文摘

客观的。系统性红斑狼疮(SLE)与加速动脉粥样硬化和心血管疾病的风险增加相关。血管生成T细胞(唐),已确定一个特定的T细胞的子集,并参与修复受损的内皮。本研究旨在分析唐代细胞子集的关系从系统性红斑狼疮患者疾病的特定特性。方法。唐细胞评估子集在41系统性红斑狼疮患者的外周血样本和22名健康对照组(HC)流式细胞术的基础上CD31和趋化因子受体CXCR4表达CD3 +, CD4 +和CD8 + T细胞。结果。CD8 + CD31 +趋化因子受体CXCR4的百分比+ T细胞(CD8 +唐),但不是CD3 + CD31 +趋化因子受体CXCR4 +(唐)和CD4 + T细胞CD31 +趋化因子受体CXCR4 + T细胞(CD4 + Tang)在系统性红斑狼疮高于HC。唐细胞子集的百分比anti-dsDNA-positive系统性红斑狼疮患者显著增加比消极的同行和HC。此外,循环唐细胞子集的水平随着年龄增长负相关抽样和诊断,但不是疾病或疾病活动持续时间。结论。Anti-dsDNA-positivity可能识别一群与唐增加系统性红斑狼疮患者细胞子集和循环唐CD8 +细胞可能被视为一个潜在的有用生物标志物内皮损伤和心血管风险的系统性红斑狼疮。

1。介绍

系统性红斑狼疮(SLE)是一种常见的自身免疫性疾病,其特征是免疫系统的失调,导致慢性系统性炎症(1,2]。先前的报道,系统性红斑狼疮与加速动脉粥样硬化和心血管事件的风险增加相关的驾驶高发病率和死亡率[3,4]。然而,内皮损伤,加速动脉粥样硬化和心血管疾病增加观察系统性红斑狼疮患者不能完全用传统的心血管危险因素来解释或皮质类固醇的使用(5]。有人提出系统性炎症、细胞因子特异表达,改变T细胞亚群扮演重要角色在内皮功能障碍和心血管风险增加在系统性红斑狼疮患者6]。因此,识别心血管损伤和修复与系统性红斑狼疮相关生物标记物可能揭示见解发病机理和可用于监测心血管风险和改善心血管健康。

最近,一个特定的T细胞群,称为血管生成T细胞(唐),被认为能促进新血管的形成和修复受损的内皮的配合内皮祖细胞(epc) [7]。内皮祖细胞是一个异构的人口参与血管生成和血管修复(8]。此外,户珥和他的同事们研究发现,唐细胞的表达CD3、血小板内皮细胞粘附分子(CD31)和stromal-derived因子的受体1 (CXCR4) [7]。CD3 + T细胞的一个子集,汤唯也表达CD4和CD8细胞。据报道,减少唐细胞频率与血管疾病(9,循环唐RA患者细胞减少,一种自身免疫性疾病,心血管疾病患病率增加(10]。然而,唐细胞的百分比是知之甚少的子集(包括CD3 + CD31 +趋化因子受体CXCR4 +, CD4 + CD31 +趋化因子受体CXCR4 +和CD8 + CD31 +趋化因子受体CXCR4 +细胞)在系统性红斑狼疮患者的循环。

因此,我们探索的百分比是否唐细胞用流式细胞术不同子集系统性红斑狼疮患者与健康对照组(HC)。此外,我们的目标是评估其潜在的临床和实验室异常的链接。

2。材料和方法

2.1。病人和控制

外周血样本(PB)获得41系统性红斑狼疮患者和22 HC。所有患者实现美国风湿病学院修订标准分类的系统性红斑狼疮(11]。疾病活动评估系统性红斑狼疮疾病活动指数(咽部)招聘的时候。所有的患者有冠状动脉疾病,糖尿病,或心脏衰竭。其他信息的患者的人口统计学、临床和免疫表现和当前药物中描述表1。知情同意是获得所有科目。本研究Xijing医院的伦理委员会批准,符合《赫尔辛基宣言》的建议。

2.2。流仪结果

PB单核细胞(PBMCs)隔绝Ficoll-Paque肝素化全血钠的密度梯度离心法(美国通用电气医疗集团,匹兹堡,PA)。然后,用流式细胞术测定淋巴细胞的表型。短暂,PBMCs沾以下荧光染料结合单克隆抗体:anti-CD3-peridin叶绿素蛋白质(Percp) anti-CD4-Percp, anti-CD8-Percp, anti-CD31-phycoerythrin (PE), anti-CXCR4-allophycocyanin (APC),和isotype-matched控制免疫球蛋白抗体(都来自BD生物科学,圣地亚哥、钙、美国)在室温下30分钟,根据制造商的指示。与PBS洗后,至少20000事件/管使用收购FACSCalibur流式细胞分析仪(BD生物科学)和分析使用CellQuest软件(BD生物科学)和FlowJo 7.6.1软件(树明星)。

2.3。统计分析

使用非参数Mann-Whitney组之间的差异决定的测试。非参数相关性进行评估的斯皮尔曼等级相关分析。对于所有的测试,一个双面的值小于0.05被认为是显著的。数据分析使用SPSS 17.0软件(美国SPSS,芝加哥,IL)。

3所示。结果

3.1。基线特征的主题

系统性红斑狼疮患者的临床和实验室特征和HC见表1。总共42系统性红斑狼疮患者和22 HC这项研究招募了。没有显著差异在性别和年龄之间的系统性红斑狼疮患者和HC。传统的心血管危险因素已报告与循环唐细胞(成反比关系7]。在这项研究中,系统性红斑狼疮患者和HC没有显著差异在心血管疾病的风险因素,包括吸烟、糖尿病、高脂血症、高血压(所有)。

3.2。唐循环细胞比例在系统性红斑狼疮患者和HC子集

如图1(一),代表CD31的例子和趋化因子受体CXCR4表达CD3 +、CD4 +、CD8 + T细胞通过流式细胞术分析。循环CD31 +趋化因子受体CXCR4 +细胞百分比的总CD3 + T细胞(唐)和CD31 +趋化因子受体CXCR4 +细胞CD4 + T细胞(CD4 +唐)往往是系统性红斑狼疮患者稍高的HC相比;然而,差异没有达到统计学意义(图1 (b))。更重要的是,CD31 +趋化因子受体CXCR4 +细胞百分比的CD8 + T细胞(CD8 +唐)在系统性红斑狼疮患者显著增加而HC(图1 (b))。

3.3。自身抗体状态与唐的水平细胞的子集

然后,我们想确定是否改变循环唐细胞百分比的子集是与自身抗体在系统性红斑狼疮患者地位。最引人注目的观察后细分系统性红斑狼疮患者分成两组基于anti-dsDNA抗体状态。唐的比例,唐CD4 +, CD8 +唐anti-dsDNA-positive系统性红斑狼疮患者与消极的同行相比显著增加,HC(图2(一个))。唐的百分比和CD8 +唐在anti-dsDNA-positive anti-SSA / SSB-positive或anti-Sm-positive系统性红斑狼疮患者显著增加,而HC。然而,之间没有循环的差异唐细胞观察子集anti-SSA / SSB-positive或anti-Sm-positive系统性红斑狼疮患者和消极的同行(数字2 (b)和2 (c))。

3.4。相关的细胞与系统性红斑狼疮患者临床特征的子集

唐循环细胞的相关子集与系统性红斑狼疮患者临床特征见表2。为了评估唐细胞子集之间的关系和在系统性红斑狼疮疾病活动,我们进行了相关性的百分比,CD4 +, CD8 +唐,咽部分数。唐之间没有显著相关性被发现细胞子集和咽部分数(表2)。此外,唐代流传的百分比,CD4 +, CD8 +唐在采样和年龄随着年龄增长负相关诊断,但不是疾病持续时间(表2)。

4所示。讨论

越来越多的证据表明,血管生成和血管生成因素严重导致系统性红斑狼疮的发病机制(12- - - - - -14]。事实上,在体外和体内实验表明,唐细胞集落形成和分化所需的早期内皮祖细胞和应该刺激内皮细胞分泌血管生成细胞因子(7]。此外,唐细胞增强内皮细胞增殖和功能,认为唐细胞可能被视为一种生物标志物对心血管风险(7]。因此,在这项研究中,细胞循环唐子集的百分比,包括唐、CD4 +, CD8 +汤,被流式细胞术在系统性红斑狼疮患者全面评估。

类似于最近的一项研究[15),我们的数据显示,在系统性红斑狼疮患者循环唐细胞的百分比与HC没有不同。然而,对唐循环细胞水平,已报告不一致的结果。洛佩兹et al。10,15]表明,唐细胞的比例只有8%在HC,风湿性关节炎,系统性红斑狼疮病人。在协议与数据的最近的一项研究[7),我们表明,循环唐水平约为30 - 40%在HC和系统性红斑狼疮患者。事实上,我们和金等人的人口研究工作(7)由亚洲人,而洛佩兹等的研究。10,15招募了欧洲人。因此,唐水平的差异可能是由于不同的民族。我们相信,与更多的患者进一步的调查和后续观察需要确认和扩展当前的结果。

与此同时,我们发现不仅CD3 +细胞,而且CD4 +和CD8 + T细胞表达CD31和趋化因子受体CXCR4表面。因此,水平的循环唐唐CD4 +和CD8 +细胞也检查了在这个研究。没有明显差异在唐CD4 +细胞的百分比之间的系统性红斑狼疮患者和HC。然而,唐CD8 +细胞的比例显著增加在系统性红斑狼疮患者相比,HC,建议增强唐CD8 +细胞可能是内皮损伤修复反应出现在系统性红斑狼疮患者。此外,一个有缺陷的功能已经报道唐系统性红斑狼疮患者的细胞,包括细胞毒性表型和加速衰老15]。因此,缺乏血管修复可能进一步加强唐CD8 +细胞的水平。

之前报道,一些自身抗体,包括anti-dsDNA anti-SSA /单边带和anti-Sm抗体,扮演了一个重要的角色在诊断、疾病活动评估、器官参与,和预后评估的系统性红斑狼疮(16]。此外,据报道,自身抗体状态与血管病变和心血管疾病的风险在系统性红斑狼疮17和其他疾病18- - - - - -20.]。在目前的工作,在系统性红斑狼疮患者积极的抗体,唐及唐CD8 +细胞百分比显著增加,而HC。有趣的是,之后将这些患者根据抗体的存在与否,anti-dsDNA-positive系统性红斑狼疮患者,但不是anti-SSA / SSB-positive或anti-Sm-positive病人,水平的提高唐,唐唐CD4 +和CD8 +细胞比消极的同行和HC。因此,这些数据表明anti-dsDNA-positivity可能孤立的一个子集相关的系统性红斑狼疮患者内皮损伤和血管病变的风险。

我们没有发现任何有统计学意义的唐细胞子集之间的相关性和疾病持续时间根据咽部或系统性红斑狼疮活动。报道的文献[7,10,15),唐细胞水平与年龄相关的反向HC,风湿性关节炎,系统性红斑狼疮患者。符合这些结果,我们发现唐及其亚种群唐唐CD4 +和CD8 +细胞水平负相关抽样年龄和年龄的诊断。这些发现支持,后期年龄与缺陷有关内皮修复和心血管疾病的风险,和唐细胞子集可以作为心血管疾病的生物标记(7]。

5。结论

我们的研究结果表明,水平的系统性红斑狼疮患者CD8 +唐水平升高与HC进行比较。自身抗体的存在,特别是对于anti-dsDNA抗体,与唐可能识别一群系统性红斑狼疮患者细胞子集和血管病变的风险更高。这些发现表明,第一次循环唐CD8 +细胞可能被视为一个潜在的有用的内皮损伤的生物标志物在系统性红斑狼疮。进一步的研究需要阐明唐CD8 +细胞的功能和调查对系统性红斑狼疮变化的机制。

伦理批准

这项研究是通过道德标准委员会Xijing医院。

信息披露

吉林苗,冯秋李婷婷和彭赵是共同第一作者。

相互竞争的利益

所有作者声明没有利益冲突。

作者的贡献

6月湾、Xiaokun气和萍朱贡献同样这项工作。

确认

这项工作是支持由中国国家基础研究项目(没有。2015 cb553700-04)和中国国家自然科学基金(没有。81401338)。