研究文章
香烟烟雾暴露通过TFEB-Mediated自噬抑制细菌造成损伤和产生的吞噬作用的缺陷
图5
非瑟酮复苏缺陷由雌性生殖道抑制吞噬作用。(一)原始细胞使用CFTR172抑制剂和/或非瑟酮(20μ米)8小时后感染PA01-GFP3小时的莫伊10。感染后,这些细胞被洗两次与PBS和观察使用亮场和荧光显微镜(规模酒吧,70μ米)。荧光图像被用来计数的数量巨噬细胞感染(细菌细胞内)使用ImageJ软件。数据表明,抑制雌性生殖道损害吞噬细菌数量显著降低的细胞内所示,由非瑟酮显著恢复治疗。从(a) (b)数据表示为均值±SEM巨噬细胞感染的比例,
,
。(c)细菌生存分析都使用了手机媒体(100μl)从实验小组,镀2%磅琼脂板和孵化24小时在37°C。克隆形成单位细菌计数显示,雌性生殖道抑制导致更高数量的cfu代表受损的吞噬作用,由非瑟酮显著恢复治疗。数据表示均值±cfu的扫描电镜,
,
。(d)原始细胞治疗CSE和/或非瑟酮(20μ米)8小时。治疗后,血清总蛋白溶菌产物分离和分析免疫印迹的雌性生殖道的表达和p62表达的变化。免疫印迹分析表明,膜雌性生殖道表达式(c波段)显著减少了CSE曝光,这是明显恢复非瑟酮治疗。β肌动蛋白被用作加载控制。CFTR (e)微密度分析检测和p62表达规范化β肌动蛋白。数据代表每组和误差,描绘意味着±SEM,
。因此,数据显示,雌性生殖道抑制影响巨噬细胞的吞噬能力。此外,非瑟酮显示能够纠正这种CFTR-mediated吞噬缺陷在原始细胞。
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| (b) |
| (c) |
| (d) |
| (e) |