文摘
体外文献研究表明,动脉粥样硬化氧化低密度脂蛋白(OxLDL)抑制滋养层入侵。本研究的目的是确定OxLDL的水平和检查之间的关系抗氧化雌二醇,雌三醇,prooxidative黄体酮在正常和preeclamptic胎盘组织和测量血清抗氧化活性paraoxonase (PON1)。这项研究包括30 preeclamptic和32名正常孕妇。OxLDL决心与ELISA、雌二醇,非结合的雌三醇,和孕酮与化学发光法测定胎盘组织。用分光光度法测定血清PON1活性测定。OxLDL水平(),雌三醇(),雌二醇()和孕酮()低preeclamptic组的胎盘组织与正常孕妇相比。血清PON1活性高preeclamptic集团()和preeclamptic集团没有宫内生长受限()与正常孕妇相比。组织雌三醇preeclamptic与IUGR组没有/ (,)低于正常组。我们的研究结果表明,事件导致胎儿胎盘功能不全导致雌三醇的水平减少限制OxLDL在胎盘组织中沉积。血清PON1活性可能是子痫前期的重要OxLDL的抑制。
1。介绍
子痫前期是一种综合症,其特征是高血压和蛋白尿导致孕产妇和围产期死亡率(1]。子痫前期的发病机理尚未完全清楚。相信在子痫前期,子宫螺旋动脉的生理改造成扩张子宫胎盘血管观察在正常妊娠中断(2]。
事实上,内侧增生和螺旋动脉的动脉粥样化已报告(2]。急性动脉粥样化是一个闭塞的螺旋动脉的病变与未知时间发病具有渗透的泡沫细胞,胞质脂肪存储(3]。氧化低密度脂蛋白(LDL)氧化低密度脂蛋白(OxLDL)是引发和加速因子在动脉粥样硬化病变的发展4]。氧化应激是一种刺激因素参与怀孕的炎症反应(3]。
胎盘的主要来源是prooxidant代理、抗氧化酶系统和激素,能够控制脂质过氧化作用在正常怀孕。prooxidative之间的平衡和抗氧化代谢产物影响LDL氧化的停滞阶段(5]。
雌二醇抑制低密度脂蛋白氧化,而孕激素增加低密度脂蛋白氧化在人类胎盘(术语的主要组织培养6]。PON1是一种抗氧化酵素高密度脂蛋白和作为预防体外氧化修饰低密度脂蛋白(7]。
自螺旋动脉疾病由于动脉粥样化建议参与子痫前期的发病机制,它似乎合理的检查水平的OxLDL由于其硬化的作用。
我们回顾文献未能找到一份报告,做了OxLDL测量直接在子痫前期胎盘组织。我们假设患OxLDL可能增加preeclamptic胎盘组织。我们的研究的目的是测量水平的OxLDL和调查之间的关系OxLDL prooxidant黄体酮和抗雌激素preeclamptic胎盘组织和正常孕妇的胎盘组织。此外,PON1活性研究preeclamptic和正常血清的抗氧化性质。
2。材料和方法
研究中的患者都是土耳其的女人。三十女人与子痫前期和32岁女性血压正常的人,简单的怀孕在妇产科,埃杰维特大学,后被包括在研究获取教师伦理委员会的批准。书面知情同意之前就从每个病人获得任何研究过程的性能。
子痫前期的诊断成立,按照美国大学的定义的产科医生和妇科医生8]。
交付后,胎儿宫内生长受限(IUGR)被定义为出生体重< 10百分比作为评估胎龄在交付与亚历山大的定义等。9]。
样本来自胎盘的中部地区,放在冰,送到实验室,30分钟内处理,在冰冷的PBS冲洗,立即冻结在-80°C进行分析在稍后的日期。组织样本被剁碎,与磷酸缓冲盐均质速度1/1 pH值7.4使用均质机(超Turrax IKA T18基本)。匀浆离心机在9000g在4°C 30分钟和上层清液立即分析。雌二醇的水平OxLDL,非结合的雌三醇,和孕激素测定在上层清液,离心后,结果被计算为每克组织。血液样本是发病前获得的劳动。凝结的血液后,离心机,整除的血清样品立即存放在−80°C到化验PON1活性。所有分析完成样品和蒙蔽他们跑一式两份。
使用人类oxLDL oxLDL水平测定酶联免疫试剂盒(Cusabio生物技术目录。CSB-E07931 h,中国)与爱普生lx - 300年夹层法ELISA设备(美国Winooski BIO-TEC仪器)的intra-assay CV < 3%, interassay简历的10%。酶联免疫试剂盒是总OxLDL具体。
水平的雌二醇(intra-assay CV < 4.9%, interassay简历7.1%),非结合的雌三醇(intra-assay简历5.2%,interassay简历7.3%)和孕酮(intra-assay简历7.0%,interassay简历9.5%)化验使用Immulite 2000设备(西门子、钙、美国),与固相化学发光酶免疫分析法的竞争力。
PON1活性测定采用日本岛津公司1601紫外分光光度计(日本岛津公司有限公司日本京都)的定义根据Gan和intra-assay CV等人8.8%。对氧磷作为衬底的一个更易与1更易CaCl的存在2100年更易Tris-HCl缓冲区(pH值8.0);血清添加开始反应,吸光度的增加在412海里被记录。p-nitrophenol的数量计算的摩尔消光系数(17.100 M1厘米−1)。结果表示为U / L (10]。
3所示。统计分析
13.0社会科学统计软件包(SPSS . n:行情)、芝加哥,美国)是用于所有数据分析。Kolmogorov-Smirnov测试用于测试的正常分布。学生t以及用于测试的意义差异preeclamptic与正态分布和正常学习小组。
三组比较与正态分布的变量是用单向方差分析(方差分析)。Bonferroni测试被用作事后测试的重要变量。没有正态分布的变量,克鲁斯卡尔-沃利斯检验被用于三组比较和曼惠特尼U以及与Bonferroni调整用于两组比较重要的变量。皮尔森和斯皮尔曼相关分析是用来确定连续变量状态测量之间的关系。
功率计算相关的比较测试计划完成了超过2008包。值小于0.05被认为是具有统计学意义。
4所示。结果
人口(产妇年龄、BMI)、临床(收缩期和舒张期血压、尿蛋白排泄,婴儿出生体重、的阿普加分数1和5分钟)和生化特征(组织和血清),和组织标记和临床数据的相关系数如表所示1,2,3,4,分别。生化特性的正常孕妇(组1),preeclamptic没有IUGR孕妇(组2),并与IUGR孕妇preeclamptic(组3)如表所示5和6。
平均孕周(GW)preeclamptic组在对照组。阴道分娩/剖腹产的比率是9/23在正常组,2/28 preeclamptic病人。未产妇/多胎产18/14在正常组和18/12 preeclamptic组。两组孕妇在怀孕期间戒烟。
OxLDL (),雌三醇(),雌二醇()和孕酮(preeclamptic患者胎盘组织的)水平明显低于健康孕妇使用的学生t以及()。Bonferroni调整后,组织雌三醇、雌二醇和孕酮水平被发现显著preeclamptic患者与正常孕妇相比,而OxLDL的水平没有显著差异(表2)。
血清PON1活动()明显高于preeclamptic组与正常孕妇相比(表3)。
之间的正相关组织OxLDL-tissue雌三醇水平(,)和组织estriol-infant出生体重之间的(,)是给定的表4。组织雌三醇之间的负相关、收缩压水平(,)和舒张压(,)是给定的表4。
雌三醇(),雌二醇()和孕酮()水平的胎盘组织和血清PON1 ()正常孕妇组之间显著不同,preeclamptic没有IUGR组,preeclamptic与IUGR组(表5和6)。
功率计算OxLDL生化数据显示62.6%,99%为雌三醇,79%为雌二醇、孕酮76.9%,54.4%在其1。
5。讨论
一些病理过程发生在preeclamptic胎盘被认为是参与了发病机理,包括螺旋动脉重建受损(2),内皮功能障碍,胎盘滋养层的植入受损,灌注不足uterine-placental单位(11]。动脉粥样硬化内皮的改变引起的氧化应激也一直在强调发病机理(1]。氧化低密度脂蛋白二级单核细胞的氧化应激和转换成泡沫细胞吸收后OxLDL重要步骤对内皮功能障碍(11]。
5.1。OxLDL
孔雀舞等人已经证明存在OxLDL绒毛和extravillous细胞滋养层的人类胎盘在妊娠前三个月使用免疫组织化学和细胞培养的一项研究报告,OxLDL导致有缺陷的滋养层入侵(12]。
没有共识的OxLDL preeclamptic女性文学。金等。13)和Genc et al。14)报道,血清OxLDL水平高preeclamptic孕妇与正常孕妇相比,而另一些啄et al。15)和Raıjmakers et al。16报道较少。
我们的结果与那些斗等人,Raıjmakers et al。在我们的研究中,不同于之前的研究,我们检查OxLDL在胎盘组织的水平。
Raıjmakers等人已经确定OxLDL水平较低的血清preeclamptic孕妇相比,控制和建议OxLDL的自身抗体可以加快OxLDL[血清间隙16]。
啄等人没有发现水平的提高血清OxLDL preeclamptic患者与他们的假设相反。他们发现低血清OxLDL子痫前期和显著降低血清IUGR OxLDL水平(血压正常的IUGR + IUGR与子痫前期)患者相比,法线。完成测量血清样本;虽然他们不能证明一个系统性的改变,他们强调的重要性可能因素(当地的影响)在胎盘组织和孕产妇血管。他们推测胎儿胆固醇减少供应作为一个可能的机制从OxLDL水平低(15]。在我们的研究中,我们没能证明在胎盘组织OxLDL水平上升。
在我们的研究中,水平没有显著差异的OxLDL preeclamptic与IUGR孕妇与正常相比没有IUGR孕妇和preeclamptic病人。
5.2。类固醇激素
几项研究在文献中已经证明了OxLDL在胎盘的存在12)和抗氧化的影响雌激素和prooxidant孕酮氧化低密度脂蛋白(5,6,17,18]。这些性激素合成在妊娠胎盘组织(5)和胆固醇的前兆。Muraguchi等人报道,雌二醇表明胎盘功能,而雌三醇显示胎盘和胎儿功能(19]。朱镕基等人报道,孕酮抑制雌二醇的抗氧化效果的主动脉内皮细胞培养的缺失和存在(17,18),这种效果类似于观察滋养层细胞培养(6]。米勒等人报道,雌三醇是一种抗氧化剂,增加低密度脂蛋白氧化体外的停滞阶段(5]。
在我们的研究中,水平的雌三醇,雌二醇和孕酮减少preeclamptic胎盘组织的患者与正常孕妇相比。那些给人的印象,减少体内OxLDL preeclamptic胎盘组织中有不同的机制从雌激素的抗氧化作用。
雌三醇显著降低在preeclamptic病人和preeclamptic患者的胎盘组织/与IUGR相比正常妊娠组。雌三醇的隐含意义评估胎盘和胎儿生长据Muraguchi et al。19]。
我们建议减少类固醇激素合成的胆固醇preeclamptic胎盘组织可能与胎儿胆固醇减少维护相关报道啄et al。15]。
5.3。PON1
Genc et al。14),Sarandol et al。20.),贝克et al。21],Yaghmaei et al。22)测量PON1活性使用相同的方法在我们的研究中(PON1水解的对氧磷)。
Yaghmaei等人已经确定,血清PON1活性显著增加在子痫前期与正常人相比22]。
贝克等人已经确定高paraoxonase活动preeclamptic孕妇相比,控制。作者也报道高paraoxonase活动严重比轻度子痫前期和强调paraoxonase的重要性在子痫前期的发病机制21]。
Genc报道PON1 preeclamptic孕妇相比低控制(14]。
Sarandol等人测量paraoxonase活动正常,温和,和严重preeclamptic孕妇。作者报告组之间没有差异(20.]。
我们研究的结果符合Yaghmaei和贝克和暗示,子痫前期血清PON1活性升高可能是重要的体内抑制OxLDL。PON1活性preeclamptic没有IUGR孕妇明显高于正常组。在胎儿的发展可能是很重要的。
Mackness等人在其调查1和PON2几个组织的实时聚合酶链反应(PCR)和其显示2在胎盘组织中,但是他们说的广泛的组织分布PON1理论上会导致更大的保护氧化应激(23]。在子痫前期关于我们的结果,其1活动的潜在作用对胎儿的增长可以通过进一步的研究来解释。
我们的文献检索没有找到一份报告,做了OxLDL在胎盘组织中直接测量。我们假设患OxLDL可能增加preeclamptic胎盘组织和旨在演示与性类固醇在胎盘组织的关系。然而,我们的研究结果表明,OxLDL和类固醇激素水平降低子痫前期胎盘组织中。因此,我们认为,减少组织雌三醇OxLDL相关,这正相关,虽然不是一个强大的,反过来可能与减少维护胎儿胆固醇。此外,这些减少胎盘组织也可能与可能形成的复合物的快速去除OxLDL RES细胞自身抗体。然而,我们无法证明增加OxLDL preeclamptic胎盘组织。进一步的研究应该进行调查其他因素的角色表演在螺旋动脉动脉粥样化和多因子的内皮功能障碍。