文摘
葡萄膜炎是一种潜在影响视觉疾病的特点是重复周期的缓解和复发性炎症。JAK / STAT通路调节的致病性Th1和Th17细胞分化调节葡萄膜炎。SOCS1模拟肽(SOCS1-KIR)抑制JAK2 / STAT1通路在最近的研究里它又显示出抑制实验性自身免疫性葡萄膜炎(淡)。然而,目前尚不清楚SOCS1-KIR改善针对JAK / STAT通路的葡萄膜炎的致病或通过抑制巨噬细胞和淋巴细胞抗原递呈细胞也在淡进入视网膜。进一步调查机制,调解SOCS1-KIR效果和评价的有效性SOCS1-KIR作为慢性葡萄膜炎的试验性药物,我们在大鼠诱导淡uveitogenic t细胞的过继转移和监测疾病进展和严重程度通过裂隙灯显微镜,组织学和光学相干断层扫描。局部管理SOCS1-KIR改善急性和慢性葡萄膜炎后通过抑制Th17细胞和炎症细胞的招募到视网膜同时促进IL-10-producing treg的扩张。我们进一步证明SOCS1-KIR授予保护居民的视网膜细胞,发挥关键作用的视觉细胞毒性效应的炎性细胞因子表达下调proapoptotic基因。因此,SOCS1-KIR抑制葡萄膜炎和神经保护作用及可能被利用作为一种非侵入性治疗慢性葡萄膜炎。
1。介绍
葡萄膜炎是一个多样化的潜在影响视觉眼内炎症性疾病占10%以上的严重视觉障碍在美国。眼睛的疾病可能发生在前面(前葡萄膜炎),后面的眼睛(后葡萄膜炎),或在整个眼葡萄膜炎(锅),可以感染或自身免疫性病因1]。眼部病变部分来自持续生产炎症细胞的细胞毒性细胞因子加入了光轴在眼部炎症。目前治疗后或锅葡萄膜炎系统性皮质类固醇和再治疗是必需的,以防止复发。然而,眼部炎症反应不佳独自糖皮质激素,长期使用类固醇的慢性葡萄膜炎与严重的副作用,如青光眼、白内障和这是一个主要的动力发展更少的有毒和更具体的治疗葡萄膜炎(2]。
实验性自身免疫性葡萄膜炎(淡)股票基本病理特征与人类的葡萄膜炎和人类锅葡萄膜炎的动物模型。水提供了有价值的见解葡萄膜炎的病理生理学3)和不可或缺的开发和测试新的药物或生物制剂治疗葡萄膜炎(4,5]。大多数的早期研究中使用的实验动物在淡刘易斯鼠,一个高度近交品系容易淡引起所有已知uveitogenic Ags。老鼠相比,大多数的老鼠菌株耐水和少量的鼠标菌株敏感发展与视网膜的疾病只有当免疫剂量远高于那些引起疾病的Ags刘易斯老鼠。水模型研究表明,葡萄膜炎是介导的Th1和Th17细胞和T细胞能独立子集产生淡取决于疾病的方法诱导或生理上下文(6- - - - - -8]。针对固有的可塑性机制调节辅助T细胞的发育途径,治疗的目标只有一个子集的意外可能推动的扩张。因此,它是最有效的发展策略,同时将目标效应响应。由Th1和Th17共享一个共同的特征就是STAT通路的义务要求的发展,研究使用老鼠缺乏STAT1或T细胞室显示损伤的STAT3 Th1和Th17细胞的发展,分别是(9,10]。事实上,STAT3的损失在T细胞防止淡在鼠标的发展,这表明JAK / STAT通路是潜在的治疗目标,可以利用来减轻葡萄膜炎(8]。此外,肆无忌惮的激活JAK / STAT信号通路由于有缺陷的表达或沉默抑制细胞因子的信号1 (SOCS1)或SOCS3基因也参与许多自身免疫性疾病的发病机制(11]。
soc蛋白质是一个家族的cytokine-inducible负反馈监管者控制启动,强度,持续时间和质量的细胞因子反应(12,13]。SOCS1 SOCS3最家族成员特征和各自拥有一个激酶抑制区域(吉珥)强有力地抑制JAK / STAT信号(11]。有显著的兴趣发展战略有效地交付外生SOCS1或SOCS3进入细胞作为潜在的治疗方法治疗自身免疫性疾病。然而,一个主要障碍治疗使用SOCS1或SOCS3是他们相对较短的半衰期和困难在开发方法提供蛋白进入细胞(14]。在这项研究中,我们合成了16-amino酸肽细胞轴承membrane-penetrating亲油基(SOCS1-KIR)与JAK2 JAK激酶活性[循环自身磷酸化,抑制15]。我们这里显示局部SOCS1-KIR管理局授予保护眼部病变和减轻慢性葡萄膜炎。
2。材料和方法
2.1。动物
刘易斯老鼠(6 - 8周大)从查尔斯河实验室购买(马里兰州弗雷德里克)和动物保健和使用符合国家卫生研究院(NIH)的指导方针(研究数字EY000262-19和EY000372-14)。美国国立卫生研究院动物保健和使用委员会批准使用的协议在本文中描述的研究(ASP nei - 601)。
2.2。多肽合成
N末端palmitoyl-lysine组附加到SOCS1-KIR模拟肽(DTHFRTFRSHSDYRRI)以及SOCS1炒肽(KHRTDSRHSDRIYTFRF)。在GenScript肽都是合成纯度> 95%(皮斯卡塔韦,NJ)。
2.3。淡和组织学的感应
我们在年龄和性别匹配诱导淡刘易斯老鼠的过继转移R16 uveitogenic T细胞系(16]。R16致病性T细胞系是特定于肽R16 (ADGSSWEGVGVVPDV残留1177 - 1191)的牛IRBP蛋白(16]。总共4×106R16 peptide-specific T细胞腹腔内注射(i.p)。主动免疫,老鼠皮下注射免疫(南)到后腿和尾巴总量为200μL乳液含有25μg R16肽和足协。疾病感应和每天的日子直到9天,老鼠接受1滴眼剂/ /(20眼µg在10µL)炒16-amino酸肽(肽)或SOCS1-KIR和老鼠牺牲后12天到50天淡的感应。建立了临床疾病并通过裂隙灯显微镜检查和组织学得分如前所述[17,18]。大规模临床疾病评分,得分从0(无疾病)到4(严重疾病)根据前房炎症的迹象(17]。眼睛组织学淡评价是收获,固定立即用4%戊二醛(热费希尔科学,罗克维尔市,医学博士,美国)磷酸盐(PBS) 1小时,和紧随其后的是固定在10%缓冲甲醛(Sigma-Aldrich corp .) 24小时。然后他们被转移在70%的酒精和储存在4°C到嵌入石蜡。石蜡包埋的眼睛当时连续分段在垂直pupillary-optic神经平面。所有部分都与苏木精和伊红染色和评价盲评。组织病理评价,iris-ciliary主体复杂,前房,玻璃体和视网膜光显微镜下观察。根据病变的数量和程度的HE-staining部分,提供了组织学分数在0到4使用前面描述的标准[17,19]。
2.4。通过数字化裂隙灯显微镜系统成像鼠前部分
眼眼前段使用数字裂隙灯检查系统(卡尔蔡司)。之后,短暂的系统性管理全身麻醉(腹腔内注射氯胺酮(1.4毫克/鼠)和甲苯噻嗪(0.12毫克/鼠)],裂隙灯显微镜下观察大鼠在不同时间点和图像捕获uveitogenic过继转移后T细胞。为了避免主观偏见,评估的前部分照片是没有知识进行鼠蒙面观察者的身份。至少两个图像(由裂缝1通过漫射照明,照明)被从每只眼睛。眼部炎症的临床分级系统是如前所建立(19]。
淡的严重程度得分(范围,0到4)用裂隙灯显微镜由眼科医生盲实验群体。得分开始那天免疫(第一天),每隔一天持续到研究的持续时间。等级0代表没有疾病(眼睛反射的光(红色反射)和半透明的);0.5级(跟踪),在虹膜扩张血管;1级,虹膜血管和异常瞳孔收缩的扩大;二年级,细胞浸润和朦胧的前房红光反射减弱;三年级,适度不透明的前室与可见学生和沉闷的红色反射;4级,不透明的前室被遮挡的学生和没有红色的反射。评分是先前建立(17,19]。
2.5。老鼠前部分的横截面成像光学相干断层扫描(OCT)
光学相干断层扫描(OCT)是一种非侵入性程序,允许可视化的内部微结构的各种活体动物的眼睛结构。SD-OCT系统与1180纳米中心波长宽带光源(Bioptigen、数控)被用于在活的有机体内非接触影像的眼睛从炒肽或SOCS1-KIR老鼠。OCT成像之前执行,每个大鼠麻醉。麻醉大鼠使用可调夹可以固定旋转容易允许水平或垂直扫描。每个扫描至少进行两次,每次与调整。扫描的维数(在深度和横向程度)调整到最佳的信号强度和对比。视网膜厚度测量视网膜中央区域的所有图片从水平和垂直扫描获得同样的眼睛,使用系统软件,并取平均值。
2.6。通过流式细胞术分析炎症细胞
从视网膜细胞被孤立,脾脏、淋巴结(LN)所描述的8)和细胞表面蛋白表达检测和量化的流式细胞仪(fluorescence-activated细胞排序)。胞内细胞因子检测,细胞被重新刺激5 h和PMA (20 ng / mL) / ionomycin (1µ米)。Golgi-stop添加在最后一小时和细胞内细胞因子染色进行使用BD生物科学Cytofix / Cytoperm装备推荐(圣地亚哥BD Pharmingen CA)。流式细胞仪分析进行正欲FACSCalibur (BD生物科学)使用Ag-specific单克隆抗体和相应的同形像控制Abs (PharMingen,圣地亚哥,CA)作为描述(6]。的rat-specific马伯使用来自BD (il - 10, IFN -γ,CD8 CD3, CD4, CD11b / c)或E-Bioscience (IL-17A)。
2.7。淋巴细胞增殖试验
细胞孤立淋巴结和脾脏的重振在体外与R16肽在炒肽的存在或SOCS1-KIR。48小时后,文化是脉冲3H-thymidine (0.5µCi / 10µ信用证)另外12小时和分析描述(5]。提交数据的平均CPM±SEM的反应五个复制的文化。
2.8。定量(qPCR)分析
总RNA提取淋巴细胞和视网膜细胞使用试剂盒的试剂根据制造商推荐的程序(生活技术,马里兰州)。所有的RNA样品消化了RNase-free DNase 1(技术)30分钟,由苯酚/氯仿萃取纯化,沉淀在0.4氯化锂。RNA (10µg),一个商业合成系统(上标三世逆转录酶;生命技术),低聚糖(dT)是用于合成第一链cDNA如前所述。逆转录酶合成第一链包含每个信使rna样本但没有为可能的DNA污染进行控制;未能获得rt - PCR产品的任何DNA PCR amplimers证实没有污染。互补脱氧核糖核酸制剂使用的都是适合PCR扩增的基础上有效的放大β肌动蛋白序列。实时PCR进行快速实时PCR系统(ABI 7500)和PCR参数作为推荐的制造商(TaqMan普遍PCR设备;应用生物系统公司)。引物和探针使用从应用生物系统公司购买。信使rna表达水平正常化GAPDH管家基因的水平。
2.9。细胞毒性试验检测细胞凋亡在视网膜和RPE细胞
细胞凋亡诱导的视网膜或RPE细胞培养中包含1中1和3小时µM staurosporine(σ)或24小时中包含IL-17 (50 ng / mL), SOCS1-KIR或炒肽。通过流式细胞仪分析细胞死亡是评估的Annexin-V或者7-AAD (7-amino-actimycin D)标记细胞根据制造商(BD生物科学)。鼠标感光细胞系(661 W),人类视网膜色素上皮细胞系(ARPE-19),穆勒和人类细胞系(MI0-M1)被用于这项研究。
2.10。统计分析
统计分析是由独立的双尾学生的以及。淡的分数,非参数Mann-Whitney法。概率值≤0.05的被认为是具有统计学意义。数据提出了均值±SEM。
3所示。结果
3.1。SOCS1-KIR减少急性和慢性葡萄膜炎的严重程度
在先前的研究中,我们表明,抑制细胞因子信号1模拟肽(SOCS1-KIR)抑制JAK2 / STAT1通路抑制小鼠淡[20.]。然而,SOCS1-KIR也目标JAK / STAT通路的炎症细胞的抑制,目前尚不清楚是否淡来源于抑制巨噬细胞和抗原递呈细胞进入视网膜后淡的感应。我们通过过继转移诱导淡鼠R16 uveitogenic T细胞系。与淡引起主动免疫,过继转移避免了干扰的抗原递呈细胞致病淋巴细胞直接交付给老鼠没有抗原递呈细胞”的机构。过继转移,每天,直到那天天9过继转移后,老鼠接受1滴眼剂/ /(20眼µg在10µL)炒16-amino酸肽(肽)或SOCS1-KIR。肽是由当地眼药水管理在一个相对较低的剂量与系统性管理,只有一小部分剂量交付预计将达到视网膜由于血视网膜屏障。此外,肽是管理非侵入性的方式避免创伤和感染的风险。这种实验方法确保药物的直接交付到目标站点之前和减轻退化或间隙的药物达到其目标的组织。疾病进展监控通过裂隙灯显微镜或光学相干断层扫描(OCT),开始从6天之后淡的感应。与淡在大多数鼠标菌株,注意,老鼠非常容易淡和经常与潘葡萄膜炎严重阻碍的观察的前炎症fundoscopy后葡萄膜炎。因此,我们使用裂隙灯显微镜疾病严重程度评分。裂隙灯图像眼眼前段显示,严重的炎症和朦胧的前房,使学生在老鼠收到控制肽(图1(一))。相比之下,淡的临床评分显著降低在眼睛治疗的老鼠SOCS1-KIR模拟控制相比肽(数字1(一)和1 (b))。分析10月的眼睛透露大量的炎症细胞数量减少前房的眼睛SOCS1-KIR-treated老鼠(图1 (c)),确认SOCS1-KIR模拟肽的抑制效应。我们还研究了通过分析裂隙灯SOCS1-KIR对慢性葡萄膜炎的影响。一些报告表明复发老鼠的淡R16 uveitogenic T细胞可能早在16或25天之后开始过继转移(21- - - - - -23]。因此我们监视葡萄膜炎大鼠的眼睛感应淡,直到50天后大鼠治疗SOCS1-KIR发现开发治疗的老鼠相比明显淡的得分越低肽(图的控制1 (d))。总的来说,这些结果表明,SOCS1模拟肽可能是有效的治疗急性和慢性葡萄膜炎。
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3.2。SOCS1-KIR减轻视网膜炎、虹膜睫状体炎、葡萄膜炎
葡萄膜炎可以发生在眼睛的前面(前葡萄膜炎),后面的眼睛(后葡萄膜炎),或在整个眼葡萄膜炎(锅)[1]。因此我们检查是否局部治疗的老鼠SOCS1-KIR模拟肽将是有效地抑制淡病理学在各个领域,包括前部和后部眼段。图像来自代表解剖标志,如视神经、虹膜、睫状体或角膜。分析大鼠的眼睛对待SOCS1-KIR或控制炒肽12天后的致病性R16 T细胞过继转移组织学显示盘的发展在老鼠爬肽治疗葡萄膜炎。组织学上的数据未经处理的小鼠的眼睛淡不透露任何非特异性炒肽对炎症的影响。这些结果与显著减少炎症细胞在中央视网膜(图2(一个)),周边视网膜(图2 (b))、虹膜、睫状体(图2 (c)),或角膜(图2 (d))的老鼠接受SOCS1-KIR和减少炎性细胞在这些组织的水平与降低眼部病变的裂隙灯显微镜(数字1(一)和1 (b))和10月(图1 (c))。组织学病理变化和炎症的分数外围和中央视网膜显示显著降低淡和疾病成绩评分之前报道17,18]。
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3.3。SOCS1-KIR抑制炎性细胞在视网膜上的水平在淡
小胶质细胞实验性自身免疫性脑脊髓炎最近被证明有助于(运算单元)通过促进Th1和Th17细胞的扩张和效应功能(24]。因为这种动物模型多发性硬化症(MS)的股票与淡的免疫病理过程的基本特点,我们检查是否淡的抑制大鼠治疗SOCS1-KIR部分来自抑制视网膜炎症细胞的扩张在淡。我们通过过继转移诱导淡R16致病性T细胞(数字3(一个),3 (c),3 (d))或通过主动免疫R16肽在CFA(图3 (b))和老鼠收到SOCS1-KIR或控制肽。眼睛疾病归纳后12天收获与胶原酶消化后,我们孤立的炎性细胞在视网膜上。然后我们通过流式细胞术分析细胞的水平表达CD4, CD8, CD11b,和CD11c T细胞的细胞表面蛋白标记,小胶质细胞和其他骨髓细胞。这些研究显示减少了髓细胞和淋巴的眼中的老鼠接受SOCS1-KIR(数字3(一个)和3 (b))。我们也收集了眼水和玻璃体后50天的老鼠过继转移和吉姆沙染色剂染色细胞和细胞学分析显示显著减少炎症细胞在眼睛的前部和后部钱伯斯(数字3 (c)和3 (d))。总的来说,这些结果表明,SOCS1-KIR减轻葡萄膜炎,在某种程度上,通过抑制炎性细胞在视网膜上的水平在淡。
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3.4。SOCS1-KIR淡期间抑制炎性细胞因子和趋化因子的表达
我们接下来在老鼠通过主动免疫诱导淡R16 / CFA和检查直接SOCS1-KIR治疗的影响招聘的Th1和Th17细胞到视网膜。我们这里显示减少41%和38%的水平Th1和Th17子集,分别在老鼠的视网膜感觉对待SOCS1-KIR相比,控制老鼠对待炒肽(图4(一))。我们也分析了水平的促炎细胞因子和趋化因子通过qPCR在视网膜上。符合减少炎症大鼠的视网膜接受SOCS1-KIR模拟肽,促炎细胞因子的表达,如干扰素-γIL-17A, TNF -α,il - 1β,显著降低il - 6的视网膜感觉SOCS1-KIR-treated老鼠(图4 (b))。此外,促炎的差别,对这些基因与减少mRNA转录CCL20 (MIP3α)和CXCL9 (MIG),两种趋化因子调节炎症细胞的招聘,特别是Th17细胞和Th1细胞,炎症(图的网站4 (c))。细胞分离大鼠脾脏和淋巴结的重振在体外与R16肽中含有炒肽或SOCS1-KIR。分析细胞的胸腺嘧啶核苷掺入试验表明,增生性反应R16肽显著地抑制了SOCS1-KIR(图5(一个)),这表明针对JAK / STAT通路可以有效地抑制uveitogenic T细胞的扩张。细胞内细胞因子染色(数字5 (b)和5 (c))和qPCR(图5 (d))分析进一步表明SOCS1-KIR的抑制效应与IL-10-producing调节性T细胞(图的扩张5 (b)(图)和减少Th17水平5 (c))。在一起,这些结果表明,SOCS1-KIR可能提供保护淡通过调节抗炎和促炎细胞因子基因的转录和减少细胞表达趋化因子受体的比例与Th1和Th17子集强调了低水平的这些细胞在视网膜上的SOCS1-KIR-treated老鼠。
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3.5。SOCS1-KIR抑制淡病理学通过保护居民视网膜细胞凋亡
在淡在很大程度上来自视网膜病理炎症细胞细胞毒性促炎细胞因子分泌的影响,渗透视网膜。巨噬细胞和小胶质细胞被认为在本地放大uveitogenic T细胞的反应,从而诱导感光细胞和视网膜组织的破坏。然而,视网膜是也想保护自己免受cytokine-mediated细胞毒性视网膜细胞固有的居民通过激活内源性抗凋亡机制。因此,我们研究了SOCS1-KIR是否会减轻眼部病变在淡通过保护居民视网膜细胞凋亡。光感受器,穆勒和视网膜色素上皮细胞潜在目标容易受到炎症在眼内炎症的侮辱。为了解决这个问题,我们使用了凋亡诱导化学、staurosporine,诱导细胞凋亡在体外在两个良好的居民视网膜细胞系((感光细胞系(661 W),穆勒人类细胞系(MI0-M1)感光,Muller细胞))以及视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)中扮演关键的角色保护视网膜免受炎症的侮辱。凋亡和坏死细胞被Annexin-V 7-AAD染色分析,评估。我们这里显示,感光细胞(图6(一)),RPE细胞(图6 (b)(图),或者穆勒细胞6 (c))在含有staurosporine部分受培养基中培养的细胞凋亡在对待SOCS1-KIR相比,细胞治疗炒肽。IL-17,关键致病细胞因子在淡,也被认为发挥细胞毒性作用。视网膜细胞或RPE细胞在含有重组IL-17培养基中培养。再次,细胞治疗SOCS1-KIR表现出增强的生存在这炒肽(处理数据6(一)- - - - - -6 (c)),提供进一步的证据表明,SOCS1-KIR可能保护居民的眼部细胞凋亡。此外,细胞的抗凋亡治疗SOCS1-KIR与减少proapoptotic基因的表达(数字6 (d)和6 (e))。
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3.6。SOCS1-KIR并不抑制外周免疫反应
SOCS1-KIR抑制反应在视网膜(图1)。因此,感兴趣的知道它的免疫抑制功能扩展到周边主要免疫系统或局部的眼睛。我们过继转移诱导淡的致病性R16 T细胞和大鼠治疗与局部SOCS1-KIR管理局或炒肽如上所述。十二天后淡感应细胞分离大鼠的脾脏和淋巴结和重振中单独或R16肽。成套的文化的增殖反应显示细胞从老鼠之间没有显著差异处理炒肽和老鼠收到SOCS1-KIR模拟肽(图7(一))。胞内细胞因子分析还表明等效的干扰素-水平γ第Th1和IL-17-producing Th17细胞从老鼠对待炒肽和那些收到SOCS1-KIR模拟肽(图7 (b))。这些结果表明,本地化管理SOCS1-KIR的眼睛没有影响效应在脾脏淋巴细胞反应或LN。因此,虽然局部SOCS1-KIR管理是有效治疗抑制炎症反应的眼睛,它不构成危险的诱导广义外围的免疫抑制免疫系统。
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4所示。讨论
缓解的重复周期/复发性炎症,慢性葡萄膜炎需要针对autoreactive T细胞和自体免疫反应调节疾病复发。在先前的报道中,我们表明,表达SOCS1 SOCS3增加视网膜在淡,这表明这些出类拔萃的感应蛋白在眼部炎症可能抑制免疫反应的调节促炎细胞因子信号的强度和持续时间(25- - - - - -27]。缺陷的表达SOCS1巩膜炎患者,结合目标超表达的研究表明,大鼠视网膜中SOCS1免受葡萄膜炎(28),意味着管理SOCS1模拟肽可能是有用的治疗葡萄膜炎。在这项研究中,我们使用SOCS1-KIR, 16-amino酸亲脂性的SOCS1肽,抑制慢性盘葡萄膜炎大鼠,一个物种与鼠标,体现慢性复发性葡萄膜炎。重要的是要注意,JAK1和JAK2 SOCS1-KIR目标,这表明它可能抑制通路由SOCS3监管。
而daclizumab等生物制剂系统性管理是有效的在几个炎性疾病包括关节炎和过敏性皮炎,其功效的药物动力学的考虑提出了质疑neuroretina,组织从外周免疫系统隔离的血视网膜屏障(9,29日]。此外,大型系统性剂量的药物往往需要达到治疗浓度在视网膜上,这可能引起副作用。这是动力检查局部交付SOCS1-KIR是否有效。我们选择把老鼠SOCS1-KIR的局部治疗,因为它允许直接交付的药物眼部组织。这种方法的优点是,它可以确保少退化或药物到达其目标组织的间隙以及低系统吸收。无关紧要的系统性吸收肽后局部的政府可以看出,我们的数据显示,SOCS1-KIR局部治疗没有施加任何抑制对外围免疫反应的影响。的临床重要性、局部管理SOCS1-KIR诱导持续治疗抑制诱导后葡萄膜炎50天的淡,这种药物管理局的方法没有造成任何明显不适的老鼠。因此,确定感兴趣的一个滴眼剂的疗效观察SOCS1-KIR每天与其他炎症性疾病,特别是在抑制术后炎症或囊状的黄斑水肿。眼药水政府也会排除与侵入性治疗方法相关的副作用,例如intravitreal注入的生物制剂,可引起高眼压、眼内炎、视网膜脱离、出血、和白内障。虽然我们没有提交数据从葡萄膜炎患者SOCS1-KIR对细胞的影响,本文提供的数据表明,局部管理SOCS1-KIR应该调查潜在的有效治疗减轻人类的葡萄膜炎和其他眼部炎症性疾病。
JAK / STAT通路是最重要的一个途径利用先天和适应性免疫系统细胞启动和调节免疫反应(9]。角色的知识积累STAT蛋白在调节分化、炎症细胞的增长和效应函数求翻译这一知识的炎症和自身免疫性疾病的治疗。尽管许多统计抑制剂已经被开发出来,相对较少的测试或评估作为治疗药物在人类疾病的动物模型。在先前的研究中,我们生成membrane-penetrating SOCS1蛋白质(MTS-SOCS1)和显示,它能抑制STAT通路和抑制扩张的uveitogenic Th17细胞在体外(30.]。然而,它不能抑制小鼠的葡萄膜炎由于其快速间隙(30.]。在这里,我们的研究结果表明,局部SOCS1-KIR政府可以改善葡萄膜炎病理在两个不同的层面:(1)通过直接抑制由uveitogenic T淋巴细胞介导的免疫病理和(2)通过保护居民眼部细胞凋亡在慢性眼内炎症性疾病。使用SOCS1-KIR模拟肽抑制急性以及复发葡萄膜炎在这项研究代表了一个重要的附加医疗设备的补救措施的几个潜在的慢性uveitides致盲。因此,值得注意的是,SOCS1激酶抑制地区也已被证明能够抑制急性淡以及实验过敏脑脊髓炎(15,20.]。一些常用的生物制剂相比,亲脂性的SOCS1-KIR肽没有soc箱,大大限制了soc蛋白的半衰期,持续的优势在活的有机体内抑制活动。我们预见潜在的SOCS1-KIR结合使用类固醇的上下文corticosteroid-sparing免疫抑制治疗。
相互竞争的利益
作者没有竞争的经济利益要申报的东西。
作者的贡献
张他进行实验,准备数据,和编辑。Cheng-Rong Yu协助淡实验,流式细胞仪分析,图准备、纸和编辑。林玛丽j . Mattapallil和太阳协助淡实验和疾病评分。约瑟夫·拉金三世负责指导的选择、合成、SOCS1-KIR和使用。查尔斯·e·Egwuagu构思、设计和监督项目和写论文。
确认
作者感谢Chi-Chao Chan博士(NEI NIH)与淡得分寻求帮助;划归博士昊华钱和李Yichao(视觉功能核心,NEI)与10月的技术援助;菲利斯银(NEI)传播R16细胞和淡得分;和拉斐尔Villasmil (NEI流式细胞仪核心设施)与流式细胞仪分析寻求帮助。