文摘
假丝酵母glabrata是一种兼性胞内机会性真菌病原体在人类感染。几个virulence-associated属性是参与其发病机理,host-pathogen交互,宿主免疫防御系统的调制,监管抗真菌药物的耐药性。本研究评估了体外抗真菌敏感性五抗真菌制剂,生产七水解酶与毒性有关,和这些表型之间的关系在91年临床菌株c . glabrata。所有c . glabrata压力很容易结合氟胞嘧啶使用。然而,这些菌株中有一些抵抗两性霉素B(9.9%)、氟康唑(15.4%)、伊曲康唑(5.5%)、或micafungin (15.4%)。总的来说,c . glabrata过氧化氢酶的菌株是好的生产商、天冬氨酸的蛋白酶、酯酶、植酸酶和溶血素。然而,caseinase和磷脂酶体外活动没有检测到。之间的显著相关性被确定micafungin最低抑制浓度(MIC)和酯酶生产、氟康唑和micafungin麦克风和溶血性活动之间,两性霉素B麦克风和植酸酶生产之间的关系。这些结果有助于澄清一些c . glabrata致病性机制。此外,一些毒性属性之间的关系和抗真菌耐药性的监管鼓励发展新的治疗策略包括毒性机制作为潜在的目标有效的抗真菌治疗药物开发的c . glabrata感染。
1。介绍
假丝酵母glabrata是一种兼性胞内机会性真菌病原体,在几个细胞生存和复制的能力,如成骨细胞(1),中性粒细胞(2),和巨噬细胞3]。这种酵母可以分离出人体的不同区域,如口腔、胃肠道,和阴道粘膜,引起疾病在大多数人4]。然而,由于增加了使用免疫抑制药物和艾滋病的出现,的频率c . glabrata感染显著增加全球在过去年5- - - - - -8]。
在过去的十年中,两个新物种的表型相关c . glabrata在文献中描述:假丝酵母nivariensis和假丝酵母bracarensis。这三个物种表型上是没有区别的,但基因异构(9,10]。有必要定期监控c . glabrata种类复杂,以确定这些临床相关的频率假丝酵母种类、地理分布、毒性属性,和他们倾向港抗真菌耐药机制(11,12]。
治疗和预防性使用长时间服用唑抗真菌治疗侵袭性念珠菌病的治疗,特别是在免疫功能低下的患者,导致耐药性的增加现象c . glabrata(5,7,13]。echinocandins已成为首选的代理最集candidemia和侵袭性念珠菌病根据最近的管理方针念珠菌病(14]。然而,echinocandin阻力增加c . glabrata(15),包括在fluconazole-resistant隔离(5,15,16]。
的致病性假丝酵母种虫害是通过表达式在几个virulence-associated因素,特别是坚持宿主细胞,形成生物膜的能力,抵抗过氧化氢和衍生品,生产能力和分泌水解酶,特别是蛋白酶、磷脂酶和溶血素(17,18]。相比,白念珠菌,有更少的研究的潜在毒性产生的属性c . glabrata。
本研究旨在评价体外抗真菌敏感性,水解酶的生产,这些表型的集合之间的关系c . glabrata巴西医院临床分离菌株。
2。材料和方法
2.1。真菌菌株
总共91酵母菌株,1998年至2015年收集在两个三级医院位于里约热内卢,巴西,初步确定的API 20 c辅助(bioMerieux、法国)c . glabrata纳入本研究。几个临床标本中分离的菌株,如胃管( );肾脓肿分泌( );胸膜液( );分泌的外科排水( );术后伤口分泌物( );腹水( );腹部分泌( );腹水( );痰液( );静脉导管( );支气管肺泡灌洗( );阴道分泌物( );粪便( );气管分泌物( );尿液( );和血液( )。在实验之前,这些临床菌株从存储中恢复过来(−20°C),生长在Sabouraud葡萄糖琼脂和CHROMagar假丝酵母介质在37°C(48小时),以评估他们的生存能力和纯洁,分别。物种的表型确认后存储与Vitek - 2通过生化分析系统(bioMerieux, Marcy-L 'Etoile,法国)使用YST卡根据制造商的指导方针。此外,c . glabrata写明ATCC 2001型菌株作为控制应变包含在所有的实验。
2.2。分子识别
酵母细胞从纯粹的殖民地恢复Sabouraud葡萄糖琼脂和用于DNA提取Gentra®Puregene®酵母和G +细菌工具包(试剂盒®)。压力通过测序its1 - 5.8 - s - its2 rDNA区域如前所述[9),使用引物ITS1 (5′-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3′)和ITS4 (5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′)。序列编辑使用Sequencher™version 4.9和比较通过爆炸序列可以从NCBI数据库/基因库。
2.3。抗真菌敏感性测试
体外抗真菌敏感性测试根据提出的建议进行临床和实验室标准协会(CLSI) M27-A3协议(19]。两性霉素B (AMB)、氟康唑(方法),伊曲康唑(ITC) micafungin (MCF),和5-flucytosine (5-FC) (Sigma-Aldrich化学公司,圣路易斯,密苏里州,美国)进行了测试。短暂,RPMI 1640中碳酸氢谷酰胺和没有(Gibco BRL,生命技术、Woerden荷兰),与0.165米3 -缓冲N -morpholinepropanesulfonic酸(拖把),pH值7.0,用于肉汤采用测试。双倍稀释药物的表现和分布在96 -好平底盘子浓度从64 - 0.125不等μ方法和5-FC g / mL, 8 - 0.015μg / mL AMB和ITC,或4 - 0.008μ对MCF g / mL。24小时的真菌培养液准备Sabouraud葡萄糖琼脂文化孵化35°C;细胞被收割RPMI中、稀释至约1 - 5×103细胞/毫升。板块在35°C孵化24 h。药物的最低抑制浓度(MIC)测定按照CLSI M27-A3建议(19];ITC, MIC值AMB和5-FC解释按照CLSI M27-S3协议;和麦克风值方法和MCF解释按照CLSI M27-S4协议(20.,21]。麦克风是验证后第二个实验在相同条件下进行相同的麦克风为每个应变值验证。
2.4。水解酶的生产
生产的水解酶在琼脂板进行化验如前所述的价格等。22]。短暂,天门冬氨酸蛋白酶活动决心用1.17%酵母碳基中补充0.2%牛血清白蛋白Ruchel et al。23]。Caseinase活动评估使用Sabouraud葡萄糖琼脂提供1%酪蛋白如前所述的威胁等。24]。磷脂酶活性的测定进行了使用蛋黄琼脂板法(2%葡萄糖,1%蛋白胨、酵母提取物0.5%,4%的氯化钠,CaCl 0.074%2,1.5%的琼脂,2%的新鲜蛋黄是添加到培养基)如前所述,价格等。22]。酯酶的生产是化验使用渐变琼脂板(CaCl蛋白胨酵母提取物0.5%,1%,0.01%2,1.5%的琼脂,80年,0.1%的渐变,pH值7.0)根据Aktas et al。25]。植酸酶活性评估使用钙肌醇六磷酸酯琼脂(1%,葡萄糖0.05% (NH4)2所以4,0.02%的氯化钾,MgSO 0.01%4h·72啊,0.2%钙肌醇六磷酸酯,MnSO 0.05%酵母提取物,0.0005%4,0.0005% FeSO4,1.5%的琼脂,pH值7.0)根据曾26]。溶血性活动在一个商业评估血琼脂平板检测法(体劳动、巴西)。确定酶的活动,能整除(10μl) 48 h老培养真菌细胞(107表面的细胞)被发现每个琼脂培养基和孵化在37°C长达7天。菌落直径(一个)和菌落的直径加上降水区域(b)是衡量一个毕业的统治者,被表示为酶的活动Pz值(a / b)如前所述22]。的Pz得分值分为四类:Pz为1.0时表示没有酶活性;Pz在0.999和0.700之间表示弱生产商;Pz在0.699和0.400之间与良好的生产者;和Pz低于0.399意味着优秀的生产商(22]。
使用半定量的测定过氧化氢酶活性进行了测定与轻微修改根据Metchock et al。27]。总之,螺旋帽管包含Sabouraud葡萄糖琼脂培养基接种200μL暂停c . glabrata细胞对应0.5麦克法兰标准和孵化37°C 48 h。孵化后,1毫升的一个刚做好1:1 80二层的10%和30%过氧化氢的混合物添加到文化。列泡沫是在室温下以毫米后5分钟。未经变质处理的介质被用作消极的控制。一列的泡沫< 45毫米分为低过氧化氢酶生产商,而列泡沫> 45毫米列为高过氧化氢酶生产商(27]。
自媒体和条件可能发挥关键作用的酶的基因表达研究,所有酶测试进行文化媒体准备从一个瓶子和测试使用相同的设备。此外,所有的测试确定生产的水解酶进行复制,和酶活动的结果表现为平均值±标准偏差(SD)。
2.5。统计分析
统计分析与GraphPad棱镜5计算机软件®。MIC值之间的相关性和酶活性都使用了斯皮尔曼等级相关,由于变量不满足二元正态分布的假设。成对的数据之间的关系的强度是通过斯皮尔曼相关系数(解释r年代)分析,近了r年代是±1,关系越强。此外,菌株分组根据其磁化率剖面(susceptible-dose依赖/抗方法;易感/ nonsusceptible其他药物),每组酶活性值的中位数是使用Mann-Whitney相比U测试。值为0.05或更少被认为是所有测试达到统计上的显著水平。
3所示。结果
3.1。真菌菌株的表型和分子识别
所有91临床酵母菌株菌落产生铜色素生色CHROMagar光滑的质地假丝酵母媒介,污染或混合殖民地没有检测到。根据Vitek 2生化分析系统,这些菌株被确定为c . glabrata平均98%的概率。
此外,91年所有的酵母菌株被确定通过测序的its1 - 5.8 - s - its2 rDNA区域。这些临床菌株显示相比99 - 100%相似c . glabrataAY939793序列存入数据库基因库,从而确认他们的身份c . glabrata。没有c . nivariensis或c . bracarensis在这项研究中被发现。获得的序列its1 - 5.8 - s - its2地区的临床菌株在加入数字KX450781-KX450814存入基因库,KX450816-KX450833 KX450835-KX450861, KX450863-KX450874。
3.2。磁化率的c . glabrata对五个抗真菌药物
有关抗真菌敏感性资料(表1),所有91年临床菌株c . glabrata很容易5-FC。然而,这些菌株显示AMB阻力,方法,国贸或MCF。总之,九c . glabrata株(9.9%)可能对AMB如下:五个菌株表现出2的麦克风μg / mL,应变呈现麦克风之一4μg / mL,和三个菌株表现出8的麦克风μ这个多烯剂g / ml。方法是最高的唑耐药菌株的数量(麦克风≥64μg / mL)。总共14株(15.4%)的方法,而5(5.5%)抵抗ITC。14株c . glabrata(15.4%)表现出麦克风> 0.12μMCF g / mL。
的c . glabrata写明ATCC 2001型菌株分为susceptible-dose依赖方法(8的麦克风μg / mL)和容易AMB, ITC, MCF和5-FC(麦克风的0.12、0.06、0.06和0.12μg / mL,职责)。
11个测试的91株(12.1%)列为对至少两种抗真菌药物。表2总结了临床菌株耐药性的巴西测试c . glabrata。
阻力之间的关系和临床菌株的起源或年隔离测试没有发现任何抗真菌药物( )。
3.3。水解酶的生产
在这组实验中,体外的能力c . glabrata产生蛋白酶(天冬氨酸的蛋白酶和caseinase)、磷脂酶、酯酶、植酸酶、溶血素、过氧化氢酶进行评估。磷脂酶和caseinase活动没有检测到雇佣了实验条件下的压力测试。八十七株的c . glabrata(95.6%)能够产生天门冬氨酸蛋白酶(Pz从0.100到0.583),而四株(4.4%)没有显示出酶活性的水解酶(Pz =1.0)。的临床菌株c . glabrata天冬氨酸的生产蛋白酶被分类如下:30临床菌株(33.0%)被认为是优秀的生产商(Pz从0.100到0.395),57临床株(62.6%)列为好生产商(Pz从0.400到0.583)。
酯酶中检测出51c . glabrata株(56.0%),是一株(1.1%)列为优秀的酯酶生产商(Pz意味着= 0.393±0.050),48株(52.7%)被认为是良好的生产者(Pz从0.414到0.667),两种(2.2%)被认为是弱势生产者(Pz从0.762到0.800)。
对植酸酶生产,所有的压力都是正面的(Pz从0.114到0.762),10株(11.0%)被认为是优秀的生产商(Pz从0.114到0.380),80株(87.9%)列为好生产商(Pz从0.400到0.692),一个应变(1.1%)被认为是软弱的植酸酶生产商(Pz意味着= 0.762±0.050)。
溶血性活动在90年被观察到c . glabrata株(98.9%),是一株(1.1%)认为优秀的生产商溶血素(Pz意味着= 0.385±0.000),82株(90.1%)划分为良好的生产者(Pz从0.409到0.688),和7株(7.7%)被认为是弱势生产者(Pz从0.722到0.795)。
的c . glabrata写明ATCC 2001型压力被认为是一个优秀的天冬氨酸的蛋白酶生产(Pz意味着= 0.357±0.034)和疲软的生产植酸酶(Pz意味着= 0.714±0.000)。Caseinase、磷脂酶、酯酶和溶血活动没有检测到雇佣了实验条件下的压力。
过氧化氢酶的活性检测c . glabrata病毒研究,包括c . glabrata写明ATCC 2001型菌株。所有的菌株产生的泡沫立即过氧化氢水解后,这些菌株被列为高过氧化氢酶生产商。
水解酶的菌株的毒力相关不相关的临床来源菌株和应变隔离( )。
3.4。抗真菌磁化率剖面和毒性之间的关系属性
斯皮尔曼相关显示重要的植酸酶生产和AMB麦克风之间的关联,溶血素生产和方法麦克风,酯酶生产和MCF麦克风,溶血素生产和MCF麦克风(表3)。根据r年代分析,phyatsePz和AMB麦克风,溶血素Pz和方法麦克风,溶血素Pz和MFC麦克风有负面单调相关性,而酯酶Pz积极和MCF麦克风单调关联。此外,所有负相关变量的强度分为弱,和酯酶/ MCF相关性分为温和。
对菌株的酶活动分组根据他们的磁化率剖面,平均产值的差异研究水解酶都没有发现的菌株c . glabrata与不同的药物敏感性AMB ( )。然而,在酯酶中位数统计上显著差异Pz价值观之间发现菌株具有不同MCF易感性概要文件和中位数Pz值溶血活性菌株之间不同的方法,ITC, MCF易感性概要文件(图1)。
(一)
(b)
(c)
(d)
4所示。讨论
表型方法不能区别对待c . glabrata,c . nivariensis,c . bracarensis(9,10]。因此,作为建议,作者(9,28),基于测序的分子方法的its1 - 5.8 - s - its2 rDNA区域来总结临床菌株的鉴定分析研究。c . glabrata是唯一的物种。这些结果与以前的研究一致12,29日),显示的高发病率c . glabrata考虑的c . glabrata物种复杂。酵母的正确识别物种引起侵袭性真菌病是基础,以确保适当的病人的管理和具体,早期,和有效的抗真菌治疗9,30.,31日]。
在抗真菌剂用于念珠菌病的管理,我们可以强调两性霉素B,氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑、isavuconazole, echinocandins, 5-flucytosine [14]。不幸的是,只有方法和echinocandins临床CLSI所描述的断点c . glabrata(21]。虽然没有建议,临床断点AMB CLSI文档表明MIC值这个抗真菌药物高于1μg / mL暗示电阻(19),这种药物纳入我们的原因分析。临床caspofungin和断点c . glabrata已被描述。然而,一些研究指出,肉汤采用测试是不适合caspofungin麦克风的决心,因为不明原因的多个实验室的差异是很常见的这种药物(32- - - - - -34),因此caspofungin并没有包含在这个研究。相反,MCF选择检查是否毒性属性规范echinocandins的阻力,因为这种药物不提高麦克风caspofungin[测定过程中观察到同样的问题34]。
在这项研究中,大多数的c . glabrata菌株提供了一个麦克风≤1μAMB g / mL。氟康唑和micafungin电阻被指出在一些c . glabrata菌株。也观察到类似的结果[葡萄牙多中心调查35),在全球研究开发在2014年哨兵抗真菌监测计划。(36]。然而,先前的研究开发在秘鲁(37)和巴西(38),用少量的菌株( ,15隔离,resp)没有发现c . glabrata菌株与AMB麦克风> 1μ克/毫升。
根据临床断点c . glabrata,发现耐药菌株的频率是方法和MCF更高。此外,一些c . glabrata菌株耐药方法和MCF。类似的结果在其他研究表明,fluconazole-resistant被发现c . glabrata隔离是对一个或多个echinocandins [5,15]。Echinocandins的阻力似乎与之前暴露于这些药物的存在颗突变(15,16),而氮杂茂的阻力可以羊毛甾醇14的改变的结果α-demethylase目标酶编码基因超表达或突变ERG11(39),或过度的射流泵介导的激活腺苷的表达盒(ABC)或主要主持人总科(MFS)转运蛋白40- - - - - -42]。
在这项研究中,结合氟胞嘧啶使用演示了最伟大的体外抗真菌活性c . glabrata临床菌株。然而,体内,这种药通常是结合另一个抗真菌剂由于高耐药性的出现在单一治疗念珠菌病(14]。
除了CLSI法应用在这项研究中,唯一的其它国际标准方法对酵母的抗真菌敏感性测试,欧洲委员会公布的药敏试验(EUCAST) [43]。Pfaller et al。44)这两个标准化方法相比10抗真菌制剂,包括氟康唑、伊曲康唑、两性霉素B micafungin,结合氟胞嘧啶使用,对临床分离的集合白色念珠菌,c . glabrata,c . parapsilosis,c . tropicalis,c . krusei。结果表明,CLSI和EUCAST方法产生相似的结果为抗真菌敏感性测试五个最常见的物种假丝酵母,说明它们的使用不应导致电阻配置文件不同的足以影响直接的治疗决定。
在假丝酵母物种,胞外水解酶促进营养,坚持,殖民,渗透组织或细胞的入侵,传播,逃避宿主免疫反应(18,45]。此外,分泌的水解酶的调节能力假丝酵母种虫害抗真菌耐药性(46]。
天冬氨酸的蛋白酶酶蛋白水解活性高和稳定性在酸性pH值(47]。在先天免疫逃避这些酶控制几个步骤,和它们降解蛋白质抗体等免疫防御,补充,和citokines,使真菌逃避宿主防御的第一行(48]。此外,一项研究由席尔瓦et al。46)表明,自然抗性假丝酵母种虫害或隔离了抗药性后长时间暴露于药物可能会增加分泌模式和天冬氨酸的分泌的蛋白水解活性蛋白酶(SAP),但需要更多的研究来阐明其关系。在我们的研究中,大多数菌株c . glabrata天冬氨酸的蛋白酶生产商被归类为好。然而,c . glabrata并不拥有经典SAP基因的基因组(46,49]。可能的酶促降解白蛋白验证本可能是由于yapsins的生产。yapsins (yp)是一个五口之家nonsecreted glycosylphosphatidyinositol-linked天门冬氨酸蛋白酶在细胞壁的完整性和著名的角色增加真菌的能力生存在人类巨噬细胞(50]。一项研究由Swoboda-Kopećet al。51确认三个基因的流行(YPS2,YPS4,YPS6在大多数c . glabrata从临床分离菌株的标本。
酪蛋白是磷蛋白质的混合物,可以通过一系列的水解酶统称为caseinases。这些酶属于最有可能和丝氨酸蛋白酶的家庭金属(52]。Caseinase活动在不被察觉的情况下雇佣了实验条件下的测试c . glabrata菌株。然而,这些结果是不一致的与abb等发现的。5316)报告caseinase活动c . glabrata隔离。的分泌caseinase也被观察到假丝酵母parapsilosis美国这篇(24),假丝酵母haemulonii物种复杂(54),而Yarrowia lipolytica(53]。Parnanen et al。55)中分离出一种丝氨酸蛋白酶c . glabrata与真菌细胞壁,但其毒性的作用c . glabrata仍不确定。
细胞外磷脂酶和酯酶分解脂肪的酶参与的毒性假丝酵母spp。24,54]。其可能的功能包括脂类的消化营养收购,粘附宿主细胞和组织,协同交互与其他酶、非特异性水解,启动炎症过程的影响免疫系统的细胞,和自卫56]。在这个工作,没有一个c . glabrata磷脂酶的菌株水平检测。Udayalaxmi et al。5714)也没有发现磷脂酶活动c . glabrata临床分离菌株泌尿生殖系统。从巴西的一项研究发现磷脂酶活性的琼脂板的方法只有一个c . glabrata应变与一匹马的鼻泪管出口58),从而确认磷脂酶产量低c . glabrata,尤其是那些孤立的从人类临床标本。在一项调查中假丝酵母观察阴道隔离从埃及、磷脂酶活动在一个小数量的c . glabrata菌株。这个研究还发现了磷脂酶PB2基因在几株进行了研究。另一方面,磷脂酶的发生率PB1基因的假丝酵母人口研究高,从87.5%到95%不等,这取决于患者患糖尿病(历史,59]。
酯酶生产菌株之间的virulence-related表型有变异的研究。在一项研究中与8个来自伊朗c . glabrata菌株与口腔黏膜,酯酶生产变化显示低于当前的工作,大部分菌株分为酯酶生产商(60]。另一方面,来自土耳其的一项研究显示,只有一个来自14个c . glabrata菌株分离血液感染在酯酶琼脂试验被认为是积极的。这些数据表明,酯酶的生产c . glabrata可能是高度异构根据临床材料或地理区域的来源的菌株被孤立。酯酶的主要生产MCF易感c . glabrata菌株。降解几丁质酶的能力也被归类为酯酶(61年),和几丁质含量高caspofungin有些阻力假丝酵母物种(62年]。我们不知道到什么程度的酯酶琼脂板试验用于这项研究还可以检测甲壳素desacetylases或如果所有酯酶基因的表达家庭有相同的规定c . glabrata菌株。斯皮尔曼的相关分析表明随着MCF麦克风增加,酯酶生产不会增加,这可能是更高的反射的细胞壁中几丁质含量低耐药菌株由于几丁质降解。正在进行进一步的研究来验证这个假设。
植酸酶是一个劈开phosphohydrolase phytate-releasing无机磷酸肌醇,两个基本营养素对所有活细胞(63年]。在这项研究中,植酸酶活性检测c . glabrata菌株。在不同的报告了类似的结果假丝酵母spp。,包括c . glabrata(26),假丝酵母parapsilosis物种复杂(24,64年),而假丝酵母haemulonii物种复杂(54]。在假丝酵母spp,维护供应磷酸肌醇,由植酸酶似乎特别重要病原体生存和持久性的主机(26]。这是观察到随着AMB麦克风增加,植酸酶生产不减少c . glabrata我们的研究。我们所知,没有相关性的报道植酸酶生产和AMB麦克风。虽然我们无法找到植酸酶中值之间的差异Pz值在敏感和耐药AMB菌株,PMann-Whitney测试获得的价值很低( ),两者之间的差异观察统计测验可能解释为低AMB-resistant菌株研究人群的数量。
铁吸收的一个基本要求,致病性真菌生存和成长为宿主。因此,他们的生存依赖于专门的机制以适应发病期间微量营养物质的限制。一般来说,真菌不得不红细胞溶解吸收铁与血红蛋白(65年]。只有一个的c . glabrata菌株的研究是无法产生溶血素,结果同意以前的出版物(66年- - - - - -68年),反映出这个酵母毒性因子的重要性。事实上,铁吸收机制的毒性被证明是必要的c . glabrata(69年]。铁吸收也参与抵抗的新型隐球菌(70年),假丝酵母物种(71年方法]。在方法取得的c . glabrata应变暴露在新月唑浓度,溶血活性的增强与溶血素基因的超表达也观察到(72年]。因此,我们希望azole-resistant菌株表达更多的溶血素。因为低数量的方法和ITC抗力移转观察在我们的研究中,我们可以推测,不同的iron-dependent机制调节电阻不同的唑类。令人惊讶的是,它还注意到,溶血素的高表达c . glabrata菌株对MCF。MCF和deferasirox之间的协同效应,铁螯合剂,被描述腐霉属insidiosum,这表明铁提高抵抗这echinocandin [73年]。我们的研究结果支持发生在类似的机制c . glabrata。总之,铁吸收不仅唑耐药性有关c . glabrata,但也耐echinocandin药物,如MCF。这些结果鼓励发展新的治疗策略包括铁损耗,已经描述白念珠菌(74年侵入性的治疗c . glabrata感染。
过氧化氢酶表达的所有菌株进行测试。然而,没有观察到的相关性之间的这种酶的活性,这些临床分离株的抗真菌敏感性。c . glabrata拥有两种酶,谷胱甘肽的机制来抵抗氧化应激诱导宿主的免疫防御系统(75年),我们的研究结果加强维护氧化还原酶机制的重要性在临床体内平衡c . glabrata菌株。
5。结论
这些发现有助于更好的理解c . glabrata发病机理,表明天冬氨酸的蛋白酶、酯酶、植酸酶、溶血素、过氧化氢酶存在于从临床菌株来源。此外,之间的关系表达式的毒性与抗真菌抗多基因因素,唑类,echinocandins鼓励发展新治疗协同策略涉及毒性机制等水解酶对耐药性作为潜在的目标c . glabrata感染。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
确认
作者感谢CAPES-PROEX,资助出版的这项工作,Leal亚历山德拉•达席尔瓦查维斯,提供一些菌株包括在这项研究中,Marilia马丁斯Nishikawa,提供c . glabrata写明ATCC 2001型菌株。自动测序进行使用DNA测序平台(abi - 3730;应用生物系统公司)(PDTIS / Fiocruz-Rio里约热内卢,巴西)。罗德里戈Almeida-Paes和罗斯玛丽亚Zancope-Oliveira支持部分慰问Nacional de Desenvolvimento Cientifico e学府305487/2015-9和304976/2013-0)(批准号。