文摘

利什曼虫amazonensis (l)(拉),l . braziliensis (v)(磅)负责一个大型临床和人类疾病的免疫病理过程谱;而拉可能负责无活动力的疾病,磅感染会导致细胞的超敏反应。为了更好地理解这些引起的免疫反应的二分法利什曼虫物种,我们评估子集的树突细胞(dc)和T淋巴细胞在排水过程中淋巴结拉和磅感染BALB / c小鼠。我们的研究结果表明高介入的DCs拉感染,以积累更多的朗格汉斯细胞(LCs);相反,磅感染导致增加真皮DCs (ddc)在整个感染。考虑到T淋巴细胞反应,增加效应,激活,CD4记忆⁺t细胞在磅感染。白介素(IL -) 4 -和IL-10-producing CD4⁺和CD8⁺t细胞均在座拉和磅感染;然而,干扰素(IFN)γ第CD4⁺和CD8⁺发现只有在t细胞磅感染。结果表明,在磅感染,DCs的监护系统是主要的子集依次与Th1免疫反应的发展;与此形成鲜明对比的是拉感染与LCs的优惠积累和Th1免疫反应的发展完全阻塞。

1。介绍

美国皮肤利什曼病(ACL)是一种人畜共患传染病通过沙蝇叮咬引起的不同属的物种利什曼虫在新的世界。在巴西,有七个物种被认为是人类疾病的病原体,但是利什曼虫braziliensis (v)(磅),l . amazonensis (l)(拉医学上)被认为是最重要的因为他们的高发病率和疾病严重程度(1]。

有不同的临床形式的人类拉不同的感染,局部皮肤利什曼病(拼箱),中度细胞过敏无活动力的弥漫性皮肤利什曼病(ADCL),细胞低敏感性的感染明显th2型免疫反应。温和的拼箱和low-responsive ADCL,有weak-definite细胞过敏性形式称为边缘传播皮肤利什曼病(BDCL),这被证明能涉及不如ADCL免疫抑制。另一方面,磅感染可引起不仅拼箱和BDCL还黏膜与皮肤的利什曼病(制程),感染的细胞过敏性极著名Th1-type免疫反应(1,2]。通过这种方式,这两个造成的ACL利什曼虫物种提供了一个clinical-immunological频谱拉显示了一个倾向于导致感染的无能杆细胞免疫反应,而磅感染导致宿主细胞免疫反应的过敏杆。临床表现的多样性主要是与抗原差异的不同种类的寄生虫1),但也与宿主免疫遗传的背景(3,4]。

树突状细胞(dc)是最有能力抗原递呈细胞(APC),他们拥有强大的t细胞刺激能力(5]。朗格汉斯细胞(LCs)和真皮细胞(ddc)构成主要前哨APC人口居住在皮肤(5- - - - - -7]。Langerin (CD207)是一个c型凝集素表达LCs,和真皮包含两个Langerin⁺DCs(区分微分CD103表达式)和两个langerin的子集⁻监护系统不同CD11b表达式(8,9]。

一些研究表明,在实验l .主要感染,如ddc (langerin⁻)能够刺激抗原t细胞增殖,表明启动一个适当的和有效的监护系统是至关重要的细胞免疫反应(10),而LCs (langerin⁺)不是,以前假设[11,12]。通过这种方式,Brewig et al。(2009)13)报道,CD4的启动⁺t细胞是由langerin介导的⁻监护系统,而langerin⁺DCs参与CD8的早期启动⁺t细胞,导致寄生虫消灭在小鼠皮肤利什曼病l .主要。最近,与寄生虫的新世界,我们报道感染的小鼠模型中增加DC数量(CD207⁺和CD11c⁺)和t细胞(CD4细胞⁺和CD8⁺在真皮的地方)l . braziliensis (v)感染。我们还观察到增加干扰素(IFN)γ水平排水淋巴结(DLN)细胞的关系l . amazonensis (l)感染,证明这些寄生虫之间的免疫反应物种的二分法(14]。

然而,研究新的世界之间的互动利什曼虫物种和先天获得豁免在活的有机体内还没有完全阐明,加强研究这些寄生虫物种的重要性引起细胞免疫反应。因此,本研究的主要目的是分析的影响拉和磅DCs的表现型的DLNs BALB / c小鼠,以及调查直流子集的关系与t细胞免疫反应的发展。

2。材料和方法

2.1。老鼠

八周大BALB / c小鼠获得动物设施的圣保罗大学医学院,巴西,被保存在我们的实验室实验,根据指南的机构审查委员会关于实验动物的福利,和动物伦理委员会批准,圣保罗大学(协议编号:0589/08)。

2.2。寄生虫

利什曼虫amazonensis(利什曼虫)(洛杉矶)(MHOM / BR / 1973 / M2269)利什曼虫(Viannia) braziliensis(磅)(MHOM / BR / 1995 / M15280)请捐赠费尔南多教授托拜厄斯对峙从Evandro恰加斯病研究所,对位,巴西。拉和磅寄生虫是隔绝无能弥漫性皮肤利什曼病和黏膜与皮肤的利什曼病,患者分别在帕拉州,巴西北部。寄生虫是生长在施耐德的果蝇介质(Sigma-Aldrich有限公司,圣路易斯,密苏里州,美国),补充heat-inactivated 10%胎牛血清(Gibco®;美国马热费希尔科学、沃尔瑟姆),10μ克/毫升的庆大霉素和100 U /毫升的青霉素25°C。文化的第六天,promastigote形式固定相的文化增长在1670 g离心10分钟使用磷酸缓冲盐(PBS)解决方案,pH值7.4,随后用于小鼠的感染。

2.3。生产全抗原拉和磅寄生虫

Promastigote形式的拉和磅(10⁹promastigotes)的固定相能恢复增长在1200 g离心10分钟在4°C,其次是与PBS洗1200 g 10分钟4°C。裂解缓冲(20毫米Tris-HCl;40毫米氯化钠;10毫米EDTA;蛋白酶抑制剂鸡尾酒1%)添加到promastigote颗粒和材料在液态氮冷冻,然后在室温下解冻三次生产整个寄生虫抗原。蛋白质浓度估计使用布拉德福德的方法。

2.4。感染BALB / c小鼠

BALB / c小鼠皮下注射感染后拦路贼10⁶promastigote形式的拉或磅在较低的固定相在体外通过50(≤6通道)μPBS的L。对照组注射PBS。拉,磅,和对照组由六个老鼠。为了证明感染的进化,拦路贼肿胀测量每周直到8周postinfection(π)。在4和8周π,腘DLNs收集从受感染的老鼠和控制来判断寄生虫负载和树突和t细胞亚群的表型。池腘淋巴结从每组准备一式三份,以确定细胞群的多样性。每个实验独立重复四次。

2.5。分析寄生虫负载

寄生虫载入DLNs决心通过量化limiting-dilution化验,如前所述[15]。短暂,DLNs无菌切除和均质在施耐德的媒介。细胞悬液受到12系列稀释和四个复制井。可行的寄生虫的数量确定的最高稀释promastigotes可以种植10天后孵化的25°C。

2.6。流式细胞术检测

2.6.1。树突状细胞表型出现

DLNs从洛杉矶- - - - - -和磅-受感染的老鼠,以及控制动物,无菌收集,处理,镀在10⁶细胞/一式三份在96 - 100年尖底板块μL(流式细胞仪缓冲区(PBS 0.5%牛血清白蛋白和乙二胺四乙酸2毫米)。单细胞悬架与以下鼠单克隆抗体:surface-stained anti-CD11c(克隆N418) anti-CD11b(克隆M1/70) anti-CD8α(53 - 6.7),anti-MHCII(克隆14-4-4S) anti-CD205(205年克隆yekta), anti-CD80(克隆16-10A1)和anti-CD86(克隆GL1)在4°C在黑暗中30分钟。所有抗体都从BD生物科学(美国新泽西富兰克林湖)。流式细胞术的盘子然后洗两次缓冲区,和细胞resuspended在100年μL固定缓冲区(在PBS 1%多聚甲醛;pH值7.5)。控制策略用于确定补充图描述的直流子集在网上补充材料http://dx.doi.org/10.1155/2016/7068287。

2.6.2。在体外刺激t细胞

DLN的单细胞悬浮体拉- - -磅来华的老鼠(10⁶细胞/)在96年被孵化- v形底板块在15的存在μg /全抗原拉和磅寄生虫,分别在-1640年(RPMI)补充10%的边后卫,2毫米的谷酰胺(Sigma-Aldrich有限公司),10毫米的消息灵通的缓冲区(Sigma-Aldrich有限公司),1毫米的丙酮酸钠,1% /卷卷不必要的氨基酸溶液,10μ庆大霉素的g / mL, 1000 U /毫升的青霉素和5×10⁻⁵米2β巯基乙醇在37°C (Sigma-Aldrich有限公司)有限公司₂为24小时。控制老鼠的单细胞悬浮液分别孵化拉或磅抗原。伴刀豆球蛋白A (1μg /)作为一个积极的控制。1μ信用证的GolgiStop (BD生物科学)补充道,和细胞孵化为额外的16个小时(IFN -γ和白介素- 10 (IL -))和24小时(IL - 4)。盘子洗了三次与流式细胞仪缓冲区和细胞surface-stained以下鼠单克隆抗体:anti-CD3ε(克隆145 - 2 - c11;BD生物科学)、anti-CD4(克隆RM4-5;BD生物科学),anti-CD8α(克隆53 - 6.7;BD生物科学)在4°C在黑暗中30分钟。Surface-stained细胞被固定和使用Cytofix / Cytoperm permeabilized™工具包(BD生物科学)。Permeabilized细胞被洗烫/洗缓冲区(BD生物科学)和沾以下鼠单克隆抗体:anti-IFN -γ(克隆XMG1.2;BD生物科学),anti-IL-4(克隆11 b11;BD生物科学),anti-IL-10(克隆JES5-16E3;BD生物科学)在4°C在黑暗中30分钟。控制策略用于确定cytokine-producing t细胞在补充图中有详细描述。

2.6.3。调节性T淋巴细胞表型出现

单细胞DLN从中断的关系洛杉矶- - - - - -和磅-受感染的老鼠,以及控制动物(10⁶细胞/),与鼠单克隆抗体surface-stained anti-CD4(克隆RM4-5;BD生物科学)和anti-CD25(克隆PC61.5;BD生物科学)在4°C在黑暗中30分钟。细胞被固定和permeabilized如上所述,细胞内染色进行了使用鼠标单克隆抗体antiFoxP3(克隆FJK-16s;BD生物科学)在4°C在黑暗中30分钟。控制策略用于确定监管t细胞补充图中描述的子集。

2.6.4。记忆T淋巴细胞表型出现

单细胞DLN从中断的关系洛杉矶- - - - - -和磅-受感染的老鼠,以及控制动物(10⁶细胞/),在4°C surface-stained在黑暗中30分钟以下鼠单克隆抗体:anti-CD3ε(145年克隆2 c11;BD生物科学)、anti-CD4(克隆RM45;BD生物科学),anti-CD8α(克隆53 - 6.7;BD生物科学),anti-CD45RB (clone16A;BD生物科学),anti-CD62L(克隆MEL14;BD生物科学)。控制策略用于确定记忆t细胞补充图中描述的子集。

所有样本获得FACSFortessa使用FACSDiva软件(BD生物科学),然后他们分析FlowJo软件9.2版本(树明星;FlowJo LLC,亚什兰,美国)。使用匹配的清白的细胞荧光测定电压。补偿是借助CompBeads (BD生物科学)单与前面描述的单克隆抗体染色。样本获得达到至少300000事件。

2.7。统计分析

Prism 5.00为Windows (GraphPad软件公司,拉霍亚、钙、美国)被用来执行所有统计分析。差异由非参数Mann-Whitney实验组织进行了分析U测试。细胞数量之间的相关性被斯皮尔曼相关系数的分析。一个值< 0.05被认为是显著的。

3所示。结果

3.1。拉感染会导致更高的皮肤病变大小和寄生虫在DLN负载

如前所述,我们组(14),拉感染引起的皮肤损伤的进步增长BALB / c小鼠从3周π伴随着高组织寄生(数据未显示),这是远远高于病变所致磅在感染的进化。相反,磅感染引起的轻度后拦路贼肿胀3至5周与回归从星期6ππ(图1(一))。

在引流淋巴结,寄生虫负荷拉感染是高于磅感染4和8周π。从4到8周π,寄生虫的数量减少感染;然而,在磅感染在寄生下降了1000倍拉感染(图25倍减少1 (b))。

3.2。拉显示更多的CD11c感染⁺MHCII⁺CD80⁺和CD11c⁺MHCII⁺CD86⁺细胞比磅感染

CD11c的数量⁺MHCII⁺细胞DLN包括DCs显著更高的不同子集拉比在磅感染4和8周π。然而,在的演变拉感染,没有观察到CD11c数量的差异⁺MHCII⁺细胞,而发展的磅感染,观察显著增加(图2(一个))。

分析了这些细胞的激活染色costimulatory分子,CD80和CD86 CD11c的表面⁺MHCII⁺细胞。在这方面,BALB / c小鼠感染拉提出了一个更高的CD11c的数量⁺MHCII⁺CD80⁺细胞相比,磅感染4和8周π。显著增加细胞的数量在两个子集拉和磅在感染的发展(图2 (b))。同样,CD11c的数量⁺MHCII⁺CD86⁺细胞高拉感染相比磅感染4和8周π。然而,在感染过程中,CD11c的数量⁺MHCII⁺CD86⁺细胞在感染(图并没有改变2 (c))。

3.3。拉感染诱导LCs的增加,磅感染增加监护系统

LCs (CD11c的数量⁺MHC⁺CD8⁺CD205⁺CD11b⁻)明显高于拉感染比磅感染4周π。然而,在8周π,观察没有区别拉和磅感染。在感染的进化,LCs的数量明显减少拉感染,但它并没有改变磅感染(图3(一个))。的数量,ddc (CD11c⁺MHC⁺CD8⁻CD205⁻CD11b⁺)之间的相似拉和磅在4周π感染,但高磅感染8周π。关于进化的感染,如ddc的数量在增加磅感染,但并不在拉感染(图3 (b))。

3.4。磅证据显示感染效应,激活和CD4记忆⁺t细胞

CD4细胞的数量⁺激活(),和记忆()t细胞在DLN更高磅感染比拉感染4和8周π(数字4(一),4 (c),4 (e)、职责)。然而,激活CD4的数量⁺t细胞在进化的有所下降磅和拉感染。

CD8的数量⁺在T淋巴细胞在DLN相似拉和磅感染4周π,尽管如此,在8周π,CD8的数量⁺t细胞是高的磅比拉感染(图4 (b))。激活CD8的数量⁺T淋巴细胞高磅感染相比拉在4周π感染,但激活CD8的数量⁺t细胞增加拉感染和减少磅感染整个感染过程中(图4 (d))。CD8记忆的数量⁺t细胞是高磅比在拉在4周π感染;然而,在8周π,CD8的数量⁺记忆T淋巴细胞之间的相似磅和拉感染。关于感染的演变,CD8的数量⁺感染(图记忆T淋巴细胞增加4 (f))。

3.5。干扰素-γ第CD4⁺和CD8⁺发现只有在t细胞磅感染

拉感染了高IL-4-producing CD4的数量⁺T淋巴细胞比子集磅在4周π感染;然而,在8周π,拉感染了低IL-4-producing CD4的数量⁺t细胞比磅感染。在感染的演变,IL-4-producing CD4的人口⁺在t细胞增加磅感染和在下降拉感染(图5(一个))。IL-4-producing CD8⁺t细胞只在被检测出拉在4周π感染,但它存在于感染8周π;此外,它是更高的拉比磅感染。在感染的演变,IL-4-producing CD8的数量⁺在感染t细胞增加(图5 (b))。

IL-10-producing CD4的数量⁺t细胞是高的磅比拉感染4和8周π。在感染的演变,IL-10-producing CD4的数量⁺在感染t细胞减少(图5 (c))。另一方面,IL-10-producing CD8的数量⁺t细胞之间的相类似拉和磅感染4和8周π,降低整个进化的感染(图5 (d))。

值得注意的是,干扰素-的数量γ第CD4⁺和CD8⁺t细胞是只有在检测到磅感染;然而,在感染的进化,干扰素-的数量γ第CD4⁺t细胞减少,而干扰素-γ第CD8⁺t细胞增加(图5 (e)和5 (f))。

3.6。磅感染诱发自然和诱导Treg细胞

自然调控t细胞(CD4细胞的数量⁺CD25⁺FoxP3⁺)是高磅比在拉在4周π感染;然而,在8周π,自然Treg细胞相似的数量磅和拉感染。然而,在感染的演变,这在动物感染淋巴细胞减少子集磅,而这是整个课程的持续拉感染(图6(一))。诱导Treg细胞(CD4细胞的数量⁺Foxp3⁺)高磅比拉感染4周π但DLN减少感染的老鼠磅在感染的发展(图6 (b))。

4所示。讨论

皮肤利什曼病的免疫反应发生的主要地点附近的感染,主要发生在淋巴结。在这些网站,吞噬细胞内寄生虫繁殖和改变淋巴器官的生理和形态。这些效应影响先天性和获得性免疫反应的细胞,因此感染的结果。在目前的研究中,证明了引起的临床反应拉与进步的疾病有关,是评估病变大小和寄生;相比之下,磅诱导一个低寄生的自我修复损伤。因此,这些寄生虫引起明显的临床结果在BALB / c小鼠与数量有关,子集,以及DCs和T淋巴细胞激活的状态。

在这项研究中,结果表明:BALB / c小鼠感染的淋巴结拉积累更多的DCs CD11c的特征⁺MHCII⁺表现型相比磅感染。这是一个与早期的朗格汉斯细胞的数量增加拉感染,后期增加的监护系统磅感染。美国在人类皮肤利什曼病,朗格汉斯细胞的存在与感染有关寄生虫疾病的物种和重力,因为病人感染了拉提出更高的表皮朗格汉斯细胞的数量相比,这些感染利什曼虫(Viannia)sp。此外,拉来华的患者无法刺激一个适当的细胞免疫反应,如低积累的皮肤t细胞(16]。然而,它已经表明,监护系统能够有效地刺激细胞免疫反应实验皮肤利什曼病,这表明,ddc至关重要的起始反应特异性T淋巴细胞(10]。因此,这些结果表明,朗格汉斯细胞的积累在BALB / c小鼠的淋巴结拉感染与疾病进展相关,而后期积累的淋巴结,ddc BALB / c小鼠感染磅更有利预后有关这些动物,正如越来越多的自我修复过程和寄生虫的数量减少。

事实上,在磅感染,积累,ddc与CD8的存在直接关联⁺与IL-10-producing CD4 t细胞和一个负相关⁺和cd8⁺T细胞,这表明监护系统是至关重要的诱导T淋巴细胞的一种有效的启动。另一方面,LCs (MHCII⁺CD11c⁺CD8⁺CD205⁺CD11b⁻)也被检测到淋巴结的BALB / c小鼠的过程中磅感染,但同样数量的控制老鼠和较小的数量相比拉感染,这表明LCs不那么突出的作用或者没有发病机制中的作用磅感染。另一方面,在拉感染,LC人口增加相比,在感染的早期阶段磅感染,与IL-4-producing CD4正相关⁺t细胞和干扰素-一个负相关γ第CD4⁺t细胞,从而帮助发展Th2反应和疾病进展。

以前,我们小组展示的增加细胞密度的DC数量(CD11c⁺和CD207⁺在BALB / c小鼠的皮肤感染拉相比那些感染了磅。此外,干扰素-的水平γ只有在高吗磅感染,但il - 4和il - 10的水平更高拉感染(14]。因此,保留,ddc淋巴器官的动物感染磅建议的存在和积累大量淋巴结,ddc的后期阶段的感染会引发免疫反应与寄生虫消灭。相比之下,动物进行性疾病所致拉无法保留,ddc的淋巴器官,但面对Th1人口下降,表明,ddc可能引发有益的宿主反应(17]。

人们普遍认为,DCs是最强大的装甲运兵车刺激t细胞活化。也知道的类型和强度costimulatory信号由DCs t细胞可以影响不同的淋巴细胞亚群的发展(18]。布朗et al。(1996) (19)报道,CD86的封锁,但不是CD80,老鼠容易l .主要感染导致寄生虫减少负担和Th2细胞因子的生产。这些结果表明CD86,不是CD80对Th2分化至关重要。研究表明,拉能够感染和改变直流生物学,有利于建立感染。此外,小鼠模型已经被用来证明拉无鞭毛体和promastigotes感染和激活DCs;然而,无鞭毛体抗原诱导CD40-dependent il - 12生产失败,引发Th2免疫反应,主要是通过介导的il - 4生产(20.]。此外,尽管CD80表达减少,增加CD86被观察到的在体外的相互作用拉与人类的DCs和这些表型的变化是伴随着降低il - 6的分泌和干扰素-γ(21]。确凿的这些数据,我们的研究显示,大量的CD80⁺和CD86⁺细胞拉提出了进步的皮肤损伤和寄生虫感染动物皮肤负担(14)和腘淋巴结。此外,这些动物不存在干扰素-γ第T淋巴细胞,导致磁化率剖面。相比之下,在磅感染的CD86-activated DCs中检测出腘淋巴结,这是与一个有效的免疫反应有关,由干扰素-γ,因此,寄生虫的数量大幅下降的过程中,感染。

感染拉或磅诱导CD4的增加⁺在DLN t细胞;然而,CD4细胞的数量⁺t细胞是更大的磅感染并显示Th1免疫表型,因为干扰素γ第CD4⁺在感染t细胞只有观察磅而不是在拉感染。尽管如此,增加il - 4, IL-10-producing CD4的数量⁺t细胞在BALB / c小鼠感染磅。值得注意的是,Qi et al。20.)表明,DLN BALB / c小鼠感染的细胞拉可能产生Th1 (IFN -γ)和Th2细胞因子(il - 4和il - 10),和Th2反应的大小与高生产的il - 4和il - 10细胞因子,负责建立拉在实验主机。此外,我们的研究结果表明,活化的CD4细胞的数量⁺t细胞()是高磅感染期间课程实验。确凿的这些研究结果,进一步证明了自愈l .主要小鼠感染与保护性Th1反应的特点是早期干扰素-γ生产和诱导的表达没有合酶激活巨噬细胞(22]。

此外,在拉感染,一个积极的相关性之间观察到激活CD4的数量⁺和il - 4, IL-10-producing CD4 t细胞⁺t细胞,但CD4⁺干扰素-γ⁺t细胞没有刺激。指出,是很重要的拉负责导致无活动力的弥漫性皮肤利什曼病,一种罕见的皮肤疾病,患者目前高度寄生多个病变以及缺乏IFN -γ生产(2]。同样,CD4细胞的数量⁺记忆细胞()高DLN BALB / c小鼠感染的细胞磅在8周π,而正相关与干扰素的数量——维护γ第CD4⁺t细胞。因此,我们的研究结果支持的想法拉可以在宿主细胞由于其抑制宿主适应性免疫反应,而干扰素的生产-γ可能负责控制组织寄生在吗磅感染。

关于CD8的角色⁺t细胞,应该强调,这些细胞已经与治疗和保护人类和小鼠利什曼病,他们的激活依赖于CD4⁺t细胞和DC细胞(23- - - - - -26]。我们的研究结果表明,CD8的参与⁺t细胞在DLN明显低于CD4的参与⁺t细胞在感染寄生虫的两个物种。然而,CD8的数量⁺t细胞是高在磅感染,主要课程的实验结束的时候,也积极与干扰素-的数量γ第CD8⁺t细胞。有趣的是,我们还观察到激活CD8的增加⁺t细胞()在感染拉而控制。事实上,它已被证明,在利什曼虫感染,CD8的保护作用⁺t细胞是最有可能因其增殖能力和产生大量的干扰素-γ(25),我们观察到磅感染。

增加内存CD8的数量⁺t细胞(在8周π)是明显的拉和磅感染,控制相比。有趣的是,这些细胞和干扰素之间有直接的关系γ第CD8⁺t细胞以及与il - 10生产CD8间接相关⁺t细胞在磅,这表明这些记忆细胞连接到保护性反应。先前的研究表明,CD8⁺t细胞产生大量的干扰素-γ后l .主要感染,这些细胞最佳的关键主要免疫(27,28]。

调节性T - (Treg)细胞中发挥关键作用的控制免疫反应,包括诱导的肿瘤、器官移植、寄生虫抗原。许多研究与人类实验模型的利什曼病主要集中在Treg细胞的作用在控制感染的组织破坏网站(29日- - - - - -32]。描述了几种类型的Treg细胞的基础上他们的起源,一代,和作用机理,主要有两个子集确定:天然CD4⁺CD25⁺调控t细胞(nTReg细胞)和诱导调控t细胞(iTReg)。此外,FoxP3的表达,转录因子已知的关键nTReg和iTreg细胞的发育和功能,也明显(31日,33- - - - - -35]。我们的研究结果强调,两种群Treg细胞(iTReg和nTReg)在场的数量在增多的DLN BALB / c小鼠感染磅在4周π。nTReg细胞也被观察到的结果拉感染,尽管在较低的数字。也观察到类似的发现法尔考等人(2012年36];这组报道的高频Treg细胞在皮肤损伤和DLN在实验感染所致磅。有趣的是,nTReg和iTReg细胞的数量减少了整个过程磅感染,这显然与一个强大的效应t细胞反应,降低病变大小、和低寄生负载在8周的DLNπ。然而,在拉感染,nTReg细胞显示略有增加在持续感染,恰逢病变的大小和增加皮肤寄生,已经显示(14]。确凿的结果,一项由霁et al。37显示一个CD4的快速积累⁺CD25⁺Treg细胞感染拉的增加,这与TGF -β,FoxP3 IL-10R在当地组织。然而,这种仁慈的作用是暂时的,暗示的重要性罚款Treg和效应t细胞在调节主机易感性之间的平衡拉感染。

5。结束语

我们所知这是第一个研究比较数量,子集,DCs和T淋巴细胞的激活状态l . amazonensis (l)或l . braziliensis (v)感染使用相同的脊椎动物宿主的遗传背景。

总的来说,这些发现表明,在l . braziliensis (v)感染控制盘是占主导地位的子集DCs存在于淋巴结的BALB / c小鼠,这反过来,是与CD4和CD8 T淋巴细胞的活化,能够产生干扰素-γ。Treg淋巴细胞在这些动物的存在可以与免疫系统的调节有关,为了防止组织损伤引起的过度免疫反应,观察到磅寄生虫的感染,虽然角色持久性淋巴结也可归因于这些淋巴细胞的子集。因此,监护系统的存在与发展的Th1免疫反应和组织寄生控制中磅感染。

相比之下,l . amazonensis (l)感染与优惠LCs积累在淋巴结4周π,和干扰素的发展——完全阻塞γ第CD4和CD8 T淋巴细胞,从而明确Th2免疫反应的发展。因此,LCs可以与寄生虫逃避免疫系统,由于抗原Th1细胞没有明显分化,导致实验寄生虫持久性主机。

这一研究获得的结果添加新知识的复杂性免疫反应的两个最重要的物种利什曼虫引起皮肤疾病的新的世界。

相互竞争的利益

作者宣称没有利益冲突。

确认

作者感谢Thaise Yumie Tomokane提供专业协助在动物保健和丽莎·格雷厄姆和安克里根评论。圣保罗研究基金会提供的金融支持(FAPESP)必须占州政府批准号2006/56319-1和Coordenacao de Aperfeicoamento de Pessoal de含量比(AK卡瓦略)。m·d·Laurenti高级研究员从慰问Nacional de Desenvolvimento Cientifico e学府,巴西(CNPq)。

补充材料