文摘
粘多糖透明质酸(HA)的监管职能提出依赖其分子量(MW)。促炎和刺激效果提出了主要为低MW公顷。然而,血液白细胞公顷的复杂反应不同的MW尚不清楚。,高纯度的影响HA的精确定义兆瓦(52、250和970 kDa)在人类血液吞噬细胞进行了测试。所有MW公顷激活血液吞噬细胞,包括自发生产ROS、脱粒,肿瘤坏死因子-α的生产,较低的MW 52公顷kDa具有最高的强度和高MW HA 970 kDa效力最低。有趣的是,HA抑制ROS生产刺激调理的酵母聚糖颗粒,相比之下,强starch-activated ROS生产,主要是独立于兆瓦。数据显示显著影响不同兆瓦的HA对血液吞噬细胞,包括高MW HA。
1。介绍
炎症是一个复杂的过程潜在的众多慢性和急性疾病的发病机理。密集的组织重构现场发生的炎症。细胞外基质降解,取而代之的是一个新合成有助于组织愈合过程。细胞外基质的主要组件之一是透明质酸(HA)。HA在本土形式是一种高分子量线性粘多糖(高分子量)达到6到8 MDa的大小(1- - - - - -3]。HA绑定在细胞表面是一个复杂的交互多价绑定事件的影响主要是通过数量、密度、和激活的细胞表面受体,包括CD44和toll样受体2和4 (2,4- - - - - -6]。HA经历密集的代谢生物依赖组织(7]。特别是,炎症显著增加公顷退化低分子量(流明瓦)碎片。尽管他们简单的一级结构,HA分子已报告有非常广泛,经常反对生物功能(2,3]。高分子量HA广泛报道具有抗血管新生、抗炎和免疫抑制特性。另一方面,小的碎片HA聚合物(流明瓦公顷)被认为是促炎和血管生成1,6]。
最重要的细胞在炎症过程中吞噬细胞,包括组织巨噬细胞和多形核白细胞(PMNL),特别是嗜中性粒细胞(8]。吞噬细胞发挥重要作用在控制急性和慢性炎症组织,通过各种介质的释放,包括细胞因子、趋化因子、生长因子,和活性氧(ROS) (8- - - - - -10]。ROS生产被吞噬细胞与所谓的“氧化破裂,“这是一个关键过程对入侵病原体(8,10]。脱粒的氧化破裂密切相关的血液白细胞伴随着表面受体表达增加(11]。因此,血液中吞噬细胞的活性氧产量和表面受体的表达让我们确定白细胞激活引起的各种刺激和预测的生理后果激活(11- - - - - -13]。
一般来说,有一个建议流明瓦哈的刺激效应和高分子量HA对血液吞噬细胞的抑制作用,类似于其他细胞类型(14]。在不同的研究中,不同作者评估了HA对血液白细胞的影响函数,特别是吞噬作用[15- - - - - -20.]。然而,详细描述不同兆瓦的血液白细胞反应HA在复杂环境中全血是缺席的。此外,当前的数据往往是矛盾的,依赖于模型系统和所选MW公顷。许多先前的研究提出的主要问题是HA的起源和纯度准备使用。
在目前的研究中,高分子量的潜力公顷(970 kDa),中型兆瓦(250 kDa),和流明瓦哈(52 kDa)激活血液吞噬细胞进行了测试在体外。相比其他的研究中,我们使用高纯度的HA药理年级低的多分散性指数。白细胞活动评估是基于ROS的决心生产、脱粒,肿瘤坏死因子-α的生产。影响选择兆瓦的HA也进行胶原蛋白的存在,作为一个丰富的组件组织的细胞外基质。有趣的是,所有MW公顷增加血液的整体激活吞噬细胞。此外,HA抑制ROS生产刺激调理的酵母聚糖颗粒(丁),这是与HA starch-activated ROS生产的增强作用。一般来说,我们的数据提供信息的作用哈在血液中吞噬细胞的激活。
2。材料和方法
2.1。准备哈
公顷链球菌等生物技术的起源和医药级(Contipro C, Dolni Dobrouc,捷克共和国)使用(21]。准备哈特定分子量(MW), 1%的水溶液0.97 - -2.33 MDa公顷被酸水解降解,利用盐酸在pH值3.8,100°C,不同时期。每个产品被乙醇沉淀分离,其次是重复与异丙醇洗涤,离心分离。沉淀是溶解在水中(1%溶液),和喷雾干燥。SEC-MALS分析与安捷伦1100系列色谱系统(美国圣克拉拉,CA)配备以下柱系统:PL aquagel-OH混合和PL aquagel-OH 30(300×7.5毫米,8μm;聚合物实验室)。洗脱液(0.1 M磷酸钠缓冲pH值7.5)监测使用DAWN-EOS multiangle激光光散射光度计(18-angle,怀亚特技术公司)和示差折光检测器Optilab雷克斯(怀亚特技术公司)。数据采集和兆瓦计算进行使用阿斯特拉V软件,版本5.3.2.15。流动相的流速保持在0.8毫升/分钟。特定折射率增量(dn / dc) 0.155毫克/毫升的用于钠公顷。SEC-MALS分析显示两个兆瓦兆瓦分布(22]。描绘的归一化光散射色谱兆瓦(图传奇)分子质量分布如图1。所有样品都含有HA寡聚物(与摩尔质量低于10 kDa HA链)。MW分布很窄:流明瓦公顷52 000克/摩尔(52 kDa)显示MW / 1.14 Mn,中型HA与250 000克/摩尔(250 kDa)显示1.35 MW /锰,和高分子量公顷970 000克/摩尔(970 kDa)显示1.34 MW /锰。木糖醇的存在进行了测试使用PyroGene重组因子C内毒素检测系统(美国Cambrex),没有发现任何大量的内毒素(小于0.01欧盟/毫升)。股票的解决方案哈准备(1毫克/毫升)在哈佛商学院准备新鲜。
2.2。材料
除非另有说明所有其他试剂购自Sigma-Aldrich公共广播级和更高的(美国)。10毫米鲁米诺的原液(5-amino-2、3-dihydro-1 4-phthalazinedione)(美国表达载体)准备在0.2四硼酸钠缓冲,pH值9.0 (1.24 g H3薄3和63 g (Na2B4O7h·102O在1升再蒸馏的水)。佛波醇12-myristate 13-acetate (PMA)溶解在二甲亚砜获得3.25μ摩尔/毫升股票的解决方案。丁屋是由opsonisation酵母聚糖从酿酒cerevisie由人类血清获得5毫克/毫升股票的解决方案,如前所述[10]。大米淀粉粒(10 mg / mL,淀粉oryzae,本地药房)准备在汉克斯平衡盐溶液(hbs), pH值7.4。
2.3。血液样本制备和实验布局的孵化和样品哈
血液样本是来自健康的志愿者签署知情同意书。全血是稀释1:2(卷/期)RPMI(锅、德国)。股票的解决方案不同的MW公顷(52个;250和970 kDa)被添加到稀释血液获得100年最后的浓度μg / mL和10μ克/毫升。上的被选为了浓度范围的下限浓度所使用的其他作者(15- - - - - -20.,23- - - - - -27]。较低浓度的10公顷μ克/毫升,在我们的初步实验,证明是有显著影响的边界上血吞噬细胞。浓度为1μg / mL,高于人类血液的生理浓度(7,28对血液白细胞),并不具备任何影响ROS生产或脱粒根据我们的初步实验数量有限的样本(数据未显示)。此外,选择样本与胶原蛋白混合(最终浓度0.16毫克/毫升;超纯的胶原蛋白溶液从牛的皮肤,Sigma-Aldrich),一起哈。哈佛商学院是用来代替公顷或胶原蛋白作为控制,调整为所有样本体积相同的反应。确定的影响哈血吞噬细胞的氧化破裂,ROS生产1.5 h孵化后立即测量或37°C,之前确定氧化破裂。确定HA对PMNL的影响脱粒,表面受体的表达特定的特殊颗粒确定后30分钟和90分钟的哈。确定影响TNF - HAα生产,样本孵化与HA 2.5和6 h。时间点的选择基于我们之前的研究(9,29日]。
2.4。ROS生产(氧化破裂)测定化学发光(CL)
鲁米诺化学发光放大(CL)是衡量使用微型板块光度计猎户座II (Berthold探测系统GmbH德国)。方法的原理是基于鲁米诺与phagocyte-derived活性氧,导致大的大量的光(10]。简而言之,100年的反应混合物包括μl(稀释血液,测试物质(哈,胶原蛋白,或适量的缓冲区),1毫米鲁米诺,一个活化剂(最终浓度PMA−97.6μg / mL,丁屋−0.4毫克/毫升,或淀粉1毫克/毫升)。分析是在重复运行。自发的CL测量样本中含有100μl稀释血液和其他物质,但没有催化剂,包括在每一个试验。CL发射后的60分钟37°C。CL反应的积分值,代表血液吞噬细胞ROS总产量,评估,和最后的数据重新计算未控制的比例(100%)。
2.5。基于表面测定PMNL脱粒Granule-Specific受体的表达
后在吞噬细胞表面受体的表达显著增加,脱粒选择:补体受体1 (CD35),主要是存储在分泌囊泡,补体受体3 (CD11b),存储在特定和白明胶酶颗粒和CD66,存储在特定颗粒(主要是11,13,30.]。稀释血液与HA孵化100 MW不同浓度μg / mL和10μg / mL,胶原蛋白的缺失和存在(如上所述),在37°C 30和120分钟。接下来,样本与鼠标anti-CD66b-FITC孵化(美国BD生物科学),鼠标anti-CD35-FITC(克隆E11 Ancell公司、美国),鼠标anti-CD11b-FITC(克隆ICRF44) (Ancell公司),或适当的同形像控制(美国BD生物科学和Ancell公司)在室温下15分钟(RT),然后由4%甲醛固定在RT PBS 15分钟,如前所述[29日]。红细胞溶解使用蒸馏水随后10分钟后沿离心(300克,7分钟),其余细胞resuspended在寒冷的PBS和保存在冰到评估的荧光流式细胞分析仪FACSCalibur (BD生物科学)。一万粒细胞,选择典型的散射特征的基础上,进行了分析。相对荧光单元的几何平均量化,和最终的数据重新计算未控制的比例(100%)。
2.6。促炎细胞因子检测TNF -α通过ELISA
确定肿瘤坏死因子-α生产、稀释血液孵化与HA的100 MW不同浓度μg / mL和10μg / mL,胶原蛋白的缺失和存在(如上所述),在37°C 2.5 h和6 h。离心(300克,10分钟后,RT),上层清液得到和TNF -α在上层清液浓度被ELISA检测,根据制造商的说明TNF -αDuoSet ELISA开发系统(美国研发系统,Inc .)。吸光度测量在450 nm波长620 nm的引用,使用微量滴定板读者(SLT彩虹分光光度计,Tecan Carlsheim,德国)。重新计算的结果是pg / mL,和最终的数据被表示为一个百分比的未经处理的控制(100%)。
2.7。统计分析的数据
至少四个独立的每个实验重复进行设置。所有数据报告的比例控制,没有哈,和所有特定值显示通过不同的符号与中值显示为一个大胆的线。非参数弗里德曼方差分析(美国StatSoft)应用于控制和治疗组比较差异。一个价值被认为是显著的:(*)控制、统计意义(#)统计学意义与52个样品孵化kDa哈,和(美元)之间的统计学意义的样本孵化250 kDa和970 kDa公顷。
3所示。结果
3.1。影响不同的MW HA对血液白细胞ROS生产
不同的影响HA (100 MWμg / mL)对血液白细胞测试样本中含有稀释全血和稀释全血的胶原蛋白。多工作站系统的HA大大刺激了自发生产的ROS人体全血,流明瓦哈有显著提高作用,中型MW哈哈有一个小得多的效果,和高分子量公顷有最低的刺激效果(图2(一个))。刺激潜在的1.5 MW HA筋疲力尽后h孵化,显著增加活性氧的生产只有在样品中产和高MW HA。在胶原蛋白的存在,所有MW HA刺激自发的活性氧产量没有显著差异在兆瓦公顷测量没有预培养(图2 (b))。有趣的是,自发的活性氧产量仍明显高于样本中包含不同MW哈,pre-incubation后控制相比,高分子量公顷的最有力的影响。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(g)
(h)
吞噬细胞可以通过各种刺激的HA活化剂使HA潜在costimulate或抑制血液白细胞对这些催化剂的反应。在这些催化剂丁屋,激活吞噬细胞的氧化破裂opsonine受体结合。这产生一个信号转导,导致NADPH氧化酶的活化,氧化破裂的关键酶。Starch-mediated激活依赖于表面受体识别葡聚糖和其他类型的多糖结构。相比之下,如佛波醇溶性刺激直接导致刺激信号分子,包括蛋白激酶C参与这些信号转导途径10]。所有这些选择活化剂PMA、丁和淀粉粒诱导显著增加CL(数据没有显示)。流明瓦哈和中型MW HA PMA-activated活性氧产量的增加,高分子量公顷相比,大大减少PMA-activated ROS生产(图2 (c))。同样,流明瓦哈和中型哈显著强PMA-activated ROS生产、控制和高分子量公顷相比1.5 h pre-incubation(图后样品2 (c))。有趣的是,在胶原蛋白的存在,中型HA和高分子量公顷下降PMA-activated ROS生产,这是重要的测量样本中没有pre-incubation(图2 (d))。LWM HA并不影响PMA-activated ROS在样品生产1.5 h pre-incubation后立即测量。
随后,HA的调制OZP-activated ROS生产不同MW评估。OZP-activated ROS生产略,然而,值得注意的是,会使流明瓦哈,相比减少OZP-activated ROS生产中等和高分子量公顷(图2 (e))。高分子量的降低效果哈1.5 h pre-incubation后也是重要的。在胶原蛋白的存在,所有MW HA明显减少OZP-activated ROS生产样品测量没有pre-incubation(图2 (f))。没有MW HA明显修改OZP-activated ROS生产,相比1.5 h pre-incubation后控制。
最后,HA的影响不同的MW starch-activated ROS生产测定。所有测试样品的HA透露刺激影响starch-activated ROS生产,确定有或没有1.5 h pre-incubation(图2 (g))。明显,流明瓦哈了刺激starch-activated ROS的产生效力最高,其次是中型MW哈,最后由高分子量哈,没有pre-incubation曾效力最低的样品。相比之下,刺激效应在胶原蛋白的存在只有pre-incubation后样品测量,这是重要的只有中等和高分子量HA(图2 (h))。
进一步评价不同MW HA对人体血液吞噬细胞活性氧的影响生产,特别是对丁屋有争议的影响和starch-activated ROS生产,后续的测试执行较低浓度的10公顷μ克/毫升。只有中等HA在这个低浓度诱导自发ROS生产(图3(一个))。相比之下,所有测试MW HA诱导自发ROS在样品生产pre-incubated 1.5 h。有趣的是,在获得HA浓度较高的数据相比,OZP-activated活性氧产量没有明显调制测量样本中没有pre-incubation和甚至会在样品测量1.5 h pre-incubation(图3 (b))。同样,starch-activated活性氧产量增加了所有测试MW哈,效力最高的高分子量HA在样品测量1.5 h pre-incubation(图3 (c))。
(一)
(b)
(c)
3.2。表面的表达Receptors-Degranulation
公顷(100的效果μ脱粒的g / mL)吞噬细胞决定的基础上表面的受体表达的变化主要是存储在吞噬细胞颗粒。
所有MW HA诱导增加CD11b表达式120分钟后潜伏期,独立存在的胶原蛋白(数字4(一)和4 (b))。有趣的是,这种影响是强烈依赖于兆瓦哈,并显著最高流明瓦哈,低中等MW哈,和最低为高分子量透明质酸、胶原蛋白的缺失和存在(数字4(一)和4 (b))。CD11b表面表达的增加已经观察到30分钟的孵化后的collagen-however的缺失和存在,没有任何显著差异在兆瓦的HA(数据未显示)。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
所有MW HA诱导增加CD35表达式潜伏期后30分钟(数据未显示)和120分钟(图4 (c)),没有明显依赖MW公顷。影响CD35表达相似的胶原蛋白;最有效的效果观察与流明瓦哈样本中孵化120分钟(图4 (d))。
同样,所有MW HA诱导增加CD66b表达式潜伏期后30分钟(数据未显示)和120分钟(数字4 (e)和4 (f))。这种效应再次强烈依赖于兆瓦HA和显著最高流明瓦哈,低中等MW哈,和最低的高分子量哈,在胶原蛋白的缺失和存在(数字4 (e)和4 (f))。
我们也评估10公顷浓度较低的影响μ克/毫升。有趣的是,没有一个测试MW HA诱导任何显著增加表达CD11b CD35、孵化后30分钟或120分钟(数据没有显示)。唯一重要的影响观察CD66b表面表达式求值时120分钟后孵化。然而,在这种情况下一点重要,表达CD66b诱导了250 kDa公顷(中值145%,最大165%,最小为108%)和970 kDa公顷(中值129%,最大151%,最小为109%)。
3.3。生产的炎性细胞因子TNF -α
肿瘤坏死因子-α生产全血,以应对不同的MW HA决心的标志的整体激活血液白细胞产生炎症介质。所有HA (100 MWμ肿瘤坏死因子- g / mL)诱导生产α之后,两个2.5 h和6 h(数据5(一个)和5 (b))。有趣的是,这种影响是强烈依赖于兆瓦哈,并显著最高流明瓦哈,低中等MW哈,和最低为高分子量透明质酸、胶原蛋白的缺失和存在(数字5(一个)和5 (b))。不同兆瓦的影响不那么重要的胶原蛋白后6 h孵化(图5 (b))。有趣的是,在TNF -显著增加α生产也观察到较低浓度10μg / mL后6 h孵化(图5 (c))。
(一)
(b)
(c)
4所示。讨论
HA准备的测试MW诱导的复杂激活血液白细胞,流明瓦有效力最高,中等MW HA在接下来的最高效力,和高分子量公顷效力最低。白细胞激活的调制丁、淀粉、PMA并没有通常依赖于兆瓦的哈;然而,它修改了胶原蛋白的存在。
有趣的是,所有MW HA刺激自发活性氧的生产制作,与最重要的效果观察与流明瓦哈。ROS增加生产是伴随着CD11b的增加,CD35、和CD66表面表达,脱粒的标志,TNF -生产α。相应我们的研究中,一个显著增加CD11b表情PMNL诱导流明瓦哈和高分子量(100μg / mL)孵化后全血已经观察到Krasiński et al。27]。类似的观察TNF -α孤立产生的感应,il - 6和MCP1外周血单核细胞,以应对LWM哈但不是高分子量哈(14]。此外,这些作者表明HA受体CD44的参与在这个过程中采用anti-CD44抑制抗体抑制细胞的反应流明瓦哈。在我们的研究中,我们也评估CD44在描述的作用效果与建议采用anti-CD44抗体的抑制作用(纯化anti-mouse /人类CD44抗体克隆IM7, Biolegend,美国)。与我们的预期相反,该抗体诱导显著的应用剂量依赖性激活血液吞噬细胞(数据未显示)。一个适当的同形像控制没有任何明显的效果。这种差异可以通过anti-CD44占CD44的直接激活受体抗体在一个复杂的系统是全血。
接下来,我们专注于血液白细胞应对其他催化剂的调制不同兆瓦的哈。HA的MW主要抑制血液吞噬细胞可溶性催化剂PMA的反应。它可以推测公顷不同兆瓦可以抑制绑定的可溶性刺激吞噬细胞表面,从而可以减少PMA-induced ROS生产。在一个类似的模型中,Krasiński等人也发现显著减少白细胞的活性氧产量反应可溶性催化剂f-Met-Leu-Phe和PMA高分子量公顷(100 - 500年μg / mL) (27]。此外,不同作者采用孤立的吞噬细胞研究中发现PMA抑制吞噬细胞反应,liposacharide, f-Met-Leu-Phe HA各种兆瓦范围广泛的浓度(17,24- - - - - -26]。OZP-activated ROS的情况下生产,主要依赖绑定的丁屋opsonine细胞表面受体,HA主要抑制活化的所有多工作站系统。这表明抑制丁之间的相互作用和吞噬细胞受体识别由哈独立的哈丁屋瓦。相反,在starch-activated ROS的情况下生产,主要是依赖于绑定的淀粉粒表面受体识别葡聚糖和其他类型的多糖结构,HA准备显示激活的潜力。以前,用人肝素化人体全血作为模型系统,高分子量公顷(2 MDa)和中型MW公顷(0.2 MDa)刺激粒子刺激吞噬细胞ROS生产(23]。其他各种研究复杂环境使用孤立的血液中吞噬细胞低于全血带来了不确定的结果。他们表现出HA-mediated势差现象(15,19,20.,23,31日],HA-mediated抑制[15- - - - - -17),甚至缺乏HA效应(16,18在血液中吞噬细胞的激活特定的刺激或unopsonised和调理吞噬作用的粒子或细菌。
有争议的报道HA对吞噬细胞的影响可以解释一些差异。的原因之一可能是不同的HA浓度范围的就业。一些研究表明,HA具有抑制作用的浓度越高,与低浓度具有刺激作用[15,16,23]。然而,上面所引的研究比较,抑制浓度,浓度没有影响,浓度与刺激影响是重叠的。在我们的研究中,我们使用HA浓度显著高于生理HA浓度血液(10 - 100μg / mL) (7,28]。然而,理论上可以达到局部使用浓度在吞噬细胞的粘附到glycocalyx血球渗出后内皮细胞和吞噬细胞的组织。感兴趣的也采用不同浓度的比较哈准备表示为摩尔每卷52 kDa公顷1.92×10时−6mol / l, 250 kDa公顷是0.40×10−60.10 mol / l, 970 kDa×10−6mol / l的更高的测试浓度(100μg / mL)。因此,从这个角度看,流明瓦哈的浓度测试本研究一阶高于用于高分子量多公顷。
不一致的结果不同作者观察到的另一个原因可能是纯洁的差异哈兆瓦,包括缩短公顷聚合物的存在。我们使用HA精确定义MW和多分散性。定义的低、中、高MW HA是广泛和各种不同作者采用HA MW流明瓦,中型和高分子量公顷。相比我们的研究,特别是兆瓦的高分子量公顷可以达到3 - 4 MDa显著升高。由于我们的数据显示的意义兆瓦的直接活化血液中吞噬细胞的哈,我们可以表明这些差异在不同作者也可以导致这些作者的不一致的结果。然而,我们没有观察到任何显著影响MW白细胞的调制响应丁或淀粉。类似于我们的研究中,同样的效果对血液白细胞激活特定的刺激已报告的范围广泛的哈瓦从高分子量中型MW Hakansson和铁刀木[31日]。相比之下,西红柿等人发现公顷(0.5 - 5毫克/毫升)抑制丁和聚苯乙烯乳胶粒子在调查豚鼠吞噬细胞吞噬作用剂量,MW-dependent的方式(17]。
HA对血液白细胞的影响进行了测试在稀释全血和稀释全血的胶原蛋白。胶原蛋白的存在能在一定程度上模拟病理条件下组织中HA与其他组件在一个复杂的细胞外基质。胶原蛋白的存在不显著的调节效应不同的瓦哈,除了哈强starch-activated ROS生产尤其是样本coincubated胶原蛋白。这表明,HA的存在增加了血液中吞噬细胞的能力与淀粉、交互和胶原蛋白强化这些影响。支持这种现象的观察Hakansson和铁刀木建议纤连蛋白,另一个细胞外基质的主要分子,HA刺激对吞噬细胞的影响是关键,尤其是HA-mediated刺激中性粒细胞迁移(31日,32]。
有趣的是,我们的研究结果与我们之前所提出的直接对比发现在测试的影响相同哈准备各种小鼠巨噬细胞细胞系(21]。在这种情况下,我们没有观察到任何显著激活小鼠巨噬细胞,单独或结合costimulators。这表明不同的机制参与血液吞噬细胞的激活全血的复杂环境。之前检测巨噬细胞细胞系对刺激高度敏感的细菌污染或炎症介质,这表明特异性的影响观察本哈准备而不是其他未被发现的污染引起的。
总的来说,所有测试MW HA准备刺激直接相关的复杂的血液白细胞激活宿主防御病原体(8,33),特别是病原体表达HA胶囊。然而,在病理条件下的“无菌”没有炎症的病原体,激活吞噬细胞产生的ROS绝大多数可以显著促进周围组织的损伤。脱粒伴随着表面受体表达的增加与吞噬细胞与内皮细胞的相互作用直接相关。最后,由此产生的促炎的潜在的HA的血液,特别是流明瓦哈,支持显著诱导肿瘤坏死因子-α,一个关键的细胞因子在炎症反应的发展。因此,激活血液白细胞的哈,特别是通过流明瓦哈,可以大大有助于病理炎症过程。
5。结论
我们的发现提供了新的信息的复杂激活血液吞噬细胞通过公顷不同MW,大大有助于我们理解炎症过程的监管公顷。相比其他的研究中,我们使用高纯度的HA药理年级低的多分散性指数。数据支持当前视图在流明瓦哈的促炎剂活血吞噬细胞的强大力量。然而,由于不同的所有测试HA MW诱发的复杂激活血液白细胞,数据没有证实高分子量的影响作为抗炎剂抑制血液白细胞激活。然而,还需要更多的研究,采用高纯度HA精确定义MW,充分阐明的基本机制不同兆瓦的HA在炎症过程中的作用。
缩写
| 哈: | 透明质酸 |
| 哈佛商学院: | 汉克斯平衡盐溶液 |
| 高分子量: | 高分子量 |
| 流明瓦: | 低分子量 |
| 丁: | 调理的酵母聚糖颗粒 |
| PMA: | 佛波醇12-myristate 13-acetate |
| PMNL: | 多形核白细胞 |
| ROS: | 活性氧 |
| 肿瘤坏死因子-α: | 肿瘤坏死因子-α。 |
确认
这项研究是由来自捷克科学基金会的资助,没有。305/08/1704,研究计划AV0Z50040507和AV0Z50040702。作者感谢Lenka Vystrcilova博士对她优秀的技术援助和玛蒂娜Hermannova HA的出色的准备和分析样本。