文摘
在巴西,在亚马逊地区,这些地区疟疾流行与盛行的肠道寄生虫,而很少有研究探讨疟疾和其他寄生虫之间的交互。因此,本研究评价细胞因子的变化,趋化因子,c反应蛋白,和一氧化氮(NO)浓度在264人,比较等离子体与并发疟疾和肠道寄生虫感染者个人独自与疟疾感染和未感染。在研究人群中24%的人感染疟原虫和18%的合并感染肠道寄生虫。原生动物寄生虫由大量的肠道寄生虫感染肠道寄生虫感染和受试者更可能有疟疾。利用主成分分析和聚类分析il - 6水平上升有关,肿瘤坏死因子-α、il - 10和c反应蛋白和低水平的IL-17A主要疟疾单独和合并感染患者的个人。相比之下,低水平的几乎所有的炎症介质水平个人未感染而增加的主要相关IL-17A主要与个人有关肠道寄生虫。总之,我们的数据表明,在我们的人口中,肠道寄生虫感染(主要是原生动物)不修改个人感染的细胞因子的生产模式恶性疟原虫和间日疟原虫。
1。介绍
的地理分布疟原虫和肠道寄生虫是全世界重叠;因此疟疾合并感染肠道寄生虫在热带地区很常见的行星(1]。尽管众所周知,polyparasitism是一种常见的条件在人群中,其实际影响其他疾病的免疫病理,包括疟疾、没有充分的探讨。在巴西,在亚马逊地区疟疾流行,这一地区正值其他疾病的流行率很高。肠道寄生虫的流行很大程度上在巴西亚马逊河,主要在研究涉及土著人群或肠道寄生的影响在亚马逊社区营养状况(2- - - - - -9]。然而,疟疾和其他寄生虫之间的交互没有探索和解决疟疾和我们的知识只有一个工作单独在儿童感染合并感染间日疟原虫在巴西亚马逊河研究[10]。
人类在非洲进行的研究显示,蠕虫感染对宿主应对疟疾可以有负面影响,包括增加易感性疟原虫感染和疾病严重程度增加11- - - - - -14]。然而,保护作用,如减少脑型疟疾的风险和较低的疟疾发病率(15- - - - - -17并没有影响的易感性疟疾或病理的影响疟原虫感染也报道(18,19]。免疫单独和疟原虫之间的相互作用尚不清楚,有一点共识疟疾和单独合并感染的效果。在疟疾感染,据报道,细胞因子是重要的分子标记细胞介导的免疫反应和已知疾病的监管的关键角色。1 T辅助(Th1)响应主要描述人类疟疾感染和促炎细胞因子的生产,如干扰素(IFN -γ)、白介素、肿瘤坏死因子(TNF -α)和其他炎性细胞因子(20.,21]。这些炎性细胞因子被认为是重要的解决疟疾感染的寄生虫血症和控制,特别是在早期阶段恶性疟原虫感染(22,23]。相反,如果这些健壮的炎症反应并不是监管在慢性感染疟疾,他们可以导致免疫病理和严重的病情反应(24- - - - - -26]。调节细胞因子,包括白介素(IL) -10和转化生长因子β(TGF -β),被证明有重要作用的immunoregulator感染所致恶性疟原虫在中和Th1炎症反应的影响与免疫病理和更严重的形式的恶性疟原虫感染(24]。还有一系列其他的介质,如il - 4和一氧化氮,与疾病严重程度在疟疾感染的个体(27,28]。
另一方面,寄生虫感染对免疫系统产生深远影响,导致一个强大的免疫调节和Th2反应能抑制宿主的能力发动Th1型免疫反应。的确,蛔虫sp.感染诱导抗炎Th2反应(29日- - - - - -31日),也与免疫调节免疫反应有关,由高浓度的白介素(IL) -10和转化生长因子-β(TGF -β)[32,33]。因此,预计蠕虫感染对免疫系统的影响可以延长对疟疾免疫反应由于单独细胞因子诱导的抗炎效果,从而可能影响疟疾感染的课程(12,34,35]。
由于认识到一些寄生虫引起抗炎细胞因子的能力,许多寄生虫操纵宿主细胞因子途径为自己的利益(36),我们假设可能有促炎细胞因子之间的平衡,疟疾有关,和抗炎细胞因子,与寄生虫或原生动物肠道寄生虫。虽然细胞因子反应被广泛描述恶性疟原虫感染,很少有研究关注系统性细胞因子浓度合并感染肠道寄生虫和疟疾。我们相信,综合分析血清水平的多个炎症标记物如细胞因子、趋化因子、c反应蛋白、一氧化氮(NO)将可以更深入地了解他们的效用来区分感染患者并发感染疟疾和肠道寄生虫个人与孤独。在这方面,能够测量大量的分子在一个样本和可视化炎症标记物的变化,包括细胞因子网络单一和疟疾和肠道寄生虫合并个人推进我们的理解是至关重要的病原体的免疫反应。因此,我们应用传统的单变量和多变量分析的数据,以确定反应的类型发展在合并感染和炎症标记物是很重要的。
2。材料和方法
2.1。研究区域和研究设计
我们进行了横断面调查在农村定居社区的波尔图Velho,直辖市的朗多尼亚州,巴西亚马逊。解决叫琼娜D 'Arc位于120公里的波尔图Velho和巴西政府在2001年创造了人们为了给土地。琼娜D 'Arc移民大多是热带雨林本地移民,一些与先前的农业经验,但大多数没有知识农业的潜力和技术所必需的农业在热带雨林地区。他们是低收入人群免费土地所吸引,并承诺政府的支持。尽管是一个人住了10年,在该地区没有卫生基础设施和居民的收入来源是农业和小型家畜生产奶酪。样本和调查数据收集在2010年和2011年,6月干个月之际,恰逢时期增加了朗多尼亚州的疟疾传播。为了被包括在这项研究中,参与者必须符合下列条件:(1)在研究区居民;(2)提供了粪便样本;和(3)血液样本集合的等离子体和疟疾诊断。共有264名参与者符合这些标准,形成了我们的研究。
2.2。样本大小
样本量估计来确定疟疾流行使用的公式估算单比例在95%置信区间。合并感染的患病率是未知的,所以我们用0.50,样本容量最大化。基于这些实体和预期误差是0.1,264名受试者被包含在我们的研究中。所有的流行病学、血液和细胞因子量化结果存储在Epi-Info 3.2版。分析之前,数据集中和标准化,以确保平等的贡献每个参数,避免由于规模差异。
2.3。收集和检查的血液
研究小组参观了房子选择随机邀请参与。在书面知情同意和流行病学调查所有成人捐助者或从捐献者的父母对于未成年人,血液是由静脉穿刺。血液采样的时候,厚,薄血涂片进行染色和染色检查10%疟疾寄生虫的存在。寄生虫学的评价是由考试1000 x 200字段的放大在油浸。寄生虫血症是表示为寄生虫的数量/μL的血厚血涂片。使用油浸物镜,500个白细胞数的同时寄生虫的数量。然后,寄生虫的数量/μL的血液被寄生虫的数量相乘计算500年对白细胞计数、白细胞的数量和产品除以500。研究疟疾诊断专家检查了所有的幻灯片。确认寄生虫学的诊断,我们进行分子分析的样本使用特定的引物属(疟原虫sp)和物种(恶性疟原虫和间日疟原虫)。放大的协议被Snounou前面描述的et al。37]。受试者认为疟疾如果他们积极的厚血涂片和/或PCR。血细胞计数,包括血液指标,使用一个自动血液分析仪(Pentra Horiba医疗,蒙彼利埃,法国)和外围涂片进行血液样本的常规微分血液细胞的量化。手动微分白细胞计数也区分了不成熟的中性粒细胞。
2.4。收集和检查粪便样本
所有人都要求提供一个早上粪便样本和一个标签为螺旋帽的塑料容器。一个粪便样本取自每个主题第二天和审查由直接清白的湿涂片在生理盐水和Lugol碘溶液在100 x 400 x的技术员肠道寄生虫识别方面的专长。医生在我们团队提供药物治疗后评估参与者的考试结果和检查它们。所有参与者发现患有肠道寄生虫感染有完整的治疗。
2.5。ELISA特定c反应蛋白
c反应蛋白水平测定血浆样品用内部ELISA。微量滴定板(Nunc / MaxiSorp,罗切斯特,纽约,美国)被涂上一层山羊anti-human-CRP抗体(σ,美国;目录C8284) carbonate-bicarbonate缓冲区(TCO4)在一夜之间在4°C。盘子被洗了三次磷酸盐- 0.05%渐变20 (PBST)和血浆样本稀释1:500年PBST孵化了1 h在37°C的盘子。盘子洗了三次,然后孵化与兔子anti-human-CRP抗体(σ,美国;目录C3527) PBST 1 h在37°C。盘子洗了三次,peroxidase-conjugated山羊anti-rabbit-IgG抗体(σ,美国;A0545)补充道。井被彻底清洗去除所有的辣根过氧化物酶(合)共轭抗体和o-phenylendyamine衬底的解决方案是添加到每个。酶(合)和基质被允许短潜伏期反应。es反应被终止的2 N H2所以4和颜色变化的程度为492±2 nm分光光度计(SpectraMax 250;分子器件、桑尼维尔CA)。血浆CRP的浓度是由比较标准的净化人类CRP浓度(σ,圣路易斯,美国)。检测CRP的范围是0.01 -320μ克/毫升。未感染人血清从每个板作为消极的控制。特定的CRP光密度值被转换为集中值(μg / mL)使用s形曲线拟来自c反应蛋白标准曲线方程。
2.6。格里斯Microassay检测亚硝酸盐和硝酸盐
修改格里斯反应被用来检测亚硝酸盐和硝酸盐([38由[],修改39])。样本的水平间接测量后首先将硝酸盐转化为亚硝酸盐,硝酸盐还原酶治疗(曲霉属真菌种NAD (P) H,σ,英国)和NADPHβ烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(σ诊断,圣路易斯,美国)。格里斯试剂(多个5%磷酸,1%,和0.1%的N - (1-naphthyl-1) -ethylendiamine盐酸盐,所有从σ,英国,溶解在去离子水100毫升)和蛋白质添加了随后由三氯乙酸沉淀(BDH,英格兰)。管内容是混合和离心机(德国埃普多夫离心机5415 C);两个样本的上层清液被转移到一个平底的微型板块及其吸收性阅读使用标520海里(SpectraMax、分子设备公司)。没有计算值与标准校准块(39]。
2.7。复合微球细胞因子免疫测定
血浆样品中细胞因子浓度测定使用高通量磁bead-based BioPlex化验。13细胞因子il - 1β2、il - 4 IL-5, il - 6, IL-7, il - 10、il - 12 p70, IL-17A,干扰素-γ肿瘤坏死因子-α、g - csf和集落刺激因子(gm - csf)]和三种趋化因子(引发,MCP-1 MIP-1β)分析了使用BioPlex装备试验(Bio-Rad实验室、大力神、钙、美国)中描述的生产指令后(40]。简单地说,50μ随着50 L的标准或测试样本μL加入一定量的混合珠子的prewetted 96 -微量滴定板。1 h的孵化和洗涤后,25岁μ检测抗体的混合物添加L和样本孵化30°C min,然后洗净。最后,50μL streptavidin-PE添加,10°C min的孵化和洗涤后,125年ressuspended的珠子μL分析缓冲和分析使用一系列BioPlex悬挂系统(Bio-Rad实验室)和BioPlex管理软件(v.3.0)。至少100珠/地区进行了分析。曲线拟合是应用于每个标准曲线根据制造商的手册和样品浓度插值从标准曲线。细胞因子检测的下限MIP-1使用这种方法β1.69 pg / mL;il - 6 1.25 pg / mL;干扰素-γ0.88 pg / mL;IL-5 0.84 pg / mL;gm - csf, 0.47 pg / mL;肿瘤坏死因子-α0.82 pg / mL;2、0.29 pg / mL;il - 1β0.73 pg / mL;IL-13 1.1 pg / mL;il - 4、0.78 pg / mL;MCP-1 1.64 pg / mL;引发,1.01 pg / mL;il - 10、0.4 pg / mL;g - csf, 1.89 pg / mL;IL-7 1.1 pg / mL;IL-12p70 0.57 pg / mL;和IL-17A 0.38 pg / mL TNF -α,0.10 pg / mL。对所有样本,分析物的量化是在一天内完成,以避免冻融循环。
2.8。统计分析
我们比较流行病学和血液之间的参数和细胞因子的生产组织、使用permutation-based方差分析(999排列),后跟一个事后测试图基(HSD),为两两差异测试。Permutation-based方差分析生成零分布的数据,避免违反常态和同质性相关的问题(41]。我们也使用卡方测试来确定比例在二进制变量之间的显著差异(性)。主成分分析(PCA)是应用于数据集包含细胞因子、趋化因子和炎症标记,检测相关的变异模式研究团体和确定变量占大多数的数据集内的变异。主成分分析是一种广泛使用的分类方法,可减少维数的多元数据和检测的变量来解释方差更重要的数据结构,生成正交(独立)轴使用原始变量的线性组合。PCA可以解释数值:每个轴(主成分,PC)所描述的一个特征值相关的变异量,它解释说,这第一个电脑总是比第二个解释了更多的变异,等等。此外,变量和单元坐标(载荷)沿着这些电脑,每个电脑标明他们的贡献。PCA也可以解释视觉,从图形的起源:变量细胞因子,趋化因子,c反应蛋白,也没有(炎症介质)和实验单位(患者)将根据他们的相关性,和距离原点总体变化意味着更高的贡献(更高的绝对载荷)。角度从原点大致成正比关系:共线向量(接近0°、180°)可以被视为积极的还是消极的相关和直角表明独立(正交)。
进一步调查感染组织和细胞因子之间的关系,我们阐述了一个热图,涉及两个层次聚类分析在一个二维的阴谋。Z分数计算从细胞因子水平的改变值和代表总体均值的标准差:Z分数=[(单个细胞因子值−人口细胞因子平均值)/人口细胞因子标准偏差)。集群分析Z分数使用欧氏距离度量和病房作为连接算法。所有的分析使用R统计环境(42]。排列进行方差分析lmPerm包(43)和PCA分析素食主义者(44),gplots包(45)是用于构建的热图。
2.9。道德的考虑
这项研究是在获得道德进行间隙Fundacao Oswaldo Cruz伦理委员会(CEP / FIOCRUZ, 492/08)。个人的口头和书面同意从所有参与者。捐助者阳性间日疟原虫和/或恶性疟原虫采血时随后使用化疗方案治疗巴西卫生部推荐的。
3所示。结果
3.1。疟疾和肠道寄生虫感染
分析了353人的基线,264名受试者被包含在我们的研究中,16例(6.1%)只感染了疟疾,48例(18.2%)合并感染疟疾和肠道寄生虫,98(37%)感染肠道寄生虫,和102年(38.7%)未感染疟疾或肠道寄生虫。间日疟原虫只是更普遍在疟疾感染(81.2%),合并感染肠道寄生虫(75%)。原生动物寄生虫由大量的主题感染肠道寄生虫感染(70.4%)或合并感染疟疾和肠道寄生虫(81.2%)。肠道寄生虫的感染率明显高于在感染疟疾的人比那些没有感染(调整或= 3.1,95% CI -5.86 = 1.66)。最普遍的原生动物贾第虫属intestinalis和寄生虫钩虫属duodenale和类圆线虫属stercoralis。多个原生动物物种中常见肠道寄生虫只(14.5%)和合并感染疟疾(33.3%),只有一个主题提出了多个单独的物种感染。双重、三重、四原生动物和单独感染被观察到。数据表1总结了单个和多个物种寄生虫感染的患病率。科目合并感染的患病率间日疟原虫疟疾(36)和75%恶性疟原虫为23%(11)2%(1)混合物种感染。g . intestinalis都是最常见的肠道寄生虫p . falcilparum和间日疟原虫合并感染。然而,在间日疟原虫科目合并原生动物的种类(图和单独更多样化1)。
3.2。感染组、流行病学和血液学的数据
如表所示2,感染组被定义为疟疾感染的存在与否和/或肠道寄生虫感染,导致以下组:疟疾(M)、(CI)合并感染,肠道寄生虫(IP)和未感染的(联合国)。受试者感染疟疾的多数是男性,一般临床疟疾症状如发烧和头痛的历史。我们没有观察到的差异在疟疾和寄生虫血症合并组。没有年龄差异,多年的住宅(TR)在流行地区,年居住在朗多尼亚(有望),和几个月自去年疟疾发作(LME)。然而过去的疟疾发作的数量(中外)更高的组织为阴性疟疾与疟疾相比集团(肠道寄生虫和未受感染的)。一些血液参数的分析表明,疟疾和合并组相似,没有观察到的差异平均血红蛋白、血小板,淋巴细胞,带细胞值,疟原虫寄生虫。然而,他们不同于肠道寄生虫和未感染组呈现低意味着淋巴细胞和血小板计数而带细胞数量更高。疟疾和血红蛋白水平合并感染组与未感染组相比略高。
3.3。水平的炎症介质
首先,我们分析了等离子体中值水平的个体细胞因子,趋化因子,不,和CRP浓度组间比较(图2)。中细胞因子水平千差万别pg - 6952 pg细胞因子从0.3。细胞因子IL-5、IL-7和gm - csf较低在大多数血浆样本(数据未显示)。最值得注意的是,疟疾组CRP和肠道寄生虫的最高水平的最高水平的IL-12p70, IL-17A,没有。疟疾和合并感染组中值水平的TNF -α2、il - 10、摘要意思-β、MCP-1和il - 6被观察到主要显著增加与肠道寄生虫和未感染组(所有的比较)。干扰素的平均水平γ和引发增加在所有组相比未感染组。细胞因子和趋化因子水平的变化非常类似于疟疾和集团合并和分析我们不能把细胞因子的变化可能是由于合并感染。
(一)
(b)
3.4。主成分分析(PCA)和聚类分析炎症介质
为了评估差异在整个多元组细胞因子,趋化因子,不,和CRP数据在个人之间的团体,我们执行一个探索性的主成分分析(PCA),多元技术确定炎症介质可能表明合并感染。图3(一个)显示一个PCA组炎性介质的M, CI, IP和联合国。虚线连接每个组的重心,重心的位置表明有一个总体的差异之间的调停者两组:M和CI和IP和联合国组织。在这两个群体,个体聚集相似的炎性介质的概要文件。炎症介质的差异M和CI组之间的IP和联合国组织更高水平的il - 1β、il - 6、TNF -αil - 10, CRP水平和减少IL-17A和IP和联合国提出更高水平的IL-17A和il - 10的水平下降和CRP(图3 (b))。为了描述细胞因子炎症介质在每一个人学习,我们应用二维聚类分析(图4)使用细胞因子,提出了最大加载值的PCA分析(il - 6、il - 1β肿瘤坏死因子-αMCP1,干扰素-γ、IL-17A CRP和il - 10)。这种方法允许主题和测量参数的耦合集群没有考虑在组。有趣的是,聚类算法可以区分两个集群:一个集群包括增加水平的il - 6、TNF -α、il - 10和c反应蛋白和低水平的IL-17A主要在个人M和CI组和第二个集群包括低水平的几乎所有主要炎症介质在从联合国组织和个体水平的提高主要IL-17A在个人从IP组。
(一)
(b)
4所示。讨论
重叠的肠道寄生虫分布和疟疾可能导致高速率的合并感染。在研究人群中24%的人感染疟原虫,55%,肠道寄生虫,18%的疟疾和肠道寄生虫。在研究区,被疟疾感染的可能性明显高于个人感染肠道寄生虫。几项研究从人类在非洲进行显示,蠕虫感染对宿主应对疟疾可以有负面影响,包括增加易感性疟原虫感染和疾病严重程度增加11- - - - - -14]。在我们的研究中,虽然疟疾更频繁的在个人肠道寄生虫感染,血液参数和寄生虫血症合并没有差异和疟疾感染者。两组贫血并不频繁和淋巴细胞的变化,细胞和血小板和乐队似乎是由于急性疟疾感染,而只在肠道寄生虫组嗜酸性粒细胞水平较高。尽管贫血和血小板减少最显著的变化在急性疟疾在合并感染寄生虫,感染和血液的变化这些感染是一个广泛的和矛盾的事件40,46- - - - - -50]。
在不同研究结果的差异可能依赖于肠道寄生虫的种类和研究人口的年龄。虽然大多数合并感染的研究与单独和孩子1,10),在我们的研究人群中最常见的肠道寄生虫是原生动物和参与者的成年人。此外,样本容量可能很小,不能让肠道感染的分层通过单独和原生动物,也许可以解释这些差异的因素。
肠道寄生虫的影响(主要是单独)疟原虫合并感染获得利益,因为它被假定Th2极化单独引发的免疫反应可能会改变自然宿主的免疫反应疟原虫寄生虫(12,34,36]。大部分细胞因子的研究主要的免疫病理严重/复杂疟疾(24,51]。一些研究观察全身细胞因子浓度合并感染比较感染者的等离子体单独与并发疟疾和肠道寄生虫感染(52- - - - - -55]。据我们所知,这是第一个研究评估16细胞因子,c反应蛋白,没有疟疾合并感染肠道寄生虫。在我们的研究中,分析个体的细胞因子,趋化因子,c反应蛋白,没有不能检测相关更改合并感染。然而,使用主成分分析和聚类分析提供了证据表明,疟疾患者组(M和CI)可以歧视团体的个人负面的疟疾(IP和联合国)基于炎症介质。他们成立了两个独立的团体基于细胞因子的水平,c反应蛋白,没有。疟疾感染者(M和CI)概要文件是高水平的il - 1β、il - 6、TNF -αil - 10, CRP水平和减少疟疾IL-17A而消极的个人(IP)和联合国这个概要文件是IL-17A的高水平,没有和il - 10和CRP的水平下降。
高CRP、il - 10, TNF -α,il - 6 M和CI组中观察到我们的分析报告在急性疟疾感染的几项研究[50,56,57]。在巴西人口,il - 10和CRP是急性疟疾引起的一个重要标志间日疟原虫(40,50,56]。
细胞因子在急性疟疾是生产的作用远非理解和对他们的影响和其他寄生虫合并感染。在我们的研究中,炎症介质水平的个体急性疟疾没有不同于个人合并感染肠道寄生虫与个人相比单一感染疟疾。然而,很少有报道证明改变儿童和成人合并感染的细胞因子水平恶性疟原虫和埃及血吸虫。更高的干扰素-γ和类似的肿瘤坏死因子-αTGF -β发现,il - 10水平相比合并和单一恶性疟原虫受感染儿童(52),在成人中,干扰素-高γ肿瘤坏死因子-α,TGF -β水平检测(53]。升高il - 6和il - 10也与儿童急性疟疾但水平较低的儿童合并感染埃及血吸虫相比,儿童感染埃及血吸虫独自一人(54]。在这些研究中高浓度的细胞因子的是否合并感染疟疾个人消极或积极的影响并没有解决。
值得强调,特别是使用PCA分析,我们观察到的贡献的重要性IL-17A分离的M和CI IP和联合国,虽然在IP IL-17A似乎更高的个人。已经观察到IL-17肠道炎症的一个重要标志有助于增强与生俱来的屏障防御在粘膜表面58,59]。有趣的是在组词和米我们也发现水平没有下降。这个炎症标记被认为是预防恶性疟原虫体外,低水平的标记与抑制没有合成不同的重力在疟疾27]。肠道寄生虫的贡献同时感染疟疾的发病机理仍然是有争议的,和它的作用可能是特定的类型取决于寄生虫参与合并感染。在我们的研究中,尽管大量的炎症标志物评估,使用多元分析技术被证明是一个非常好的工具,复杂的数据中发现隐藏的模式系统包括细胞因子研究[57,60- - - - - -62年]。事实上,使用聚类分析,普拉卡什et al。61年)检测血浆的细胞因子差异个体间有轻微,严重的noncerebral,脑型疟疾。在我们的研究中,这种分析能够检测疟疾患者之间的差异和没有疟疾,但无法检测疟疾和肠道寄生虫合并感染的个体之间的差异。因此,肠道寄生虫合并感染(主要是原生动物)血浆的细胞因子水平的影响个体急性疟疾和这些感染的真正影响可以感知到的高流行地区特定的寄生虫等蛔虫和曼氏裂体吸虫。
5。结论
总之,我们的数据表明,在我们的人口中,肠道寄生虫感染(主要是原生动物)不修改个人感染的细胞因子的生产模式疟原虫。
利益冲突
作者宣称没有利益冲突有关的出版。
确认
作者欠债的人参与这项研究和安德里亚·桑切斯Tapia修改论文。这项工作是支持Fundacao德帕罗尽管带动做里约热内卢(巴西FAPERJ), Pronex疟疾、慰问Nacional de Desenvolvimento Cientifico e学府(CNPq、巴西),西班牙Oswaldo Cruz (FIOCRUZ、巴西),Pronex疟疾/ CNPq /十进数字/ MS。等高是从CNPq受体研究生产力的奖学金,和JCSA接受者的奖学金从西班牙Oswaldo Cruz,从CNPq VAR。