文摘

一个主要的问题曼氏裂体吸虫感染是门静脉周的纤维化的发展,这主要是由于宿主免疫应答蛋白抗原。实验研究指出单核细胞参与肝纤维化的发病机制。本研究的目的是描述的子集单核细胞在门静脉周的患者不同程度纤维化二级血吸虫病。单核细胞分为古典(CD14^{+ +}CD16⁻)、中级(CD14^{+ +}CD16⁺非经典数理(CD14),⁺CD16^{+ +})。单核细胞标记和细胞因子的表达式是评估使用流式细胞仪。经典的单核细胞的频率高于其他的子集。的表达HLA-DR, il - 6、TNF -α,TGF -β高从中度到重度纤维化患者单核细胞相比其他组。虽然没有观察到受体表达差异(IL-4R和IL-10R)组患者之间,单核细胞中il - 12的表达从中度到重度纤维化患者,建议保护作用的细胞因子在肝纤维化的发展。我们的数据支持的假设三种不同单核细胞群体参与的免疫发病机理门静脉周的纤维化,因为他们表达高水平的促炎和profibrotic细胞因子和低水平的监管标记。

1。介绍

血吸虫病是一种慢性、消耗性疾病,影响全世界超过2亿人,据估计,有7亿人生活在区域在感染的风险1,2]。它是一种特定的社会经济和公共卫生重要性的疾病,因为它是流行于热带和接头热带地区。在巴西,据估计,大约700万到2.5人感染美国曼,大约2500万人生活在在感染的风险3,4]。肝脏病理的曼氏裂体吸虫感染宿主寄生虫抗原的免疫反应的结果美国曼鸡蛋,被困在门户静脉系统(5- - - - - -7]。鸡蛋作为周围的肉芽肿形成壁垒,防止分散美国曼蛋抗原。然而,随着连续的鸡蛋,激烈的炎症过程发展到严重纤维化。肝脏病理导致中断正常的血液流动静脉系统的正弦信号,导致门脉高压,肝脾肿大,食管和胃静脉曲张,,这可能导致出血甚至死亡(8,9]。这种严重的疾病发生在约百分之五的感染对象住在流行地区(10,11]。

单核细胞是参与慢性肝脏疾病的发病机制,特别是与纤维发生有关。单核细胞,例如,参与肝纤维化的发展通过各种机制包括细胞因子的分泌和一代的产品相关的氧化应激(12]。根据其分化州和地方信号,单核细胞和巨噬细胞能够分泌多种生长因子和促炎,profibrotic和抗炎细胞因子(13]。最近,人类单核细胞分为三个亚种群根据CD14的表达和CD16:古典(CD14^{+ +}CD16⁻)、中级(CD14^{+ +}CD16⁺非经典数理(CD14),⁺CD16^{+ +})[14]。Liaskou等人的研究显示证据暗示中间单核细胞在肝纤维化的发病机制引起的慢性炎症性疾病(15]。然而,据我们所知没有研究这些特征单核细胞在个人档案门静脉周的纤维化二级血吸虫病。因此,在这项研究中,我们旨在描述单核细胞亚种群对促炎的激活和表达状态,antifibrotic profibrotic,监管分子患有不同程度的门静脉周的纤维化。

2。方法

2.1。研究设计和流行区域

本研究进行了一个名为阿瓜的流行区血吸虫病Preta,在巴伊亚,巴西。阿瓜Preta位于萨尔瓦多以南280公里,巴伊亚州的首都。它由一个居民区的中心周围的村庄和农场。大约有800个人住在社区。他们住在卫生条件差,农业是主要的职业。有一条河在这一地区用于洗澡、洗衣服和餐具,和休闲,暴露出居民的高风险美国曼感染(16]。横断面寄生虫学的调查使用Kato-Katz [17)和沉积技术进行了三种不同的粪便样本。本研究的入选标准是个体从流行地区至少有一个积极的寄生虫学的考试美国曼。从537人同意参加本研究334人感染美国曼(62.5%)。其他蠕虫感染的频率为43.4%鞭虫trichiura37.4%,蛔虫钩虫,33.7%,3.5%类圆线虫属stercoralis。从334人被感染美国曼220同意执行腹部超声,为了确定门静脉周的纤维化的程度。他们还同意捐献血液免疫反应研究。对于这个目标,我们分析病人的性别、10到60岁。17级0(没有纤维化),患者患者15级(早期纤维化),和八纤维化等级II和III(中度和重度纤维化)包括在内。我们很难找到晚期患者的门静脉周的纤维化研究的地区;只有8个患者这种情况符合入选标准。

十岁以下的人不在,由于低概率发展中门静脉周的纤维化(18),和个人年龄超过60岁,由于潜在的免疫系统的衰老。我们也不包括个人积极的艾滋病毒血清学,htlv 1, B和C或肝炎病毒类型;所有这些条件,可能会干扰免疫反应。

2.2。超声检查

腹部超声(美国)都使用了量子2000西门子和Elegra西门子超声波凸饱和电抗器的3.5 - -5.0 Mhz。肝脏跨度midclavicular线测量。肝脏也检查了光滑的表面,回声增强,声束的后衰减和肝外门静脉直径介于其进入门户肝静脉和第一个分叉在肝脏。门静脉周的纤维化是描述为多个散射回波的地区。分级的门静脉周的纤维化是由平均总厚度的四门管区后第一次分裂左翼和右翼的门静脉分支(PT1)如下:0,平均厚度3毫米;度我,意思是厚度3 - 5毫米;第二学位,平均厚度5 - 7毫米;和第三度,平均厚度7毫米(19]。我们决定使用开罗的分类,因为我们表现使用这些参数和先前的研究,因为医生表现的正是我们的研究很好地熟悉这个分类18,20.]。门静脉周的纤维化的分数是根据严重程度分组:0人那些没有门静脉周的纤维化程度,我个人早期门静脉周的纤维化和患有中度到重度患者门静脉周的纤维化是第二和第三度(21]。免疫反应的分析包括17个人没有门静脉周的纤维化,15个人早期纤维化和8患有中度到重度的形式的疾病,表现为二级()和三()(表1)。

2.3。特性的研究主题

研究了个体的特点如表所示1。中度到重度纤维化患者的平均年龄是高(年)相比,个人没有纤维化(年;)。没有明显差异在性别分布或寄生虫组间的负担。肝脏和脾脏的大小也在本研究评估。肝脏大小组间无显著差异。然而,在群患有中度到重度纤维化,脾脏大小相比更高的患者早期纤维化和没有纤维化()。此外,门静脉的直径与中度到重度纤维化主题与个人相比无纤维化(表1)。

2.4。细胞培养

外周血单核细胞(PBMCs)孤立使用Ficoll-Hypaque梯度沉积和调整3×10的浓度⁵/毫升RPMI 1640中含10%正常人类血清(AB积极和热灭活),100 U /毫升的青霉素、链霉素的100毫克/毫升,2更易与L谷酰胺,30更易/ L的玫瑰(BRL,所有从生活技术GIBCO盖瑟斯堡,MS)。细胞培养是刺激与10μ克/毫升的海(裂体吸虫属卵抗原)或没有刺激细胞因子来评估生产37°C的大气中含有5%有限公司₂16 h。孵化后,细胞染色fluorochrome-conjugated抗体和获得使用流式细胞仪(FACSCanto BD生物科学,圣何塞,CA)如下所述。

2.5。流式细胞术

PBMCs (3×10⁵10)通过Ficoll-Hypaque梯度孵化μ克/毫升的海16 h, 37°C,和5%的股份₂。在过去4 h(文化、Brefeldin (10μg / mL;σ,圣路易斯,密苏里州)损害蛋白质分泌高尔基氏复合体,添加到文化。之后,这些细胞被染色与PERCPCy5.5-labeled抗体共轭CD14 (anti-CD14 PERCPCy5.5;克隆61 d3), anti-CD16 FITC(克隆CB16) anti-IL-4R anti-IL-10R PE(多克隆)αPE(克隆hIL-4R-M57)和anti-HLA-DR PE(克隆LN3),然后洗在PBS和固定在4%甲醛在室温下为20分钟。细胞内染色进行与anti-IL-12 PE(克隆C8.6)马伯,anti-IL-10 APC(克隆JES3-19F1) anti-TGF -βAPC(9016年克隆),anti-IL-6 APC(克隆MQ2-13A5)和anti-TNF -α从eBioscience PECy7 (MAb11),所有的抗体。单核细胞的数量是由非特异性荧光从散射(FSC)和散射(SSC)细胞大小和粒度等参数,分别。单核细胞区域与特定区域图:区域1 (G1)(图1(一))。100000事件是对所有实验获得。

2.6。流式细胞仪数据的分析

阳性细胞的频率进行了分析使用程序流乔(树明星,美国)。单核细胞子集选择基于CD14和CD16(图的表达1 (b))。代表在单核细胞CD14表达子集的柱状图如图1 (c)。我们也评估的表达CD56人口的单核细胞和NK细胞标记是消极的(数据没有显示)。限制的象限标记设置基于消极人口和控制同形像(数据没有显示)。数据被表示为平均荧光强度(MFI)参数。

2.7。统计分析

统计分析和图形表示使用电脑程序执行Graphpad PRISM 5.0软件(La Jolla、钙、美国)。群体间的比较进行适当地使用参数和非参数方法(方差分析和克鲁斯卡尔沃利斯测试)。所有统计测试双尾和统计学意义建立在95%置信区间和意义被定义。伦理委员会Climerio de Oliveira巴伊亚联邦大学的妇产科,巴西,通过本研究,从所有参与者获得知情同意或其法定监护人。

3所示。结果

3.1。单核细胞与不同程度的受试者的数量由于血吸虫病门静脉周的纤维化

我们评估的频率不同的亚种的单核细胞,这些细胞的激活状态。中间(CD14的频率^{+ +}CD16⁺非经典数理(CD14)和⁺CD16^{+ +})在与海洋文化刺激单核细胞更高(17%(7.72% - -32.3%),11.1%(2.71% - -27.4%),职责。)的患者早期纤维化组相比,无纤维化(13.8% (3.88% - -22.8%),7.56% (1.88% - -24%);职责)。没有显著差异在古典单核细胞(CD14的频率^{+ +}CD16⁻)学科中不同程度的门静脉周的纤维化(无纤维化:无刺激(WS) 56.3%(32.3% - -73.9%),海50.1% (32% - -73.9%);早期纤维化:WS 45.4%(24.2% - -71.6%),海46.1% (22.3% - -74.6%);中度到重度纤维化:WS - 40.1% (19.2% - -73.8%), 46.5% (15.3% - -75.6%)。此外,我们观察到的独立程度的纤维化,nonstimulated文化中经典的单核细胞的频率较高(56.3%(32.3% - -73.9%))也与海洋文化刺激(50.1% (32% - -73.9%);)比中间的频率(WS: 14.35%(6.3% - -23.4%)和海洋:13.8% (3.88% - -22.8%);)和模单核细胞(WS: 5.36%(2.24% - -26.2%)和海洋:7.5% (1.88% - -24%),)。

HLA-DR的表情从患者单核细胞不同程度的评估门静脉周的纤维化。我们观察到,在群患有中度到重度纤维化HLA-DR单核细胞上的表达在古典(图都较高2(d)) (WS MFI = 1318(404 - 2531),海MFI = 1981(906 - 3419)),和中间单核细胞(图2(e)) (WS MFI = 1782(648 - 3563),海MFI = 2033(965 - 4198))相比,组患者早期纤维化(经典:WS MFI = 492(278 - 1623),海MFI = 747.5(313 - 1766)和中级:WS MFI = 807(278 - 2079),海MFI = 1034(392 - 2022))和无纤维化(经典:WS MFI = 659(263 - 1138),海MFI = 533(315 - 1791),和中间:WS MFI = 970(474 - 1430),海MFI = 733 (486 - 2733))。然而,没有显著差异的表达上HLA-DR模单核细胞不同程度的患者罹门静脉周的纤维化(图2(f))。代表直方图HLA-DR如图2(一)-2(c)。

3.2。表达Profibrotic和促炎的分子在单核细胞与不同程度的受试者的子集门静脉周的纤维化二级血吸虫病

单核细胞的子集患有不同程度的门静脉周的纤维化进行评估关于IL-4R等profibrotic标记的表达α和TGF -β和促炎细胞因子il - 6和TNF -等α。

的α受体表达的il - 4组患者无纤维化高古典(图3(一个))(WS MFI = 66.5(38.5 -199),海MFI = 67.15(37.4 -257))、中级(图3 (b))(WS MFI = 110(48.2 -319),海MFI = 113.5(50.9 -367)),和模单核细胞(图3 (c))(WS MFI = 90.7(26.3 -205),海MFI = 103.4(24.1 -230))与群主题与早期纤维化(经典:WS MFI = 36.7(19.5 -202),海MFI = 38.35 (26 - 228);中级:WS MFI = 53.6(32.5 -316),海MFI = 54.1 (42 - 316);和模:WS MFI = 42.25(21.2 -235),海MFI = 38 (32.8 -217))。这种受体的表达也较高的三个亚种群从中度到重度纤维化患者单核细胞(经典:海MFI = 49.9 (35.5 -120);中级:WS MFI = 106(59.7 -197),海MFI = 103(62.1 -213),和模:海MFI = 62.6(42.9 -189))与组患者早期纤维化。在古典(图3(一个)非经典数理单核细胞(图)3 (c))这种差异只是观察到与海洋文化的刺激。

TGF -的表达β组的受试者与中度到重度纤维化高古典(WS MFI = 62.25(29.1 -74, 1)海MFI = 55.5(24.1 - -81.8))(图3 (d))、中级(WS MFI = 85.4(22.5 -102),海MFI = 64.7(22.4 -115))(图3 (e))和模单核细胞(WS MFI = 28.5(13.7 - -44.2))(图3 (f))与无纤维化组患者相比(经典:WS MFI = 18.05(10.4 - -58.2),海MFI = 26.2 (8.9 - -46.2);中级:WS MFI = 21.6(13 - 77.9),海MFI = 25.6 (12.2 - -52.8);和模:WS MFI = 13.45 (7.6 - -27.7))。此外,TGF -的表达β在古典文化没有抗原刺激单核细胞是高组的患者早期纤维化(MFI = 29.8(21.9 -86))相比,个人没有纤维化(MFI = 18.05(10.4 - -58.2))(图3 (d))。

il - 6的表达(数字3 (g)- - - - - -3(我))是在所有三个亚种群的单核细胞组患者中度到重度纤维化(经典:WS MFI = 79.8(28 - 98.6),海MFI = 65.45(26.5 -135),中级:WS MFI = 145(38.4 -217),海MFI = 131(36 - 258),和模:WS MFI = 99.15(18.5 -172),海MFI = 87.6(17.9 -231))与无纤维化组患者相比(经典:WS MFI = 18.35(9.75 -36),海MFI = 21.4 (8.6 - -62.5);中级:WS MFI = 17.9(12.6 - -55.5),海MFI = 21.85 (12.3 -108);和模:WS MFI = 10.8(7.23 - -32.8),海MFI = 10.6(6.63 - -39.2))和早期纤维化(经典:WS MFI = 25.4(21.1 - -70.9),海MFI = 25.2 (20.7 - -87.6);中级:WS MFI = 33.1 (26.1 -117);和模:WS MFI = 16.2(10.1 -93),海MFI = 11.1 (15.2 -107))。我们也观察到,在中间单核细胞il - 6的表达更高的患者早期纤维化(海MFI = 31.2(26 - 139],与个人没有纤维化(海MFI = 21 85 -108(12.3))(图3 (h))。

关于TNF的表达α,我们发现与中度到重度纤维化组受试者显示高表达的细胞因子在古典(图3 (j))(WS MFI = 321(52 - 386),海MFI = 244(47.4 -324))、中级(图3 (k))(WS MFI = 368(73.1 -413),海MFI = 261(62.8 -377)),和模单核细胞(图3(左)海)(MFI = 85.6(24.3 -123)),相比个人没有纤维化(经典:WS MFI = 20.5(5.32 - -86.9),海MFI = 20.5 (4.1 -108);中级:WS MFI = 62.7(17.4 -129),海MFI = 48.7 (14.7 -125);和模海MFI = 25.65 (8 - 112))。也有更高的TNF的表达α模单核细胞,文化没有抗原刺激,患者组的中度至重度纤维化(MFI = 85.2(19.6 -111))(图3(左))相比,患者早期纤维化(MFI = 15.7 (8.5 - -97.6))。此外,TNF的表达增加α在古典初期患者单核细胞的纤维化(WS MFI = 78.8(22.4 -384),海MFI = 67.9(12.9 -313))与个人相比无纤维化(图3 (j))。

3.3。监管和Antifibrotic分子单核细胞与不同程度的受试者的子集门静脉周的纤维化二级血吸虫病

的表达il - 12、il - 10和IL-10R在单核细胞评估血吸虫病的病人。的表达il - 12在古典(图更高4(一))(WS MFI = 464(87.5 -1310)和海洋MFI = 456.5(97.6 -831))、中级(图4 (b))(WS MFI = 722.5(104 - 1589)和海洋MFI = 635(117 - 1180)),和模单核细胞(图4 (c))(WS MFI = 492.5(52.1 -1006)和海洋MFI = 434(62.1 -690))的早期纤维化与群主题中度到重度纤维化(经典:WS MFI = 115.5(85.4 -656)和海MFI = 117.5 (81 - 584);中级:WS MFI = 144(113 - 922)和海洋MFI = 145.5(83.8 -896),和模:WS MFI = 67.45(39.7 -618)和海洋MFI = 84.8 (37.5 -550))。此外,我们观察到的个人没有纤维化的表达il - 12在古典(WS MFI = 408(86.2 -757)和海洋MFI = 416(57.2 -716))和模单核细胞(海MFI = 422(28.4 -624))相比,中度到重度患者的纤维化。在模单核细胞这种差异只是观察到海洋的存在。

与监管分子在这些单核细胞il - 10的表达没有明显差异科目与不同程度的门静脉周的纤维化(数字4 (d)- - - - - -4 (f))。

IL-10R的表达,然而,在古典(图4 (g)海)(MFI = 62.3(41.6 - -90.8)),中间(图4 (h))(WS MFI = 118(83.2 -291)和海洋MFI = 151(93.8 -284)),和模单核细胞(图4(我)海)(MFI = 78.6(61.3 -187))的患者中度到重度纤维化与群主题相比早期纤维化(经典:海MFI = 41.75 (25.2 -198);中级:WS MFI = 73.8(38.8 -305)和海洋MFI = 85.75 (40.8 -291);和模:海MFI = 42.35 (24.6 -213))。此外,群人没有纤维化IL-10R较高的表达在经典(WS MFI = 82.6(40 - 211)和海洋MFI = 63.1(39.7 -227))和模单核细胞(WS MFI = 101.4(37.8 -234))相比,组患者早期纤维化(经典:WS MFI = 41.45(25.4 -217)和海MFI = 41.75(25.2 -198)和模:WS MFI = 44.8 (25 - 243))。

4所示。讨论

本研究旨在描述单核细胞的表型患者不同程度的门静脉周的纤维化二级血吸虫病。中度到重度纤维化患者的平均年龄与个人相比没有高纤维化。这是在协议与文献[18,21),也可能被解释成常数reexposure寄生虫,或纤维化发展的缓慢的过程22]。寄生虫的负担和性别分布相似组患者不同程度的纤维化。然而,从我们组其他的研究表明,个人没有纤维化有更高的寄生虫负担比其他组(18,20.]。一个可能的解释这个观察是慢性感染可以导致肠纤维化,可能影响迁移的鸡蛋肠内腔,从而减少蛋数在寄生虫学的考试23]。其他研究也调查了性别角色发展的门静脉周的纤维化,注意整体的男性偏见易感性(24,25]。

我们没有观察到组织的个人之间的显著差异对肝脏大小,可能因为在患有中度到重度的门静脉周的纤维化,肝实质不是严重受损。众所周知,肝脏大小随纤维化的进展(19,26- - - - - -28]。

然而,我们观察到,在中度到重度纤维化患者脾脏大小比其他团体更大。门静脉直径也更高的科目有中度到重度纤维化患者相比没有纤维化。这些与其他研究结果一致29日,30.]。

近年来,有研究强调了单核细胞在炎症过程的重要作用与肝纤维化实验模型(31日- - - - - -34]。

黄等人评估的特点古典单核细胞、中间,并通过基因表达分析和观察到模古典单核细胞表达基因参与组织修复功能,中间单核细胞基因表达MHC II级(35),和模单核细胞基因参与细胞骨架重排可能负责其高运动性在活的有机体内(36]。对单核细胞的作用在人类血吸虫病的病理,这项研究旨在描述单核细胞的子集(古典、中间、和模)在血吸虫病不同程度的患者门静脉周的纤维化。

HLA-DR表情单核细胞是重要的T细胞抗原表达。我们观察到,在中度到重度纤维化患者的表达HLA-DR古典和中间单核细胞相比是更高的初期患者纤维化和纤维化。然而,没有显著差异的表达HLA-DR在模组中单核细胞。这些结果表明,古典和中间单核细胞可能参与门静脉周的血吸虫病肝纤维化发展通过抗原表示,随后,在T细胞活化。使用新的人类单核细胞的分类研究是罕见的。Hudig等人发现单核细胞从人类个体的不同表型是异构的,可能改变根据疾病模型(37]。然而,也有一些研究在文献中显示模HLA-DR的单核细胞低表达,表明这个人口有巡逻概要和低能力呈现抗原T细胞(35,36,38]。此外,我们的研究小组还观察到的曼氏裂体吸虫抗原rSm29 PBMC文化中可溶性的存在利什曼虫braziliensis抗原(SLA)的表达减少HLA-DR模单核细胞从患者皮肤利什曼病(16]。

为了更好地理解所涉及的机制在血吸虫病门静脉周的纤维化的发展,分子profibrotic和促炎的配置文件同时进行不同的亚种的单核细胞。

IL-4R的表达α在单核细胞的三个亚种群高纤维化和中度到重度纤维化的患者,与患者相比早期纤维化。在实验模型中,细胞因子il - 4和IL-13负责诱导通过绑定到另一个激活单核细胞αil - 4的受体。通过IL-4R信号α导致精氨酸酶的表达,一种酶负责转换精氨酸脯氨酸。脯氨酸是一种重要的氨基酸参与胶原蛋白生产和开发的纤维化(39]。在实验模型美国曼感染已经表明,通过IL-4R响应能力α肉芽肿形成和生存很重要的宿主在感染(40,41]。然而,很少有研究报道IL-4R的角色α人类单核细胞和分子的作用在血吸虫病仍然是有争议的。

TGF -的表达β三个亚种群的单核细胞也更高的科目有中度到重度纤维化相比,个人没有纤维化。这种细胞因子诱导成纤维细胞增殖和胶原蛋白沉积,表明其潜在的作用建立纤维化(42- - - - - -44]。Souza等人进行的研究中血清水平没有显著差异的TGF -β在血吸虫病不同程度的患者门静脉周的纤维化(18]。此外,其他研究没有发现水平的差异TGF -βPBMCs文化刺激与海中组患者不同程度的门静脉周的纤维化(20.,21]。可能的表达TGF -β由人类单核细胞与纤维化相关,而这个由淋巴细胞细胞因子的生产并不是必不可少的。研究由Kanzler et al。(2001)支持TGF -的作用β在丙型肝炎患者肝纤维发生感染。作者提出,TGF -β预测临床疾病进展(45]。然而,李等人发现,当地生产的TGF -β通过调节性T细胞有保护作用出现在纤维发生在个人与丙型肝炎病毒感染(46]。

相同的细胞因子的生产模式后,炎症细胞因子il - 6的表达是在所有三个亚种群的单核细胞从患有中度到重度纤维化早期纤维化患者相比,没有纤维化和也高于中间单核细胞的早期纤维化与个人没有纤维化。哈利勒et al。(1996)报道过程中il - 6的增加产量美国曼感染和肉芽肿形成在实验模型中,这可能表明的参与细胞因子在肝脏病理学47]。另一个实验研究报道巨噬细胞il - 6的高生产文化隔绝肉芽肿,以应对海上抗原(48]。急性细胞因子il - 6是一个阶段相关纤维发生和胶原沉积49- - - - - -52],柱身等人发现,il - 6在感染艾滋病毒的患者与肝纤维化密切相关酒精问题,细胞因子,这可能是一个有用的预测标记为这些患者肝纤维化(53]。

最近,它已被证明,TGF -的结合β和il - 6是至关重要的幼稚T细胞的分化成Th17细胞(54- - - - - -57]。IL-17是细胞因子参与几种疾病的发展,招募中性粒细胞和巨噬细胞炎性网站(58]。IL-17参与血吸虫病的发病机制被描述在实验模型59- - - - - -61年]。在我们的研究中,我们观察到高表达的il - 6和TGF -β患有中度到重度纤维化的单核细胞。这些细胞因子可能导致IL-17的感应,因此导致疾病的恶化。Souza et al .,然而,没有发现差异的IL-17 PBMCs文化的上层清液刺激与海洋之间组织的不同程度的门静脉周的纤维化(18]。

TNF的表达α高在中度到重度纤维化患者单核细胞与初期相比,个人没有纤维化或纤维化。高水平的肿瘤坏死因子-αPBMC产生的刺激裂体吸虫属nonstimulated细胞抗原或已经发现患者的门静脉周的纤维化(10,18,22,62年]。然而,其他研究没有观察到任何差异在TNF -α水平上层清液患者PBMC刺激的海上不同程度的纤维化(20.,21]。在实验研究中TNF -α似乎是必要的肝纤维化发展(63年]。在慢性乙型肝炎病毒感染CD16⁺单核细胞的子集产生高水平的肿瘤坏死因子,表明这个子集的单核细胞可能在这些HBV-infected肝损伤患者密切相关(64年]。我们的研究表明,单核细胞表达TNF -α、独立的族群,这可能是肝纤维化的重要发展。

除了炎症和profibrotic单核细胞或巨噬细胞,这些细胞也基本在预防纤维化实验模型(65年,66年]。

在我们的研究中,单核细胞表达il - 12的高患者早期纤维化和无纤维化相比,患有中度到重度纤维化。一些研究表明,肉芽肿性炎症和肝纤维化的实验模型美国曼是可以预防的il - 12,一个关键细胞因子诱导Th1免疫反应(67年- - - - - -69年]。霍夫曼等人表明,免疫反应的偏差Th1类型需要减少肉芽肿的大小和防止肝纤维化(63年]。单核细胞的中度至重度纤维化患者il - 12的研究显示低表达,这些患者可能存在一个受损的Th1反应和纤维化发展的控制不足。

细胞因子il - 10是一个调节功能;然而,我们没有发现显著差异在单核细胞il - 10的表达与不同程度的个体门静脉周的纤维化。一些作者已经证明这在PBMC细胞因子水平升高的患者严重门静脉周的纤维化(20.),而其他人则找到了低水平的细胞因子在这些病人21),或无显著差异组患者il - 10的水平(18]。实验研究双il - 10、il - 12的淘汰赛中导致严重纤维化发展(69年,70年]。

il - 10的表达受体在这项研究中,然而,在中度到重度纤维化患者单核细胞和早期纤维化患者相比无纤维化。这是意想不到的,因为赫伯特等人发现管理anti-IL-10R单克隆抗体对小鼠感染美国曼显著增加生产il - 4、干扰素-γ肿瘤坏死因子-α,IL-17以及肝细胞损害的大小(71年]。

IL-4R的表达α和IL-10R单核细胞无纤维化的患者可能导致这些人的抗炎的单核细胞。此外,从我们的团队在最近的研究中,我们观察到患者的淋巴细胞中度和重度纤维化较低分子激活CD28的表达和低表达的调控标记,如CTLA-4和CD25^高监管缺失,暗示这些人淋巴细胞的纤维化的程度更高(72年]。

5。结论

综上所述,我们的研究结果表明,单核细胞亚群的中度至重度患者门静脉周的纤维化参与疾病的免疫发病机理,因为他们表达高水平的促炎和profibrotic结合低表达的细胞因子的调控分子。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

作者要感谢Irisma Souza博士和博士指出冈萨雷斯进行超声评估。作者也很感激所有的志愿者社区的阿瓜Preta-Gandu,同意参加本研究,到当地卫生代理艾琳耶稣对她的支持,和惠特尼奥丽埃纳Bagge修正和建议的文本。埃德加·m·卡瓦略和玛丽亚Ilma慰问Nacional de Araujo是调查人员支持Desenvolvimento Cientifico e学府(CNPq)。这项工作得到了巴西国家研究委员会(CNPq)普遍(482113/2010-3)。