中性鞘磷脂酶的行为在海马体神经炎症MPTP-Induced帕金森病小鼠模型和在胚胎海马细胞

文摘

中性鞘磷脂酶是参与增长逮捕、分化、增殖和凋亡。尽管先前的研究已经报道在海马体生理病理学中性鞘磷脂酶的参与,其行为在海马体帕金森病仍未被发现。在这项研究中,我们将会显示一个upregulation诱导一氧化氮合酶的差别,对这些中性鞘磷脂酶在1-methyl-4-phenyl-1海马体,2,3,6-tetrahydropyridine——注射(MPTP药物-)诱导帕金森病小鼠模型。此外,中性鞘磷脂酶活动的刺激与维生素1,25-dihydroxyvitamin D3特别减少饱和脂肪酸鞘磷脂通过鞘磷脂刚性分子可能会影响神经可塑性。可能的生物相关性中性鞘磷脂酶的增加帕金森病进行了探讨。

1。介绍

描述了神经炎症参与帕金森病的发病机理1]。之前在1-methyl-4-phenyl-1证明,2,3,6-tetrahydropyridine——注射(MPTP药物-)诱导小鼠模型的帕金森病(PD),中脑的特点是过度的钙粘蛋白和白细胞介素- 6伴随着减少多巴胺合成的酪氨酸羟化酶(2]。另一方面,在MPTP-induced帕金森,促炎细胞因子的增加是减毒通过吸收FK506,免疫抑制剂药物(3]。Castro-Hernandez等人证明MPTP-induced多巴胺损失了时间的影响;神经毒性效应很明显主要在海马腹侧区(4]。最近,年龄相关性海马体积损失与认知障碍患者PD所示(5]。Lipopolysaccharide-induced神经炎症改变从大鼠海马等离子体膜的脂质成分6],调制神经炎症的鞘脂类被描述(7]。Glucocorticosterone诱导神经酰胺的释放到细胞外空间的海马体,减少神经干细胞增殖(8]。神经酰胺是一类鞘脂类,由sphingomyenase (SMase)和从头合成,调节各种细胞功能如增殖、分化、衰老、凋亡、自噬、迁移,细胞内贩卖(9]。中性SMase (nSMase) /描述了神经酰胺通路参与海马炎症期间ischemia-associated神经损伤(10]。nSMase活动减少神经酰胺积累的抑制星形胶质细胞,减轻神经元损伤10]。此外,SMase抑制serotonin1A受体的配体结合功能(11)和减少M1毒蕈碱的受体(12在海马体。鞘磷脂的水解(SM)与生产sphingosine-1-phosphate海马神经元兴奋性增加(13]。到目前为止,还没有在海马神经炎症nSMAse PD的数据。在这里,我们调查的可能变异nSMase与诱导一氧化氮合酶(间接宾语)与MPTP-induced PD小鼠的海马齿状回。我们的结果显示减少nSMase。发生在成人齿状回神经发生(14),我们使用1,25-dihydroxyvitamin D3 (VD3)通过nSMase诱导细胞分化[15,16)刺激nSMase胚胎海马细胞。然后,我们研究了SM物种的变化为了理解可能减少nSMase PD的重要性。

2。方法

2.1。动物

十- twelve-week-old雄性C57BL / 6 j小鼠体重25 - 30 g (CERJ、法国)被用作之前报道(2]。老鼠被保存在一个温控房间(23°C±1°C)下12小时光/暗周期提供食物和水随意。动物治疗进行根据伦理法规和指南(指导的护理和使用实验动物,国家卫生研究院出版数量85 - 23,1985年修订)和欧洲理事会指令86/609 / EEC社区。实验协议后进行动物实验伦理的法国国家结构图(文章R 214 - 87 - 126的农村“代码”)和获得伦理委员会的批准5号“达尔文”和ICM的动物保健和使用委员会。

2.2。试剂

Anti-nSMase和anti-NOS2 (M-19)来自圣克鲁斯生物技术有限公司(美国加州)。sds - page分子量标准从Bio-Rad实验室(美国大力神,CA)。VD3是来自意大利DBA(贝鲁斯意大利米兰)。杜尔贝科修改鹰的介质(DMEM),牛血清白蛋白,tetramethylrhodamineisothiocyanate-conjugated山羊anti-rabbit免疫球蛋白,和MPTP-HCl从西格玛化工有限公司(圣路易斯,密苏里州,美国)。脂质标准16:0SM、18:1SM 24:0SM买来两代情(美国艾尔Avanti极地雪花石膏)。

2.3。注射MPTP和组织准备

动物被当作之前报道(2]。组的老鼠( 注射)收到MPTP药物在急性协议。老鼠给4 i.p。在剂量注射MPTP-HCl 2小时,20毫克/公斤(自由基地)。他们安乐死注射最后MPTP药物注射后7天。控制老鼠收到同等体积的0.9%氯化钠溶液。移除大脑后缀在新鲜的4%多聚甲醛(PFA) /磷酸盐(PBS)的解决方案,与30%蔗糖cryoprotected 0.1 PB和冷冻异戊烷(−30°C)。大脑自由浮动部分(20μ米厚)包括海马体是准备使用冷冻切片机(Microm,德国)。部分存储在−70°C到使用。

2.4。免疫荧光

一夜之间,低温恒温器部分被孵化的3% (w/v牛血清白蛋白(BSA)和1% (w/v)甘氨酸在PBS阻止非特异性网站之前报道(17]。然后,部分与anti-iNOS孵化或anti-nSMase主要抗体稀释1:3% (100w/vBSA在PBS为1小时,洗了三次0.1% (v/v在PBS) Tween-20 PBS和两次,孵化与tetramethylrhodamineisothiocyanate-conjugated anti-rabbit免疫球蛋白1 h,稀释1:50 3% (w/v在PBS) BSA,如上所述。样品安装在80% (w/v)甘油,含有0.02% (w/v)南₃在PBS和p-phenylenediamine(1毫克/毫升),以防止荧光减弱。抗体孵化项目都是在室温下在一个潮湿的室。荧光分析在DMRB徕卡显微镜epi-fluorescent配备了数码相机。

2.5。细胞培养和治疗

不灭的海马神经元HN9.10e (Kieran Breen博士的礼物Ninewells医院,邓迪,英国)被培养为之前报道(16]。VD3,溶解在绝对乙醇作为汽车在100 nM生理浓度,添加到文化48 h;在控制样品,只有绝对乙醇添加(16]。中使用的细胞总蛋白质含量的分析部分,部分酶活性测定,在SM的lipidomic分析部分。

2.6。蛋白质含量

总蛋白浓度在750 nm评估spectrophotometrically通过使用牛血清白蛋白作为标准,如前所报道(18]。

2.7。酶活性测定

酶参与神经细胞分化(nSMase) [16)和溶酶体酶参与神经细胞损伤,如酸性鞘磷脂酶(aSMase),β己糖胺酶,α-fucosidase,β甘露糖苷酶,α甘露糖苷酶,β牛乳糖,β葡糖脑苷脂酶(19,20.]化验。nSMase活动测量如前所报道(21]。简单地说,¹⁴C-SM(最终具体活动1.08 Ci /摩尔)作为衬底。反应混合物中含有0.1 M盐酸三羟甲基氨基甲烷/液pH值7.6,0.1毫米¹⁴MgCl C-SM 6毫米₂、0.1% Triton x - 100和100μg蛋白的最终体积0.1毫升。孵化项目进行45分钟的37°C。2毫升氯仿和甲醇(2:1)被用来停止反应,和0.4毫升的0.5%生理盐水补充道。样本在2000转离心10分钟和0.5毫升的阶段是在计数瓶稀释10毫升Ecoscint和1毫升蒸馏水;放射性物质与帕卡德液体闪烁测量分析仪。aSMase活动测量如前所报道(22]。简单地说,与nSMase衬底制备。反应混合物中含有1毫米EDTA, pH值5.0,0.1毫米¹⁴C-SM, 250毫米醋酸钠,0.1% Triton x - 100年和100年μNFL的g蛋白或核最终体积0.1毫升。孵化条件和放射性nSMase进行了分析。的β己糖胺酶,α-fucosidase,β甘露糖苷酶,α甘露糖苷酶,β牛乳糖,β葡糖脑苷脂酶酶活动与相应fluorogenic测定底物和反应缓冲区,正如前面报道(20.]。BMG的荧光测定Labtech FLUOstar最适条件荧光计(激发波长= 360海里;发射波长= 446海里)。

2.8。超快的液相色谱串联质谱(UFLC-MS /女士)

脂质提取,16:0SM 18:1SM 24:0SM标准准备,之前报道(23]。分析是由使用超快的液相色谱系统串联质谱仪应用生物系统(日本岛津公司意大利开发。、意大利)和16:0SM、18:1SM 24:0SM物种进行了分析通过使用外部校准器和确认为之前报道(23]。所有SM物种进行了分析的基础上,通过确定峰分子量通过使用标准作为参考24]。

2.9。统计分析

为每个分析进行了三个实验。数据表示为±s.d,t -测试是用于控制之间的统计分析和实验样本。

3所示。结果与讨论

3.1。结果

伊诺炎性细胞因子已被报道的动物纹状体和黑质中高度表达PD (25]。期间,海马体受损PD (4,5),我们分析了伊诺表达式的不同部分正常和MPTP-induced帕金森小鼠的海马。我们用DAPI显示齿状回信号(蓝色)的原子核,我们的注意力集中在角落里地区(图1)。免疫荧光染色anti-iNOS抗体(红色)和与DAPI合并(蓝色)显示的高表达伊诺比控制在实验动物(图1)。自成立伊诺函数在炎症,在我们的研究结果证实了神经炎症从PD小鼠海马齿状回的。为了确定的相对贡献nSMase在PD神经炎症,nSMase蛋白质的表达以相同的样本。合并后的图像与DAPI信号(蓝色)在细胞核和nSMase(红色)显示出强劲减少nSMase实验样本。符合了SM在大脑中所扮演的重要角色(26],因为SMase SM催化水解的酶,这些数据表明,nSMase可能作用在齿状回功能。此时此刻,我们没有数据的活动nSMase海马的控制和PD-induced老鼠。未来的研究将阐明这一点。因此,我们想知道是什么影响海马细胞的SM nSMase刺激。为此,我们进行了体外研究通过使用VD3激发nSMase活动和HN9.10e胚胎海马细胞的诱导分化(15,16]。这将是非常有用的在未来模拟在活的有机体内情况使用HN9.10e PD小鼠细胞后沉默nSMase表达式。生理剂量的VD3 [16)显著增加nSMase活动治疗后48 h(图2(一个))。然后,我们想确定酶活性的海拔是特定nSMase或如果是一般反应的酶对脑功能监管很重要。因此,aSMase酶活性,β己糖胺酶,α-fucosidase,β甘露糖苷酶,α甘露糖苷酶,β牛乳糖,β葡糖脑苷脂酶在未经处理的量化和VD3-treated HN9.10e细胞。这些酶的活性保持不变(数字2(一个)和2 (b))。实验结果显示,nSMase被VD3特别刺激。因此,我们假设其增加活动可以改变SM概要文件。为了验证这个假设,我们执行的分析SM物种UFLC-MS /女士。结果表明,VD3下降1.2倍16:0SM的数量,和24:0SM的1.70倍(图3(一个))。有更深层次的见解在SM物种含有饱和或不饱和FAs,我们评估领域的所有的峰识别的基础上他们的分子量和它们的值与蛋白质含量分析。显著降低的水平饱和分子16:0SM物种被发现,18:0SM, 20:0SM, 22:0SM, 24:0SM, 26:0SM,和发现显著增加不饱和分子物种16:3SM 16:4SM, 18:1SM, 20:4SM, 24:3SM 26:2SM, 26:3SM(图3 (b))。然后我们相比的变化总水平的SM物种含有饱和和不饱和FAs。报道在图3 (c)SM, SM饱和FAs下降和不饱和FA VD3-treated细胞相比,控制细胞的增加。

3.2。讨论

SMase是不可或缺的酶对大脑和信号转导途径的调节中起着重要的作用的SM和神经酰胺物种参与生理功能和病理疾病。各种各样的研究指出nSMase和aSMase功能的多样性在大脑发育/干细胞分化和缺血性退行性/压力反应[26,27]。最近的证据突出的作用的生理病理学nSMase海马体(10- - - - - -12]。海马体的参与在PD最近描述(4,5]。姚等人表明,海马病理学是一个关键贡献视觉幻觉PD (28]。如何在PD海马受损尚不清楚。当我们知道伊诺是引起炎性细胞因子(25),我们假设PD小鼠的海马的神经炎症。在这一点上,在差别nSMase对这些神经炎症的可能角色仍然是模糊的。直到现在,人们很少知道具体nSMase作用海马健康和/或疾病。顾等人表现出相当大的星形胶质细胞在脑缺血早期神经酰胺的生产伴随着nSMase的感应,但没有在大鼠海马aSMase,积累与神经酰胺(29日]。Babenko和夏克霍娃nSMase报道,但不是aSMase增加海马和大脑皮质在老化,表明redox-sensitive nSMase发挥了重要作用在SM营业额失调在海马体和大脑皮层在老年30.]。因此作者表示nSMase作为不良事件的增加。然而,诺曼等人强调,nSMase增加海马神经元动作电位频率水平快速提高的天然保湿因子和S1P指示的积极监管通过nSMase[海马神经元的兴奋性13]。因此,在这一点上,主题是工作稀缺,nSMase的积极或消极的作用在不同的实验条件是不和谐的。有趣的是,我们使用VD3刺激nSMase HN9.10e胚胎海马的活动培养细胞为了研究海马的这种酶的特定角色。缺乏aSMase的参与,β己糖胺酶,α-fucosidase,β甘露糖苷酶,α甘露糖苷酶,β牛乳糖,β葡糖脑苷脂酶VD3反应符合观测表明在海马体(nSMase的特异性作用13,29日,30.]。因此,先前的研究是符合我们的研究结果,因此我们认为是一个合适的实验模型使用VD3加强nSMase的具体活动,因此研究对SM HN9.10e物种的具体影响。

值得注意的是,我们的结果表明,增加nSMase专门活动减少饱和脂肪酸,因此减少了SM的饱和或不饱和脂肪酸比例。所以我们认为机制潜在的增加不饱和脂肪酸不依赖于转换的不饱和饱和脂肪酸,但具体行动的nSMase饱和SM。因为不饱和脂肪酸膜更多的液体(31日),我们假设SM物种的变化确定增强动态属性的细胞诱导分化VD3 [32]。Manduca等人证明了抑制神经2-arachidonylglycerolω6脂肪酸降解的突触可塑性是重要的n - 3多不饱和脂肪酸acid-deficient老鼠(33]。另一方面,富含多不饱和脂肪酸的饮食从怀孕的第一天改善小鼠大脑可塑性的老鼠在产后一天34]。因此,我们的研究的另一个新发现是减少饱和不饱和脂肪酸比nSMase诱导,通过SM少刚性分子,可能会影响神经可塑性。这些数据将预测nSMase刺激可以用作海马在PD的健康。

4所示。结论

总之,第一次,我们从PD-induced小鼠海马的证明,nSMase强烈减少与nSMase活动神经炎症,增加在HN9.10e VD3治疗后细胞减少专门只饱和SM。总的来说,这些结果将nSMase海马功能的关键酶。进一步调查的潜在角色在PD nSMase可能提供一个更好的理解的生物相关性和海马的激活水平与VD3针对nSMase的潜在好处。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

作者的贡献

Cataldo Samuela Cataldi和阿库里了同样的工作。

确认

研究导致这些结果已收到的资助项目“Investissements d未来”ANR-10-IAIHU-06 (Stephane Hunot),乌迪内大学和佩鲁贾大学。

引用

1. j·a·麦肯齐l . j . Spielman c . b .指针et al。”存在作为一个共同的机制与可改变的老年痴呆症和帕金森疾病危险因素,”目前衰老科学,10卷,不。3,2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. s . Cataldi m . Codini s Hunot et al .,“在1-methyl-4-phenyl-1钙粘蛋白,2、3、6-tetrahydropyridine-induced帕金森病,”炎症介质卷,2016篇文章ID 3937057, 7页,2016。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. g . d . Manocha a . m . Floden k . l . Puig k . Nagamoto-Combs c . r . Scherzer和c k .梳子”定义的贡献存在帕金森病人源化小鼠的免疫系统,”分子神经退化,12卷,不。1,p。2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. j . Castro-Hernandez p . a . Adlard和d·芬克尔斯坦,”Pramipexole恢复沮丧的腹侧海马传输MPTP-lesion后,“科学报告第44426条,卷。7日,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. c·b·施耐德·m·Donix k·林斯et al .,“加速年龄相关性海马体积损失与轻度认知障碍、帕金森病”美国阿尔茨海默病和其它痴呆杂志,32卷,不。6,313 - 319年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. i . j .加西亚·f·木下光男c . Scavone j . a . Mignaco l·a·巴博萨和l·桑托斯Hde“乌本苷调节从大鼠海马等离子体膜的脂质成分,LPS-induced神经炎症”《膜Biolology,卷248,不。6,1191 - 1198年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. r . Gualtierotti l . Guarnaccia m .伯莱塔et al .,“调制在中枢神经系统的神经炎症:趋化因子的作用和鞘脂类,“先进的治疗,34卷,不。2、396 - 420年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. a . Gulbins h . Grassme r . Hoehn et al .,“海马神经干细胞增殖的调节内皮神经酰胺,”细胞生理学和生物化学,39卷,不。2、790 - 801年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. y . a . Hannun l·m·默,“许多天然保湿因子,”《生物化学》卷,286年,第27862 - 27855页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. 沈l .顾黄,w . et al .,“早期nSMase2 /神经酰胺通路的激活星形胶质细胞参与ischemia-associated通过炎症大鼠海马神经元损伤,”《神经炎症,10卷,p。109年,2013年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. p·辛格和a .将“删除鞘磷脂headgroup抑制海马serotonin1A受体的配体绑定函数,“生化Biophys研究通讯,卷419,不。2、321 - 325年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. e . Dontigny c . Patenaude m .老年痴呆,g . Massicotte“鞘磷脂酶选择性地降低M1毒蕈碱的受体在大鼠海马膜,“海马体,22卷,不。7,1589 - 1596年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. e·诺曼·r·g·卡特勒·r·弗兰纳里,y . Wang和m·p·马特森“质膜鞘磷脂水解增加海马神经元兴奋性的sphingosine-1-phosphate介导的机制,”神经化学杂志,卷114,不。2、430 - 439年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. j . y . Yoon能源部,d·马修斯j . Karamchandani d·g·穆尼奥斯,“巨细胞病毒在人类齿状回神经祖细胞和它的影响:报告两种情况下,“临床神经病理学36卷,第245 - 240页,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. t .冈崎r·m·贝尔和y . a . Hannun鞘磷脂在HL-60细胞营业额由维生素D3。在细胞分化作用。”《生物化学》,卷264,不。32岁,19076 - 19080年,1989页。视图:谷歌学术搜索
16. e . Bartoccini f·马里尼,大肠Damaskopoulou et al .,“核脂质microdomains调节核吸收维生素D3和影响胚胎海马细胞分化,“细胞的分子生物学,22卷,不。17日,第3031 - 3022页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. c·阿库里Giambanco, r·比安奇和r . Donato”膜联蛋白V,膜联蛋白VI, S100A1和S100B在发展和成人骨骼肌禽流感,”神经科学,卷109,不。2、371 - 388年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. e·阿尔比r·拉扎,m .中提琴马尼“磷脂酰胆碱和鞘磷脂代谢相声细胞核内,“生物化学杂志卷,410年,第389 - 381页,2008年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. k . Bienias a . Fiedorowicz a . Sadowska s Prokopiuk和h的车,“鞘磷脂代谢,调节”药理报告,卷68,不。3、570 - 581年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. d . Chiasserini e . Persichetti s Paciotti t . Beccari和l . Parnetti“PD的溶酶体酶:需要进一步的证据,”运动障碍卷,29号10,1329年,页2014。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. e·阿尔比拉,r·拉扎et al .,“核脂质microdomain鞘磷脂和DNA之间的相互作用在肝脏再生,”国际《分子科学,14卷,第6541 - 6529页,2013年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. e·阿尔比s Cataldi g·罗西et al .,“核神经酰胺和甘油二酯的平衡取决于甲状腺细胞的生理状态和变化UV-C辐射诱导细胞凋亡,”生物化学生物物理档案,卷478,不。1,52-58,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. 拉,a . Floridi l . Pugliese et al .,“分析血清鞘磷脂物种uflc-ms / ms与单克隆丙种球蛋白病病人的影响,“《色谱分离技术5卷,1000239条,2014年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. m . Garcia-Gil a·拉·r·拉扎et al .,“血清剥夺改变血脂在HN9.10e胚胎海马细胞,”神经学字母卷,589年,第87 - 83页,2015年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. c . Anusha t Sumathi, l·d·约瑟夫”保护作用的芹黄素在鱼藤酮诱导的帕金森病大鼠模型:抑制神经炎症和氧化应激介导的细胞凋亡,”Chemical-Biological交互卷,269年,第79 - 67页,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. m . Garcia-Gil和e·阿尔比“核脂质在神经系统:他们所做的事情在健康和疾病,”神经化学研究,42卷,不。2、321 - 336年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. e . Assi d . Cazzato c·迪帕尔马c佩罗塔,e . Clementi和d . Cervia“鞘脂类和大脑常驻巨噬细胞在神经炎症:一个新兴的神经系统病理方面,“临床免疫学和发展ID 309302条,卷。2013年,8页,2013。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. n .姚明,c .张s彭日成et al .,“多通道MRI海马的帕金森病与视觉幻觉,”大脑结构和功能,卷221,不。1,第300 - 287页,2016。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. 沈l .顾黄,w . et al .,“早期nSMase2 /神经酰胺通路的激活星形胶质细胞参与ischemia-associated通过炎症大鼠海马神经元损伤,”《神经炎症,3卷,不。10,109年,页2013。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. n . a . Babenko和e . g .夏克霍娃“长期食品限制防止aging-associated鞘脂类的代谢失调在大脑,”老年医学老年病学档案,卷。58岁的没有。3、420 - 426年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. 拉,a . Macchiarulo a Floridi et al .,“Very-long-chain脂肪酸鞘磷脂在核肝细胞和肝癌细胞的脂质microdomains:可以从C24:0 0影响交流信号蛋白质和维生素D受体?”细胞分子生物学,26卷,不。13日,2418 - 2425年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. f·马里尼、大肠Bartoccini g . Cascianelli et al .,“效果1α,25-dihydroxyvitamin D3在胚胎海马细胞,”海马体,20卷,不。6,696 - 705年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. a . Manduca a·巴拉t Larrieu et al .,”放大mGlu5-endocannabinoid信号救助行为和突触赤字在青少年和成人饮食的小鼠模型,多不饱和脂肪酸的不平衡,”神经科学杂志》上,37卷,不。29日,第6868 - 6851页,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
34. a . l . Dinel c·雷伊,c . Bonhomme p . Le Ruyet c . Joffre s Laye之类,“乳制品脂肪混合改善大脑DHA和神经可塑性和调节皮质甾酮在老鼠中,“前列腺素、白细胞三烯和必需脂肪酸卷。109年,第29,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

版权

版权©2017 Samuela Cataldi等。这是一个开放的分布式下文章知识共享归属许可,它允许无限制的使用、分配和复制在任何媒介,提供最初的工作是正确引用。