3、7,然后每天直到28。经过诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎运动损伤开始每天11和达到14 WT老鼠。减肥模式遵循临床评分(数据的变化2(一个)和2 (b))。重要的是,SOCS2-deficient小鼠显示了强劲的发展抗实验性自身免疫性脑脊髓炎,发病和疾病的高峰期,有更好的运动机能和控制体重的损失与WT同行相比。

众所周知,WT开发缓解阶段,受MOG-induced实验性自身免疫性脑脊髓炎动物中枢神经系统的急性炎症损伤。见图2疾病的峰值后,有部分缓解运动功能障碍的临床评分下降和体重增加在WT(数字2(一个)和2 (b))。然而,SOCS2^{- / -}老鼠没有从中枢神经系统损伤(图中恢复过来2(一个)),这些动物的体重持续下降直到19 dpi(图2 (b))。因此,在缺乏SOCS2、疾病发病和进展延迟但复苏并不发生,这表明SOCS2的表达是有害的在开始/但有益的的复苏阶段的峰值实验性自身免疫性脑脊髓炎的疾病。

3.2。SOCS2调节中枢神经系统的炎症水平的高峰期间运算单元

自从SOCS2起着至关重要的作用在调节炎症发生在几个组织,我们接下来研究炎症细胞在中枢神经系统的EAE-induced WT SOCS2^{- / -}老鼠在14和后28天(图诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎3)。符合临床评分、WT老鼠显示明显浸润的单核细胞在神经纤维网,主要在脑干14 dpi(图3)。SOCS2^{- / -}老鼠表现出减少的损失在实质与中度炎症在这个时间点。在脊髓,WT小鼠严重脊髓炎的特点是强烈的细胞浸润在14 dpi。大脑组织SOCS2^{- / -}老鼠表现出轻度至中度骨髓炎在这个时间点(图3)。在运算单元的高峰期,组织学差异直接反映在临床特征。虽然WT小鼠有明显的运动问题,总尾巴瘫痪和全部或部分瘫痪的后肢除了尿失禁在某些情况下,SOCS2^{- / -}小鼠显著减少(减少瘫痪)运动问题,用更少的障碍在尾部肌肉和肢体运动。总之,这些数据表明SOCS2倾向于炎症反应。在早期的实验性自身免疫性脑脊髓炎

在28日dpi、WT老鼠表现出焦MOG-induced实验性自身免疫性脑脊髓炎,轻度至中度脊髓脊膜炎在脊髓(图3)。在这个时间点,广泛而强烈的脊髓脊膜炎和髓鞘脱失SOCS2检测^{- / -}老鼠(图3)。SOCS2^{- / -}老鼠增加炎症浸润在大脑和脊髓与WT相比,它只表现出温和的脑炎(图3)。

3.3。SOCS2调节T细胞浸润在中枢神经系统运算单元

关键事件描述发病期间和神经病理学的实验性自身免疫性脑脊髓炎是免疫细胞在中枢神经系统的渗透21]。我们分析了CD4 T细胞的渗透,发展,主要参与子集实验性自身免疫性脑脊髓炎脊髓和大脑WT和SOC2^{- / -}老鼠在14岁和28 dpi。T CD4细胞的数量减少从SOCS2脊髓^{- / -}老鼠在14 dpi与WT同行(图4(一))。然而,在缓解期(dpi) 28日的实验性自身免疫性脑脊髓炎,SOCS2^{- / -}小鼠CD4 T细胞数量的增加(图4(一))和类似的Treg细胞数量与WT老鼠在脊髓(图4 (b))。重要的是,Th (CD3的比例⁺CD4⁺)和Treg (CD4细胞⁺CD25^高FoxP3⁺)在脊髓细胞显示SOCS2 Treg细胞的减少^{- / -}老鼠在28 dpi与WT老鼠(图4 (c))。我们观察到类似的配置文件在大脑(图补充1)。接下来,我们调查的形象渗透Th细胞,包括Th1、Th2, Th17细胞脊髓运算单元的早期和晚期阶段。我们发现从SOCS2脊髓^{- / -}老鼠Th17细胞增多和减少数量的Th1细胞在14 dpi与WT同行相比(数字4 (e)和4 (f))。在后期阶段的运算单元,SOCS2^{- / -}老鼠Th1人数大幅增加(图4 (d))。此外,Th1、Th2细胞的比例减少14岁在SOCS2 dpi^{- / -}老鼠,而Th17细胞的比例增加而WT同行(图4 (g))。然而,在28 dpi, EAE-induced WT小鼠脊髓Th2细胞的优势,而SOCS2^{- / -}老鼠强Th1细胞频率增加(图4 (g))。

3.4。嵌合小鼠容易运算单元

到目前为止,我们的研究结果表明,SOCS2-deficient老鼠但发展的早期阶段对实验性自身免疫性脑脊髓炎持久的疾病阶段,后期效果与增加炎症细胞的浸润到中枢神经系统。调查是否nonhematopoietic细胞也参与的双重效应SOCS2运算单元,我们生成的老鼠缺SOCS2仅限于nonhematopoietic或造血隔间。为了解决这个问题,WT老鼠辐照和移植骨髓祖细胞从SOCS2孤立^{- / -}供体(SOCS2^{- / -}→WT)。相反,辐照SOC2^{- / -}老鼠与WT骨髓移植供体细胞(WT→SOCS2^{- / -})。嵌合体生成鼠标控制转移WT或SOCS2^{- / -}骨髓成辐照WT或SOCS2^{- / -}小鼠,分别(WT→WT SOCS2^{- / -}→SOCS2^{- / -})。运算单元是诱导移植后4 - 5个星期。我们发现所有收到SOCS2嵌合WT老鼠^{- / -}细胞(SOCS2^{- / -}→WT),但不是WT (WT→WT)细胞,诱导后20天内死亡实验性自身免疫性脑脊髓炎严重疾病(数据的显示参数5(一个)- - - - - -5 (c))。这表明SOCS2^{- / -}造血细胞极其炎症,SOCS2表达nonhematopoietic细胞WT老鼠无法克服炎症。另一方面,在嵌合SOCS2运算单元^{- / -}老鼠接受WT或SOCS2^{- / -}细胞,抵抗早期发展的重大损失的临床评分显示EAE-induced SOCS2^{- / -}老鼠(图5(一个))。此外,尽管75%存活,SOCS2^{- / -}老鼠WT或SOCS2重新填充^{- / -}细胞无法在疾病的晚期(数据恢复5(一个)- - - - - -5 (c)),这表明SOCS2 nonhematopoietic细胞是非常重要的,最初的保护从实验性自身免疫性脑脊髓炎而SOCS2在造血细胞对鼠标从运算单元恢复至关重要。因此,这些结果表明,缺乏SOCS2 nonhematopoietic或造血隔间足以提供不平衡的炎症反应,导致疾病有关的免疫病理反应。

4所示。讨论

我们在这里描述的角色第一次SOCS2运算单元。我们的研究结果可以概括如下:(i) SOCS2表达在中枢神经系统发展;在实验性自身免疫性脑脊髓炎(2)在缺乏SOCS2、临床延误严重实验性自身免疫性脑脊髓炎的迹象,这延迟与中枢神经系统的Th1数量减少;(3)SOCS2^{- / -}老鼠但最终建立实验性自身免疫性脑脊髓炎缓解不发生在WT老鼠。因此,SOCS2^{- / -}老鼠无法恢复急性中枢神经系统损伤。缓解与一个不受控制的缺乏免疫反应特点是浸润Th1炎症细胞数量的增加,和减少数量的Th2和Treg细胞在中枢神经系统;(iv)不仅SOCS2-deficient免疫细胞,而且抗放射性的或基质细胞缺乏SOCS2导致更高的发展对实验性自身免疫性脑脊髓炎。在一起,我们的数据表明,SOCS2有助于在最初的感应神经炎症/峰也是复苏的关键阶段的实验性自身免疫性脑脊髓炎在疾病的缓解期。

中枢神经系统的炎症过程与T细胞浸润有关,在实验性自身免疫性脑脊髓炎主要Th1和Th17细胞和小胶质细胞和巨噬细胞的参与22]。一个重要事件,在实验性自身免疫性脑脊髓炎与MS发病机理,是周边地影射的引发刺激T细胞导致中枢神经系统的炎症反应的放大。我们表明,SOCS2不足导致减少比例的Th1细胞浸润峰的大脑和脊髓疾病(第14天邮报免疫)。在一起,更少的细胞和细胞因子可能占减少炎性损害中枢神经系统。急性期的运算单元,干扰素-γ和IL-17生产浸润细胞炎症的结果起着至关重要的作用。在SOCS2 Th1细胞减少^{- / -}老鼠,低水平的干扰素-γ可能与最初的观察和部分保护。这些影响可能会反映在后续事件在疾病进展,因为SOCS2^{- / -}发展与老鼠延误实验性自身免疫性脑脊髓炎WT老鼠。有报告的角色发展CCR6在实验性自身免疫性脑脊髓炎疾病的急性期与增加特定Th1病原细胞的频率,同时,脊髓病变的Treg细胞的小鼠(23]。这些Treg细胞可能是招募发炎组织通过CCR6-mediated趋化作用,扩大由CD4 - 2的作用⁺效应细胞CD25 (IL-2Rα亚(链)高表达24]。然而,我们也不能排除SOCS2参与下游信号通路的调控CCR6以及其他的趋化因子受体(或趋化因子配体)的交通T细胞小鼠中枢神经系统的实验性自身免疫性脑脊髓炎。因此,一个可能的障碍在白细胞迁移机制(T细胞和单核细胞)可能是导致有益的结果观察在SOCS2运算单元的初始阶段^{- / -}老鼠。

减少炎症SOCS2中找到^{- / -}小鼠模型是使用这种实验性自身免疫性脑脊髓炎与我们组的结果一致显示减少大脑的炎症p .鼠Anka-infected小鼠在感染的早期阶段11),在t . cruzi来华SOCS2之心^{- / -}老鼠(12]。此外,它已被证明,SOCS2调节/抑制炎症后的中枢神经系统弓形虫感染(14]。

SOCS2和一些统计转录因子家族成员,STAT5等紧密相关的。例如,在神经元分化的规定通过生长激素(GH), GH-activated STAT5b结合SOCS2并导致其表达的启动子,进而在GH受体磷酸化酪氨酸残基,导致减少JAK2 / STAT5激活(25]。因为STAT5激活需要分化Th1、Th2,和Treg (Foxp3⁺)细胞和抑制Th17极化(26),我们相信这种机制发展的延迟也可能参与实验性自身免疫性脑脊髓炎SOCS2中观察到^{- / -}老鼠。据报道,然而,缺乏SOCS2加强Th2分化过敏和哮喘小鼠模型,STAT6和STAT5被激活,而STAT3, Th17极化的关键不是[16]。我们发现缺乏SOCS2导致减少数量的Th2 14岁和28 dpi诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎与WT相比,但无论SOCS2至关重要的Th2分化仍在实验性自身免疫性脑脊髓炎需要澄清。值得注意的是,在SOCS2 Th2细胞的比例^{- / -}老鼠是5.6倍低于28 dpi WT老鼠,和它的功能没有出现避免/抑制Th1 / Th17反应。因此,控制招聘的T细胞和他们的极化可能构成SOCS2在运算单元的影响。

之前它已经被证明SOCS2表达式的调制在树突状细胞的表达与5-lipoxygenase (5-LO)和芳基碳氢化合物受体(AhR) [14]。SOCS2直接调制5-LO气道高反应性和表达高峰期间在中枢神经系统的实验性自身免疫性脑脊髓炎(数据没有显示)。与此一致的是,EAE-induced SOCS2^{- / -}小鼠呈现显著减少中枢神经系统炎症的早期阶段的运算单元。啊受体是一个重要的监管机构SOCS2 [14]。气道高反应性刺激后,激活和易位到细胞核,能促进SOCS2表达,导致细胞因子调节(27]。AhR是由多个配体激活,包括5-LO产品,如lipoxin (LXA),称为诱导的关键SOCS2 AhR-dependent地(14,28]。如今调节气道高反应性等人表明,Th17细胞分化不同调节运算单元,根据配体类型(29日]。气道高反应性自^{- / -}老鼠无法康复后的临床症状有所下降的实验性自身免疫性脑脊髓炎SOCS2的表达和NF -表达增加κB在胶质细胞与脊髓(后来的炎症和神经退行性变的30.),我们的数据表明,该活动/表达可能是急性期期间SOCS2实验性自身免疫性脑脊髓炎的AhR激活后5-LO绑定产品。是可能的,当一个给定的刺激,引起5-LO产生LXA,气道高反应性可以激活,导致细胞细胞核的易位激活紧随其后Socs2基因。时表示,SOCS2蛋白质结果通过调节细胞因子的生产,将编排实验性自身免疫性脑脊髓炎代/扩大保护和autoreactive免疫细胞,以及调节趋化因子参与招聘的生产更多的细胞在中枢神经系统的急性期运算单元。然而,类花生酸的生产和作用需要进一步研究在实验性自身免疫性脑脊髓炎和目前正在测试在我们的实验室。

特点是局部的缓解阶段实验性自身免疫性脑脊髓炎临床恢复运动功能的改善。有趣的是,SOCS2^{- / -}老鼠无法恢复运动障碍到达延迟后的峰值运算单元。这个能力恢复的原因是不清楚。从我们组最近的研究表明一个不平衡的晚期炎症反应的不同模型。例如,在一个模型与对乙酰氨基酚过量肝功能衰竭,SOCS2^{- / -}老鼠有更多的坏死、氧化和促炎细胞因子在肝脏比WT老鼠15]。在脑型疟疾模型中,SOCS2^{- / -}老鼠显示增加寄生虫血症和减少Treg细胞渗透阶段,后期效果与Th1和Th17细胞增多和细胞因子水平升高(11]。在这里,我们表明,SOCS2^{- / -}老鼠提出优势Th1细胞频率运算单元的后期阶段。有趣,其他的研究表明,慢性炎症导致开关替代条件实验性自身免疫性脑脊髓炎Th17细胞细胞因子,通过干扰素的生成和发展γ第Th17细胞(31日,32]。然而,角色的发展在T细胞的可塑性SOCS2实验性自身免疫性脑脊髓炎尚不清楚。

它已经表明,SOCS2调节诱导调控T细胞(iTreg)稳定通过调制FoxP3的表达在体外和在活的有机体内刺激后,这部分不稳定没有SOCS2蛋白(33]。在这种背景下,从SOCS2 Treg细胞^{- / -}老鼠可能不适当的调节效应T细胞刺激后的活动。与此一致的是,我们发现老鼠缺乏SOCS2显示比例明显较低的渗透Treg细胞在中枢神经系统运算单元的后期阶段。这些事件可能与T细胞炎症的控制活动和更高的SOCS2炎性损伤中枢神经系统中观察到^{- / -}老鼠运算单元的后期阶段。此外,我们的嵌合小鼠实验清楚地表明,缺乏SOCS2 nonhematopoietic或造血隔间足以提供不平衡的炎症反应,导致疾病有关的免疫病理反应。因此,还需要进一步的研究来确定SOCS2的确切作用在上下文中的nonhematopoietic细胞实验性自身免疫性脑脊髓炎。

5。结论

总之,我们的数据表明,在缓解阶段SOCS2对经济复苏至关重要的运算单元,可能通过促进Treg细胞分化/扩张/稳定的后续抑制促炎细胞因子。因此,SOCS2蛋白质参与炎症过程的监管,在实验性自身免疫性脑脊髓炎,这种机制可能表明另一种目标当前的治疗策略。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。

信息披露

巴西的抽象XXXIX国会提出了免疫学的社会。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

这项工作是支持的Pro-Reitoria UFMG德尽管如此,慰问Nacional de Desenvolvimento Cientifico e学府(CNPq;307981/2014-2、140833/2017-0 305894/2018-8),Fundacao德帕罗尽管de米纳斯吉拉斯(FAPEMIG) Coordenacao de Aperfeicoamento de Pessoal de含量比(披肩)(巴西),和国家科学和技术研究所的登革热和Host-Microbial交互(apq - 03606 - 17)。作者要感谢杰奎琳·巴博萨de Oliveira Viana和Frankcineia Aparecida德阿西斯技术援助和芭芭拉博士Maximino Rezende辐照实验援助。

补充材料

补充1:浸润免疫细胞SOCS2概要文件^{- / -}老鼠的大脑。大脑从WT和SOCS2^{- / -}天真或免疫(MOG)老鼠收获和提交给14岁和28 dpi流式细胞术分析。CD3的数量⁺CD4⁺(a)和CD4细胞⁺CD25^嗨+FoxP3⁺总人口(b)的评估通过流式细胞术使用特定抗体的描述材料和方法。(c) CD3的比例⁺CD4⁺(Th)和CD4细胞⁺CD25^嗨+FoxP3⁺(Treg)在大脑中。 动物每组。数据,显示为代表三个独立的实验 。 (是由学生的统计意义 - - - - - -测试)。(补充材料)

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