文摘

老化的典型并发症的发展目前影响艾滋病毒携带者/艾滋病(PLWHA)可以部分归因于持续的免疫激活和慢性炎症这些个体特征。本研究的目的是分析影响联合抗逆转录病毒疗法(cART)政府施加于等离子体水平的HMGB1(高机动组盒蛋白1)、年龄(先进的糖化结束产品)、可溶性受体sRAGE、细胞因子、c反应蛋白(CRP),和一些在无症状PLWHA代谢标记。在30 PLWHA分析纵向,之前和车启动后6 - 12个月。我们观察到低层次的年龄post-cART组伴随着增加CRP和甘油三酸酯水平已经数月的早期治疗。因为当前不断的建议开始车和它的长期使用,这些和其他标记应该调查为了监视和推迟PLWHA non-AIDS并存病的出现。

1。介绍

尽管艾滋病毒流行情况影响全世界超过3600万人,近1%的全球流行(1),平均寿命的艾滋病毒携带者/艾滋病(PLWHA)非常类似于一般的未感染的人口,这使得感染的临床方法类似于其他慢性疾病,老化特征(1- - - - - -3]。这种改善是由于结合了动作和在这一领域的进步,特别是保证获得强有力的和联合抗逆转录病毒疗法(cART)大部分人(1,2,4]。

然而,我们今天面临的一大挑战是推迟发病和严重程度的非艾滋病诱发的并发症,这更早出现在感染艾滋病毒的人(5),包括心血管疾病、糖尿病糖尿病、肾脏、肝脏和骨骼改变和肿瘤4- - - - - -8]。这些并发症的发生和严重程度是严格依赖于强烈的免疫激活和慢性炎症影响PLWHA,不管车管理,只能在一定程度上减少这些条件和衍生产品3,7]。此外,毒性和副作用的车还可以促进此类疾病的发展(7,9),主要是血脂异常。

高级糖化终端产品(年龄)的氧化应激的结果发生在正常的生理条件如老化。然而,如果他们不是在尿液中排出或它们的形成是加剧糖尿病高血糖和其他疾病的情况下,他们在维管组织积累,造成有害影响(10,11]。此外,他们的结合受体(愤怒)促进促炎和促凝血的细胞通路的激活,从而增加生产的粘附分子、细胞因子il - 6和TNF -等α,一氧化氮(NO)的生成。这些机制可以影响艾滋病毒感染的过程中,导致许多严重的病理条件下,包括动脉粥样硬化的发展,糖尿病糖尿病、骨质疏松、肿瘤、神经系统疾病等(11- - - - - -17]。

还观察到另一个信使rna剪接,移除愤怒跨膜域(18,19)结果生产可溶性愤怒(sRAGE) [20.]。sRAGE与跨膜受体竞争封存其配体和防止促炎通路的激活19]。因此,改变sRAGE水平已经与心血管风险增加有关(14,21),高胆固醇血症(22)和高血压(23),以及糖尿病糖尿病(10),和新药物促使愤怒阻塞和/或sRAGE增加提出了未来疗法(18]。

高机动组盒蛋白1 (HMGB1)是另一个关键因素在促进炎症。它可以积极分泌不同的刺激后,如细胞因子、木糖醇,其分子模式(pamp) [24),或者被动,坏死细胞(25在HIV-individuals),常见的条件。在细胞外环境中,HMGB1激活各种模式识别受体(PRRs),比如愤怒和toll样受体(TLR) [26- - - - - -28),作为促炎细胞因子(25]和alarmin,刺激先天和适应性免疫系统,防止损伤和促进再生和修复(29日]。在人类,其系统性水平高一些急性和慢性炎症相关条件,包括胰腺炎、糖尿病糖尿病、疾病和自身免疫性疾病和癌症(17,28,30.- - - - - -32]。

很少有研究调查这些标记在艾滋病毒感染的作用,他们的表情是如何改变后车启动。考虑需要更好地理解炎症机制和细胞活化在这个病人,以及他们对“早衰”现象的影响,本研究的目的是比较HMGB1的水平,年龄,sRAGE,一些炎症生物标记的等离子体无症状PLWHA之前车,大约6个月到一年之后它的介绍。

2。材料和方法

2.1。研究设计

这是一个纵向研究涉及30感染艾滋病毒的科目,参加传染病专家门诊的“多明戈阿尔维斯梅拉”(SAEI-DM) Botucatu医学院复杂(FMB) -UNESP,在圣保罗,巴西。这个服务覆盖了大约600人从Botucatu城市和周边地区,在这项研究中,150人(那些cART-naive)接受了采访,其中只有30被包括在应用排除标准。收集的数据和生物样品在两个阶段进行,治疗开始前(M0),大约6到12个月后干预(M1),根据病人定期返回服务。这个研究项目由当地研究伦理委员会批准,2012年和2015年之间进行的。

2.2。包含和排除标准

入选标准是20至50岁,没有以前的购物车管理,签署知情同意书。

病人排除那些有下列条件:使用维生素补充剂,癌症历史(当前或以前),厌食症,病态的肥胖,糖尿病糖尿病、心血管、遗传或自身免疫性疾病、器官移植,妊娠在任何阶段或母乳喂养,合并感染,如肺结核、慢性病毒性肝炎、脑或传播弓形体病,使用非法药物和酒精。下列标准,排除发生在患者与此同时报道两个或更多:常规性能强烈的体育锻炼;使用抗生素、抗焦虑药或抗抑郁药;主动吸烟。这些条件包括只有一个的人,因为是在调整模型对这些变量进行统计分析。

2.3。社会人口和临床数据

社会人口和临床数据收集的访谈和病人的医疗记录。大多数的参与者大约34岁男性(60.0%)(±8.2),异性恋(66.6%),和单身(36.6%)。艾滋病毒感染的平均持续时间,考虑其诊断,为2.2岁(±3.2),和70%的受试者显示CD4 + T细胞计数低于500细胞/毫米³在第一集,最低点的细胞/毫米³。

此外,30.0%的人主动吸烟者,23.3%进行激烈的体育活动,6.6%的人服用抗焦虑药或抗抑郁药。

以下测试结果收集的医疗记录:血浆HIV病毒载量(重要),CD4 + T细胞计数、血糖、甘油三酯、总胆固醇、c反应蛋白(CRP)。坚持车被认为是,首先,随后基于病人的报告和验证的记录药品撤出,在药房服务。

2.4。实验室检测的性能

12毫升的血液被收集到一个包含管EDTA从每个患者纳入研究。样品冷却和黑暗环境中保持在1500转2 - 3小时,然后离心机(离心机5702 r埃普多夫)10分钟10°C。六个等离子整除每个存储在−80°C到执行的测试。

2.4.1。等离子体测量HMGB1

一个夹层immunoenzymatic试验(ELISA)进行,使用100年μL(稀释后样品(1:10)和制造商的规格从商业工具(MyBioSource,项目MBS2707497)。本文用分光光度法测定血浆HMGB1浓度,在450海里。结果表示为pg / mL使用光密度(OD)曲线和样品的计算。

2.4.2。等离子体测量年龄

一个商业酶联免疫试剂盒(细胞生物学实验室有限公司项sta - 317)是使用厂家提供的协议后,与100年μL的纯样品。吸光度是读的分光光度计波长450 nm,基于样本的OD和曲线,年龄层次计算μ克/毫升。

2.4.3。测量sRAGE

使用100μL的纯样品,夹心ELISA协议是根据制造商的指示(研发系统项DRG00)。阅读是立即执行的分光光度计波长450纳米。OD样品和曲线的计算,并表示在pg / mL。

2.4.4。测量的il - 6、引发和il - 10

细胞因子是由测量流式细胞术(FACSCalibur-E34297502374)使用CBA(仪珠阵列)工具包的炎性细胞因子,根据制造商的说明书(BD-Becton,迪金森和公司,551811项)。荧光强度,从血细胞计数器,显示细胞因子存在于样本的数量。样品、标准包含已知浓度的每个细胞因子一起分析了曲线的绘制、阅读,建立相应的检测极限。结果在pg / mL的软件FCAP数组™(BD-Becton,迪金森和公司)。

2.5。分析的结果

连续变量表示为的意思是(我)和标准差(SD)和分类变量的频率和百分比(%)。我们使用泊松测试或伽玛分布的非参数变量和负二项或单向方差分析后续Tukey-Kramer事后测试那些参数数据。我们也进行皮尔逊相关性之间的连续临床变量:年龄、sRAGE, HMGB1,葡萄糖、甘油三酯、总胆固醇、c反应蛋白、细胞因子、CD4 + T细胞。

所有计算都是调整年龄、性别、和烟草使用、激烈的体育活动,和抗焦虑药和/或抗抑郁药物的使用。

显著差异被认为是当值小于或等于0.05。所有分析在专业人士的帮助下机构的研究支持办公室使用SAS对于Windows, 9.2版。

3所示。结果

在这项研究中,我们观察到病人的CD4 + T细胞计数增加(与细胞/毫米³,购物车(表后)1)。值得注意的是CD4 + T细胞获得的平均是170.38细胞/毫米³它是高于在个体数低于500细胞/毫米³(209.71细胞/毫米³)在治疗的开始,而那些最初数超过500细胞/毫米³(109.62细胞/毫米³)。在巴西,虽然治疗是提供给所有感染艾滋病毒,2013年12月,治疗前开始只对有症状的患者或患者CD4 + T细胞计数低于500 /毫升。

PLWHA研究中,83.3%的人在一个治疗方案包括nonnucleoside逆转录酶抑制剂(NNRTI),和80.0%检测不到六世在M1。第二个集合的时候,参与者被问及坚持治疗,由86.6%的人报告。六世在pre-cART测量的平均值是126550。8 (±69756。2)RNA复制/毫米³。在M1, 80.0%的病人检测不到六世;在剩下的20%患者中,六世是30813。3 (±27463。9)RNA复制/毫米³。病毒载量M0、M1差异达到统计学意义()(表1)。

观察血清甘油三酯水平的差异(与mg / dL,)比较M0、M1。相反,没有葡萄糖和总胆固醇的差异(图观察到两个时刻1)。

车的介绍后,年龄等离子体水平(与pg / mL,)显著降低(图2)。为了探讨CD4 + T细胞对这种变化的影响,患者分为两组根据他们的CD4 T细胞计数在M0(>或< 500 CD4细胞/毫米³,和19个人,职责)。结果表明,年龄降低发生只在个人与最初的CD4 + T细胞计数低于500 /毫米³()。sRAGE没有差异()或HMGB1 ()如图2。

c反应蛋白水平也增加了六个月后车(与mg / dL,);然而,没有观察到细胞因子水平的差异比较M0、M1(图3)。

研究变量之间的皮尔逊相关性后,我们只发现il - 10水平呈正相关,引发和CRP和CD4 + T细胞计数与il - 6和引发负相关。

4所示。讨论

发展为艾滋病的风险和死亡相关高病毒血症和低CD4 + T淋巴细胞水平(33],它强化了坚持的重要性,购物车和定期监测这些参数在临床实践。大多数首次治疗的患者开始购物车显示减少六世到检测不到的水平(< 40张/毫米³)和CD4 + T细胞数量的增加,大约6个月的治疗后(1]。这一趋势反映了这一研究获得的结果以及实际的倾向在巴西,如图所示在过去流行病学公报,探测不到六世是通过治疗后78%的病人在2013年和2014年(4]。

为了延迟CD4 + T细胞的减少到非常低的水平,目前的建议是尽快开始治疗艾滋病毒感染的诊断被证实,无论CD4 + T细胞计数。尽管这方面的知识,26%的巴西人很晚诊断,当他们的CD4 + T细胞计数低于200 /毫米³,因此,他们也开始治疗后(4]。同样,在这项研究中,70%的病人显示不到500细胞/毫米³和一个最低点335.7细胞/毫米³在mo。然而,类似于以前的研究由我们的研究小组(34),车后增加CD4 + T细胞在患者更明显降低在M0计数。

尽管车的好处在艾滋病毒感染的稳定,有证据表明,治疗是伴随着一些负面影响,特别是考虑到其长期管理(9,35]。尽管增加氧化应激(35和血脂异常9,36)一些最明显的副作用,在我们的研究中,没有观察到不同的葡萄糖和总胆固醇水平后的治疗干预。然而,我们不能排除,治疗时间过长可能会引发这些问题,作为平托否决权等。35)发现血脂异常和葡萄糖扰动发生后三年的车使用。另一方面,在我们的研究中,病人有显著提高甘油三酸酯水平已经在第一个月的治疗,不影响使用的方案,蛋白酶抑制剂(PI),或者NNRTI(数据没有显示)。然而,其他作者报道,代谢不平衡可能与不同的车方案,特别是包括一些π(36]。这种变化应该监控,导致并发症的出现与艾滋病、心血管疾病和糖尿病等糖尿病(8]。

早期老化与和解释有关的持久的免疫激活和炎症感染艾滋病毒的人由于残余艾滋病毒复制所示淋巴组织,激烈的微生物可能发生易位,代谢失衡,细胞因子的不稳定性和氧化还原状态,等(7,37- - - - - -39]。众所周知,车可以减少炎症,但不恢复生理基础水平(3,7]。指的炎症过程,细胞因子和CRP测量研究了前后车的介绍。我们大部分的病人显示检测水平的细胞因子,这在某种程度上,可以通过无症状的条件和缺乏合理并存病的研究时间。此外,血浆细胞因子水平,除了TNF -α费伊,也极低的研究(40)也有感染艾滋病毒的人。低价值的另一个解释是技术用来测量他们的选择(CBA),这可能是传统的ELISA相比不敏感。

无显著统计学差异观察il - 6,引发,和il - 10水平生产,虽然il - 6已经提出了一个稍低价值和il - 10水平在车启动后更普遍。其他作者报道il - 6的合成减少治疗的介绍后,考虑不再干预,一到两年的41),所以,这种不一致可能与短的购物车管理在我们的研究中。il - 6水平的轻微的减少可以降低病毒载量车启动后,他们与CD4 + T细胞计数负相关,在这项研究中还发现,小增加il - 10的水平。除此之外,我们发现il - 10的引发和c反应蛋白之间的正相关关系,表明可能需要高il - 10水平导致减少在其他炎症标记物。

在目前的研究中,所有患者的CRP水平正常或略高,考虑到在这两个时刻的参考价值研究;然而,观察综合治疗后显著增加。因此,这些结果似乎并不表明贡献从马车到炎症减少在研究期间。实际上,我们的假设是体内c反应蛋白升高,可能与代谢综合征相关参数的增加,甘油三酯等治疗后在我们的研究中也显示出更高的价值。也发现类似的结果Masia et al。42和吉马良斯等。43cART-naive相比治疗患者,证明了c反应蛋白之间的正相关或hs-CRP和甘油三酯,脂类,胰岛素水平,和收缩压和舒张压等参数,包括弗雷明汉风险评分(42,43]。病毒载量和CD4 + T细胞计数与c反应蛋白在这些研究;因此,c反应蛋白和hsCRP是标记与艾滋病毒感染有关的心血管风险和车42,43]。

然而,另一项研究[44]表明,c反应蛋白水平降低车后治疗,尽管他们仍维持在高水平。然而,这些作者相关的更高层次的c反应蛋白高死亡率由于营养不良的心血管变化后短时间内感染艾滋病毒的成年人在非洲,可能的解释的是持续的慢性炎症过程44]。无论如何,这两个层次的CRP炎性细胞因子和代谢轮廓与个人的生活方式有关。因此,平衡的食物摄入,可怜的钠含量,脂肪和糖的摄入抗氧化剂,和体育活动,特别是耐力和力量训练的结合,是重要的在维护或延迟脂肪代谢障碍,代谢综合征和其他non-AIDS疾病(45,46]。

目前的研究调查了其他三个差研究参数:年龄,HMGB1参与诱导的细胞激活和触发炎症反应,sRAGE,起到相反的效果。

车启动后,年龄等离子体水平显著降低。对年龄浓度对艾滋病毒感染的发病机制及其影响,尤其是体内。据我们所知,这是第一个研究评估的影响车在无症状PLWHA时代的水平。然而,不同的报告表明,他们的高水平发展的各种相关并发症在non-HIV-infected个人,主要是老龄化带来的并发症,如白内障、动脉粥样硬化(11,47),骨质疏松症(13),阿尔茨海默病(16)、慢性肾脏疾病和糖尿病糖尿病(11,15]。关于这一点,车似乎有助于改善该参数。然而,在我们的研究中,这很容易改进只在病人开始推车CD4 + T细胞计数较低(< 500细胞/毫米³),至少在短期时间的治疗。需要进一步分析在长期车期监控这在PLWHA关键参数。

sRAGE水平差异之前和之后的车介绍没有观察到在目前的研究中,可能是因为短时间间隔的分析。毕竟,首先年龄激活炎症级联与顺向il - 6的生产,这可能是只有在这种感应sRAGE增加循环发生(48]。因此,后车的年龄水平降低,有较低的细胞刺激和较低的sRAGE生产。另一个假设是,即使是轻微的,无意义的posttherapy sRAGE增加,有年龄大的捕获这些可溶性受体,从而显著减少艾滋病患者的循环水平后车。

在普通人群中,改变水平的血液与老龄相关的疾病,特别是与代谢综合征(10,21,22,49]。研究sRAGE稀缺的艾滋病毒/艾滋病领域的,尽管它的重要性对病毒的发病机理和慢性疾病感染者的管理。宋et al。21]发现高浓度的sRAGE降低PLWHA动脉粥样硬化的发展相关,表明这个标记的保护作用的主要和最严重的并发症之一这些个体。因此,这些作者(21)表明,测量等离子体sRAGE可用于临床实践,试图预测PLWHA的心血管风险。相同的作者还显示使用购物车类之间没有差异,尽管大多数患者高sRAGE NNRTI方案。同样,在目前的研究中,大部分患者(83.3%)组成的接收方案NNRTI,指依法韦伦。此外,我们没有发现任何我们的病人使用的购物车类之间的关系,研究了生物标志物的变化(数据没有显示)。

系统性水平高的HMGB1也发现在许多慢性炎性疾病,包括糖尿病糖尿病和癌症,在严重的情况下,如脓毒症(17,32,50]。一个有趣的发现是,HMGB1可以绑定和促进运动有限合伙人的有限合伙人单体聚合从而支持有限合伙人绑定到CD14最终增加TNF -α生产,通过TLR4激活(27]。同时,单核细胞刺激有限合伙人和TNF - HMGB1导致增加生产α相比单独有限合伙人的情况(27]。这表明HMGB1也可能引起艾滋病毒再活化PBMC车下的人(51]。然而,在这项研究中,没有观察到的差异在HMGB1前后车的水平。相比之下,其他研究显示增加PLWHA中HMGB1含量与未感染的人口,主要是在晚期疾病患者(52,53]。这个标记之间的关联、六世的病人也观察到Trøseid et al。53),除了减少他们经过两年的车。这是另一个方面没有观察到在这项研究中,可能由于短时间内分析。

尽管目前的研究分析了一个小样本,不存在病人的膳食调查的数据,这也可能影响时代的水平(54和一些代谢参数的46],研究人口经历了严格的排除标准,以减少可能的混杂效应的结果,如故意引起并发症的存在,是由年龄、sRAGE, HMGB1。我们研究的另一个限制是相关时间开始治疗后第二次分析,从6到12个月。短的措施可能不会反映一个给定的稳态水平细胞因子在购物车,例如,尤其是在那些仍然显示检测到的个人重要的价值观。因此,尽管我们的目的是检查标记的变化开始治疗,这些患者体内的生物标记物的研究车长期也会启发。除此之外,缺乏对照组可以被认为是本研究的另一个偏见,由于缺少参数措施不定义良好的文献中,这就可以解释一些数据建立。

5。结论

最后,我们得出结论,在第一个月的车,减少葡萄糖氧化途径,减少年龄可溶性尤其是患者初始CD4 + T < 500细胞/毫米³,这将表明较低的免疫激活和改善这些患者的炎症状态。然而,其他炎症标记物的分析并没有显示出这样的好处因为炎性细胞因子的水平并不修改和CRP增加在同一时期。另一个消极的方面是增加甘油三酯在这短时间内。因为HMGB1和sRAGE水平没有调制的初始治疗,其他模式识别受体和其他产品负责细胞激活和炎症可能是更多的信息分析慢性炎症的感染艾滋病毒的人。

因此,分析其他标记和更大的群组研究中进行进一步的研究和长期的影响是重要的澄清机制激活药物治疗,炎症,影响PLWHA和代谢变化。那里,尽管车的无可置疑的好处在控制艾滋病毒复制,一些策略可能是有用的在预防/延迟的发生非艾滋病诱发的疾病,如体育锻炼实践,均衡的饮食和其他健康的生活习惯。

相互竞争的利益

作者宣称没有利益冲突。

确认

这项工作是支持由巴西代理“斗篷”(Coordenacao de Aperfeicoamento de Pessoal de含量比),凯伦Ingrid Tasca, Caio Cavassan de Camargo;从“Reitoria / UNESP,朱莉安娜Trindade Caleffi;从FAPESP”必须占州政府(Fundacao德帕罗尽管Estado de Sao Paulo)玛丽安娜与(2010/13922-5数量)。作者要感谢从EAP / UNESP人员的努力,尤其是教授Jose Eduardo Corrente刺的帮助与统计分析。作者从热带疾病部门,感谢所有的人Botucatu血液中心、热带疾病的实验室和实验研究单位(FMB / UNESP),尤其是教授半径标注。教授Alexandrina Sartori半径标注。黑川纪章Cilmery s时,玛丽亚Regina Moretto,西尔维亚·r·t·Estevan所有的帮助。作者还要感谢专业门诊的病人和员工Infectology“多明戈阿尔维斯梅拉”。