CD4细胞的特征⁺腹主动脉瘤患者T细胞亚群

文摘

背景。CD4细胞产生的介质⁺T淋巴细胞参与动脉瘤性损伤的发病机制在腹主动脉瘤(AAA)的病人。本研究的目的是确定和CD4的特点⁺T细胞参与人类AAA子集。方法。CD4⁺动脉瘤性损伤测定T细胞亚群在30人使用流式细胞仪(FC)和免疫组织化学(包含IHC)。外周血单核细胞(PBMCs)从AAA也分析了FC患者与对照组相比。结果。人体含有干扰素-动脉瘤的病变γIL-12p35 il - 4, IL-23p19 IL-17R, il - 22生成阳性细胞。PBMCs从AAA患者干扰素-的表达水平更高γ肿瘤坏死因子-α相比,il - 4和il - 22生成控件。结论。我们的结果显示T的存在_H1、T_H2,T_H17日,和T_H22子集AAA动脉瘤性损伤的病人,表明这些细胞可能主要原位激活,在那里他们可以诱导组织退化和AAA的发病机制。

1。介绍

腹主动脉瘤(AAA)是一种退行性疾病,其特征是腹部主动脉壁的逐步弱化,导致血管直径的增加至少50% (1]。虽然疾病的发病率在世界范围内,变化可能会影响9%的男性65岁,和死亡率可能达到90%在复杂情况下,引起的内出血由于受损的腹主动脉破裂2]。

AAA的开发过程中发生的有害的修改主要影响中模,降解细胞外基质的成分和血管平滑肌细胞的凋亡发生3]。这些病理过程的触发不是完全理解,但流行病学研究相关因素如吸烟、高血压和男性性别与主动脉壁损伤(4]。招募白细胞进入主动脉媒体,由趋化因子和弹性蛋白降解产物,似乎是一个早期的发病机理和关键事件AAA (5]。事实上,存在广泛的炎性浸润动脉瘤性损伤的组织学特征是在AAA (6)和肿瘤坏死因子等炎性细胞因子水平上升α、il - 6和il - 1β已报告在AAA级患者的血清或等离子体7]。AAA的全基因组分析组织提供的证据upregulation基因参与白细胞游走,激活免疫反应,激活T细胞,和调节淋巴细胞活化而表达下调基因富集在以下类别:细胞骨架组织、肌细胞发育、器官形态发生和细胞连接组装(8]。此外,AAA和主动脉闭塞性疾病患者过多表达的inflammasome NLRP3 mRNA表明这两种疾病的常见炎症病因(9]。基因的表达与炎症和矩阵退化如COX2、MMP-2, MMP-9也称为高架动脉瘤组织(10,11]。这些发现表明,免疫炎症机制可能参与AAA的发展。

多种免疫细胞类型已确定在AAA病变,包括巨噬细胞(12)和淋巴细胞(6]。大部分的CD4淋巴细胞识别⁺T细胞。这些细胞可分为不同的亚型根据生产他们的签名细胞因子和特定的转录因子的表达。T_H1细胞分化是依赖的存在il - 12和转录因子的表达T-bet,而T_H2细胞代发生在环境中il - 4,导致GATA-3和c-MAF转录因子的表达13]。细胞因子(T)的签名_H淋巴细胞是肿瘤坏死因子- 1α和干扰素-γ,T_H2细胞il - 4。一些报告表明,干扰素-γ和il - 4可能导致AAA的发病机制诱导巨噬细胞和血管平滑肌细胞产生不同类型的金属蛋白酶(mmp)和组织蛋白酶。这些酶导致主动脉壁退化主要是由胶原蛋白和弹性蛋白退化(14,15]。尽管研究人员建议T的存在_H1和T_H2人类病变[16),这些细胞的作用在AAA的发病机制尚未完全清楚。

CD4⁺T细胞可以分化成T_H17和T_H22[子集17,18]。转录因子的表达RORC的TGF -β和il - 6 T_H17代(19),而il - 6和TNFα端依赖描述气道高反应性T的表达式_H22[子集18]。细胞因子(T)的签名_H17细胞IL-17 IL-23 [20.细胞因子(T),签名_H22细胞il - 22生成[18]。一些报告表明IL-17能够诱导等炎症介质的产生il - 1、il - 6、TNF -αCCL2, CCL7 CCL20处于受控,CXCL8,和内皮细胞基质金属蛋白酶,平滑肌细胞,巨噬细胞(21,22]。同样,il - 22生成潜力炎症诱导基质金属蛋白酶的生产,CCL7,处于受控,CXCL3, CXCL9 CXCL8, il - 6,成纤维细胞(23]。这些介质,由IL-17和il - 22生成时,可能导致膜的降解腹主动脉的媒体。

最近的流行病学研究报告疾病之间的关系,由T_H细胞子集和AAA。丹麦全国以人群为基础的病例对照研究表明,哮喘,T_H2-driven病理条件下,增加AAA发展和破裂的风险(24]。此外,一个全国性的队列研究还包括丹麦人口报道银屑病与AAA的风险增加有关,和与银屑病的严重程度(风险似乎增加25]。IL-17牛皮癣发病的关键细胞因子,抑制T_H17细胞是一种治疗策略26]。T_H22细胞和他们的签名细胞因子也与牛皮癣有关(27]。

很明显,不同子集的T_H细胞参与的发展特征病理变化观察到人类AAA,和最近的研究揭示的机制不同的T_H细胞亚型可能调节MMP的生产,导致主动脉壁减弱(12,28]。根据微环境细胞因子e生存因素,其中大部分是由T_H激活细胞,巨噬细胞要么是“经典”(M1) TNF -α和干扰素-γ或“或者激活”(M2) il - 4, IL-13, il - 10。M1和M2巨噬细胞有不同的基质金属蛋白酶和TIMP生产资料(28]。T_HT细胞,主要是_H2细胞,也可能导致AAA通过激活B细胞,导致产生抗体(29日]。B细胞和T细胞,是最常见的淋巴细胞亚群在AAA级情况下(30.]。然而,尽管越来越多的可用数据,不同的角色T_H细胞在AAA并不完全理解。因此,在这项研究中,我们旨在识别和描述不同的CD4细胞⁺患者T细胞亚群AAA。

2。材料和方法

2.1。病人和控制

三十患者选择性开放修复提交的AAA,参加临床医院,坎皮纳斯州立大学由坎皮纳斯,一个三级转诊医院,参加本研究。

对照组由个人用同样的并发症患者中AAA但没有记录的疾病。排除标准包括失代偿性的充血性心力衰竭、心脏瓣膜病临床重要,已知或怀疑血栓性疾病、恶性肿瘤、炎症或自身免疫性疾病,心肌梗死前一月内的历史,或肾肺衰竭。

知情同意是获得所有的参与者,研究协议符合1975年赫尔辛基宣言的伦理准则,反映在由伦理委员会的批准。

2.2。处理AAA病变样本

AAA病变样本期间收集的开放手术修复和受到不同的程序。样本进行免疫组织化学(包含IHC)被固定在4%甲醛24 h,嵌入在石蜡,并分为4μ片。样品用于细胞渗透表现型的流式细胞术被安置在RPMI 1640中直到样品到达实验室。样品在一夜之间被酶消化liberase(2毫克/毫升;Blendzymes-Roche Sigma-Aldrich,圣路易斯。密苏里州,美国)。使用Medimachine样本进一步瓦解(BD生物科学,圣何塞、钙、美国)。结果细胞悬架被扩展了在体外10天的RPMI 1640介质(英杰公司有限公司大岛,纽约,美国)补充谷氨酰胺(2毫米;美国圣路易斯σ)、庆大霉素(5μg / ml;Sigma-Aldrich), 10% heat-inactivated人类AB血清,- 2 (10 ng / ml,研发系统、明尼阿波利斯、锰、美国)37°C的5%股份₂。扩张后,单核细胞(MCs)使用Ficoll-Hypaque密度梯度分离(Amersham生物科学,乌普萨拉,瑞典)。

2.3。免疫组织化学

部分AAA病变三部曲沉浸在5%解决方案(Sigma-Aldrich)和放置在一个蒸笼蒸15分钟为了deparaffinize,水合物和恢复抗原。内源性过氧化物酶与H阻塞₂O₂(10倍量),每个部分与CD3孵化,CD8(美国Dako,圣克拉拉,CA), il - 4, IL-23 (BioLegend、圣地亚哥、钙、美国),IL-17(美国圣克鲁斯、达拉斯、TX),或il - 22生成抗体(Abcam,剑桥,英国)。NovoLink聚合物检测系统(Novocastra、纽卡斯尔、英国)是按照制造商的指示使用任何tissue-bound抗体检测。颜色的开发进行了3,3 - - - - - -diaminobenzidine (DAB)解决方案,部分与苏木精复染色。

2.4。血液采样

从患者的血液样本,前一天开放手术修复,从控制人收集到肝素管。一旦收集,血液样本在Ficoll-Hypaque离心机(美国通用电气医疗集团,皮斯卡塔韦,新泽西),和外周血单核细胞(PBMCs)。血浆样本存储在−80°C的灵敏度高C反应蛋白(hs-CRP)量化。

2.5。在体外刺激单核细胞

使用流式细胞仪检测,从外周血单核细胞(MCs),从AAA病变刺激在体外的签名每个辅助T细胞因子产生的子集。细胞培养的2×10的浓度⁶细胞每在24-well板块(Amersham生物科学,乌普萨拉,瑞典)的RPMI 1640中补充谷氨酰胺(2毫米)、庆大霉素(5μg / ml), 10% heat-inactivated人类AB等离子体。PBMCs与anti-CD3刺激、anti-CD28 anti-CD2 antibody-coated珠子(Miltenyi) 48 h公司37°C的5%₂。十四烷酸在最后6 h,佛波醇酯(PMA, 50 ng;Sigma-Aldrich),钙离子载体(250 ng;Sigma-Aldrich)和brefeldin (1μg;Sigma-Aldrich)添加到培养基中。MCs从AAA病变与anti-CD3最初孵化,anti-CD28, anti-CD2 antibody-coated珠子了10天在37°C公司5%₂为了扩大T淋巴细胞。在孵化的最后6小时,细胞被收获,计算(2×10⁶细胞/),PBMCs和刺激,如前所述。

2.6。流式细胞术

刺激后,在体外PBMCs和MCs从AAA病变是收获和流式细胞术分析了T细胞表型。每一个免疫荧光反应是使用3×10⁵细胞在PBS稀释。最初,这些细胞被孵化与特定的表面标记的抗体:CD3 (FITC、PE (Caltag)和PerCP (BioLegend)), CD8 (APC (BioLegend)和FITC (BD生物科学)),CCR5 (FITC (BD生物科学)),CCR6 (PE (BioLegend))、CXCR3 (PE (BD生物科学)),和CCR4 (PerCP / Cy5.5 (BioLegend))。接下来,这些细胞被固定在2%的甲醛,与皂素permeabilized (PBS的0.5%;Sigma-Aldrich)和干扰素-受到细胞内染色γ(FITC-BD生物科学)、肿瘤坏死因子-α(PE-BD生物科学)、il - 4 (APC-BioLegend) IL-17 (PE-eBioscience)和il - 22生成(660 - ebioscience eFluor,圣地亚哥、钙、美国)。的细胞获得FACSCalibur流式细胞分析仪(BD生物科学,圣何塞、钙、美国)。进行了分析使用FCS表达软件(新创软件,格兰岱尔市、钙、美国)。

2.7。统计分析

统计分析使用GraphPad棱镜软件,5.0 (La Jolla、钙、美国)。所有测量数据1- - - - - -3)表示为中位数和四分位范围被认为具有统计显著性值< 0.05。两组比较(AAA与控制和AAA与外周血的定量数据进行使用非参数Mann-Whitney等级和测试。单核细胞刺激前后参数在文化比较使用非参数Wilcoxon配对测试。

3所示。结果

3.1。描述的学习小组

患者的人口统计学和临床特征AAA参加本研究总结在表1。实验小组主要由男性(男性/女性比例是28/2),平均年龄为65.4岁(范围60.3 - -70.5年)。关于疾病的阶段,腹部aortae的平均直径为6.5厘米(范围4.9 - -8.1厘米),管腔内的血栓的厚度是2.8厘米(范围0.8 - -4.8厘米)。大多数患者当前或之前吸烟习惯与高血压有关。实验中发现的其他并发症组血脂异常,糖尿病和肥胖。病人的治疗方案表明经常存在AAA-associated心血管疾病,动脉粥样硬化是最常见的病理生理的过程。然而,生化数据显示这些并发症是减毒,除了c反应蛋白水平升高,炎症的标识。

对照组年轻,男性和女性之间的平等分配男女患者相比,AAA级,还提出了一个更高频率的肥胖个体除了糖尿病和血脂异常的趋势,这可能影响了他汀类药物的频繁使用。事实上,不同于多数,AAA提交给患者选择性开放修复;对照组主要是由代谢综合征患者,有高血压、糖尿病、血脂异常、肥胖同样复发。同时,在对照组,心血管疾病是不太常见的。

3.2。AAA损伤分析

3.2.1之上。表现型

如果MCs的表现型AAA病变显示T的比例非常低_H细胞产生细胞因子(图他们签名1)。MCs,干扰素是积极——不到1%γ肿瘤坏死因子-α,IL-17。il - 4出现在CD4的6.6%⁺T细胞,而il - 22生成是积极的,1.1%的人口。与PMA刺激和钙离子载体后,我们发现高百分比的细胞产生干扰素-γ(50.9%)或TNF -α(82%)。大多数的细胞干扰素-γ⁺肿瘤坏死因子-α⁺和T_H1签名中细胞因子是最普遍的T_H细胞从AAA。T_H2细胞因子il - 4,出现在分析人口的21.8%在体外刺激。我们也观察到,刺激CD4的14%⁺T细胞只生产IL-17,而il - 22生成阳性细胞占人口的8.5%。事实上,我们并没有发现大量的IL-17和il - 22生成double-positive细胞。

有关趋化因子受体表达T_H2,T_H17日,和T_H22日,如果T_H细胞从AAA CCR4病变⁺(80.14%)。只有少数细胞CCR4⁺CCR6⁺细胞,只有CCR6分析细胞的12.85%⁺。T_H1有特定的受体CXCR3 CD4的23.33%⁺T淋巴细胞,只有1.7%的人口是CCR5⁺。后在体外刺激,我们观察到一个类似模式的趋化因子受体的表达,CCR4和CXCR3最为普遍。我们检测到阳性细胞的频率减少CCR4和CCR6之后在体外刺激。CXCR3的百分比⁺细胞也减少,但是差异没有达到统计学意义。CCR5的频率⁺细胞很低,刺激(图后并没有改变1)。

综上所述,我们的第一组数据表明,尽管签名为T细胞因子_H1、T_H2,T_H17日,和T_H22如果细胞几乎没有,intralesional淋巴细胞可以产生大量的细胞因子刺激后。

3.2.2。免疫组织化学

T_HAAA病变组织内细胞子集包含IHC特定标记的部分进行了分析。我们检测CD3⁺T细胞主要在follicle-like结构位于动脉外膜和媒体的主动脉(图2(一个))。只有少数CD3⁺细胞被发现在细胞外基质成分。

我们进一步研究了T淋巴细胞在AAA病变以确定这些细胞是否有辅助或细胞毒性作用。CD8⁺细胞内发现炎性浸润,但CD8⁻细胞被更高的数量;这些细胞属于辅助人口(图2 (b))。事实上,我们进一步确定il - 4⁺,IL-17⁺,IL-23⁺,或il - 22生成⁺在浸润区域。我们发现更多的阳性细胞在follicle-like结构,对应CD3的本地化⁺T细胞(图2 (c)- - - - - -2 (f))。重要的是,我们发现IL-17⁺T细胞区域,以及IL-23⁺地区。

3.3。外周血细胞分析

我们下一个分析患者的外周血AAA和对照组T的表达_H签名的细胞因子。细胞进行评估之前和之后在体外刺激(数据3(一个)- - - - - -3 (e))。只有少数细胞分析前炎性细胞因子刺激产生的病人。然而,在体外激活与anti-CD3和anti-CD28抗体诱导干扰素-γ肿瘤坏死因子-α,IL-17 il - 4和il - 22生成生产。细胞渗透的AAA报道病变,最常见的在刺激外周血CD4细胞因子⁺T细胞是肿瘤坏死因子-α和干扰素-γ(分别为58.92%和18.65%),其次是il - 4 (6.99%)、IL-17(5.35%)和il - 22生成(2.21%)。大多数的肿瘤坏死因子-α⁺细胞干扰素-γ⁺,而il - 4⁺,IL-17⁺,il - 22生成⁺细胞主要是单一的正面。在对照组中,我们发现同样的模式为IFN -细胞因子的生产γ肿瘤坏死因子-α和il - 22生成和IL17。然而,il - 4⁺刺激后细胞减少,但未能达到显著差异。

有关趋化因子受体(数字3 (f)- - - - - -3(我)),CCR4和CXCR3最流行不仅在如果还在在体外激活T_H细胞,CCR6和CCR5紧随其后。有趣的是,几乎所有细胞都是单一的正面,和CXCR3的频率和CCR6分析人口减少刺激后,虽然CCR4和CCR5频率没有变化。

与实验组,CCR4和CXCR3是最频繁的受体如果T_H从控制参与者的外周血细胞。CCR5是出现在一个重要的细胞的百分比(11.2%),和CCR6表达的只有5.35%。事实上,大多数CXCR3⁺细胞也CCR5⁺在这一组,而CCR4⁺和CCR6⁺主要是单一阳性细胞。与AAA病人,CCR5的频率的增加⁺对照组细胞,而其他的频率受体PBMC刺激后并没有改变。

通过比较分析周边T_H从AAA病人和控制细胞群,我们检测到一个更高的频率如果干扰素-γ⁺细胞在后者。肿瘤坏死因子-的结果是类似的α、IL-17和il - 4(数字3(一个)- - - - - -3 (e))。然而,频率仍非常低;因此,这可能不会反映生物过程。事实上,如果周边T之间的主要区别_H分析组的淋巴细胞趋化因子受体的表达。CCR6⁺和CXCR3⁺细胞中较普遍从AAA病人控制参与者相比,虽然CCR4和CCR5的频率更高(CCR5和统计学意义)在控制参与者。

当我们比较刺激外周T_H细胞从AAA患者和那些来自控制个人,有一个更高比例的细胞生产签名在病人的外周血细胞因子。事实上,AAA患者干扰素-频率增加γ⁺肿瘤坏死因子-α⁺T_H1,il - 4⁺T_H2,il - 22生成⁺T_H22细胞边缘。唯一的例外是IL-17⁺T_H17淋巴细胞,同样频繁在外周血从病人和对照组。我们还发现一个外围CXCR3的比例下降⁺,CCR5⁺,CCR4⁺T_HAAA级患者的细胞。

此外,我们比较lesional和外周血T_H细胞收集来自同一AAA病人之前和之后在体外刺激(图4)。如果样本,我们发现il - 4的比例增加⁺T_H在病变相比,外周血淋巴细胞(图4 (c))。CCR4结果相似,更频繁的在T_H细胞病变(图4 (h))。激活后,增加T的频率_H发现了细胞与炎性潜在病变。事实上,我们发现更高比例的干扰素-γ⁺肿瘤坏死因子-α⁺T_H1,il - 4⁺T_H2,IL-17⁺T_H17、il - 22生成⁺T_H22比外周血细胞原位(数字4(一)- - - - - -4 (e))。趋化因子受体CCR4 lesional T也更频繁_H人口(图4 (h))。

4所示。讨论

在目前的研究中,我们检查病变患者从AAA关于疾病发病机理得到可靠的场景。为了实现这一目标,我们只招收患者接受开放手术修复的动脉瘤。的标准过程很大程度上解释我们的实验的临床特征组:动脉瘤修复受损的动脉时必须执行超过5.5厘米宽或生长超过8毫米。此外,只有病人没有主要心血管、呼吸道或肾并发症注册开放的手术技术(31日]。同意这些先决条件,主动脉在实验组的平均直径为6.5厘米(晚期病变),和病人并没有显示出严重的相关并发症。此外,生化参数都在正常范围内,除了c反应蛋白。观察到的模式对年龄、性别、和基于之前预计并存病的流行病学研究32]。

我们发现T_H1、T_H2,T_H17日,和T_H22细胞单核细胞浸润使用流式细胞仪从AAA提取病灶。虽然在较低的数字,干扰素-γ⁺肿瘤坏死因子-α⁺T_H1,il - 4⁺T_H2,IL-17⁺T_H17、il - 22生成⁺T_H22细胞中发现如果样本。后在体外刺激,我们发现大量的T_H细胞细胞因子产生他们的签名。最普遍的子集是T_H1 (IFN -γ⁺肿瘤坏死因子-α⁺),其次是T_H2 (il - 4⁺),T_H17 (IL-17⁺),和T_H22 (il - 22生成⁺)。大量IL-17的缺失⁺il - 22生成⁺细胞表明il - 22生成生产是由T_HAAA 22细胞组织。已经表明,这些不同的子集迁移到损伤:通过不同的受体CXCR3 / CCR5 (T_H1)和CCR4 / CCR6 (T_H2,T_H17日,和T_H(22)16,33,34]。在我们的研究中,我们发现CXCR3⁺细胞比CCR5更普遍⁺或CCR5⁺CXCR3⁺如果刺激T细胞_H人群从AAA病变,这表明T_H1细胞可能主要通过CXCR3迁移。事实上,最常见的受体的T_H细胞是CCR4。我们没有检测CCR4的很大一部分⁺CCR6⁺细胞,从而避免了进一步分析病理生理学的T_H17和T_H22的子集,因为这些亚型对这些受体双阳性。CCR4的高患病率⁺T_H单核细胞浸润从AAA病变显示的主要受体T_H2迁移CCR4,这似乎是最常见的一个子集AAA病变。集体,结果对AAA病变显示所有T的存在_H原位子集。

类似于其他研究的结果,通过包含IHC染色,我们发现CD3⁺CD8⁻T细胞主要在follicle-like结构局部AAA的媒体和动脉外膜组织部分(6,35]。事实上,我们观察到阳性染色为il - 4, IL-17, IL-23或il - 22生成与CD3 colocalizing⁺CD8⁻T细胞。因此,我们可以确认存在不同的激活T细胞亚群在AAA病变。有趣的是,我们也发现IL-23 macrophage-like细胞内膜层。按照,Sharma等人先前的论文证明IL-17升高和IL-23表情AAA级患者的主动脉组织中与控制相比,以PCR和ELISA (36]。

一些报道相关T_H子类型的病理生理学AAA (35,37]。这些研究主要集中在T_H1和T_H2人口和细胞因子(IFN -显示他们的签名γ分别为和il - 4)能够诱导的生产和激活不同的酶参与细胞外基质降解,如基质金属蛋白酶和组织蛋白酶(35,38]。有趣的是,许多这样的研究是基于动物模型实验和现在的相互矛盾的数据。熊和他的同事们发现干扰素-γ敲除小鼠小病变相比,野生动物由于降低巨噬细胞MMP的生产,因为缺乏干扰素-γ(39]。然而,另一项研究使用表明,野生型小鼠主动脉移植同种异体移植物段专门引起干扰素-主机γ主要反应在移植,但未能开发AAA。相反,移植到宿主缺乏干扰素-γ受体导致IL-4-dominated响应与内侧弹性蛋白损失和AAA发展。作者得出结论,干扰素-γ的上下文中起着有益的作用AAA,因为它控制有害IL-4-driven响应(40]。

最近的研究试图表明T的角色_H17细胞因子IL-17 AAA发展;然而,结果是矛盾的。罗曼等人一个模型用于SOCS3超表达在T细胞和显示,减少IL-17生产推广严重AAA在老鼠41]。相反,地高辛的抑制IL-17,模型猪胰弹性蛋白酶的C57BL / 6小鼠灌注,提升抵御AAA (42]。这些发现可能是由于应用程序不同的动物模型,结合使用弹性蛋白酶等炎症因子,血管紧张素ⅱ,或氯化钙灌注研究AAA病机,从而不能充分反映人类AAA发展(38]。

我们还分析了不同的T_H子集的外周血通过流式细胞术患者和对照组。我们发现一个低数量的T_H细胞因子在两组细胞积极为他们签名。然而,在在体外刺激,我们发现干扰素的百分比γ⁺肿瘤坏死因子-α⁺(T_H1),il - 4⁺(T_H2),IL-17⁺(T_H17)和il - 22生成⁺(T_H22)细胞增加。结果对照组相似,除了il - 4⁺(T_H2)的比例没有增加。然而,我们注意到AAA级患者有更高比例的T_H子集能够生产他们标志性的炎性细胞因子与控制参与者。因此,我们的研究结果首次表明炎症增加外周血T的潜力_H细胞群在AAA病人可能导致系统性低度炎症过程观察到AAA级患者的血清CRP水平高。

有关趋化因子受体,我们的研究结果显示,最常见的受体外周血T_H细胞从AAA CXCR3和CCR4患者。大部分细胞被单一的正面,和所有的频率刺激后受体减少。从对照组外周血,我们发现CXCR3的比例很高⁺CCR5⁺细胞和CCR4⁺细胞,CCR6越频繁的受体。不同于AAA病人,所有受体的患病率增加外周血T_H细胞刺激后。有趣的是,AAA患者更高比例的如果细胞阳性CXCR3和CCR6 CCR5的频率⁺缺乏刺激的细胞几乎是不存在的。总的来说,这些结果可能反映了AAA患者和对照组之间的差异对于之前激活的外周血。在对照组,大多数的细胞可能是天真的,而细胞从AAA病人可能主要preactivated记忆细胞。

lesional相比我们还和外周血细胞从相同的病人为了副外围和原位免疫反应。关于如果细胞,我们发现没有lesional和外周血样本之间的差异,除了il - 4⁺和CCR4⁺细胞(T_H2)。在体外刺激,lesional样品增加了频率不同的T_H表达他们的签名相比,细胞因子子集外周血样本。此外,在刺激lesional样本CCR4更普遍。这些结果表明,T_H子集优先激活在损伤和炎症过程主要是当地的。

5。结论

总体而言,我们的研究结果清楚地表明存在典型的T_H(T子集_H1和T_H2)和最近发现T_H(T子集_H17和T_H在AAA病变22)。此外,我们表明,增加外周血T的存在_H细胞能产生促炎细胞因子签名可能导致轻度炎症过程发生在患者AAA。然而,我们建议激活不同的T_H优先子集内进行AAA病变。

数据可用性

生成的数据集和/或分析在当前研究可从相应的作者以合理的要求。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

作者感谢FAPESP (Fundacao德帕罗尽管必须占州政府Estado de Sao Paulo),格兰特# 2011/10126-6;CNPq(蹂躏Nacional de Desenvolvimento Cientifico e学府);和斗篷(Coordenacao de Aperfeicoamento de Pessoal de含量比)对金融支持。

补充材料

细节中使用的主要抗体免疫组织化学中可用补充表1。细节的抗体用于细胞外和细胞内染色(流式细胞术)可在补充表2。(补充材料)

引用

1. j·艾默里奇和j . n . Fiessinger“腹主动脉瘤,”《柳叶刀》,卷349,不。9066、第1699条、1997。视图:谷歌学术搜索
2. y Kumar k . Hooda s, p . Goyal n .古普塔和m . Adeb”共同出现的腹主动脉瘤:绘画评论和并发症,”《转化医学,5卷,不。12,256页,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. v . p . Jagadesham d·j·a·斯科特和s . r .梳理“腹主动脉瘤:自身免疫性疾病?”分子医学的趋势,14卷,不。12日,第529 - 522页,2008年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. b . j . Toghill a . Saratzis和m . j . Bown)“腹主动脉aneurysm-an独立的动脉粥样硬化疾病吗?”心血管病理27卷,第75 - 71页,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. k . a .拱腰m . Tataria s . j . Ziporin j·k·李,和r·w·汤普森”活动在人类腹主动脉瘤:单核细胞的趋化作用的弹性蛋白退化肽和67 - kd细胞表面弹性蛋白受体,”血管外科杂志》,35卷,不。2、254 - 261年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. a·e·科赫g·k·海恩斯,r . j . Rizzo et al .,“人类的腹主动脉瘤。Immunophenotypic分析表明免疫介导的反应。”美国病理学杂志》,卷137,不。5,1199 - 1213年,1990页。视图:谷歌学术搜索
7. 林德伯格,m . Zarrouk j·霍尔斯特,a . Gottsater“炎症标记物与腹主动脉瘤相关,”欧洲细胞因子网络,27卷,不。3、75 - 80年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. m . Pahl r . Erdman h . Kuivaniemi j . Lillvis j .爱尔摩和g .跺脚,“转录(ChIP-Chip)分析ELF1 ETS2, RUNX1和STAT5人类腹主动脉瘤,”国际分子科学杂志》上,16卷,不。12日,第11258 - 11229页,2015年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. c . Gonzalez-Hidalgo j·德·哈罗德,s . Bleda c . Canibano米歇尔,f . Acin,“微分inflammasome基因的mRNA表达NLRP1 NLRP3腹主动脉瘤和主动脉闭塞疾病,”治疗心血管疾病的发展,12卷,不。4、123 - 129年,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. s . Soumian r·吉布斯a·戴维斯和c·阿尔布雷特,“mRNA表达的基因参与脂质在闭塞的流出和矩阵退化和扩张的动脉粥样硬化疾病,”临床病理学杂志,卷。58岁的没有。12日,第1260 - 1255页,2005年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. t . Huusko t . Salonurmi p Taskinen et al .,“信使RNA表达和血浆蛋白水平升高的骨桥蛋白和基质金属蛋白酶类型2和9升主动脉瘤患者,”胸心血管外科杂志》上,卷145,不。4、1117 - 1123年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. j . Raffort f . Lareyre m·克莱门特r . Hassen-Khodja g . Chinetti z . Mallat,单核细胞和巨噬细胞在腹主动脉瘤,”自然评论。心脏病学,14卷,不。8,457 - 471年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. k·m·墨菲和s . l . Reiner“辅助T细胞的谱系的决定,”自然评论。免疫学,卷2,不。12日,第944 - 933页,2002年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. e . p . Amento n . Ehsani h·帕尔默和p·利比,“积极的和消极的调节细胞因子和生长因子间质胶原基因表达在人类血管平滑肌细胞,”动脉硬化和血栓形成,11卷,不。5,1223 - 1230年,1991页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. g·k·汉森,m . Hellstrand l . Rymo l .鲁比亚和g . Gabbiani“干扰素γ的抑制增殖和表达differentiation-specific alpha-smooth肌肉肌动蛋白在动脉平滑肌细胞,”实验医学杂志,卷170,不。5,1595 - 1608年,1989页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. 美国Schonbeck, g . k . Sukhova n .格迪斯T和p·利比。_H2主要免疫反应在人类的腹主动脉瘤,”美国病理学杂志》上,卷161,不。2、499 - 506年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. l·e·哈林顿,r·d·哈顿p·r·摩根et al .,“白介素17-producing CD4⁺效应T细胞通过血统发展不同于辅助T类型1和2血统,”自然免疫学》第六卷,没有。11日,第1132 - 1123页,2005年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. s . Trifari c·d·卡普兰,e·h·Tran n . k . Crellin和h .吐,“识别人类辅助T细胞白介素22个人口,拥有丰富的生产和有别于T_H-17年,T_H1和T_H2细胞,”自然免疫学,10卷,不。8,864 - 871年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. 周即伊万诺夫,b·s·麦肯齐l . et al .,“孤儿核受体RORγt指导促炎IL-17的分化程序⁺T辅助细胞。”细胞,卷126,不。6,1121 - 1133年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. g . l . Stritesky:叶,m·h·卡普兰”IL-23促进维护Th17血统,但不承诺”免疫学杂志,卷181,不。9日,第5955 - 5948页,2008年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. j·k·科尔、s . t .假名和a·j·拉姆齐”在肺部炎症Interleukin-17:一个新兴的角色,”美国呼吸系统细胞和分子生物学》杂志上,28卷,不。1、9 - 11,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. x o . h .公园,z . Li Yang et al .,“一个独特的血统的CD4 T细胞调节组织炎症产生白介素17日”自然免疫学》第六卷,没有。11日,第1141 - 1133页,2005年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. a . Andoh z, o . Inatomi et al .,“Interleukin-22, il - 10亚科的一员,在结肠牙龈myofibroblasts诱发炎症反应,”胃肠病学,卷129,不。3、969 - 984年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. c·l·刘h . Wemmelund y王et al .,“哮喘协会与人类腹主动脉瘤破裂,“动脉硬化、血栓和血管生物学,36卷,不。3、570 - 578年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. 美国哈立德,a . Egeberg o . Ahlehoff l . Smedegaard g . h . Gislason和p·r·汉森”全国研究银屑病患者的腹主动脉瘤的危险,”动脉硬化、血栓和血管生物学,36卷,不。5,1043 - 1048年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. p . j . Mease”,抑制interleukin-17 interleukin-23 TH17细胞通路治疗银屑病关节炎和牛皮癣,”当前舆论风湿病学,27卷,不。2、127 - 133年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. t, s . Yu, d .马”Th22及相关细胞因子在炎症和自身免疫性疾病,”专家意见的治疗目标,17卷,不。2、113 - 125年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. p . j . Murray j·e·艾伦,s . et al .,的k .比斯华斯“巨噬细胞激活和极化:命名法和实验指导方针,“免疫力第41卷。。1、14到20,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. l .张和y, B淋巴细胞在腹主动脉瘤,”动脉粥样硬化,卷242,不。1,第317 - 311页,2015。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. e . Ocana j . c . Bohorquez j . Perez-Requena j . a . Brieva和c·罗德里格斯,”描述的T和B淋巴细胞浸润腹主动脉瘤,”动脉粥样硬化,卷170,不。1,39-48,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. a·r·布雷迪·g·汤普森,f . g . Fowkes r·m·格林哈尔希j·t·鲍威尔和英国小动脉瘤试验参与者,“腹主动脉瘤扩张:风险因素和监视时间间隔,”循环,卷110,不。1月16,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. j·f·布兰查德,h . k .亚美尼亚和p·p·弗“腹主动脉瘤的危险因素:一项病例对照研究结果,“美国流行病学杂志》,卷151,不。6,575 - 583年,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. e . v . Acosta-Rodriguez l . Rivino j . Geginat et al .,“人类白介素17-producing表面表型和抗原特异性T辅助记忆细胞,”自然免疫学,8卷,不。6,639 - 646年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
34. k . Wolk和r·萨瓦特”Interleukin-22: T -和天然杀伤细胞中细胞因子调节组织细胞的生物学,”细胞因子和生长因子的评论,17卷,不。5,367 - 380年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. n·d·佛瑞斯特,s m•克鲁克香克·d·j·a·斯科特和s . r .梳理“功能描述腹主动脉瘤的T细胞,”免疫学,卷115,不。2、262 - 270年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
36. a·k·沙玛,g, a Jester et al .,“实验性腹主动脉瘤的形成是由IL-17和减毒的间充质干细胞治疗,”循环卷。126年,11 _supplement_1 S38-S45, 2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
37. n . Sakalihasan r . Limet, o . d . Defawe“腹主动脉瘤,”《柳叶刀》,卷365,不。9470年,第1589 - 1577页,2005年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
38. k .清水r·n·米切尔和p·利比,“炎症和细胞免疫反应在腹主动脉瘤,”动脉硬化、血栓和血管生物学,26卷,不。5,987 - 994年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
39. w . Xiong, j .麦克塔r . Knispel j .值得y Persidsky,阻断TNF - b和t·巴克斯特。α变弱动脉瘤形成在小鼠模型中,“《免疫学,卷183,不。4、2741 - 2746年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
40. 清水k . m . Shichiri·利比r·t·李和r·n·米切尔Th2-predominant炎症和干扰素-的封锁γ信号引起动脉瘤在同种异体移植物主动脉。”临床研究杂志,卷114,不。2、300 - 308年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
41. m·罗曼·s·塔勒布,m . Dalloz et al .,“过度SOCS3的T淋巴细胞导致受损interleukin-17生产和严重的动脉瘤形成老鼠——简要报告,“动脉硬化、血栓和血管生物学,33卷,不。3、581 - 584年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
42. z, y, k . Zhang et al .,“抑制Th17 / IL-17A-related炎症反应与地高辛授予保护实验性腹主动脉瘤,”动脉硬化、血栓和血管生物学,34卷,不。11日,第2438 - 2429页,2014年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

版权

版权©2018法比奥Haach Teo等。这是一个开放分布式下文章知识共享归属许可,它允许无限制的使用、分配和复制在任何媒介,提供最初的工作是正确引用。