文摘
背景和目的。越来越多的证据表明,白色脂肪组织是一个重要的贡献者在酒精性肝病(ALD)的发病机理。我们研究了血清总脂联素的浓度(Acrp30),瘦素,和患者抵抗素在慢性酒精滥用和不同等级的肝功能异常,以及ALD的并发症。材料和方法。一百四十七年连续ALD患者前瞻性招募。血浆adipokine水平的评价是使用immunoenzymatic ELISA执行测试。多变量逻辑回归应用为了选择先进的肝脏功能障碍和疾病并发症的独立预测指标。结果。Acrp30和ALD患者抵抗素水平显著高于控制。肾上腺白质退化症患者相比,瘦素水平较低的女性与控制,但是在男性中瘦素浓度没有显著差异,被发现。高血清Acrp30水平显示一个独立的协会与先进的肝功能异常,以及肾上腺白质退化症患者并发症的发展,也就是说,腹水和肝性脑病。结论。血清中瘦素浓度在性别上的差异可能会影响“肾上腺脑白质退化症”的课程,在女性与男性不同。血清Acrp30水平可以作为一个潜在的“肾上腺脑白质退化症”患者的预后指标。
1。介绍
白色脂肪组织(窟)代表一个活跃的内分泌器官,调节体内脂肪质量和能量平衡。有越来越多的证据表明,WAT-derived发病可能导致肝损害与脂肪浸润有关,炎症和纤维化(1,2]。脂联素、瘦素、抵抗素是最好的描述这个类分子。脂联素分泌专门从脂肪组织和循环在不同亚型:三,低分子量(流明瓦),五个一(三聚物二聚体)中等分子量(毫米波)和multimeric高分子量(高分子量)亚型3]。主要由脂肪组织瘦素表达,尽管低水平已发现在胎盘,骨骼肌,胃和乳腺上皮细胞,大脑(3]。虽然抵抗素是由人类脂肪细胞分泌的最重要来源似乎血液单核细胞(3]。
等离子体浓度的发病调查不同肝脏疾病的患者,也就是说,非酒精性脂肪肝病(4- - - - - -6),1型自身免疫性肝炎(7),病毒性肝炎B (8)和C (9]。酒精性肝病(ALD)是另一个发病可能发挥关键作用,代表炎症和代谢状态之间的联系。但是,公布的数据潜在的病理生理机制是模棱两可的。
因此,本研究的目的是确定血清总脂联素的浓度(Acrp30)、瘦素、抵抗素在慢性酒精滥用和不同等级的患者肝脏功能障碍。我们也调查了adipokine相关性与传统的炎症指标,肝脏实验室参数,和退化的并发症。此外,在上述结果的基础上,我们试图选择非侵入性的预测疾病严重程度和退化的结果。未来的研究是在美国进行的医科大学胃肠病学的卢布林,波兰。
2。材料和方法
连续一百四十七成人肾上腺白质退化症患者住院住院病人(pts)由于疾病代谢失调是前瞻性招募。对照组由30名健康志愿者匹配研究小组在年龄和性别和招募主要是学术界和学员的胃肠病学,卢布林的医科大学。
肾上腺白质退化症患者是基于临床的诊断标准,比如详细的病历,典型的症状和慢性肝病的物理结果,实验室值(血清转氨酶活性升高(正常范围:ALT < 31 IU / L;AST < 34 IU / L)、AST / ALT比率高于2),和成像研究,过度饮酒的设置(即。饮酒超过40 g / d男性和20 g / d对女性分至少6个月)。为了证实酒精滥用,酒精使用障碍识别Test-Consumption (AUDIT-C)使用问卷10]。审计的8对男性60岁,或4对于女性来说,或者年龄超过60岁的人被认为是一种积极的筛选试验。积极的AUDIT-C,除了饮酒的数量,是一个包含标准。基于AUDIT-C得分,饮酒状态决定在这两个研究小组。对照组的两个人,他们承诺完全禁欲,被归类为戒酒者和18他们自我消费不超过每天20克乙醇(每月10到16饮料;1杯指的是纯酒精)10 g光饮酒者。饮用量之间的风险,当前的饮酒者ALD集团范围如下:女性40 g / d超过100 g / d和男性50 g / d超过100 g / d。
根据研究方案,患者签署知情同意,完成了记忆(他们的病史),他们回答AUDIT-C问卷。
患者进入研究没有消费酒精饮料前至少24小时获得血液样本进行实验室测试。没有人接受皮质类固醇或pentoxifylline的资格。为进一步分析(即所有必要的数据。,the major demographic variables included age, gender, alcohol intake and the period of alcohol abuse, education, family history of alcoholism, employment status, treatment of ALD before admission, and comorbidities) were recorded, and the planned procedures including blood sampling were performed within 48 hours after hospital admission. Blood samples from all patients were collected at 07:30 am after a minimum 8-hour overnight fast in order to avoid the circadian and feeding impact on serum adipokine fluctuations. Basic laboratory tests included determination of(1)天冬氨酸aminotransferase-AST,肝功能参数(丙氨酸aminotransferase-ALT碱性phosphatase-AP, gamma-glutamyl transpeptidase-GGT,总bilirubin-Tbil,白蛋白,印度卢比、凝血酶原时间);(2)全血细胞计数(hemoglobin-Hgb, erythrocytes-RBC、platelets-PLT leukocytes-WBC);(3)肾功能参数(creatinine-CREA、血清钠level-Na);(4)传统的炎症标记物:中性粒细胞,中性粒细胞淋巴细胞计数率(NLR)和c反应protein-CRP水平);(5)指标的其他病因的慢性肝病,也就是说,乙肝病毒和丙肝病毒感染(HBsAg, anti-HBc类IgM抗体和免疫球蛋白;anti-HCV抗体)、反核antismooth肌肉,抗线粒体抗体,标记威尔逊氏病和血色沉着病)。
根据实验结果,确定基线严重肝功能异常根据Child-Turcotte-Pugh (CTP) (11)和终末期肝病模型(MELD) (12)标准。分数的计算,互联网可用计算器使用,也就是说,http://www.mayoclinic.org和http://potts-uk.com/livercalculator.html。
患者进入研究分为子组根据:(1)性别;(2)年龄:50,50岁;(3)肝功能异常的严重程度根据CTP(类A, B, C)和融合(20或20)分数;(4)肾上腺白质退化症患者并发症的存在在住院的时候,也就是说,腹水,肝性脑病(他),食管静脉曲张,胆汁淤积,肾脏功能障碍。
分与其他严重疾病,不受控制的糖尿病、心力衰竭、肺功能不全或恶性肿瘤时被排除在外。
症状明显的肝性脑病(他)分类根据West-Heaven标准(13]。
胆汁郁积的定义的基础上,建议欧洲肝脏研究协会(EASL),也就是说,碱性磷酸酶(美联社)大于1.5倍的上限(ULN)和正常的活动γ谷酰基转肽酶(GGT) ULN[三倍多14]。为了执行的腹部超声证实存在腹水和胆汁郁积的排除其他原因(例如,胆总管的囊肿和胆结石)。测试抗线粒体抗体(ama)排除诊断原发性胆汁性肝硬化(PBC),和药物肝毒性已被排除。
胃镜检查是为了确定食管静脉曲张。肾脏功能障碍的基础上确定血清肌酐水平升高(高于正常的上限,即1.3 mg / dL)。
在某些情况下,CT扫描时也表现任何病理的本质存在疑虑。
身体质量指数(BMI)和/或腰臀比(WHR)通常用于评估身体成分和脂肪质量。然而,我们不适用这些指标由于他们的偏见和脂肪含量误差评估腹水的侦测。腹水是出现在89年的147例(60.5%)受试者纳入调查。酗酒者与失代偿性的肝脏疾病都有很高的营养不良发生率和高BMI值由于液体潴留在同一时间。此外,我们的一些病人不能站在住院的时间,所以他们的体重和身高的测量是不可能的。这些常数的适用性的评估身体脂肪量经常被质疑(15,16]。
等离子体水平的评价选择发病(总adiponectin-Acrp30、瘦素、抵抗素)与immunoenzymatic ELISA(酶联免疫吸附测定)测试使用商用设备(Quantikine酶联免疫试剂盒,R & D系统,美国)。这项研究是根据程序进行推荐的生产者和描述的附加材料。测量用VictorTM3读者(美国PerkinElmer)。
研究协议符合伦理指南1975年赫尔辛基宣言》(2008年修订,6日)反映在先天的机构审查委员会批准的卢布林的医科大学。所有受试者签署知情同意书之前调查。
3所示。统计分析
统计分析了使用Statistica 10软件包(StatSoft、波兰)。组中的数据分布的初步评估了柯尔莫哥洛夫和斯米尔诺夫检验。分析显示所有值的偏态分布;因此,连续变量被描述为中位数和四分位范围,其95%置信区间(95% CI),并使用Mann-Whitney相比以及。分类变量是作为数字和百分比。分类变量之间的差异被确切概率法或评估测试耶茨连续性、校正。CTP类之间的差异研究adipokine水平分析了利用克鲁斯卡尔-沃利斯和事后多重比较测试。斯皮尔曼等级相关的测试是用来评估肝功能参数之间的关联,传统的炎症指标,研究血清生物标志物水平。接收机操作曲线(roc)发病显著,也就是说,Acrp30和抵抗素是构建评估其曲线下的区域(auc)和肾上腺白质退化症患者并发症预测的最佳阈值。德龙的方法等。17]的计算使用了AUC的标准误差。Youden指数及其相关的分界点为每个adipokine估计(18]。auc显著变量的比较来评估他们的准确性预测肝脏功能障碍的严重程度和肾上腺白质退化症患者并发症的发展。多变量逻辑回归应用为了选择先进的独立预测指标肝脏功能障碍和疾病的发生并发症。一个双边值小于0.05被认为是相关的统计学意义。
4所示。结果
人口调查包括147名患者(107男性40(72.8%)和女性(27.2%))。他们的平均年龄是(26到74)。研究对象的基线特征如表所示1和2。
最初我们执行一个评估adipokine ALD患者的血清水平与健康对照组比较。结果表明,血清Acrp30和抵抗素水平明显高于ALD患者与健康对照组相比。他们展示在表3。
下一步是比较研究了生物标记物的水平在ALD和对照组根据性别。血清Acrp30 ()和瘦素()浓度明显高于对照组的女性相比,男性。另一方面,没有一个研究根据性别ALD发病表现出显著差异。此外,更高水平的Acrp30在两性中发现ALD患者与对照组相比。血清中瘦素水平与ALD明显低于女性控制。没有明显差异男性血清中瘦素水平在两组。血清抵抗素水平明显高于在两性ALD患者与对照组相比。这项研究的结果发表在表4。
因为衰老改变身体脂肪量和它的功能,我们评估血清adipokine水平两个年龄子组:50,50岁。正如所料,血清中瘦素浓度明显高于老年患者相比,年轻的子群。血清中没有年龄差异的另外两个发病水平。这项研究的结果发表在表5。
只有Acrp30在发病学的水平显著增加,肝脏功能障碍的严重程度分类根据CTP和MELD分数。这项研究的结果发表在表6和7。
adipokine协会的分析血清和肝脏功能参数显示显著,瘦素和血清转氨酶和胆红素之间正相关水平。正相关的瘦素与血清白蛋白水平在女性。有逆相关Acrp30和抵抗素与血清白蛋白水平和积极的男性Acrp30美联社和胆红素水平的相关性。分析的结果如表所示8。
我们发现显著正相关的血清抵抗素水平和白细胞计数和CRP水平。血清中瘦素浓度呈弱逆相关的白细胞计数。以上分析的结果提出了在桌子上9。
下一步的研究进行了比较研究发病水平ALD患者划分根据疾病并发症的出现。发病的血清浓度显著不同的子组的患者选择根据肝脏功能障碍的严重程度(融合20)和退化的并发症,曲线下的面积(auc)检查,为协会和诊断的准确性研究变量与疾病并发症的比较。血清Acrp30水平确定为先进的肝脏功能障碍(融合的独立预测指标20)和腹水,他的发展。血清抵抗素水平对肾脏功能障碍失去意义时调整为其他变量。没有一个研究发病是独立与胆汁郁积和食管静脉曲张。以上结果总结在表10、11和12所示。
5。讨论
和慢性过度饮酒会导致炎症在脂肪组织中,胰岛素抵抗,和肝脂肪变性19]。因此,探索“肾上腺脑白质退化症”的致病机制应该包括脂肪组织分泌的作用和发病。此外,酒精滥用与受损的能量摄入和支出,以及分解代谢增加。所有上述发病过程是通过控制调节。最近的研究中et al。20.)展示了白色脂肪组织的重大损失(窟)酒精性脂肪变性的小鼠模型。它表明窟障碍可以通过反向甘油三酯直接影响肝脏脂质稳态传输。临床研究表明,低脂肪量与高肝脏脂肪含量在酗酒者21]。这些报告促使我们设计协会的一项研究来解释血清adipokine浓度与肝脏功能障碍的严重程度和退化的并发症。在目前的研究结果证实了至关重要的作用肾上腺白质退化症之一窟内分泌的发病机理。更高水平的两个发病,Acrp30和抵抗素被发现ALD患者与对照组相比。出乎意料,没有瘦素水平的差异在两个研究组织(表3)。
性别的分析数据显示Acrp30和瘦素水平明显高于对照组的女性和男性发病的水平相比(表4)。我们的结果是一致的与其他报告关于性别差异的血清adipokine浓度(22]。然而,无显著差异水平的三个研究发病在退化性观察。相比之下,显著降低瘦素水平被发现肾上腺白质退化症患者与健康对照组相比在雌性。结果对应于上述钟山等人报告20.]表明可能减少身体的脂肪含量。当比较肝脏功能障碍的严重程度在两种性别中,女性显示更高分数的CTP和融合(表2)。Hypoleptinemic州增加感染的风险(23,24]。因此它可能改变两性制程中。
我们正在试图推测代谢改变引起的乙醇在退化的过程中,通过调节瘦素的分泌,可能负责不同的女性和男性疾病的临床表现。它已经报道Rojdmark et al。25],摄入适量的酒精对瘦素分泌有抑制作用在正常科目。可能直接而不是间接影响,因为有几个因素会影响瘦素没有受到酒精在他们的研究。此外,瘦素水平增加在禁欲,这可能与减少多巴胺在中脑边缘系统(26]。性别差异在我们的研究中也观察到的结果由Dammann et al。27)观察到没有明显的急性适度饮酒对瘦素水平的影响在健康男性志愿者。
先前的报道关于瘦素水平在人类酗酒者是不确定的。数据高度发散和依赖于人口研究。他们中的一些人指出增加(28,29日),和其他降低外周血瘦素浓度(30.]。
希腊et al。31日]也观察到更高的血清中瘦素水平在健康女性的健康男性相比对照组。但是,与目前的工作,他们报道中瘦素水平升高的女人和酒精性肝硬变的孩子类c。上述研究显示显著减少posthepatitis肝硬化患者血清中瘦素的水平。可能我们的结果之间的差异可以解释为评估的患者在不同阶段制程。队列中瘦素的水平是评估在肝脏疾病的急性期共存的代谢亢进和系统性炎症激活的迹象。相比之下提出报告,上面所引的研究是一个稳定的慢性患者阶段执行的障碍。
De Timary et al。32]提出了一种双模式规定的能量摄入酒精依赖症。他们表明,酒精加速新陈代谢和减少脂肪和瘦素水平在个人消费高于12.5千卡/公斤/天的酒精(观察瘦素水平较低的女性“肾上腺脑白质退化症”在我们的研究)。为个人消费低于12.5千卡/公斤/天的酒精,酒精摄入量补偿是不含酒精的营养摄入量,减少可能由于代谢和饱腹感的变化因素。
另一方面,Campillo et al。28]后观察到血液中瘦素水平的增加营养治疗酒精性肝硬化患者肝功能改善平行。
类似的血清adipokine Acrp30升高和抵抗素浓度,并减少患者瘦素在炎症性肠病(33]。
我们调查的子组的发病水平ALD患者不同程度的肝功能缺陷定义的标准CTP和融合。我们发现血清Acrp30水平与肝功能损害程度明显上升(表6和7)。多变量分析确认其独立影响肝脏功能障碍的严重程度(融合20)(表12)。是与非酒精性脂肪肝病(NAFLD),据报道,血清脂联素浓度低,坏死炎性组织损伤(负相关34,35]。另一方面,一个伟大的证据表明有益和Acrp30在肝损伤小鼠的保护作用[36,37]。政府减少ROS生产刺激有限合伙人和肿瘤坏死因子的表达α(肿瘤坏死因子α)在枯氏细胞38]。脂联素水平和行动的机制不同人类和啮齿动物之间仍然是未知的。
之间的相关性被发现在男性血清Acrp30水平和肝脏功能的参数:积极与胆红素水平,逆白蛋白水平(表8)。这些结果与以前一致指数的积极Acrp30与肝脏功能障碍的严重程度(CTP和融合)。此外,血清抵抗素浓度和疲软的逆相关性观察肾上腺白质退化症患者组的白蛋白水平。
此外,我们的研究结果表明adipokine协会的存在与重大疾病并发症的(表10)。再次Acrp30似乎发挥关键作用。腹水患者血清水平显著升高,脑病。多变量分析证实了独立Acrp30对两个并发症(表的影响12)。
边缘型统计学意义(子组)的瘦素水平差异有无腹水被发现,可能表明其负面影响肾上腺白质退化症患者(表的演变10)。然而,多变量分析未能证明其影响上述并发症的发展。在我们的研究中,观察到也布伦南et al。39)没有发现任何重大协会瘦素浓度与发病率和死亡率在女性糖尿病患者心血管疾病。相反,其他作者的报道表明,瘦素缺乏可能会加强对炎性因子的毒性作用,包括内毒素和肿瘤坏死因子α(40- - - - - -42]。
子组血清抵抗素水平显著增加,胆汁郁积和肾脏功能障碍(表的症状9)。不过,他们失去了意义,当调整对其他变量进行了研究。抵抗素水平升高是之前报道的存在的慢性肾脏疾病(43- - - - - -45]。另一方面,Menzaghi et al。46]表明抵抗素可能发挥重要作用在健康受试者调节肾脏功能。在目前的研究中,多变量分析未能证实其独立影响上述并发症。
建议对脂联素、抵抗素的预后价值评估的严重性和炎性疾病和癌症的结果出现在最近的一些出版物(47- - - - - -51]。我们测量了等离子体的总脂联素水平(Acrp30),据报道已经对评估死亡率比高分子量更有用。Acrp30的高血浆浓度是一个独立的预后因素在慢性心脏衰竭患者与正常体重指数(52]。高总脂联素的浓度也与心脏衰竭和现有的缺血性心脏病患者的死亡率(53]。
ALD的发展被认为结合代谢和炎症活动,因此,评估血清发病水平的选择和炎症标记物之间的关系是巨大的利益。我们推测,显著提高血清Acrp30和抵抗素水平的研究群体可能是一个指标的系统性炎症激活过程中这种疾病。文献的数据表明,慢性炎症的发病水平的上升(54- - - - - -57]。所述其他地方,瘦素也影响免疫和炎症功能。我们发现与白细胞计数的弱负相关。
另一方面,Acrp30浓度的增加血液中的肾上腺白质退化症患者可能反映了患者的防御机制而不是炎症反应由于其已知的抗炎作用[58]。此外,Acrp30水平研究小组没有任何相关性炎症与传统参数(表9)。结果对应于一般信念对其抗炎的潜力。据报道,Acrp30不足导致持久的亚临床炎症在肥胖、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)、缺血性心脏病和2型糖尿病59- - - - - -63年]。
相比之下,增加血清脂联素的水平一直在观察炎症和/或自身免疫性疾病与肥胖没有协会和积极的能量平衡。其中包括类风湿性关节炎、红斑狼疮和炎症性肠病(64年,65年]。看来Acrp30分泌可能不同监管根据潜在疾病的发病机制,特别是在其与能量平衡(超重或肥胖)。
此外,贝(66年)假设对象精力赤字的厌食症,恶病质,1型糖尿病,肾功能衰竭,血的脂联素水平增加时,它可能有一个保护作用和适应身体在禁食。本研究的结果是一致的这样的解释的事实。ALD患者,无论他们的性别、等离子体含量显著增高,与对照组相比Acrp30(表4)。可能是由于营养不良经常发生在病程。
抵抗素的促炎属性在我们的研究证实了正相关的血清浓度与白细胞计数和CRP水平(表9)。吉野et al。57)报道,血浆抵抗素和瘦素水平呈正相关的类风湿性关节炎患者CRP水平。类似的观察患者的川崎病来自Kemmotsu等人报告67年]。CRP水平明显增加抵抗素水平的研究。结果Trzeciak-Ryczek et al。68年从在体外研究表明,巨噬细胞和脂多糖刺激或促炎细胞因子(il - 1、il - 6和TNF)相当大的增加抵抗素生产期间感染。提供数据支持的假设抵抗素可能成为一个新的炎症的标志。
我们的研究有一些局限性。它是一个单中心试验,应强调的是,由于样本量不足,我们的结果推广前需要确认在前瞻性,多中心研究。这种验证可能有助于消除可能的错误产生的研究技术和主观差异研究人群的选择。这项研究的另一个局限性是缺乏目标估计身体的脂肪含量和验证措施。最新的诊断方法是双能x线吸收仪(用),这可能与高精度作为黄金标准(69年]。然而,在我们的研究过程是不可用。此外,健康的戒酒者和轻度饮酒者的对照组(20克/天)用作参考类别饮酒。无病经常饮酒者包括作为一个比较队列控制饮酒的可能的影响。饮酒是自我报告在我们的研究中。参与者决定每天酒精消费饮料的数量,一周,和/或月。因为这些值(即。,the volume and alcohol concentration of a beverage) are not easy to estimate, the real ethanol intake may lack precision [70年]。斯托克和斯特灵的研究71年)还显示,大多数人都无法准确评估的体积和力量喝一杯。在波兰等国,饮酒模式相差很大的地区和饮料类型,所以研究人员应该特别注意小心评估喝饮酒评估类型和尺寸准确。
总之,本研究的结果证实了积极参与的窟ALD发病机理。我们推测,血清中瘦素浓度在性别上的差异可能会影响“肾上腺脑白质退化症”的课程,在女性与男性不同。看来,除了他们的代谢影响,发病可能发挥作用的炎症调节器。一个独立的协会的高血清Acrp30水平先进的肝功能异常,以及肾上腺白质退化症患者并发症的发展。、腹水和肝性脑病)可能表明其潜在作用肾上腺白质退化症患者预后的指标。此外,由于逆血清浓度,Acrp30可能成为相关标记区分ALD和非酒精性脂肪肝。抵抗素水平与肾脏功能障碍协会ALD患者应该进一步阐明。
血清生物标志物的可用性使他们一个有前途的好,微创诊断工具可能在临床实践中广泛使用。的决心似乎分子参与疾病的不同阶段演化可能有助于在未来产生一个可靠的诊断算法。联合治疗是否与在ALD患者发病可能有作用被大大预期。调制的分泌可能被认为是一个诱人的治疗过程,但需要详细调查。
利益冲突
作者声明,这项研究是在没有进行任何商业或财务关系可能被视为一个潜在的利益冲突。
承认
本研究从医科大学研究经费支持的卢布林,波兰(pw445/2010 - 2011)。