文摘
功能食品含有生物活性化合物的乳清可能扮演重要的角色在肥胖的预防和治疗。本研究的目的是调查的前景的生物技术过程凝聚的乳清蛋白(CWP)壳聚糖和测试其antiobesogenic潜力。方法。CWP (100 mg·公斤·天)是管理与食源性肥胖小鼠8周。动物们被分成四组:控制normocaloric饮食用水填喂法(C)或团聚体(C-CWP)和高脂肪饮食填喂法与水(高频)或团聚体(HF-CWP)。结果。HF-CWP减少体重和血清脂质分数并显示减少肥胖和胰岛素。脂联素明显高于HF-CWP组相比,高频。LPS水平HF-W组明显高于HF-CWP相比。il - 10显示之间的负相关肠系膜脂肪组织中胰岛素和葡萄糖水平HF-CWP组。CWP推广增加磷酸化AMPK和ATGL在肠系膜脂肪组织量HF-CWP组。结论。CWP能够调节的影响,可能是由于其高生物价值的蛋白质。我们观察到一个保护作用对肥胖和白色脂肪组织的炎性环境改善。
1。介绍
在过去的几十年中,人群中肥胖的发病率增加了严重,这已成为公共卫生挑战。它的病因是多方面的,包括环境、饮食、缺乏身体活动和遗传因素。肥胖是一种复杂的疾病与高热量的饮食,导致其他一些慢性非传染性疾病的发展(1]。肥胖也增加血浆内毒素(lipopolysaccharide-LPS),饱和脂肪酸(2,3],促炎细胞因子(3)所有参与发展的复杂并发症如糖尿病、高血压、血脂异常、代谢综合征。
脂肪组织不仅是一个能量储存器官,因为它扮演重要的内分泌和免疫的作用。白色脂肪组织(窟)是一个内分泌器官分泌pro -抗炎发病如肿瘤坏死因子-α(TNF -)和白细胞介素- 6 (il - 6)是重要的炎症标记物,刺激生产的几个蛋白质和促炎细胞因子在不同的细胞类型,通过核因子κ激活(NF - BκB) (4]。此外,内毒素和饱和脂肪酸在同一个通路NF -行动κB激活。许多研究表明,有限合伙人(内毒素)可以激活这些蛋白在脂肪细胞,从而增加促炎发病的基因表达5- - - - - -7]。
脂肪分解脂肪的酶的主要作用是为其他组织提供FAs的能源需求。甘油三酯储存在脂滴首先是由脂肪甘油三酯脂肪酶水解酶(ATGL),也被称为desnutrin,释放甘油二酯基和足总,这就需要一个abhydrolase域包含5 (ABHD-5)启动子被激活。ATGL水解后,甘油二酯是由荷尔蒙顺序然后水解脂肪酶(高速逻辑)和单甘油酯脂肪酶(球型),生产nonesterified脂肪酸(NEFAs)和甘油(8]。不同脂酶获得时,脂滴蛋白涂层囊泡(perilipins)磷酸化。周围Perilipin通常防止脂类分解甘油三酯的脂质滴,从而防止脂酶的访问。
乳清蛋白(WP)被发现是一个很好的预防肥胖,因为生物价值由高生物活性肽。这些作为抗菌药物、抗高血压和监管者的免疫功能,减少身体脂肪以及各种相关机制对人类健康有益。他们也有额外的功能;例如,他们有食欲抑制剂作用[9),刺激肌肉蛋白质合成,调节身体的能量体内平衡(10]。有大量的证据表明潜在的抗炎和抗氧化效果的WP锻炼(9,11- - - - - -13]。
壳聚糖复合凝聚与WP由副产品加工的虾、蟹(壳聚糖),和奶酪,添加产品的环境效益,这些副产品可能被重用,而不是垃圾填埋场处置或释放到河流的生产商(14]。鉴于上述情况,与分离技术的发展和乳清蛋白保存,使用的方法可能导致经济复苏这宝贵的营养和增加功能属性的表达式(15]。复凝聚被定义为胶体形成两个液相分离。这一过程基本上是由带有相反电荷的引力的生物高聚物。发生这一现象的形成一个系统的平衡胶体和稀释浮层(16,17]。因此,本研究的目的是调查的前景的生物技术过程络合和奶酪乳清分离蛋白在壳聚糖和测试他们antiobesogenic潜在的炎症标记物的调制和分解脂肪的途径出现在肥胖。
2。方法
2.1。凝聚和表征
在这项研究中我们用甜奶酪乳清(SW 1108袋25公斤)和1.5%的脂肪被公司Alibra-PR推向市场。乳清粉的溶解10 g 100毫升蒸馏水。壳聚糖用于凝聚介质摩尔质量与75 - 85% 200 - 800 cps的脱乙酰作用和粘性程度(Sigma-Aldrich 44887 - 7)。壳聚糖的浓度为0.75毫克/毫升。壳聚糖溶解在柠檬酸(208更易/ L),这一步后,添加到奶酪乳清的比例为1:1在室温下搅拌1 h。壳聚糖溶液的pH值和WP调整到6氢氧化钠(250更易/ L)和可溶性在室温下搅拌(±25°C)。与壳聚糖固体凝固称为团聚体(CWP)是通过离心收集(1300克)。
为了获得平均30%的蛋白质凝聚层3 L奶酪乳清被使用。因此,CWP得到样品的化学分析的总脂质、总蛋白和乳糖。最后,对于测量样品的矿物微量元素,钙、钾、镁、和P,奶酪乳清,CWP,壳聚糖,100μg受到光学对电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP OES珀金埃尔默最适条件3000 DV,诺沃克,CT,美国)。确定现有蛋白质分数与减少缓冲CWP电泳概要文件包含62.5毫米Tris-HCl、20%甘油、2%十二烷基硫酸钠(SDS) (10%), 5%巯基乙醇,溴酚蓝在pH值为6.8。
2.2。动物和治疗
本研究的研究伦理委员会批准大学Federalde圣保罗,葡方保利斯塔人药物(UNIFESPEPM),作为搜索协议数量0473/10。实验过程是按照实验动物保健原则由美国国立卫生研究院(National Institutes of Health)出版数量96 - 23,1996年修订)。
49岁男性瑞士老鼠twelve-week-old CEDEME (Centro de Desenvolvimento de莫德罗Experimentais da大学联邦de Sao Paulo)被安置一分之五笼在标准实验动物实验室和保持受控条件下的光(12 h与灯光光暗周期在6点)和温度(24±1°C)。所有的老鼠收到了水和食物随意。动物被划分如下:控制饮食加上自来水(北京市);控制饮食+团聚体(C-CWP);高脂肪饮食+团聚体(HF-CWP);和高脂肪的饮食加上自来水(HF-W)。所有饮食都准备根据的建议,美国营养学会(18)(表1)。团聚体(CWP)含有100 mg·公斤·天是由填喂法。身体体重记录每周两次。
2.3。团聚体的组成和方面
图1(一)显示了蛋白质的凝聚层的主要蛋白质的存在更大的分数,也就是说,alpha-lactalbumin (-La-14 kDa)、beta-lactoglobulin (34 kDa -Lg-18 kDa单体和二聚体形式),牛血清白蛋白(bsa - 66 kD)和乳铁蛋白(lacf - 86 kDa)。(图CWP有絮凝方面1 (b))组成的蛋白质和微量元素,如钙、钾、镁、磷、钠(表2)。
(一)
(b)
2.4。脂肪酸成分的饮食
总脂质提取、饮食样本均质在氯仿和甲醇2:1 (v / v),在室温下混合,孵化为5分钟。然后,额外的1.25毫升氯仿和1.25毫升去离子的H2添加了啊,最后,被大力均质3分钟后,样本在1000转离心5分钟在室温下。氯仿层是N下干的2,总提取转化成甲基酯,分析了气相色谱法(GC),加上一个火焰电离剂检测器(FID),(3900年瓦里安GC)和脂肪酸是由计算保留时间,使用模式的脂肪酸与已知的保留时间(37岁的Supelco组件)。添加了170°C的温度保持1分钟,然后坡道2.5°C /分钟240°C的最终温度,保持5分钟。注入器和检测器都维持在250°C和260°C,分别。我们使用一个列CP蜡52 cb,厚度为0.25毫米,内部直径0.25μ米,30米的长度,以氢气为载气的线速度22厘米−1。
2.5。口服葡萄糖耐量试验(OGTT)
禁食12小时后,从尾静脉血液收集评估基葡萄糖浓度。然后,葡萄糖(默克公司)解决方案(1.4 g / kg)被填喂法管理。收集血液样本后15日,30日,45岁,60岁,120分钟测量葡萄糖浓度使用葡萄糖分析器(AccuCheck罗氏)。
2.6。实验程序
在实验周期的结束,动物禁食前12 h在一夜之间被斩首了。树干血液收集并立即离心机(1125克/ 15分钟在4°C)。血清分离和储存在−80°C后生化和荷尔蒙的决心。脂肪组织仓库,腹膜后(RET),肠系膜(MES)和附睾(EPI),解剖,重,立即在液态氮冷冻,储存在−80°C。
2.7。生化和荷尔蒙血清分析
血清浓度的葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇的酶比色法测定使用商业套装(Labtest、巴西)。胰岛素和脂联素的浓度测量使用特定酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(Milipore和研发系统)。有限合伙人决定使用商业套装(Lonza)。
2.8。肠系膜脂肪组织TNF -α蛋白质、il - 6和il - 10水平取决于ELISA
安乐死后,肠系膜脂肪组织被移除,均相到一个特定的总蛋白提取缓冲(Triton x - 100年1%,100毫米Tris-HCl (pH值7.4),焦磷酸钠100毫米,100毫米氟化钠,10毫米EDTA,原钒酸钠10毫米,2.0毫米phenylmethylsulfonyl氟化物,抑肽酶和0.1毫克/毫升),和离心机在12000 g 30分钟在4°C。上层清液得救了,蛋白质含量是决定使用BCA化验(Bio-Rad,赫拉克勒斯,加州)与牛血清白蛋白(BSA)作为参考。肿瘤坏死因子-的定量评估、il - 6和il - 10的蛋白质是由ELISA (DuoSet ELISA、研发系统、明尼阿波利斯、MN)后,制造商的建议。所有样本作为重复运行和均值。
2.9。蛋白质免疫印迹分析
安乐死之后,肠系膜脂肪组织解剖和均质1.0毫升的增溶缓冲区在4°C (Triton x - 100年1%,100毫米Tris-HCl (pH值7.4),焦磷酸钠100毫米,100毫米氟化钠,10毫米EDTA,原钒酸钠10毫米,2.0毫米phenylmethylsulfonyl氟化物,抑肽酶和0.1毫克/毫升)。不溶性材料被离心分离为30分钟9000 g在70年Ti转子(美国贝克曼,富勒顿,CA)在4°C。上层清液的蛋白质浓度测定采用BCA化验(Bio-Rad、大力神、钙、美国)。蛋白质变性的沸腾(5分钟)Laemmli样本缓冲区包含100毫米德勤和运行在10%十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳Bio-Rad微型板胶装置。
从凝胶的蛋白质是electrotransferred硝化纤维膜在15 V ~ 1.30 h / 4凝胶(常数)Bio-Rad半干的传输装置。非特异性蛋白质绑定硝基降低了预孵化2 h 22°C的阻断缓冲区(1% BSA, 10毫米三,150毫米氯化钠,和0.02%渐变20)。硝化纤维膜是孵化一夜之间在4°C抗体荷尔蒙脂肪酶(高速逻辑),脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL) abhydrolase域包含蛋白5 (ABHD-5) perilipin, 5′磷活化蛋白激酶(p-AMPK1 e 2 -刺172),alpha-tubulin获得圣克鲁斯生物技术(美国圣克鲁斯,CA)稀释1:1000年与阻断缓冲区补充1% BSA然后洗30分钟没有BSA在阻断缓冲区。这些墨迹随后被孵化与peroxidase-conjugated二级抗体1 h 22°C。评价蛋白质加载,膜被剥夺和reblotted anti-alpha-tubulin抗体。特定的乐队是由化学发光检测和可视化/捕获是由UVITEC gel-documentation系统。带强度量化的光学测密度术发达放射能照像(Scion图像软件,接穗公司,弗雷德里克,医学博士,美国)。
2.10。统计分析
所有结果给出平均值±标准平均误差(SEM)。统计意义评估使用双向方差分析(方差分析)图基的紧随其后事后分析识别组之间的显著差异。皮尔森的相关性是用于评估分析变量之间的关系。差异被认为是重要的()StatsDirect软件。
3所示。结果
3.1。身体和组织重量
6周的治疗后,hyperlipidic饮食促进体重的增加相比,控制(北京市建筑与HF-W)。另一方面,HF-CWP显示较低的体重相比HF-W(图2)。hyperlipid饮食增加的相对质量附睾的肠系膜仓库和肥胖(Σ的附睾的、腹膜后和肠系膜相对重量)相比,对照组(北京市建筑与HF-W),而与团聚体减少这些参数(HF-W与HF-CWP)。腹膜后得宝是增加HF-W组相比,北京市一个(表3)。
3.2。的血清脂质水平、胰岛素、脂联素、脂多糖和OGTT
hyperlipid饮食增加了三酰甘油(标记)和VLDL相比对照组(北京市建筑与HF-W),而与团聚体减少这些参数(HF-W与HF-CWP)。胰岛素水平和HOMA指数增加的动物喂食hyperlipidic饮食(北京市建筑与HF-W)。当与团聚体,hyperlipid饮食促进增加脂联素和LPS浓度下降(HF-W与HF-CWP)(表4)。
口服葡萄糖耐量试验表明,hyperlipidic饮食推广增加15分钟相比控制(HF-W与北京市建筑)。曲线下的面积(AUC)分析增加HF-W相比,北京市建筑(图3)。
3.3。的浓度il - 6、il - 10和tnf在肠系膜脂肪组织
浓度有显著降低il - 10在动物喂食高脂肪的饮食动物相比,美联储控制饮食(HF-W与北京市建筑)。C-CWP组il - 6的浓度较低相比,北京市建筑群体。il - 10 / TNF -比在肠系膜组织没有显著差异(表5)。
3.4。表达的蛋白质参与脂类分解途径
数据4(一),4 (b),4 (c),4 (d),4 (e)显示数据高速逻辑的蛋白表达,ATGL, Perilipin, ABHD-5 AMPK活性,分别在肠系膜脂肪组织。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
奥软C-CWP蛋白表达减少,HF-W相比,北京市建筑集团(图4(一))。有增加ATGL HF-CWP组相比HF-W组(图4 (b))。Perilipin显著高于HF-W组相比,北京市和HF-CWP组(图4 (c))。的蛋白表达显著减少ABDH-5在C-CWP相比,北京市和HF-CWP组织(图4 (d))。AMPK的磷酸化(图4 (e))高HF-CWP相比HF-W组。
3.5。相关性
AUC和标签之间的正相关关系(HF-W组(图)被发现5(一个))。图5 (b)显示了胰岛素水平之间的正相关和STA HF-W ()组。数据5 (c)和5 (d)显示一个逆相关性胰岛素()(图5 (c))和葡萄糖(与肠系膜脂肪组织中il - 10)水平HF-CWP组(图5 (d))。
(一)
(b)
(c)
(d)
4所示。讨论
许多程序隔离和恢复WP的调查和报告的19]。功能、物理和化学特性变化根据程序用于获得这些蛋白质。在我们的研究中,可以恢复在WP(表平均30%2)。如果我们把这些数字与公布的数据(通常使用传统的技术,如超滤(UF)),我们的方法似乎是一个低效率的过程(19]。然而,成本效益因素应该被考虑。例如,超滤方法不仅是昂贵的部署而且操作。除了具有成本效益,凝聚过程促进WP的分离和获得一个低热量的产品。
的出现与健康食品化合物可能最终成为一个好的策略来改善公共卫生。近年来,功能性食品引起了科学界的关注,消费者和食品制造商。保健品的化合物(维生素、益生菌、生物活性肽和抗氧化剂)广泛,和科学证据似乎越来越支持健康促进的概念通过食物成分(20.,21]。
功能食品通常是销售食品含有成分技术操作执行有利于健康(22]。我们的研究成果支持先前的研究显示CWP作为营养食品的有效性能够稳定脂肪量增加动物喂食高脂肪的饮食。我们的发现同意WP摄取利益广泛报道文献[23- - - - - -27]。作为证明,体重下降HF-CWP组HF-W组相比,伴随着减少肥胖。
现在普遍认为,过量摄入饱和脂肪与血脂异常的发展(28,29日),本研究进一步证实,动物喂食高脂肪的饮食增加VLDL和标签。研究已经证明了insulinotropic WP的影响(9,11,30.]。在这项研究中,我们没有发现任何显著性差异之间的血糖组评估。关于胰岛素和HOMA指数,hyperlipidic饮食显示更高的值。我们的研究结果表明肥胖这一实验模型的有效性。然而,CWP治疗提升改善血糖和胰岛素耐受性。一项研究由黄等。31日)利用不同的蛋白质来源(奶酪乳清蛋白、大豆、红肉和牛奶)在肥胖小鼠(由高脂肪饮食诱导)发现增加脂联素浓度和减少胰岛素当动物被用奶酪乳清蛋白。在目前的研究中,我们还发现CWP在调节脂联素的关键作用,作为HF-CWP高值组HF-W相比组。这些发现表明,CWP可能功能的影响。山内et al。32)展示了潜在的脂联素在减少胰岛素抵抗增强脂肪酸氧化,导致标签内容的减少肥胖糖尿病大鼠。
有强有力的证据WP的免疫调节作用[33]。含有WP的产品可能是有益的治疗某些疾病。研究表明,WP促进改善治疗胃肠道症状的婴儿小鼠rotavirus-induced腹泻,在结直肠癌的老鼠保护性作用,减少血液中释放il - 6的老鼠进行瞬态肠缺血/再灌注和可以提供保护作用实验诱导乳腺癌动物(25,34,35]。最近的研究在文献中,两者都有在活的有机体内和在体外,专注于这些蛋白质可能造成的影响,在巨噬细胞和淋巴细胞。尽管大多数蛋白质退化胃消化期间,某些奶酪乳清蛋白,如lg,洛杉矶、GMP对消化和保持不变。这种蛋白质消化吸收后可以直接刺激白细胞。因此,重要的是要理解这些蛋白质的机制影响免疫力,刺激体内抗炎过程(33]。
il - 10是一种多效性的细胞因子,控制炎症过程通过消除生产促炎细胞因子il - 1、il - 6,和引发,TNF -生产主要是由单核细胞,巨噬细胞,淋巴细胞,肥大细胞,成熟脂肪细胞(14,36]。il - 10 / TNF -比率被认为是炎症的一个重要指标是低价值往往与发病率和死亡率的风险增加有关。我们没有观察到il - 10 / TNF -增加比HF-CWP MES的团体。我们相信,由于短时间内治疗动物可能没有发达的促炎的状态。增加长度的治疗,我们认为找到更具表达性的结果。另一个可能性是团聚体可能可以保护小鼠免受一种促炎的治疗饮食引发的状态,导致HF-CWP组il - 10的不必要的平衡。然而,一项研究涉及延长治疗期可能需要辨别这可能的效应。
从这个意义上讲,有免疫调节机制CWP,最有可能的细胞因子il - 10,它有一个自我平衡的肠系膜脂肪组织代谢的影响。我们的结果表明,il - 10可能是一个积极监管机构的胰岛素敏感性和葡萄糖摄取增加。这种机制可以保护对胰岛素抵抗的脂肪组织。虽然无节制的炎症反应在肥胖的确切起源尚不清楚,众所周知,在肥胖的促炎细胞因子的生产过剩影响新陈代谢。例如,TNF -导致细胞无力应对胰岛素和胰岛素水平上升(37),与其他变量相关,il - 10与胰岛素敏感性密切相关,如禁食和postload胰岛素浓度,高密度脂蛋白胆固醇和甘油三酸酯水平。除了CWP的修复效果,我们表现出的系统性效应,减少有限合伙人血清水平。
关于CWP的构成,我们可以强调的存在洛杉矶和lg蛋白质,主要的蛋白质存在于团聚体,已被证明有效的抑制促炎细胞因子的释放27,38]。这些蛋白质的存在是一个伟大的迹象表明,团聚体组件能够调节炎性环境提升通过hyperlipidic饮食。由我们组的另一项研究中,老鼠,此前接受高脂肪饮食和美联储的补充CWP(填喂法,36毫克蛋白/公斤体重),显示il - 10之间的正相关和tnf肠系膜脂肪组织,腹膜后脂肪组织和肝脏组织。我们还观察到一个积极的相关性脂多糖和il - 10在肝脏组织。因此,预处理与高脂肪饮食促进代谢变化和炎症,和CWP调制炎性环境14]。
证据表明吃WP导致卡路里摄入量减少,基底能量消耗增加,调节胰岛素敏感性和葡萄糖体内平衡,导致脂肪组织的脂质代谢的变化,肝脏和肌肉(39- - - - - -42]。AMPK和脂联素代谢的关键分子反应在不同组织(43,44];它们参与预防响应对消费所造成的消极生理过程的高饱和脂肪酸的饮食。激活AMPK的食物或药物的生物活性成分被认为是目标,因为它可能反向相关的代谢变化与肥胖和2型糖尿病45]。它也知道,脂联素可以激活AMPK在白色脂肪组织46]。动物对团聚体显示增加AMPK活化与奥软的减少和增加ATGL在肠系膜脂肪组织蛋白表达。类似的结果是在审查报告由Bijland et al。47]。
一项由Gaidhu et al。43)表明,AMPK活化刺激爱卡(5-aminoimidazol- - - - - -4- - - - - -carboxamida ribonucleotideo)最初促进抑制脂肪细胞的脂解作用孤立在活的有机体内,反映出血清中游离脂肪酸减少。另一方面,长期治疗与爱卡促进脂类分解增加,作者将这归因于ATGL的内容的增加和减少高速逻辑的活动48]。但是,明确的结论很难到达,由于缺乏化验使用特定AMPK的操作工具。此外,整体效果的AMPK激活的脂解作用仍有争议。激活AMPK的持续时间和模式可能是特别重要的,当它涉及到一个过程旨在减少促炎状态引起的增加脂类分解(47]。此外,脂联素可以抑制奥软的激活,不改变ATGL和ABHD-5脂肪细胞为了调节脂类分解的稳态控制避免lipotoxicity [49]。
脂类分解似乎发挥重要的生理作用,招聘在受到压力时的能源动员和/或能量不足。此外,非常重要的减少脂类分解显然是有害的,证明在临床领域的缺陷所带来的症状在分解脂肪的装置50]。鉴于此,它是合理的质疑,抑制脂类分解,通过高速逻辑CWP,引起的是有益的或有害的,因为提高分解脂肪的活动和游离脂肪酸的同时增加循环显然是有害的,会导致一些并发症。清楚地确定这一点,然而,游离脂肪酸和内源性甘油浓度的分析需要。
的蛋白表达明显高于另一个有趣的发现是perilipin HF-W组(52%),也指的是更大的存款甘油三酯,因为这种蛋白质主要是固定的水滴中性脂肪细胞的脂质。这是符合研究表明,蛋白表达增加perilipin导致增加储存的甘油三酯降低水解率。(51]。
最后,有大量的证据表明WP的摄入可以降低消耗的热量,增加基础能量消耗,并改善胰岛素敏感性和葡萄糖稳态,从而导致脂肪组织中脂质代谢的变化,肝脏和肌肉(39- - - - - -42]。
5。结论
CWP能够促进营养和生理HF-CWP组的改善,如减少体重和降低血清脂质水平降低血清胰岛素和有限合伙人紧随其后。此外,干预CWP导致高脂联素内容和衰减过程会导致葡萄糖耐受不良。因此,CWP可以发挥有益的作用,在某种程度上,在调节脂类分解动物对待hyperlipidic饮食。
缩写
| ABHD-5: | Abhydrolase域包含5 |
| AUC: | 曲线下的面积 |
| CWP: | 团聚体 |
| C-CWP: | 控制饮食+团聚体 |
| 北京市建筑: | 控制饮食加上自来水 |
| HF-CWP: | 高脂肪饮食+团聚体 |
| HF-W: | 高脂肪饮食加自来水 |
| 高速逻辑: | 荷尔蒙脂肪酶 |
| 有限合伙人: | 脂多糖 |
| 球型: | 单甘油酯脂肪酶 |
| NEFAs: | Nonesterified脂肪酸 |
| p-AMPK1 e 2 -刺172: | 5′磷活化蛋白激酶 |
| 标签: | 三酰甘油 |
| OGTT: | 口服葡萄糖耐量试验 |
| ATGL: | 甘油三酯脂肪酶酶 |
| WP: | 乳清蛋白。 |
利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
作者的贡献
所有作者阅读和批准了期末论文。
确认
作者感谢USP LAMEROA实验室的工作人员分析援助的饮食。这项工作是支持FAPESP(必须占州政府拨款。2009/53801-5),斗篷,CNPQ。