文摘
的数量和严重的过敏和自身免疫性疾病的病人接受移植的全球增长。目前,这些患者需要终身免疫调节药物的管理。通常,这些药物价格昂贵,而且显示直接或晚发严重的副作用。治疗会大大提高了针对自身免疫的原因,也就是说,失去宽容自体抗原。积累知识的免疫机制导致耐受性树突状细胞(tolDC)的发展,与特定目标在长期抑制不必要的免疫反应。第一个临床试验tolDC最近进行了更tolDC试验正在进行中。虽然安全试验一直在鼓励,tolDC相关的许多问题,例如,cell-manufacturing协议、管理路线,数量和频率,或作用机制仍有待回答。旨在共同努力翻译tolDC和耐受性细胞的其他产品(如亚群和巨噬细胞)的诊所,一个欧洲成本(欧洲科学技术合作)网络已经启动了FACTT(行动重点,加快细胞致耐疗法)。FACTT旨在最小化重叠和最大化比较tolDC方法通过建立最低信息模型和共识监测参数,确保进程将会在一个高效的,安全的,具有成本效益的方式。
1。自体免疫细胞治疗、过敏和移植
健康的免疫系统平衡防止入侵的有害的病原体或癌细胞,同时维护一个睡着的状态(“宽容”)我们的组织和无害的物质1]。崩溃的免疫耐受性会导致不必要的、有害的反应,导致自身免疫性疾病(援助)像风湿性关节炎(RA), 1型糖尿病(近年来),或多发性硬化症(MS)和过敏性哮喘等过敏和食物过敏。这些免疫介导性疾病是一个主要的疾病负担。在世界范围内,据估计,大约在10个人(7.6% - -9.4%)2受到援助,1 9有记录的诊断过敏。
对同种异体组织和移植物抗宿主病(GvHD)的免疫反应,目前的主要障碍成功的实体器官和骨髓移植。许多因素影响外国移植反应,最基本的移植物抗原性和alloreactive的贡献效应T细胞(3]。解体捐助者与接受者的规则组织相容性使得成千上万的组织,器官,干细胞移植在欧洲每年执行(4]。然而,作为组织类型通常不可能的完美匹配,大多数免疫抑制,主要取决于终身全面移植受者移植物抗宿主病预防移植排斥反应或目标T细胞(5]。
现有的疗法来治疗或预防援助、过敏反应和移植主要包括慢性免疫调节药物治疗。然而不治疗,这些药物是不可避免地与直接或晚发严重副作用的风险(例如,威胁生命的感染,癌症)。此外,一般免疫抑制疗法可能会随时间而变得无效的病人的生理变化(例如,当中和抗体诱导针对生物制剂),低级的免疫反应发生,或疾病的病理机制改变压力持续治疗。应用程序和持续监控这些终身治疗代表一个巨大的社会和经济负担产生戏剧性的影响患者的生活质量。因此,有一个未满足的需要更有效和更安全的治疗旨在诱导或恢复免疫耐受6]。
过继转移免疫功能的原则与纯化白血球的数量以实验免疫学家(图1)。从最早发现的可转移抑制基因在动物细胞群,它提出了细胞移植可以作为tolerance-promoting治疗人类[7]。最近的科技进步使标识、隔离体外操纵各种类型用作治疗药物。发展的细胞疗法是临床上有吸引力的原因有很多,尤其是低毒和抗原特异治疗的前景。更值得注意的是,因为免疫耐受是一个自我强化的国家(8),细胞疗法的治疗效果比治疗细胞本身,开放治疗治疗的可能性。一些细胞类型现在在兼职免疫抑制药物早期临床试验,包括各种类型的调节性T细胞亚群)[9]或耐受性抗原递呈细胞(包括耐受性直流(tolDC)和监管巨噬细胞(Mregs)) (10- - - - - -13]。目前,尚不清楚这些细胞类型将被证明是最合适的细胞疗法;事实上,每一种都有其特定的优势。在这里,我们描述一个FACTT财团的合作努力解决科学、临床和监管障碍与tolAPC实施治疗。
2。单核吞噬细胞和维护外围宽容
正是为了避免上述自身免疫性和过敏性反应,免疫反应必须控制在许多层面。在他们的发展过程中,T细胞、B细胞、NK细胞进行选择性过程限制他们self-reactivity潜力;然而,这个“中央”宽容并不完全停止响应占自我和无害的外国抗原。许多合作机制的“外围”宽容已经被描述,包括外围克隆删除,无力,疲惫,偏差,无知,和监管。在过去的15年里,卓越的积极的作用,细胞介导监管出现了从监管细胞群的研究,尤其是FoxP3+亚群。随后,T细胞介导的依赖监管tolAPC (14成为了一个热门的研究主题。现在是牢固确立专门的亚种群的单核吞噬细胞是不可或缺的自我耐受性的感应和维护(15),以及防止本构对非病理性刺激炎症反应(16]。
耐受性的函数并不局限于任何特定子集单核吞噬细胞;更令人困惑的是,不同的监管直流和巨噬细胞子集可以通过类似的细胞和分子机制。反思单核吞噬细胞的作用在有序的循环炎症可能有助于解释这个明显的冗余(图2)。巨噬细胞和直流是正常的组织间质成分,提供至关重要的功能在维持组织内稳态通过消除坏死细胞和抑制炎症反应对无害的刺激。在检测不到发炎稳态迹象的情况下,tissue-resident直流也通过传入淋巴管转移到淋巴组织,有助于维护周边T细胞对自我和他人的宽容nonharmful抗原。巨噬细胞在组织和直流敏感致病性信号从他们的环境,他们成熟一个免疫原性状态。激活单核吞噬细胞在急性炎症级联组织发起,包括进一步招聘炎症从血液单核细胞,常常导致二级组织损伤。激活直流快速转移到淋巴组织刺激适应性免疫反应,炎症的关键属性。重要的是,急性炎症反应通常是自限性的,这部分是由于重复和强烈刺激单核吞噬细胞抗炎模式切换。因此,巨噬细胞和DC可以显示抑制功能未成熟的细胞,poststimulatory抗原递呈细胞”。
3所示。tolDC和Mregs作为细胞治疗产品恢复宽容
单核吞噬细胞的重要作用移植耐受的诱导和维护,特别是许多示威活动,这个活动可以与纯化直流或巨噬细胞过继转移人口,刺激感兴趣的前景使用tolAPC抑制致病性免疫反应(17,18]。鉴于单核吞噬细胞的表型可塑性,它或许不足为奇,广泛选择的替代monocyte-derived细胞类型开发作为潜在的治疗细胞类型(19]。大部分注意力都集中在治疗直流驱动他们逮捕了不成熟的状态;然而,其他团体正在开发治疗性细胞产品基于poststimulatory monocyte-derived抑制细胞类型或从早期myeloid-derived抑制细胞单核细胞祖细胞(图3)。
而“默认”直流是诱导功能,激活直流有能力促进破坏性的T细胞反应。因此很明显,维持直流activation-resistant状态是绝对tolDC治疗的先决条件。tolDC可以被定义为一个maturation-resistant细胞不成熟或semimature表型(例如,低表达costimulatory分子)和稳定的突出的表达抗炎分子和低促炎细胞因子的表达。为了实现这一目标,评价了生物和药理代理人产生tolDC在体外(20.- - - - - -25]。自核易位的核因子kappa-light chain-enhancer激活B细胞(NF -κB)是一个主要的细胞过程后刺激促炎介质,几个代理,阻止这个途径,因此直流测试过的成熟过程生成tolDC在体外,包括NF -κB抑制剂,bay11 - 7082,维生素D3,地塞米松或il - 10 (26- - - - - -28]。此外维生素D3干扰细胞代谢也得到了证实。它抵消代谢转向更高的糖酵解和线粒体氧化磷酸化的逐步丧失后炎症激活(29日]。此外,DC可以修改基因敲出免疫原性函数或插入耐受性的特点。总的来说,tolDC生成在体外使用这些药物已经被证明是减少的症状建立援助或防止移植排斥的组织在实验动物模型(30.,31日]。这些有前途的结果有助于tolDC疗法用于治疗人类的发展援助和预防移植排斥反应。到此为止,许多方法来生成tolDC在体外被翻译根据良好生产规范(GMP)临床使用在过去的15年。
另一个临床的先进的例子activation-induced monocyte-derived抑制细胞Mreg [32]。通过自己的坚持塑料表面,接触血清组件和刺激与干扰素γ单核细胞是成熟,抑制巨噬细胞,通过吲哚胺2,3-dioxygenase——(IDO)相关的机制13]。Mregs表达CD86和HLA-DR,以及高水平的其他maturation-associated标记,像CD274。至少在体外人类Mregs能够删除激活T细胞,抑制T细胞增殖,驾驶幼稚T细胞成为诱导亚(33]。
4所示。tolAPC-Based临床试验
几个准备tolAPC已经经过第一阶段的临床试验。试验与自体tolDC完成内转(美国)(12),RA(澳大利亚10),英国,韩国34])和克罗恩病(西班牙)11)(表1)。到目前为止,结果令人非常鼓舞,从安全的角度来看,由于试验都没有发现任何重大关切,防止进一步的测试。tolDC疗法被病人耐受良好,,重要的是,自身免疫治疗患者没有增强。进一步我tolDC阶段试验正在进行中(西班牙、比利时和俄罗斯),女士neuromyelitis视(西班牙),近年来(荷兰)和肾移植(法国)。此外,第二阶段试验tolDC内转至患者(美国)将开始招募患者迫切。Mregs含有电池的产品现在已经作为一个兼职管理免疫抑制治疗超过20肾移植受者的初步结果(13,35,36]。这种治疗方法正在扩展的一项研究[37]。
5。协作努力克服局限性tolAPC疗法
正如上面总结的,几个tolAPC产品已经或正在进行临床试验。由于生产和管理的复杂性与启动细胞疗法,相对较少的组织准备或进行试验与细胞致耐疗法(CTT)在欧洲或全球。具体的会议或论坛是缺乏的,因为大多数科学家参加针对疾病的会议或一般免疫学会议结论的领域,包括tolAPC弱势。研究小组在肾移植工作最近发起一个共同倡议CTT(“一项研究”欧盟财团),旨在评估结论活体供肾移植;另外,许多其他团体在其他类型的器官移植或援助工作独立发展他们的项目。由于这种广泛分布在CTT和有限的行动,联合行动需要集成经验,分享成果,讨论策略来推进新临床试验的临床应用。实现这一欧盟成本财团FACTT(行动重点,加快细胞致耐疗法)于2014年发起的加速开发和实现的结论,包括tolDC和Mreg,通过创建一个论坛交流和集成的知识和专长。这是第一个欧洲计划汇集了不同学科背景下人类免疫耐受的主要目标,加快和推进总部临床应用治疗援助,过敏,预防移植排斥。
关于tolAPC目前这种疗法的局限性有关的生产过程和评价临床试验,旨在提供信息的假设机制(s)的行动。第一个步骤是由FACTT财团将有助于推动tolDC领域解决关键问题在不同实验室之间的合作和利益。下面讨论的这些问题是最重要的。
5.1。比较tolDC生产协议
细胞治疗领域中一个突出的问题是变化的方法用于提取、生产、使用的细胞治疗的目的。不同的方法很难直接比较不同的细胞产品,因此带来的不确定性,最终最后的疗效和安全性比较结果。对这个问题的解决方案是定义一组标准协议;然而,这种方法比较困难,因为这需要大量修改现有的方法在许多实验室。作为FACTT项目的一部分,我们定义一个不那么激进的方法提供了一个标准的报告框架。我们称之为MITAP(最小信息耐受性抗原递呈细胞”)。这些指导方针使方法清楚和透明的差异和相似之处。我们相信这种方法有更大的几率被使用的CTT社区作为作者当它还提供了一个清单,例如,描述他们的方法在论文中;MITAP使他们的工作更容易,而不是增加负担的科学出版物。我们已经测试了MITAP FACTT社区内,准备在不久的将来发布最终版本。
5.2。共识功能质量控制参数
一般而言,临床适用tolDC可以被定义为一个maturation-resistant细胞MHC II表达式和一个不成熟或semimature表型(低或限制表达CD80、CD83、CD86)和稳定的突出的抗炎膜分子的表达和/或产品和低分泌的促炎细胞因子的表达,即使在存在环境促炎的信号。另一个限制是没有共识如何确定tolDC“tolerogenicity”(力量)的产品,考虑到公差可以通过不同的机制,在此限制功能的标准化质量控制(QC)参数,使产品的功能和安全之间的比较不同实验室之间的困难。
通常功能化验等抑制试验或allostimulatory产能分析视为效力分析。但是必须考虑这种类型的化验是缓慢而不是非常精确。因此使用合适的“代孕”效力标记必须认为,例如,抑制分子的释放(TGF il - 10β和我),某些表面标记的表面表达,甚至缺乏一定的分子。对于这个洞察tolDC产品及其耐受诱导机制是很重要的。
理解的基本生物替代tolDC产品之间的关系是一个关键的目标FACTT财团。升值之间的相似和相异细胞类型以及这些差异如何决定这些细胞治疗药物的药理特性的高效发展至关重要。通过FACTT我们旨在讨论和分享经验中,形成一个共识和位置的最小集合功能质量控制参数,再使用上述MITAP记录,特此在将来也可以利用它来比较不同tolDC方法。
5.3。协调的Immunomonitoring
解释immunomonitoring tolAPC试验的结果是一个艰巨的任务由于各种方法和协议可用来检测特定的T细胞反应。缺乏协调immunomonitoring协议分析治疗的病人很难单独试验的结果进行比较,减速的潜在发展。
的能力tolAPC疗法抑制致病性T细胞反应在活的有机体内需要监控管理前后致耐电池产品确定tolAPC治疗对免疫系统的影响和关联这些影响临床结果。immunomonitoring协调的限制是由于有限的见解在活的有机体内宽容和机制缺乏行之有效的生物标记。FACTT旨在创建一个共识和位置有关immunomonitoring化验和将强调使用最少的信息模型来描述它们。实现协调特定flow-cytometric的性能和功能分析,标准化方法,面板和抽样条件将通过出版物和集中推荐的研讨会。
5.4。规定
tolAPC大幅修改细胞,因此必须分类在欧洲先进体细胞治疗药品(ATMP)。这是按规定实施(EC)数量1394/2007的欧洲议会和理事会38]。这种方法最重要的结果是,ATMP被类似于其他生物医药产品,而不是细胞。营销授权审批(MAA)这些产品通过欧洲医疗机构集中和路径为病人提供ATMP相比已经大幅细胞移植或输血/血液制品,因为他们必须检查在一系列临床前测试和随后的昂贵的类似于其他类别的药物临床试验。在某些情况下,这条路是难以实现的细胞不能被定义为小分子水平可能甚至生物药物。尽管这是被监管机构,它已经增加了很高的GMP标准要求生产细胞临床使用。自2007年规定,只有五个ATMP举行集中MAA(没有人tolDC)在欧洲,这说明了difficultness规定。难以捉摸的承诺所必需的金融奖励和非常具体的专业知识开发ATMP分散大型制药公司从投资这个医学分支,因此学术医院、大学和小型企业(通常是academia-based)与有限的资源仍然ATMP的主要制造商。明显的经济原因,这种组织的法规造成重大障碍,显著延缓tolDC的翻译应用程序。
FACTT旨在简化交互与监管当局的意见和经验在总部领导班子表示,通过与部门讨论和通过意见书。特此,FACTT旨在创建意识到治疗细胞有不同的作用机制和不同的安全性与常规化学药物相比,因此需要非常规的监管要求39]。此外通过共享基础数据所必需的临床实验的药用产品档案,临床前研究FACTT旨在避免工作重复。
6。结论
总的来说,通过创建一个论坛,研究者和临床医生在地里干活的CTT治疗,经验应该共享,使即将到来的审判基于先前的试验中所获得的经验。这种方法节省金钱在复制工作,可能为未来的试验优化结果。技术正在进行或完成tolDC试验将由我们的合作伙伴共享实验室准备新的结论(例如,通过短期科学任务)。我们设想一个FACTT合作将是一个重要的步骤加快实施CTT的诊所。
缩写
| FACTT: | 行动重点,加快细胞致耐疗法 |
| ATMP: | 先进的治疗药品 |
| 援助: | 自身免疫性疾病 |
| 成本: | 欧洲科学技术合作 |
| 结论: | 细胞致耐疗法 |
| 潮湿: | 危险相关的分子模式 |
| GMP: | 良好生产规范 |
| 移植物抗宿主病: | 移植物抗宿主病 |
| 共: | 市场营销授权批准 |
| MITAP: | 最低耐受性抗原递呈细胞”的信息 |
| Mreg: | 调节巨噬细胞 |
| 女士: | 多发性硬化症 |
| NF -κB: | Kappa-light chain-enhancer激活B细胞 |
| PAMP时: | 病原体相关分子模式 |
| 质量控制: | 质量控制 |
| 类风湿性关节炎: | 类风湿性关节炎 |
| tolAPC: | 耐受性抗原递呈细胞 |
| tolDC: | 耐受性树突状细胞 |
| 近年来: | 1型糖尿病。 |
利益冲突
作者宣称没有利益冲突有关的出版。
确认
作者收到Sanquin赠款为他们的工作在CTT血液供应(内部非营利grant)(安雅十Brinke Marieke Van火腿),兰德斯泰纳非营利输血研究基金会(s . Marieke Van火腿),英国关节炎研究(Catharien m .,希尔肯),MRC (Catharien m .希尔肯,乔凡娜Lombardi),英国心脏基金会(乔凡娜Lombardi) JGWP基金会(Catharien m .,希尔肯)ISCIII FIS 14/1775(伊娃·m·Martinez-Caceres), IWT TBM项目没有。140191(娜塔莉冷却和伊娃·m·Martinez-Caceres),欧盟第七框架计划通过一项研究计划(260687年奖)(爱德华·k·盖斯勒詹姆斯·a·哈钦森乔凡娜Lombardi,和Birgit Sawitzki),雷根斯堡中枢毛皮Interventionelle Immunologie(爱德华·k·盖斯勒,詹姆斯·a·哈钦森),欧洲合作和欧洲格兰特科技(成本)。成本是欧盟框架计划的一部分地平线2020(行动重点,加快细胞致耐疗法,BM1305,http://www.afactt.eu)。